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醋甘遂对Walker-256腹水模型大鼠的粪便代谢组学研究

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中国中药杂志 2022年第6期47卷 1558-1566页

作者：周世康姜东京张毅张丽南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业化与方剂与创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 苏州卫生职业技术学院药学院江苏苏州215000

基于代谢组学技术,研究醋甘遂对Walker-256细胞癌性腹水模型大鼠的粪便内源性代谢物变化,寻找与醋甘遂治疗癌性腹水相关的粪便潜在生物标志物,探讨醋甘遂粉末对腹水模型大鼠泻水逐饮的作用机制。采用快速液相色谱串联四极杆飞行时间质谱... 详细信息

基于代谢组学技术,研究醋甘遂对Walker-256细胞癌性腹水模型大鼠的粪便内源性代谢物变化,寻找与醋甘遂治疗癌性腹水相关的粪便潜在生物标志物,探讨醋甘遂粉末对腹水模型大鼠泻水逐饮的作用机制。采用快速液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UFLC-Q-TOF-MS)技术,对各组大鼠粪便样本进行测定,应用主成分分析(PCA)、偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)等多种方法进行模式识别,结合t检验和变量投影重要性(VIP)筛选出与癌性腹水相关的潜在生物标志物,并基于MetaboAnalyst进行通路分析,最后联合肠道菌群测序结果相关分析,阐释醋甘遂的泻水作用机制。结果显示,生/醋甘遂粉末均可使模型大鼠体内异常代谢有所恢复,醋甘遂的调节作用弱于生甘遂。共筛选鉴定出11种癌性腹水潜在生物标志物、5条代谢通路和4种肠道菌。醋甘遂的泻水逐饮作用与调节苯丙氨酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,色氨酸代谢,甘油磷脂代谢,糖基磷脂酰肌醇生物合成等代谢通路有关。该研究为深入理解与醋甘遂泻水逐饮效应相关的肠道菌群-宿主相互作用提供科学依据,并为醋甘遂临床合理应用提供参考。

关键词：醋甘遂癌性腹水粪便代谢组学代谢通路分析

醋甘遂成分群B、C对Walker-256癌性腹水模型大鼠肠道菌群多样性的影响

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中国中药杂志 2022年第5期47卷 1253-1261页

作者：张毅姜东京周世康王旻宇张丽南京中医药大学翰林学院江苏泰州225300 南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023 苏州卫生职业技术学院药学院江苏苏州215000

探讨醋甘遂成分群B、C对腹水模型大鼠肠道菌群多样性的影响,找寻与其泻水逐饮作用相关的关键差异性菌群,揭示相关成分群泻水逐饮的生物学机制。以Walker-256癌性腹水模型大鼠为研究对象,果导片为阳性药,分组连续7 d灌胃醋甘遂成分群B、... 详细信息

探讨醋甘遂成分群B、C对腹水模型大鼠肠道菌群多样性的影响,找寻与其泻水逐饮作用相关的关键差异性菌群,揭示相关成分群泻水逐饮的生物学机制。以Walker-256癌性腹水模型大鼠为研究对象,果导片为阳性药,分组连续7 d灌胃醋甘遂成分群B、C。实验第6天灌胃后,收集新鲜粪便样品,通过16S rDNA高通量测序技术及GC-MS定量分析粪便短链脂肪酸的方法研究醋甘遂成分群B、C对模型大鼠肠道菌群的调节作用。实验第7天灌胃后,采集血清和肠组织样本,测定相关指标。结果显示,与空白组比较,模型组大鼠排便量、尿量显著降低(P<0.01),腹水量、尿Na^(+)、K^(+)、Cl^(-)水平显著增加(P<0.01),肠AQP8及其mRNA表达降低(P<0.01)。大鼠肠道有益菌乳杆菌属的丰度降低(P<0.01),而潜在致病菌毛螺菌科、厌氧支原体属等丰度均升高(P<0.01),短链脂肪酸含量显著降低(P<0.01)。与模型组比较,模型醋B组、模型醋C组大鼠的上述指标均有不同程度回调(P<0.01)。推知醋甘遂成分群B、C可通过增加模型大鼠有益菌乳杆菌属的丰度,降低有害菌毛螺菌属和厌氧支原体属的丰度,调节腹水大鼠紊乱的肠道菌,发挥泻下逐水作用。该研究可为醋甘遂临床合理应用提供参考。

关键词：醋甘遂成分群肠道菌群癌性腹水泻水逐饮

醋甘遂成分群B,C对正常大鼠粪便代谢组学的研究

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中国中药杂志 2020年第6期45卷 1452-1459页

作者：郭思嘉姜东京张丽南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心中药资源产业化与方剂与创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

基于代谢组学方法,对给予醋甘遂不同成分群(B,C)前后大鼠的粪便代谢物进行比较研究,探求与醋甘遂毒性相关的差异性代谢物和代谢通路,揭示醋甘遂的毒性作用机制。采用快速液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UFLC-Q-TOF-MS)技术,对大鼠粪便... 详细信息

基于代谢组学方法,对给予醋甘遂不同成分群(B,C)前后大鼠的粪便代谢物进行比较研究,探求与醋甘遂毒性相关的差异性代谢物和代谢通路,揭示醋甘遂的毒性作用机制。采用快速液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UFLC-Q-TOF-MS)技术,对大鼠粪便样本进行测定,结合主成分分析(PCA)和偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)等多种方法筛选并鉴定与醋甘遂毒性相关的生物标志物,并采用t检验进行单变量统计分析,考察给予醋甘遂成分群B,C后正常大鼠粪便这些生物标志物的含量变化,揭示醋甘遂成分群B,C对大鼠粪便代谢组的影响程度,并结合基于MetaboAnalyst数据库的代谢通路分析探求醋甘遂成分群B,C的毒性作用机制。结果显示,与空白组相比,醋甘遂成分群B和C组大鼠粪便样本代谢组发生了明显改变,且醋B组改变程度更大,发现并鉴定了16种醋甘遂毒性潜在生物标志物及5条相关代谢通路。醋甘遂的毒性作用可能与色氨酸代谢、初级胆汁酸生物合成、氨基糖和核苷酸糖代谢、嘌呤代谢和缬氨酸,亮氨酸和异亮氨酸降解等代谢通路的紊乱有关。该研究为醋甘遂的临床安全应用提供了科学依据。

关键词：醋甘遂成分群粪便代谢组学偏最小二乘-判别分析通路分析

基于网络药理学、分子模拟的射干治疗脑胶质瘤的作用机制

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西安交通大学学报（医学版） 2022年第5期43卷 769-778页

作者：周扬姜东京刘松柏陆海峰曾峰钟其新戴小蓉苏州卫生职业技术学院药学院苏州检验医学生物技术重点实验室江苏苏州215009 广州中医药大学青蒿研究中心广东广州510445 广州中医药大学第一附属医院科研处广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广州中医药大学深圳医院(福田) 广东深圳518034

目的通过网络药理学方法、分子对接技术和体外细胞实验验证探讨射干治疗脑胶质瘤的潜在分子生物学机制。方法①通过数据库检索获取射干活性成分、作用靶点及脑胶质瘤疾病靶点。利用STRING数据库进行蛋白质相互作用关系分析,利用R语言进... 详细信息

目的通过网络药理学方法、分子对接技术和体外细胞实验验证探讨射干治疗脑胶质瘤的潜在分子生物学机制。方法①通过数据库检索获取射干活性成分、作用靶点及脑胶质瘤疾病靶点。利用STRING数据库进行蛋白质相互作用关系分析,利用R语言进行基因本体论(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,使用Cytoscape软件构建“化合物-靶点-疾病”网络和PPI网络,利用AutoDock软件进行分子对接验证。②通过免疫蛋白印迹实验(Western blotting)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、细胞凋亡实验对网络药理学靶点蛋白通路富集结果进行验证。结果①筛选得到射干32个活性成分、484个作用靶点和464个脑胶质瘤疾病靶点,映射后获得62个治疗靶点,网络拓扑学分析获得异-德国鸢尾醛、3-甲基鼠李素等12个关键药效分子和AKT1、STAT3、HRAS等核心靶点,富集分析结果显示主要涉及肽基丝氨酸磷酸化、蛋白激酶B信号转导、肽基丝氨酸修改等生物过程和PI3K/AKT信号通路、Rap1信号通路等;分子对接结果验证了关键药效分子与核心靶点具有较好的结合活性。②Western blotting实验结果表明,与空白对照组相比,射干提取物8 mg/mL和16 mg/mL组的VEGF、MMP9蛋白表达量均显著降低(P<0.01或P<0.001),且呈剂量依赖性,射干提取物16 mg/mL组的p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值均显著降低(P<0.01),细胞凋亡实验表明与空白对照组比较,射干提取物8 mg/mL和16 mg/mL组的细胞早期凋亡率显著降低(P<0.01或P<0.001),qRT-PCR实验结果表明射干提取物8 mg/mL和16 mg/mL组VEGF和MMP9基因mRNA表达水平显著降低(P<0.001或P<0.0001)。结论射干治疗脑胶质瘤是多成分、多靶点、多途径相互作用的结果;细胞实验结果证实了射干提取物能够影响PI3K/AKT信号通路相应靶点蛋白和VEGF、MMP9的表达,验证了网络药理学结果,为射干的临床应用以及脑胶质瘤的研究提供一定的理论依据。

关键词：射干网络药理学脑胶质瘤作用机制作用靶点

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续断“发汗”前后成分比较及质量控制研究

续断“发汗”前后成分比较及质量控制研究

作者：姜东京浙江中医药大学

学位级别：硕士

目的1.发汗对续断中总皂苷、水溶性浸出物及醇溶性浸出物的影响;2.建立续断样品“发汗”前后的特征指纹图谱;3.同时测定续断样品“发汗”前后的8个主要成分的含量;4.建立基于近红外光谱的续断未“发汗”和“发汗”样品的快速鉴别模型以... 详细信息

目的1.发汗对续断中总皂苷、水溶性浸出物及醇溶性浸出物的影响;2.建立续断样品“发汗”前后的特征指纹图谱;3.同时测定续断样品“发汗”前后的8个主要成分的含量;4.建立基于近红外光谱的续断未“发汗”和“发汗”样品的快速鉴别模型以及8个主要成分含量快速检测方法;5.建立血清中马钱苷和川续断皂苷Ⅵ的同时测定,并用于“发汗”前后续断样品在大鼠体内的药动学研究。方法1.采用UV显色法、热浸法考察发汗对续断中总皂苷含量、水溶性浸出物和醇溶性浸出物的影响。2.选择续断未“发汗”和“发汗”样品各20批,以流动相乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,柱温30℃,记录时间为120min,气体流速2.0L·min-1为色谱条件,采用国家药典委员会出版的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2.0版》软件建立续断未“发汗”和“发汗”样品的特征指纹图谱。3.采用高效液相色谱法同时测定续断未“发汗”和“发汗”样品中8个主要成分的含量。4.从不同产地收集213批未“发汗”续断样品和234批“发汗”续断样品,采集近红外光谱图,采用判别分析法建立其定性鉴别模型;用HPLC法测定8个主要成分的含量,采用偏最小二乘法（PLS）建立NIR光谱与HPLC法测定值之间的多元校正模型,并预测续断样品中8种主要成分的总量。5.采用HPLC-MS进行检测,确定续断“发汗”前后马钱苷、川续断皂苷Ⅵ的药动学参数以及在体内的药时曲线。结果1.续断“发汗”后水溶性浸出物、水溶性浸出物和总皂苷都降低了。上述结果的原因可能是续断在以麻袋覆盖堆置“发汗”的过程中酶解了相关物质所致。2.续断未“发汗”和“发汗”样品的色谱图比较,两者相同位置色谱峰的高度有不同程度的变化,“发汗”样品的色谱峰高度较低,甚至消失,在新的位置出现了新的色谱峰;续断未“发汗”和“发汗”样品的指纹图谱中有35个共有色谱峰,其中7、8、9、10、18、19、21、29号峰分别为马钱苷酸、绿原酸、咖啡酸、马钱苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、川续断皂苷Ⅵ。3.建立了同时测定续断“发汗”前后样品中马钱苷酸、绿原酸、咖啡酸、马钱苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、川续断皂苷Ⅵ等8个有效成分含量的方法,且该法稳定可靠。4.未“发汗”样品选择谱段7,756.86～4,006.00 cm-1,“发汗”样品选择谱段8,562.39～4,528.04 cm-1。采用SNV+spectrum+S-G组合对原始光谱进行预处理,建立模型,并经预测集验证,鉴别准确率达到100%;5.续断未发汗品中马钱苷、川续断皂苷Ⅵ的最大血药浓度比发汗品中高出许多,药时曲线下面积（AUC）未发汗品也明显大于发汗品。结论1.发汗法在一定程度上降低了续断中总皂苷、水溶性浸出物和醇溶性浸出物的含量。2.建立的续断样品“发汗”前后的指纹图谱可以很好地控制这两种样品的质量。3.同时测定了发汗前后8个成分的含量,为进一步揭示炮制的机理打下物质基础。4.所建立的近红外光谱技术鉴别模型可快速、准确鉴别续断未“发汗”和“发汗”样品:模型对预测集样品具有一定的预测能力,基于红外光谱技术快速检测8个指标性成分是可行的。5.比较了大鼠灌胃给药后主要成分马钱苷、川续断皂苷Ⅵ的药动学特征,发现灌胃未发汗品后大鼠体内马钱苷、川续断皂苷Ⅵ药动学参数t1/2、MRT等明显优于发汗品,说明续断生品在体内容易吸收。

关键词：续断发汗指纹图谱近红外光谱入血成分

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肠道菌群在中药研究中的应用

中国中药杂志 2016年第17期41卷 3218-3225页

作者：姜东京张丽曹雨诞姚卫峰南京中医药大学江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/中药资源产业化与方剂创新药物国家地方联合工程研究中心江苏南京210023

该文基于肠道菌群的生理功能,综述了近年来中药与肠道菌群相互作用的研究进展,包括有毒/刺激性中药对肠道菌群的失调影响,中药对肠道菌群失调的转归作用,肠道细菌对中药成分的代谢作用以及肠道菌群与宿主的共代谢作用等方面,对中药特定... 详细信息

该文基于肠道菌群的生理功能,综述了近年来中药与肠道菌群相互作用的研究进展,包括有毒/刺激性中药对肠道菌群的失调影响,中药对肠道菌群失调的转归作用,肠道细菌对中药成分的代谢作用以及肠道菌群与宿主的共代谢作用等方面,对中药特定生物效应与肠道菌群结构及"肠道菌群-宿主共代谢"内源性代谢物间的联系进行思考和展望,旨在为基于肠道菌群探讨中药的生物学作用机制和物质基础,推动中药临床的安全有效应用提供新的策略。

关键词：肠道菌群中药调控成分代谢肠道菌群-宿主共代谢

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不同类型黄芩性状与水溶性成分的相关性研究

中药材 2023年第9期46卷 2165-2171页

作者：刘逊姜东京宋琪琪王亚琼汪明志王添艳张迪苏州卫生职业技术学院江苏苏州215009 苏州市药品检验检测研究中心江苏苏州215104

目的:分析不同类型的黄芩药材性状特征与其水溶性成分的相关性,寻找评价黄芩药材品质优劣的科学依据。方法:收集各地黄芩药材共131批次,采用性状观察、显微检测荧光强度以及紫外-可见分光光度法、HPLC法测定黄芩的浸出物、淀粉及核苷类... 详细信息

目的:分析不同类型的黄芩药材性状特征与其水溶性成分的相关性,寻找评价黄芩药材品质优劣的科学依据。方法:收集各地黄芩药材共131批次,采用性状观察、显微检测荧光强度以及紫外-可见分光光度法、HPLC法测定黄芩的浸出物、淀粉及核苷类水溶性成分的含量,分析各项检测指标之间的相关性。结果:黄芩药材可分为四种类型,各类型黄芩的性状差异明显。黄芩的荧光灰度值与淀粉、水溶性浸出物含量呈显著正相关;淀粉含量与水溶性浸出物呈强正相关;鸟苷含量与腺苷含量存在相关性。四种黄芩类型中,以子芩为主的山西类型栽培黄芩核苷类成分含量最高;以枯芩为主的野生类型黄芩的淀粉及水溶性浸出物含量最低,且枯芩从根头部到尾部淀粉含量逐渐升高。结论:红色荧光显微技术可以定性表征黄芩的淀粉含量;黄芩生长时间越久,环境越恶劣,枯芩越多,淀粉及水溶性浸出物含量越少;子芩型黄芩与枯芩型黄芩水溶性成分差异显著。该研究结果可为黄芩药材品质评价以及临床使用提供参考。

关键词：黄芩药材类型性状水溶性成分相关性

基于近红外光谱和多维谱效研究中药产地加工“发汗”

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中成药 2014年第11期36卷 2377-2380页

作者：杜伟锋姜东京蔡宝昌浙江中医药大学中药炮制技术研究中心浙江杭州311401 南京中医药大学江苏省中药炮制重点实验室江苏南京210046

利用近红外光谱技术快速鉴别中药材"发汗"与否,采用多维谱效关系阐明药材"发汗"的物质基础,为中药产地加工——"发汗"机理的研究提供了新的思路与方法,为制定规范合理的药材产地加工技术标准提供科学依据。

关键词：产地加工发汗近红外光谱多维谱效新思路

基于近红外光谱主成分分析-马氏距离法的发汗与未发汗续断的快速鉴别

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中国中药杂志 2014年第23期39卷 4603-4607页

作者：杜伟锋贾永强姜东京张浩浙江中医药大学中药炮制技术研究中心浙江杭州311401 中国医学科学院药物研究所北京协和药厂北京102600

为了快速准确的鉴别续断发汗与否,以续断发汗和未发汗样品为实验材料,采用近红外光谱法结合主成分分析-马氏距离判别分析方法建立了定性鉴别模型。选取了129个未发汗样品和86个发汗样品的近红外光谱图,应用主成分分析-马氏距离法进行判... 详细信息

为了快速准确的鉴别续断发汗与否,以续断发汗和未发汗样品为实验材料,采用近红外光谱法结合主成分分析-马氏距离判别分析方法建立了定性鉴别模型。选取了129个未发汗样品和86个发汗样品的近红外光谱图,应用主成分分析-马氏距离法进行判别分析,选择谱段为9 881.46~4 119.20 cm-1,采用“标准正则变换＋原始光谱＋二阶求导”组合对原始光谱进行预处理,主成分数为14,建立定性鉴别模型;并经预测集验证,鉴别准确率达到100%。说明近红外光谱结合模式识别方法进行续断“发汗”与否定性鉴别在技术上是可行的,可以作为续断产地加工“发汗”定性鉴别的一种辅助手段。

关键词：近红外光谱续断发汗主成分分析马氏距离判别分析