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二次诱变创制花生高蛋白种质与蛋白含量的遗传分析

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花生学报 2025年

作者：于树涛殷业超张诗行张宇董敬超王力夫姜春姣王传堂沈阳农业大学农学院辽宁省沙地治理与利用研究所山东省花生研究所

种质资源研究是花生遗传育种研究工作的基础,目前培育的花生品种遗传基础狭窄,通过EMS诱变技术可以获得丰富的种质资源。本研究利用0.4%EMS诱变剂将普通蛋白含量的阜花19转化为高蛋白花生。第一次EMS诱变处理,阜花19蛋白含量提高不显著... 详细信息

种质资源研究是花生遗传育种研究工作的基础,目前培育的花生品种遗传基础狭窄,通过EMS诱变技术可以获得丰富的种质资源。本研究利用0.4%EMS诱变剂将普通蛋白含量的阜花19转化为高蛋白花生。第一次EMS诱变处理,阜花19蛋白含量提高不显著,第二次EMS诱变处理,阜花19粗蛋白含量超过30%以上的单株有8个,对其中1株高蛋白(C-Za-454-2,30.32%)材料进行两个试点的稳定性鉴定,结果表明蛋白含量稳定,蛋白含量比野生型提高了29.08%。研究还构建了C-Za-454-2与阜花19的F2群体,经遗传规律分析,蛋白性状分离比为3:1,属于隐性核基因控制;经主基因+多基因遗传分析,最适模型为1MG-AD,即由1对主基因-加性-显性调控,主基因遗传率为37.0658%。本研究创制了高蛋白花生种质,并为花生蛋白相关基因挖掘及遗传改良提供了依据。

关键词：花生 EMS 二次诱变高蛋白主基因+多基因

香肠加工过程中13-HODE和9-HODE变化规律的研究

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香肠加工过程中13-HODE和9-HODE变化规律的研究

作者：姜春姣南京师范大学

学位级别：硕士

13-羟基十八碳二烯酸(13-HODE)和9-羟基十八碳二烯酸(9-HODE)作为亚油酸(LA)的次级氧化产物——羟基十八碳二烯酸(HODEs)的两种同分异构体,在腌腊肉制品中广泛存在。大量研究表明,内源性的HODEs具有病理生理学作用,HODEs的升高会促进动... 详细信息

13-羟基十八碳二烯酸(13-HODE)和9-羟基十八碳二烯酸(9-HODE)作为亚油酸(LA)的次级氧化产物——羟基十八碳二烯酸(HODEs)的两种同分异构体,在腌腊肉制品中广泛存在。大量研究表明,内源性的HODEs具有病理生理学作用,HODEs的升高会促进动脉粥样硬化和某些癌症的发生或发展。近年来研究发现,外源性HODEs也可能存在相似的病理生理学作用,因此对腌腊肉制品中13-HODE和9-HODE进行分析并对加工过程中HODEs的变化规律进行研究,有利于对市场上腌腊肉制品的食品安全进行把控,并可为进一步研发控制HODEs的加工工艺提供理论依据。本文以13-HODE和9-HODE为研究对象,建立了同时测定腌腊肉制品中13-HODE和9-HODE的HPLC-DAD分析方法。之后,以香肠为腌腊肉制品的代表,制作低温风干香肠和热风干燥香肠,探索香肠加工过程中13-HODE和9-HODE的含量变化规律。最后,通过构建乳浊液和脂质体体系,分别研究不同理化因素对LA氧化生成13-HODE和9-HODE的影响。本论文分为三个部分,每部分的研究内容及结果如下。1)采用高效液相色谱对腌腊肉制品中的13-HODE和9-HODE进行检测。腌腊肉制品中的13-HODE和9-HODE用甲醇提取,经C18固相萃取柱净化,以正己烷/异丙醇/乙酸(98:2:0.5,v/v/v)为流动相,在Lichrosorb Si 60(250 × 4.0 mm,5μm)色谱柱上分离,选用二极管阵列检测器在234 nm进行检测。实验结果表明:13-HODE和9-HODE分别在0.5-20和1.0-12.5 μg/mL范围内线性良好(R2分别为0.9994和0.9990),检测限分别为0.075、0.15 μg/g,定量限分别为0.25 μg/g和0.5 μg/g。不同添加水平的平均回收率分别为88.2%和86.0%。14种腌腊肉制品的分析结果显示,所有样本均含有 13-HODE和 9-HODE,范围分别为:1.2-167.54 和 0.63-139.20 μg/g。本实验建立的检测方法操作简单、易于普及,具有良好的灵敏度和准确性,可以满足腌腊肉制品中13-HODE和9-HODE含量的同时分析的要求。2)分别制作热风干燥香肠和低温风干香肠,设置7个不同的工艺点取样。对每个工艺点样本中13-HODE、9-HODE的含量、盐分、脂氧酶活性等指标进行测定。结果表明,两种香肠加工过程中各指标均呈现相似的变化趋势:13-HODE和9-HODE的含量逐渐增多;水分逐渐降低;盐分逐渐升高;pH呈波动趋势;盐后LOX活性有所升高,之后逐渐降低;POV和TBARs逐渐升高。通过各指标间的相关性分析,可初步判断一定浓度盐分对13-HODE和9-HODE存在抑制作用;通过两种香肠加工成品中13-HODE和9-HODE含量的比较可初步判断温度对目标分析物的生成存在一定的促进作用;另外,加工过程中13-HODE和9-HODE的变化可能与LA的氧化方式有关。3)构建LA乳浊液和DPPC/LA脂质体两种体系,研究不同理化因素(pH、盐分及温度)对两体系中LA自动氧化(Fe2+-抗坏血酸/LA)及酶促氧化(15-LOX-1/LA)生成13-HODE和9-HODE的影响。研究表明,在两种体系中,pH、盐分及温度对13-HODE和9-HODE的生成均存在一定的作用。在特定的pH下,13-HODE和9-HODE的比值为定值,且随着pH的升高,LA酶促氧化作用生成的13-HODE和9-HODE逐渐增多;与之相反,随着pH的升高,LA自动氧化生成的13-HODE和9-HODE逐渐减少。盐分对13-HODE和9-HODE生成的促进作用存在一定的浓度范围,超出该范围盐分对目标分析物的生成起抑制作用。温度的升高对13-HODE和9-HODE的生成存在一定的促进作用。本实验有助于解析上一实验香肠加工过程中HODEs的变化规律,为腌腊肉制品生产加工过程中HODEs形成机制的深入研究奠定基础。

关键词：腌腊肉制品香肠 13-HODE 9-H0DE 脂质氧化

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17个杂交组合花生籽仁镉含量的遗传分析

分子植物育种 2024年

作者：樊美玉高薇薇梁风建李进杨军军王欢姜春姣山东省花生研究所费县农业技术推广中心中国农业科学院生物技术研究所

为了解花生镉含量积累性状的遗传机制，本研究采用植物数量性状主基因＋多基因混合遗传模型方法分析了17个杂交组合F2群体花生籽仁镉含量遗传规律。本研究中镉含量的变异系数范围在4.2%～24.6%之间，除C2001、C2002、C2005、C2009、C201... 详细信息

为了解花生镉含量积累性状的遗传机制，本研究采用植物数量性状主基因＋多基因混合遗传模型方法分析了17个杂交组合F2群体花生籽仁镉含量遗传规律。本研究中镉含量的变异系数范围在4.2%～24.6%之间，除C2001、C2002、C2005、C2009、C2014、C2016等，其他组合的镉含量性状符合正态分布。大部分组合中该性状受2对主基因控制，少数组合中由1对主基因控制，未检测到多基因。C2001、C2018等2个组合存在主基因间互作。10个组合主基因遗传率均在90%以上；C2020、C2009的主基因遗传率只有3.78%和14.39%，C2003主基因遗传率为52.52%，受环境影响较大。主基因遗传率高且遗传规律相对简单的组合，可望用于后续定位镉含量相关基因。本研究为进一步探讨花生低镉分子机制创造了条件。

关键词：镉含量花生遗传模型主基因+多基因

正相高效液相色谱法同时测定腌腊肉制品中13-HODE和9-HODE含量

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食品工业科技 2017年第24期38卷 268-273,277页

作者：姜春姣江芸耿志明宋慧张牧焓王道营徐为民南京师范大学金陵女子学院食品科学系江苏南京210097 江苏省农业科学院农产品加工研究所江苏南京210014 江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心江苏南京210095

采用高效液相色谱对腌腊肉制品中的13-羟基十八碳二烯酸(13-HODE)和9-羟基十八碳二烯酸(9-HODE)进行检测。腌腊肉制品中的13-HODE和9-HODE用甲醇提取,经C18固相萃取柱净化,以正己烷/异丙醇/乙酸(98∶2∶0.5,v/v/v)为流动相,在Lichrosorb... 详细信息

采用高效液相色谱对腌腊肉制品中的13-羟基十八碳二烯酸(13-HODE)和9-羟基十八碳二烯酸(9-HODE)进行检测。腌腊肉制品中的13-HODE和9-HODE用甲醇提取,经C18固相萃取柱净化,以正己烷/异丙醇/乙酸(98∶2∶0.5,v/v/v)为流动相,在Lichrosorb Si 60(250×4.0 mm,5μm)色谱柱上分离,选用二极管阵列检测器在234 nm进行检测。结果表明:13-HODE和9-HODE分别在0.5~20和1.0~12.5μg/m L范围内线性良好(R^2分别为0.9994和0.9990),检测限分别为0.075、0.15μg/g,定量限分别为0.25、0.5μg/g。不同添加水平的平均回收率分别为88.2%和86.0%。对14种腌腊肉制品的分析结果显示,所有样本均含有13-HODE和9-HODE,范围分别为:1.2~167.54和0.63~139.20μg/g。本实验建立的检测方法操作简单、易于普及,具有良好的灵敏度和准确性,可以满足腌腊肉制品中13-HODE和9-HODE含量的同时分析。

关键词：亚油酸腌腊肉制品 13-HODE 9-HODE 高效液相色谱法

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花生5个性状的遗传分析

分子植物育种 2023年

作者：杨军军姜春姣孙昊杰梁风建王志伟曲春娟杨珍王传堂吉林农业大学农学院山东省花生研究所费县农业农村局农业技术推广站

为了解花生熟性和荚果大小的遗传规律，本研究利用植物数量性状主基因+多基因混合遗传模型软件，对花生品种‘Tifrunner’(母本)、其早花大果突变体‘HES-14’(父本)及其杂交后代F1、F2共4个世代材料，就开花量、单株果重、单株仁重、... 详细信息

为了解花生熟性和荚果大小的遗传规律，本研究利用植物数量性状主基因+多基因混合遗传模型软件，对花生品种‘Tifrunner’(母本)、其早花大果突变体‘HES-14’(父本)及其杂交后代F1、F2共4个世代材料，就开花量、单株果重、单株仁重、荚果长、单株仁重/单株果重等5个性状进行联合遗传分析。结果表明，花生开花量、单株果重、单株仁重的最适模型为1MG-AD，以上3个性状均由1对主基因加性-显性效应控制，主基因遗传率分别为96.6224%、27.6034%、23.0411%；荚果长和单株仁重/单株果重的最适模型是2MG-EA，这两个性状由2对主基因等加性效应控制，主基因遗传率分别为97.7109%、48.0686%。在育种实践中，对花生开花量、荚果长性状的改良可在早期世代进行选择，单株果重和单株仁重性状的改良可在后期世代进行选择。试验结果为下一步开展花生早熟和荚果大小基因定位提供参考。

关键词：花生突变体主基因+多基因混合遗传模型遗传率基因定位

基于混池高通量测序的花生含油量相关基因初定位

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江苏农业科学 2024年第19期52卷 51-56页

作者：樊美玉王传堂孙昊杰苑广迪于静张明君姜春姣山东省花生研究所山东青岛266100 山东润柏农业科技股份有限公司山东潍坊261100

为开发花生高油相关分子标记,促进花生高油育种,并提高我国食用油自给率,以普通油酸含量高油花生品种HFLS与3个高油酸花生品种(系)花育665、花育668、FB4为亲本搭配4个杂交组合,选择含油量遗传规律相对简单且主基因遗传率最高的HFLS×花... 详细信息

为开发花生高油相关分子标记,促进花生高油育种,并提高我国食用油自给率,以普通油酸含量高油花生品种HFLS与3个高油酸花生品种(系)花育665、花育668、FB4为亲本搭配4个杂交组合,选择含油量遗传规律相对简单且主基因遗传率最高的HFLS×花育665组合,利用F_(2)群体构建各包括30个个体的极端高油和极端低油混池,连同亲本HFLS和花育665进行高通量测序。将花生含油量基因初步定位在A02和A05染色体上,候选区间总长度分别为5.3、5.1 Mb。在候选区间内设计119对SNP和InDel引物,筛选出双亲间具有多态性的InDel标记和SNP标记共14对;利用F_(2)群体验证这14对标记,经单标记分析发现,A02染色体上的4对标记(Chr02-7、Chr02-25、Chr02-65和Chr02-34)和A05染色体上的1对标记(Chr05-80)与花生含油量显著相关,表型变异解释率分别为46.4%、33.2%、34.8%、31.0%和28.3%。其中,标记Chr02-65、Chr02-7、Chr02-25和Chr02-34所对应的物理位置为A02染色体87578082~88550841 bp之间,区间大小约为0.97 Mb,区间内基因为37个。本研究定位区间与前人报道的无重叠,为花生高油分子育种提供了新的标记。

关键词：花生主基因+多基因含油量 BSA 基因定位

亚油酸氧化产物——羟基十八碳二烯酸的研究进展

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食品科学 2018年第7期39卷 278-284页

作者：姜春姣江芸耿志明张牧焓孙冲卞欢王道营徐为民江苏省农业科学院农产品加工研究所江苏南京210014 南京师范大学金陵女子学院江苏南京210097 江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心江苏南京210095

羟基十八碳二烯酸(hydroxyoctadecaenoic acids,HODEs)是亚油酸的氧化产物,研究表明,内源性的HODEs具有病理生理学作用,与人类某些疾病的形成和发展有关;而外源性的HODEs可能具有相同的病理生理学作用,其潜在的安全隐患值得关注。本文就... 详细信息

羟基十八碳二烯酸(hydroxyoctadecaenoic acids,HODEs)是亚油酸的氧化产物,研究表明,内源性的HODEs具有病理生理学作用,与人类某些疾病的形成和发展有关;而外源性的HODEs可能具有相同的病理生理学作用,其潜在的安全隐患值得关注。本文就HODEs的种类、产生机理、病理和生理学意义、检测方法等进行综述,并就食品安全领域的相关研究作一些展望。

关键词：食品安全亚油酸脂质氧化羟基十八碳二烯酸

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花生生化品质与芽期抗逆性的相关性研究

中国油料作物学报 2023年第6期45卷 1266-1274页

作者：刘文强王志伟姜春姣梁风建孙昊杰曲春娟王欢王传堂吉林农业大学吉林长春130118 山东省花生研究所山东青岛266100 费县农业技术推广中心山东临沂273400 中国农业科学院生物技术研究所北京100081

为了探究花生种子生化品质与胁迫处理下花生种子萌发能力的关系,对90个花生材料分别进行盐(0.12 mol/L即0.7%NaCl)、碱(0.1 mol/L NaHCO3,pH 8.3)、干旱(15%PEG6000)、低温(2℃浸泡72 h)处理,对胁迫处理下的发芽指标与花生种子生化品质... 详细信息

为了探究花生种子生化品质与胁迫处理下花生种子萌发能力的关系,对90个花生材料分别进行盐(0.12 mol/L即0.7%NaCl)、碱(0.1 mol/L NaHCO3,pH 8.3)、干旱(15%PEG6000)、低温(2℃浸泡72 h)处理,对胁迫处理下的发芽指标与花生种子生化品质进行典型相关分析。研究发现:盐胁迫下油酸与活力指数是正相关关系,低温胁迫下油酸与发芽率是负相关系,油酸有利于盐胁迫下花生种子萌发,不利于低温胁迫下种子萌发;干旱胁迫下棕榈酸与发芽指数是正相关关系,棕榈酸有利于干旱胁迫下花生种子萌发;碱胁迫下维生素E与发芽指数的正相关关系,维生素E有利于碱胁迫下种子萌发。研究结果对于花生芽期抗逆育种、探讨花生芽期抗逆机制具有一定参考价值。

关键词：花生胁迫种子萌发生化品质典型相关分析

21个高油酸花生品种(系)对赤拟谷盗的抗性鉴定

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种子 2024年第11期43卷 73-77页

作者：姜春姣尉继强梁风建于静张建成王志伟王传堂山东省花生研究所山东青岛266100 威海市农业科学院山东威海264299 费县农业农村局山东费县273499

为探究高油酸花生对赤拟谷盗的抗性情况,本研究以21个高油酸花生品种(系)为材料,按0~4级花生籽仁受害标准,对花生籽仁的虫情指数、相对虫情指数及相对抗虫指数进行测定。结果表明,21个花生品种(系)虫情指数为0.49~37.36,相对虫情指数为0... 详细信息

为探究高油酸花生对赤拟谷盗的抗性情况,本研究以21个高油酸花生品种(系)为材料,按0~4级花生籽仁受害标准,对花生籽仁的虫情指数、相对虫情指数及相对抗虫指数进行测定。结果表明,21个花生品种(系)虫情指数为0.49~37.36,相对虫情指数为0.01~1.00,相对抗虫指数为0~0.99,鉴定出高感、感、抗、中抗、高抗材料分别为2、4、2、8、5个。生化品质与抗虫性相关分析发现,花生籽仁相对抗虫指数与蔗糖含量、可溶性总糖含量及棕榈酸含量呈显著负相关。本研究所用品种(系)不仅具备高油酸特性,而且具有高产特性,有望育成抗仓储害虫的高油酸高产花生新品种,为花生抗仓储害虫育种提供了优异的亲本材料。

关键词：花生仓库害虫赤拟谷盗抗性育种高油酸