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三个群体MICA基因外显子2、3和4的多态性研究

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中华医学遗传学杂志 2002年第4期19卷 336-339页

作者：龚卫娟范丽安杨珏琴许玲娣姚芳娟上海第二医科大学上海市免疫学研究所 200025

目的　调查上海地区汉族、云南傣族和新疆维吾尔族 3个群体 MICA基因外显子 2、3和 4的多态性。方法　采用聚合酶链反应 -序列特异的寡核苷酸探针杂交 (polymerase chain reaction andsequence- specific oligonucleotide probing,PCR- ... 详细信息

目的　调查上海地区汉族、云南傣族和新疆维吾尔族 3个群体 MICA基因外显子 2、3和 4的多态性。方法　采用聚合酶链反应 -序列特异的寡核苷酸探针杂交 (polymerase chain reaction andsequence- specific oligonucleotide probing,PCR- SSOP)方法 ,分析 183名汉族、4 1名傣族和 6 6名维吾尔族正常人群的 MICA胞外区等位基因多态性。结果　分别在汉族、傣族和维吾尔族中检测出 10、7和 9个MICA等位基因 ,其中 MICA* 0 0 8在汉族和维吾尔族中频率最高 ,而傣族中 MICA* 0 10的频率最高。 3个民族 MICA等位基因分布方式各不相同 ,而且维吾尔族的等位基因分布与另外两个民族相比 ,差异具有显著性。结论　MICA等位基因分布方式具有民族地区特异性。

关键词： MICA基因多态性人类白细胞抗原B 连锁不平衡 PCR-SSOP

人类白细胞抗原-DRB1基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症的相关性研究

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中华妇产科杂志 2002年第9期37卷 519-522页

作者：陈富强范丽安许玲娣姚芳娟江苏省无锡市锡山人民医院妇产科上海第二医科大学上海市免疫研究所

目的　探讨人类白细胞抗原 (HLA) DRB1基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症 (ICP)的关系。方法　采用聚合酶链反应序列寡核苷酸 (PCR SSO)探针杂交法对 42例ICP患者 (ICP组 )和 5 6例正常孕妇 (对照组 )进行HLA DRB1等位基因分型 ,比较... 详细信息

目的　探讨人类白细胞抗原 (HLA) DRB1基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症 (ICP)的关系。方法　采用聚合酶链反应序列寡核苷酸 (PCR SSO)探针杂交法对 42例ICP患者 (ICP组 )和 5 6例正常孕妇 (对照组 )进行HLA DRB1等位基因分型 ,比较其基因频率及其与临床表型之间的关系。同时对ICP组孕妇的肝功能及甘胆酸盐水平进行检测。结果　两组孕妇中 ,HLA DR9、DR12、DR4基因频率均较高。ICP组孕妇中共检出 14例HLA DR6等位基因 ,对照组仅检出 4例HLA DR6等位基因。ICP组中HLA DR6等位基因频率为 16 7% ,对照组为 3 6% ,两组比较 ,差异有极显著性 (P0 0 5 )。未发现ICP组孕妇HLA DR6基因与肝功能及甘胆酸盐水平有相关关系。结论　ICP患者HLA DR6基因可能是ICP发病的易感基因之一。

关键词：妊娠并发症肝内胆汁郁积疾病遗传易感性 HLA-DR抗原等位基因多态现象

用地高辛标记的PCR/SSO方法进行HLA-B27等位基因检测

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中华微生物学和免疫学杂志 1998年第3期18卷 230-234页

作者：蒋黎华杨珏琴范丽安姚芳娟上海第二医科大学上海市免疫学研究所

目的建立检测ＨＬＡ－Ｂ２７等位基因的聚合酶链反应／顺序特异的寡核苷酸探针方法，并分析其实用性。方法采用４对引物Ｅ４０ｓ、Ｅ９０ａｓ；Ｅ９１ａｓ、Ｅ１３６ａｓ；Ｅ９１ｂｓ、Ｅ１８１ａｓ；Ｅ４０ｓ、Ｅ１３０ａｓ分别扩增靶... 详细信息

目的建立检测ＨＬＡ－Ｂ２７等位基因的聚合酶链反应／顺序特异的寡核苷酸探针方法，并分析其实用性。方法采用４对引物Ｅ４０ｓ、Ｅ９０ａｓ；Ｅ９１ａｓ、Ｅ１３６ａｓ；Ｅ９１ｂｓ、Ｅ１８１ａｓ；Ｅ４０ｓ、Ｅ１３０ａｓ分别扩增靶ＤＮＡ，用１０个探针ＣＬ－１～９和ＰＡＮ－Ｂ２７分别进行杂交，探针用地高辛系统标记和检测，可检定Ｂ＊２７０１～２７０８共８个等位基因。结果通过对Ｂ２７等位基因已明确的８个阳性对照ＤＮＡ、５例Ｂ２７阴性标本及７５例阳性标本的检测，表明本方法技术稳定结果可靠，不会与其它ＨＬＡⅠ类基因产生交叉杂交而影响结果的指定。结论本研究为ＨＬＡ－Ｂ２７多态性和强直性脊椎炎关联研究提供了一种有效方法，也为ＨＬＡⅠ类分子基因分型研究积累了经验。

关键词：聚合酶链反应人白细胞抗原等位基因

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HLA-E与原因不明习惯性流产的关联研究

中国免疫学杂志 2001年第9期17卷 489-490页

作者：赵亮范丽安杨珏琴姚芳娟上海市免疫学研究所上海200025

目的 :探索HLA E与原因不明习惯性流产的发生是否存在关联。方法 :采用地高辛标记的寡核苷酸探针杂交技术 ,对上海地区 5 3例原因不明习惯性流产病人和 15 6例正常对照进行了HLA E等位基因检测。结果 :在病人和对照组中HLA E 0 10 1均... 详细信息

目的 :探索HLA E与原因不明习惯性流产的发生是否存在关联。方法 :采用地高辛标记的寡核苷酸探针杂交技术 ,对上海地区 5 3例原因不明习惯性流产病人和 15 6例正常对照进行了HLA E等位基因检测。结果 :在病人和对照组中HLA E 0 10 1均是最常见的等位基因 ,其基因频率分别为 5 0 %和 43.0 9% ,其次是E 0 10 32分别为 2 9.2 5 %和 33 .12 %。E 0 10 31则分别占 2 0 .75 %和 2 3.79% ,HLA E 0 10 2和E 0 10 4在两组标本中均未检出。检出的 3个等位基因在两组之间比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :HLA E等位基因多态性与原因不明习惯性流产的发生可能没有直接关联。

关键词： HLA-E 原因不明习惯性流产关联研究基因多态性

HLA-G多态性与原因不明习惯性流产相关性研究

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中国免疫学杂志 2002年第2期18卷 120-121页

作者：颜卫华范丽安杨珏琴姚芳娟上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025

原因不明习惯性流产(Recurrent Spontaneous Abortion, RSA)是指排除了所有已知引起流产原因、连续3次或3次以上的反复早期(怀孕20 w内)流产,其病因及发病机制尚不清楚. 近年来从免疫遗传角度提出了一些新的观点,认为RSA的发生与遗传有... 详细信息

原因不明习惯性流产(Recurrent Spontaneous Abortion, RSA)是指排除了所有已知引起流产原因、连续3次或3次以上的反复早期(怀孕20 w内)流产,其病因及发病机制尚不清楚. 近年来从免疫遗传角度提出了一些新的观点,认为RSA的发生与遗传有关,特别是HLA-G的发现,为探讨RSA的发病机制提供了一条新途径[1].

关键词：习惯性流产 RSA HLA-G多态性免疫遗传

人类组织相容抗原免疫遗传与妊高征发病关系的探讨

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中华妇产科杂志 1994年第11期29卷 654-656页

作者：胡兴张振钧杨珏琴姚芳娟范丽安上海医科大学妇产科医院镇江医学院附属医院上海第二医科大学免疫遗传室

选择４０对妊高征夫妇及正常对照组１００例，对其人类组织相容性抗原中与Ｄ区相关抗原（ＨＬＡ－ＤＲ）频率分布、纯合型频率及夫妇间ＨＬＡ－ＤＲ抗原共享进行了检测。结果显示：与正常对照组相比，妊高征患者ＨＬＡ－ＤＲ＿４频率有... 详细信息

选择４０对妊高征夫妇及正常对照组１００例，对其人类组织相容性抗原中与Ｄ区相关抗原（ＨＬＡ－ＤＲ）频率分布、纯合型频率及夫妇间ＨＬＡ－ＤＲ抗原共享进行了检测。结果显示：与正常对照组相比，妊高征患者ＨＬＡ－ＤＲ＿４频率有极显著的增加（Ｐ＜０．００１），妊高征患者夫妇ＨＬＡ－ＤＲ共享有明显提高（Ｐ＜０．０１），其中尤以ＤＲ＿４抗原共亨率最高（Ｐ＜０．０００１），然而，ＨＬＡ－ＤＲ及ＤＲ＿４纯、杂合型频率两组间无明显差异。结果表明，妊高征的遗传易感性可能与ＤＲ＿４有关，其相关性推测可能是由于ＤＲ＿４与妊高征的疾病易感基因间连锁不平衡所致，但ＤＲ＿４是否直接充当一种免疫缺陷基因尚不能确定。

关键词：组织相容性抗原妊娠高血压综合征免疫遗传学

原发性IgA肾炎与HLA-DQB1等位基因遗传多态性的研究

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免疫学杂志 1999年第4期15卷 253-255页

作者：许玲娣范丽安陈楠杨珏琴姚芳娟上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025 上海瑞金医院肾脏科

应用ＰＣＲ／ＳＳＯ方法对５１例经肾穿刺证实ＩｇＡ肾病患者和９６名健康对照人员进行了ＨＬＡ－ＤＱＢ１等位基因分型。结果显示ＩｇＡＮ患者组中ＤＱＢ１０３０２基因频率明显高于正常对照组（Ｐｃ＜０．００１，ＲＲ为８．２... 详细信息

应用ＰＣＲ／ＳＳＯ方法对５１例经肾穿刺证实ＩｇＡ肾病患者和９６名健康对照人员进行了ＨＬＡ－ＤＱＢ１等位基因分型。结果显示ＩｇＡＮ患者组中ＤＱＢ１０３０２基因频率明显高于正常对照组（Ｐｃ＜０．００１，ＲＲ为８．２０）；ＩｇＡＮ患者组中ＤＲ４、ＤＱＢ１０３０２均为阳性的表型频率也明显高于对照组（Ｐ＜０．００１，ＲＲ为６．４３），而ＤＲ４阳性、ＤＱＢ１０３０２阴性的表型频率在两组中无差异。推测ＤＱＢ１０３０２等位基因可能与上海汉族ＩｇＡＮ的发病有一定的关联。

关键词： IgA肾病 DQ基因遗传多态性 HLA

HLA-C和HLA-G基因真核细胞双表达载体的克隆及鉴定分析

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免疫学杂志 2004年第5期20卷 334-337,342页

作者：张磊杨珏琴姚芳娟许玲娣范丽安上海市免疫学研究所上海第二医科大学上海200025

目的　构建人HLA C和HLA G基因真核细胞双表达载体。方法　用RT PCR从孕妇蜕膜组织有核细胞总mRNA中逆转录扩增全长HLA C和HLA GcDNA ,首先将HLA G经BamHⅠ和ClaⅠ双酶切 ,HLA C经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后 ,分别定向插入真核细胞双顺反子... 详细信息

目的　构建人HLA C和HLA G基因真核细胞双表达载体。方法　用RT PCR从孕妇蜕膜组织有核细胞总mRNA中逆转录扩增全长HLA C和HLA GcDNA ,首先将HLA G经BamHⅠ和ClaⅠ双酶切 ,HLA C经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后 ,分别定向插入真核细胞双顺反子载体pVITRO2的多克隆位点 1(mcs1)和 2 (mcs2 )中 ,然后经酶切和测序鉴定 ,确定已建立pVITRO2的单表达质粒pVITRO2 HLA G和pVITRO2 HLA C ,再将HLA CcDNA经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切 ,定向插入单表达质粒pVITRO2 HLA G的多克隆位点 2 (mcs2 )中 ,经PCR反应初筛 ,再经双酶切鉴定。结果　限制性内切酶和测序分析表明已成功构建了HLA Cw 0 10 3和HLA G 0 10 1的单表达质粒pVITRO2 HLA C和pVITRO2 HLA G以及双表达质粒pVITRO2 HLA CG。结论　本研究成功构建了真核细胞双顺反子载体pVITRO2的双表达质粒pVITRO2 HLA CG ,以及单表达质粒pVITRO2 HLA C和pVITRO2 HLA G。

关键词： HLA-C HLA-G 双顺反子载体pVITR02 双表达质粒

两种不同HLA-B分子对NK细胞表面受体表达的研究

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中国免疫学杂志 2004年第10期20卷 665-667,671页

作者：龚卫娟杨珏琴姚芳娟许玲娣范丽安上海第二医科大学上海市免疫学研究所免疫遗传室上海200025

目的 :探讨两种HLA B分子 (HLA B5 1和HLA B39)对NK细胞表面活化性受体CD16和抑制性受体KIR3DL1表达的调节。方法 :采用流式细胞仪检测NK细胞分别与转染HLA B5 1和HLA B39分子的K5 6 2细胞相互作用后 ,CD16和KIR3DL1的表达情况。结果 :... 详细信息

目的 :探讨两种HLA B分子 (HLA B5 1和HLA B39)对NK细胞表面活化性受体CD16和抑制性受体KIR3DL1表达的调节。方法 :采用流式细胞仪检测NK细胞分别与转染HLA B5 1和HLA B39分子的K5 6 2细胞相互作用后 ,CD16和KIR3DL1的表达情况。结果 :外周血淋巴细胞与K5 6 2细胞作用 2 4小时后 ,CD5 6 +CD16 +细胞数、KIR3DL1+细胞数均明显增加。与表达HLA B39的K5 6 2细胞相比 ,表达HLA B5 1的K5 6 2细胞与外周血淋巴细胞作用后 ,CD5 6 +CD16 +细胞数、KIR3DL1+细胞数均明显下降。结论 :NK细胞杀伤靶细胞时 ,活化性受体CD16表达上调后会伴有抑制性受体KIR3DL1的上调 ;HLA B5 1分子表达在K5 6 2细胞后 ,表达外源性HLA B5 1分子的K5 6 2细胞与NK细胞作用 ,NK细胞表面受体KIR3DL1的表达可下调。

关键词： HLA-B51 HLA-B39 NK细胞 KIR3DL1 CD16 表达