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作者：姚金美苏州大学

学位级别：硕士

家蚕是典型的胚胎滞育昆虫，即时浸酸和低温冷藏可分别阻止滞育发动和解除滞育状态。滞育发动时呼吸耗氧量显著下降，糖原大量转化为山梨醇，同时细胞停止分裂。即时浸酸显著提高了其呼吸耗氧量，抑制了山梨醇积累，细胞继续分裂。低温... 详细信息

家蚕是典型的胚胎滞育昆虫，即时浸酸和低温冷藏可分别阻止滞育发动和解除滞育状态。滞育发动时呼吸耗氧量显著下降，糖原大量转化为山梨醇，同时细胞停止分裂。即时浸酸显著提高了其呼吸耗氧量，抑制了山梨醇积累，细胞继续分裂。低温冷藏期间，呼吸耗氧量保持于极低水平，山梨醇重新转换为糖原，细胞不能分裂。在低温解除滞育后，呼吸耗氧量迅速上升，细胞分裂恢复。辅酶ⅠNAD(H)和辅酶Ⅱ NADP(H)分别参与细胞的能量代谢和还原性生物合成及抗氧化。NAD激酶（NAD kinase，NADK）能够催化NAD(H)生成NADP(H)。苹果酸脱氢酶（malate dehydrogenase, MDH）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）是胞浆中催化NADH氧化的关键酶。6-磷酸葡萄糖脱氢酶（glucose-6-phosphatedehydrogenase, G6PDH）和异柠檬酸脱氢酶（isocitrate dehydrogenase, ICDH）是胞浆中催化NADP还原的关键酶。鉴于滞育蚕卵中呼吸耗氧量和糖原-山梨醇相互转化可能与NAD(H)和NADP(H)代谢相关，本研究测定了即时浸酸和低温冷藏对滞育蚕卵中NAD(H)和NADP(H)代谢的影响。主要结果如下：一、即时浸酸对滞育蚕卵中NAD(H)和NADP(H)代谢的影响滞育发动阶段，蚕卵中NAD(H)含量、NADP(H)含量和NADK活性显著下降，表明NAD和NADP的降解大于合成，NAD(H)含量下降导致呼吸耗氧量显著降低，NAD降解产物可能参与了细胞分裂抑制;同时，尽管NADH/NAD比值在产下后36h左右达到峰值，但是MDH活性无显著变化，LDH活性显著下降，表明NADH氧化减弱;另外，尽管NADPH/NADP比值处于波动中，但是ICDH活性无显著变化，G6PDH活性显著下降，表明NADP还原减弱。即时浸酸处理后，NAD(H)含量、NADP(H)含量和NADK活性显著升高，并且显著高于滞育蚕卵，表明NAD和NADP的合成大于降解，NAD(H)含量显著升高为呼吸耗氧量迅速增加奠定了基础;同时，NADH/NAD比值处于波动中，MDH活性显著升高，LDH活性显著下降，表明胞浆中NADH通过苹果酸-天冬氨酸穿梭氧化机制加强;除了产下后36h外，两者NADH/NAD比值无显著差异，即时浸酸蚕卵MDH和LDH活性都显著高于滞育蚕卵，表明NADH/NAD氧化还原循环强度与NAD(H)含量变化一致;此外，即时浸酸蚕卵NADPH/NADP比值显著升高，G6PDH活性无显著变化，ICDH活性显著升高，表明NADP还原增强;两者NADPH/NADP比值无显著差异，即时浸酸蚕卵G6PDH和ICDH活性都显著高于滞育蚕卵，表明NADP还原能力与其NADP(H)含量变化一致。可见，即时浸酸后呼吸耗氧量增加与其NAD(H)含量而不是NADH/NAD比值升高有关，生物合成和抗氧化能力增强与其NADP(H)含量而不是NADPH/NADP比值升高有关。二、低温冷藏对滞育蚕卵中NAD(H)和NADP(H)代谢的影响产下后10-90d，滞育卵中G6PDH和ICDH活性显著提高，其它测定指标无显著变化。可见，滞育维持阶段蚕卵除了NADPH/NADP氧化还原循环偏向于还原外，NAD和NADP代谢处于稳定状态。低温处理过程中，NAD(H)含量、NADP(H)含量和NADK活性都显著升高，而且显著高于滞育蚕卵，表明NAD和NADP的合成大于降解，NAD(H)含量显著增加为解除滞育后转移到常温下呼吸耗氧量迅速升高奠定了基础;在低温冷藏蚕卵中，尽管NADH/NAD比值无显著变化，MDH活性显著升高，但是LDH活性无显著变化，表明NADH通过苹果酸-天冬氨酸穿梭氧化机制加强;两者NADH/NAD比值和LDH活性无显著差异，但是低温冷藏蚕卵的MDH活性显著高于滞育蚕卵，表明低温处理过程中NADH的氧化增强;此外，低温冷藏蚕卵中NADPH/NADP比值在早期和中期无显著变化，但是后期迅速升高，而且G6PDH和ICDH活性也显著升高，表明低温处理后期NADP还原显著增强;尽管两者早期和中期NADPH/NADP比值和ICDH活性无显著差异，但是低温处理蚕卵NADP(H)含量和G6PDH活性显著高于滞育蚕卵，表明在早期和中期可能有更多的NADPH用于抗低温氧胁迫。可见，低温冷藏后呼吸耗氧量增加与其NAD(H)含量而不是NADH/NAD比值升高有关，生物合成和抗氧化能力增强与其NADP(H)含量和NADPH/NADP比值升高有关。

关键词：家蚕滞育即时浸酸低温冷藏辅酶Ⅰ 辅酶Ⅱ

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丝蛋白合成和分泌期家蚕丝腺中有氧氧化特性分析

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昆虫学报 2016年第1期59卷 1-7页

作者：姚金美王启龙赵林川苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123 苏州科铭生物技术有限公司江苏苏州215123

【目的】有氧氧化中葡萄糖(Glc)、丙酮酸(PA)、乙酰Co A(AC)、还原型吡啶核苷酸(NADH)和腺苷三磷酸(ATP)摩尔数的理论比值为1∶2∶2∶10∶30~32,而己糖激酶(HK)、磷酸果糖激酶1(PFK1)、丙酮酸激酶(PK)、丙酮酸脱氢酶(PDH)、柠檬酸合酶(... 详细信息

【目的】有氧氧化中葡萄糖(Glc)、丙酮酸(PA)、乙酰Co A(AC)、还原型吡啶核苷酸(NADH)和腺苷三磷酸(ATP)摩尔数的理论比值为1∶2∶2∶10∶30~32,而己糖激酶(HK)、磷酸果糖激酶1(PFK1)、丙酮酸激酶(PK)、丙酮酸脱氢酶(PDH)、柠檬酸合酶(CS)、异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)、α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)、NADH泛醌还原酶(NCR)、琥珀酸泛醌还原酶(SCR)、泛醌细胞色素C还原酶(CCR)、细胞色素C氧化酶(CCO)和ATP合酶(AS)活性的理论比值为1∶1∶2∶2∶2∶2∶2∶10∶2∶12∶12∶26~28。本研究旨在分析丝蛋白合成和分泌期家蚕Bombyx mori丝腺有氧氧化的特性。【方法】利用分光光度法和高效液相色谱法测定了上述生化指标的变化。【结果】丝蛋白合成和分泌期家蚕丝腺中检测不到Glc,产物含量以1/30 ATP,1/10 NADH,1/2 AC和1/2 PA的顺序递增;糖酵解途径相关酶活性,以PFK1活性最低;三羧酸循环相关酶活性以1/2 ICDHm,1/2α-KGDH和1/2 CS的顺序递增;氧化磷酸化相关酶包括1/26 AS,1/10 NCR,1/2 SCR,1/12 CCR和1/12 CCO的活性以1/26 AS活性最低;1/26 AS,1/2 ICDHm,1/2 PDH和PFK1的活性依次递增。NADH含量、ATP含量、PFK1活性、PDH活性和NCR活性在丝蛋白合成期升高,但在丝蛋白分泌期下降。【结论】据此推测,家蚕丝腺中PFK1,ICDHm和AS分别是糖酵解途径、三羧酸循环和氧化磷酸化的限速酶;糖酵解途径、丙酮酸脱氢、三羧酸循环和氧化磷酸化速率依次递减;有氧氧化速率在丝蛋白合成期升高,相反在丝蛋白分泌期降低。

关键词：家蚕丝腺丝蛋白有氧氧化限速酶

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低温冷藏提高家蚕滞育卵NAD含量和胞质苹果酸脱氢酶活性

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昆虫学报 2012年第9期55卷 1031-1036页

作者：王启龙万华星姚金美司马杨虎赵林川苏州大学基础医学与生物科学院江苏苏州215123

为了调查5℃低温处理是否改变家蚕Bombyxmori卵滞育NAD代谢,本研究利用HPLC和分光光度法测定了经25℃和5℃分别处理的滞育卵中NADH含量、NAD+含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性和胞质苹果酸脱氢酶(cMDH)活性。结果表明:5℃处理的NAD(NADH+NAD+... 详细信息

为了调查5℃低温处理是否改变家蚕Bombyxmori卵滞育NAD代谢,本研究利用HPLC和分光光度法测定了经25℃和5℃分别处理的滞育卵中NADH含量、NAD+含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性和胞质苹果酸脱氢酶(cMDH)活性。结果表明:5℃处理的NAD(NADH+NAD+)含量和cMDH活性分别增加了106%和53%,并且显著高于25℃处理(P0.05)。据此推测,5℃低温处理加强了家蚕滞育卵NAD+合成和再生能力。

关键词：家蚕滞育解除辅酶NAD 乳酸脱氢酶胞质苹果酸脱氢酶

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二化性家蚕滞育发动期间滞育性卵和非滞育性卵的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸变化

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蚕业科学 2013年第1期39卷 47-51页

作者：王启龙姚金美司马杨虎赵林川苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123

为了探究家蚕滞育发动期间呼吸耗氧量下降与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)含量变化的关系,用高效液相色谱法和分光光度法分别检测在25℃条件下产下后12～72 h的二化性家蚕滞育性卵与非滞育性卵中的还原型NAD(NADH)含量、氧化型NAD(NAD+)含... 详细信息

为了探究家蚕滞育发动期间呼吸耗氧量下降与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)含量变化的关系,用高效液相色谱法和分光光度法分别检测在25℃条件下产下后12～72 h的二化性家蚕滞育性卵与非滞育性卵中的还原型NAD(NADH)含量、氧化型NAD(NAD+)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性和胞质苹果酸脱氢酶(cMDH)活性。滞育性卵中的NADH+NAD+含量、NADH/NAD+值及LDH活性分别在产下后18、36、24 h达到峰值,而cMDH活性处于波动中。在产下后24～72 h,非滞育性卵中的NADH/NAD+值极显著低于滞育性卵,而LDH和cMDH活性极显著高于滞育性卵。据此可以推测,滞育发动期间家蚕滞育性卵的NAD+降解增强和NAD+再生下降共同导致呼吸耗氧量下降。

关键词：家蚕滞育发动呼吸耗氧量烟酰胺腺嘌呤二核苷酸乳酸脱氢酶胞质苹果酸脱氢酶

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中医体质学说在老年痛风患者护理中的体会

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人人健康 2018年第10期 135-136页

作者：杨丽华姚金美云南省丽江市宁蒗彝族自治县中医医院

目的:研究探讨中医体质学说在老年痛风患者中的护理效果。方法:选择2016年1月至2017年1月期间在本院就诊的痛风患者40例进行研究,随机分为两组,每组20例,其中对照组采用常规的入院护理,观察组根据不同患者的体质进行护理,观察两组患者... 详细信息

目的:研究探讨中医体质学说在老年痛风患者中的护理效果。方法:选择2016年1月至2017年1月期间在本院就诊的痛风患者40例进行研究,随机分为两组,每组20例,其中对照组采用常规的入院护理,观察组根据不同患者的体质进行护理,观察两组患者的治疗效果。结果:观察组的有效率为85%,对照组的有效率为75%,观察组患者的疗效优于对照组,两组比较,P<0.05。结论:对于老年痛风患者,采取中医体质护理,可以有效提高治疗的效果,增加患者对护理人员的满意度,可以在今后患者的护理过程中进行推广应用。

关键词：中医体质学说老年痛风护理体会

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急诊护理对预防急腹症患者并发症的影响

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人人健康 2018年第8期 188-189页

作者：姚金美杨丽华云南省丽江市宁蒗彝族自治县中医医院

目的 :研究探讨急诊护理对预防急腹症患者并发症的影响。方法 :选择2016年1;2月在本院就诊的急腹症患者30例随机分为两组,每组15例进行研究,其中对照组采用常规的入院护理,观察组采取急诊护理干预措施对其进行护理,观察两组患者的并发... 详细信息

目的 :研究探讨急诊护理对预防急腹症患者并发症的影响。方法 :选择2016年1;2月在本院就诊的急腹症患者30例随机分为两组,每组15例进行研究,其中对照组采用常规的入院护理,观察组采取急诊护理干预措施对其进行护理,观察两组患者的并发症发生情况以及对护理人员的满意度。结果 :观察组采取急诊护理干预,患者出现并发症的情况比对照组的要少,患者对护理人员的满意度高于对照组,两组比较,P<0.05。结论 :对于急腹症患者,采取急诊护理干预,可以有效减少患者出现并发症,提高患者对护理人员的满意度,可以在今后患者的护理过程中应用。

关键词：急诊护理预防急腹症并发症影响

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冷藏期家蚕滞育卵和即时浸酸卵的H_2O_2含量及过氧化氢酶基因表达的变化

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蚕业科学 2010年第4期36卷 697-701页

作者：侯宜胜王丽姚金美赵林川苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123

将产下后48h的家蚕滞育卵和即时浸酸卵进行低温(5℃)冷藏处理30d以上,滞育卵孵化率显著上升,而即时浸酸卵孵化率显著下降。为了探讨低温处理对滞育卵和即时浸酸卵的孵化产生不同影响的分子机制,测定了冷藏期间2种卵中的H2O2含量、过氧... 详细信息

将产下后48h的家蚕滞育卵和即时浸酸卵进行低温(5℃)冷藏处理30d以上,滞育卵孵化率显著上升,而即时浸酸卵孵化率显著下降。为了探讨低温处理对滞育卵和即时浸酸卵的孵化产生不同影响的分子机制,测定了冷藏期间2种卵中的H2O2含量、过氧化氢酶(CAT)基因mRNA转录水平和CAT活性变化。结果表明:2种卵在冷藏期间随着卵中的H2O2含量显著增加,CAT基因mRNA转录水平也上调;虽然冷藏后的10～70d,2种卵中的H2O2含量、CAT基因mRNA转录水平及CAT活性都显著上升,但滞育卵的H2O2含量仍显著高于即时浸酸卵,而CAT基因mRNA转录水平和CAT活性则显著低于即时浸酸卵。即时浸酸卵在冷藏过程中H2O2含量显著增加,可能造成了对胚胎的氧化伤害,从而降低其孵化率。然而,滞育卵在冷藏过程中的CAT基因mRNA转录水平及CAT活性相对较低,H2O2相对较高,胚胎却未受到氧化伤害,推测低温处理可能诱导了滞育卵中其它抗氧化反应。

关键词：家蚕滞育卵即时浸酸卵低温 H2O2 过氧化氢酶基因

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即时浸酸显著提高滞育性家蚕卵辅酶Ⅰ和Ⅱ含量

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昆虫学报 2012年第1期55卷 24-28页

作者：姚金美万华星司马杨虎赵林川苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123

即时浸酸在阻止家蚕Bombyx mori卵滞育发动的同时,提高了其呼吸耗氧量,抑制了山梨醇积累。本研究利用HPLC法测定了家蚕滞育卵和5min即时浸酸滞育性卵中辅酶Ⅰ和Ⅱ含量。结果表明:产下后24-72h,家蚕滞育卵中NAD,NADH,NADP和NADPH含量分... 详细信息

即时浸酸在阻止家蚕Bombyx mori卵滞育发动的同时,提高了其呼吸耗氧量,抑制了山梨醇积累。本研究利用HPLC法测定了家蚕滞育卵和5min即时浸酸滞育性卵中辅酶Ⅰ和Ⅱ含量。结果表明:产下后24-72h,家蚕滞育卵中NAD,NADH,NADP和NADPH含量分别下降了30%,37%,50%和4%;而即时浸酸滞育性卵中分别增加了77%,46%,142%和241%。不过,即时浸酸并未显著改变滞育性家蚕卵中NADH/NAD和NADPH/NADP比值。据此推测,即时浸酸提高滞育性家蚕卵辅酶Ⅰ含量与其呼吸耗氧量增加有关;即时浸酸显著提高辅酶Ⅱ含量与山梨醇积累抑制无关,而主要与生物合成加强有关。

关键词：家蚕滞育滞育卵即时浸酸辅酶Ⅰ 辅酶Ⅱ

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安徽林业干部职工冲在抗洪救灾一线

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中国林业 2020年第7期 96-97页

作者：龙琳汪树人方利荣姚金美不详

进入主汛期以来,安徽省多地续强降雨,安徽省林业局迅速部署省内国有林场、苗圃、自然保护区等林业重点区域加强监测预防。各地林业部门提前排查安全隐患,充分发挥乡(镇)、村林长的作用,落实林长网格责任,加大对林业重点区域的巡查频次,... 详细信息

进入主汛期以来,安徽省多地续强降雨,安徽省林业局迅速部署省内国有林场、苗圃、自然保护区等林业重点区域加强监测预防。各地林业部门提前排查安全隐患,充分发挥乡(镇)、村林长的作用,落实林长网格责任,加大对林业重点区域的巡查频次,根椐气象情况调整林业建设、林业生产、山林巡护等野外活动,安排居住生活在危险地带的林业职工和家属及时避险、转移疏散。

关键词：国有林场林业职工气象情况林业生产林业建设野外活动林业部门安徽林业

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低温处理对家蚕滞育卵还原型与氧化型谷胱甘肽比值的影响

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蚕业科学 2011年第1期37卷 52-56页

作者：王丽侯宜胜姚金美司马杨虎赵林川苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123

还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的比值反映出细胞的氧化胁迫状况。利用分光光度法分别测定家蚕滞育卵持续25℃保护和经5℃低温处理后卵内谷胱甘肽代谢的变化,探讨蚕卵的谷胱甘肽代谢与滞育解除的关系。与持续25℃滞育温度... 详细信息

还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的比值反映出细胞的氧化胁迫状况。利用分光光度法分别测定家蚕滞育卵持续25℃保护和经5℃低温处理后卵内谷胱甘肽代谢的变化,探讨蚕卵的谷胱甘肽代谢与滞育解除的关系。与持续25℃滞育温度条件下的蚕卵相比,5℃低温解除滞育的处理显著提高了蚕卵总谷胱甘肽含量、GSSG含量和硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)活性,而显著降低了GSH含量以及GSH/GSSG比值。结果表明,低温处理过程中,滞育卵TPX活性显著升高,间接地促进GSH氧化为GSSG,使GSH/GSSG比值显著下降,由此导致蚕卵处于过氧化状态。

关键词：家蚕滞育卵滞育解除还原型谷胱甘肽氧化型谷胱甘肽硫氧还蛋白过氧化物酶

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