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Bt水稻的抗虫性鉴定及转基因的遗传分析

中国农业科学 2002年第2期35卷 142-145页

作者：姚方印朱常香李广贤温孚江山东农业大学生命科学学院山东农业大学生命科学学院济宁272077 山东省水稻研究所泰安271018

利用Basta抗性选择技术快速检测Bt转基因水稻及杂交后代群体单株。试验表明 ,阳性单株在室内和田间有良好的抗螟虫性能 ;在杂交后代中抗除草剂bar基因和目的基因cryIA(b)紧密连锁与协同表达 ;外源基因在F2和BC1群体中遵循孟德尔分离规... 详细信息

利用Basta抗性选择技术快速检测Bt转基因水稻及杂交后代群体单株。试验表明 ,阳性单株在室内和田间有良好的抗螟虫性能 ;在杂交后代中抗除草剂bar基因和目的基因cryIA(b)紧密连锁与协同表达 ;外源基因在F2和BC1群体中遵循孟德尔分离规律 ;应用杂交、回交育种方法将抗虫基因转育到推广品种中是可行的。本研究为进一步选育双价抗虫和抗除草剂水稻新品种奠定了基础

关键词： Bt转基因水稻 Basta 抗螟虫性鉴定遗传分析

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水稻普通矮缩病研究进展

生命科学 2011年第10期23卷 957-962页

作者：李臻王庆国姚方印刘炜山东省农业科学院高新技术研究中心山东省作物与畜禽品种改良生物技术重点实验室济南250100 农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室济南250100

水稻普通矮缩病(又称普矮病),是由叶蝉传播的一类病毒性病害,近年来有扩散的趋势。该病在水稻上的发病症状表现为感病植株矮小、无效分蘖增多、根系发育不良、叶片僵直、不能抽穗,造成水稻减产和绝收,给粮食生产安全带来巨大威胁。主要... 详细信息

水稻普通矮缩病(又称普矮病),是由叶蝉传播的一类病毒性病害,近年来有扩散的趋势。该病在水稻上的发病症状表现为感病植株矮小、无效分蘖增多、根系发育不良、叶片僵直、不能抽穗,造成水稻减产和绝收,给粮食生产安全带来巨大威胁。主要就病原及其介体、病毒检测方法、基因工程及RNA干扰技术培育抗病性种质及品种筛选等方面对近年来水稻普通矮缩病相关研究进展进行阐述,为该病的深入研究特别是基因工程育种提供参考。

关键词：水稻普通矮缩病病原检测方法 RNA干扰基因工程育种

水稻两种细胞质雄性不育“三系”及其F_1 杂交种线粒体DNA的RFLP分析

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西北植物学报 2001年第6期21卷 1110-1116页

作者：姚方印李广贤刘理梅山东省水稻研究所山东济宁272017

对水稻 BT型和 WA型细胞质的雄性不育系 ,相应保持系和恢复系以及杂种的 mt D-NA用 1 2个线粒体探针进行了 RFLP分析 ,结果如下 :(1 ) BT型和 WA型不育系的 mt DNA在组织结构上存在差异 ;(2 )不育系的 mt DNA与其保持系间存在显著差异 ... 详细信息

对水稻 BT型和 WA型细胞质的雄性不育系 ,相应保持系和恢复系以及杂种的 mt D-NA用 1 2个线粒体探针进行了 RFLP分析 ,结果如下 :(1 ) BT型和 WA型不育系的 mt DNA在组织结构上存在差异 ;(2 )不育系的 mt DNA与其保持系间存在显著差异 ,推测 mt DNA与水稻的 cms有关 ;(3 ) atp9探针检测到 WA型不育系与 F1之间的多态性 ,Frag3 6探针检测到BT型不育系与 F1之间的多态性 ,Frag9探针检测到 WA型和 BT型不育系与其 F1之间的多态性 ,证明核恢复基因影响 mt DNA的结构 ;(4)对 mt

关键词：水稻细胞质雄性不育系线粒体DNA RFLP F1杂种

BT型细胞质雄性不育水稻及其三系的线粒体DNA研究

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西北植物学报 2001年第5期21卷 839-843页

作者：姚方印李广贤朱常香温孚江山东省水稻研究所山东济宁272077 山东农业大学生命科学学院山东泰安271018

用 RAPD技术对 BT型水稻胞质雄性不育系秀 A及其保持系秀 B、恢复系湘晴以及杂种 F1代的线粒体 DNA进行了比较分析。结果表明不育系与其保持系间存在显著差异 ;不育系与其 F1之间 mt DNA也存在差异。在引物 OPJ- 0 8的扩增产物中 ,秀 A... 详细信息

用 RAPD技术对 BT型水稻胞质雄性不育系秀 A及其保持系秀 B、恢复系湘晴以及杂种 F1代的线粒体 DNA进行了比较分析。结果表明不育系与其保持系间存在显著差异 ;不育系与其 F1之间 mt DNA也存在差异。在引物 OPJ- 0 8的扩增产物中 ,秀 A扩增出一条分子量为 80 0 bp的多态性片段 ;在引物 OPK- 1 0的扩增产物中 ,杂种 F1扩增出一条分子量为 90 0bp的片段。把这两片段回收、克隆并制备探针 ,OPJ- 0 880 0 的 Southern杂交结果显示不育系与其 F1杂交图谱存在多态性 ;OPK- 1 0 90 0 的 Southern杂交结果显示不育系与其保持系间存在差异。

关键词：水稻 BT型细胞质雄性不育线粒体DNA RAPD 克隆

利用F2和F3粳稻育种群体定位水稻粒型和千粒重QTL

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分子植物育种 2024年

作者：刘芳李平波李臻柳絮张华王庆国姚方印山东师范大学生命科学学院山东省农业科学院湿地农业与生态研究所

粒型和粒重是影响水稻产量和品质的重要因素。为了挖掘新的控制水稻粒型和粒重的数量性状位点(quantitative trait loci， QTL)，在本研究中，我们以耐盐材料‘D123’为父本，以一个具有黄淮粳稻背景的显性核不育单株为母本杂交发展而来... 详细信息

粒型和粒重是影响水稻产量和品质的重要因素。为了挖掘新的控制水稻粒型和粒重的数量性状位点(quantitative trait loci， QTL)，在本研究中，我们以耐盐材料‘D123’为父本，以一个具有黄淮粳稻背景的显性核不育单株为母本杂交发展而来的F2和F3代群体，利用分子标记技术对控制水稻谷粒粒型和粒重的QTL进行遗传定位。F2和F3代群体共检测到35个QTL，包含粒长QTL 9个、粒宽QTL 9个、长宽比QTL 10个和粒重QTL 7个，覆盖第1、2、4、5、6、8、11、12号染色体。其中，8个QTL可以在两个群体中被重复检测到，分别是粒长QTL qGL2和qGL8，最高可以解释21.88%的表型变异；粒宽QTL qGW1和qGW4，最高可以解释10.85%的表型变异；长宽比QTL qLWR2和qLWR5，最高可以解释11.8%的表型变异；千粒重QTL qTW1-2和qTW2，最高可以解释34.28%的表型变异。这些定位到的QTL为水稻粒型和粒重的基础研究以及水稻产量和品质的遗传改良提供了宝贵的基因资源。

关键词：水稻粒长粒宽长宽比千粒重 QTL定位

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水稻光温敏核不育基因研究进展

山东农业科学 2007年第3期39卷 36-41页

作者：贾曦姚方印李萌山东省农业科学院山东济南250100

光温敏核不育水稻的发现和应用为杂交水稻生产由“三系法”向“两系法”转变提供了种质基础。本文综述了光温敏核不育基因的遗传及基因定位研究进展。

关键词：水稻光温敏核不育基因遗传定位

棉花花粉的人工萌发及其在远缘离体受精上的利用

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Acta Botanica Sinica 1991年第7期33卷 523-528页

作者：刘承智陈凤祥马朝芝姚方印华中农业大学农学系

研究了诱导棉花花粉萌发的不同培养基,比较和分析了不同培养基和不同培养方法的优劣,分别应用添加本品种柱头和花瓣提取液以及综合氨基酸液的改良Taylor培养基,首次获得了能比较长时间保持其生活力和长势旺盛的萌发花粉。对花朵进行低... 详细信息

研究了诱导棉花花粉萌发的不同培养基,比较和分析了不同培养基和不同培养方法的优劣,分别应用添加本品种柱头和花瓣提取液以及综合氨基酸液的改良Taylor培养基,首次获得了能比较长时间保持其生活力和长势旺盛的萌发花粉。对花朵进行低温处理,取得了提高花粉萌发率的良好效果。讨论了低温促进萌发和蓖麻油造成无效朗发的原因。将诱导萌发的培养基涂于母本离体柱头上,得到促进种间离体受精的良好效果。

关键词：棉花花粉萌发离体受精

生物安全性白藜芦醇合成酶表达载体的构建及水稻遗传转化

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华北农学报 2011年第2期26卷 114-118页

作者：李海青柳絮王庆国姚方印刘炜山东省农业科学院高新技术研究中心山东省作物遗传改良与生物技术重点实验室山东济南250100 农业部黄淮海作物遗传改良与生物技术重点开放实验室山东济南250100 山东师范大学生命科学学院山东济南250014

白藜芦醇是植物遭受胁迫时自身分泌的一种可抵御病菌感染的抗菌素,对真菌具有一定的抑制作用。而白藜芦醇合成酶在白藜芦醇合成途径中具有关键性的作用。水稻稻瘟病作为一种由真菌引起的严重病害,具有高发性、毁灭性的特点,对水稻品质... 详细信息

白藜芦醇是植物遭受胁迫时自身分泌的一种可抵御病菌感染的抗菌素,对真菌具有一定的抑制作用。而白藜芦醇合成酶在白藜芦醇合成途径中具有关键性的作用。水稻稻瘟病作为一种由真菌引起的严重病害,具有高发性、毁灭性的特点,对水稻品质及生产危害极大。本研究从花生中分离到白藜芦醇合酶基因PNRSC,通过基因工程的方法构建入经改造的以玉米泛素Ubi为启动子、以生物安全性的bar基因为选择标记的植物双元表达载体pCAM-BIA1300中,经农杆菌介导对黄淮稻区主栽品种圣稻13进行遗传转化,经Basta抗性鉴定及分子筛选,证明白藜芦醇合成酶基因已整合入水稻基因组,并获得转基因株系。目前转基因植株已移栽至大田,为进一步进行基因功能鉴定及田间抗病水稻新品种培育提供了候选材料。

关键词：白藜芦醇白藜芦醇合成酶基因PNRSC 水稻稻瘟病 Ubi启动子 bar基因 Basta 抗病水稻新品种培育

玉米锌指蛋白基因ZmAN14过表达转基因烟草对非生物胁迫的响应

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中国农业科学 2015年第5期48卷 841-850页

作者：宣宁柳絮张华陈高刘国霞边斐姚方印山东省农业科学院生物技术研究中心

【目的】Zm AN14是玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族成员,该家族在水稻中广泛参与非生物胁迫应答。通过分析玉米旱21(H21)及转Zm AN14烟草在非生物胁迫下的表达情况,为玉米Zm AN14及其家族的功能和分子机制的全面解析提供新信息。【方法... 详细信息

【目的】Zm AN14是玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族成员,该家族在水稻中广泛参与非生物胁迫应答。通过分析玉米旱21(H21)及转Zm AN14烟草在非生物胁迫下的表达情况,为玉米Zm AN14及其家族的功能和分子机制的全面解析提供新信息。【方法】通过对Zm AN14进行序列分析,发现其属于玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族。以玉米自交系H21为研究材料,在三叶期时对其进行非生物胁迫和ABA诱导处理,0、1、3、6、12和24 h时取整株样品,同时在玉米不同生长期取根、茎、叶、胚芽鞘、雌蕊、雄蕊、花丝、苞叶等不同组织样品,利用实时荧光定量PCR方法对Zm AN14的组织表达谱和非生物胁迫及ABA诱导的表达谱进行分析,并结合启动子区顺式作用元件分布情况进行对比分析。将Zm AN14编码序列克隆至GFP表达载体p MDC85,利用亚细胞定位技术验证Zm AN14在胞内的定位情况。将Zm AN14克隆至GAL4 DNA结合结构域载体,并转化酵母,将其涂布在缺陷培养基上观察酵母生长情况,分析其有无转录激活活性。将Zm AN14编码区与植物表达载体p1300-221连接构建超表达载体,并将其转入烟草,选择Zm AN14 m RNA表达量高的T2纯合体株系进行盐、干旱胁迫和ABA诱导,观察其对非生物胁迫的应答。【结果】序列分析表明,Zm AN14开放阅读框(ORF)为516 bp,编码一个171个氨基酸的蛋白,预测分子量为18.3 k D,等电点是8.28。Zm AN14具有A20和AN1结构域,属于玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族。实时定量荧光PCR结果表明Zm AN14在叶中大量表达,受Na Cl、干旱胁迫和ABA诱导上调。Zm AN14与GFP融合蛋白定位于细胞质和细胞核中,定位结果与ZNF216和Zm AN13类似,而Zm AN14本身并没有核定位信号,暗示Zm AN14与其他蛋白结合进入细胞核中发挥其生物学功能。Zm AN14在酵母中表达时不能在酵母缺陷培养基(SD/-Leu-His medium)上生长,因此,未发现其具有转录激活活性。将Zm AN14在烟草中过表达会增加烟草苗期对盐和干旱的抗性。【结论】Zm AN14属于玉米A20/AN1型锌指蛋白基因家族。Zm AN14主要在叶中表达,受非生物胁迫和ABA诱导,在烟草中过表达可以提高烟草苗期对盐和干旱的抗性。Zm AN14可能通过与其他蛋白的互作行使功能。相比较于其他的A20/AN1型锌指蛋白,在转基因烟草中,Zm AN14也参与非生物胁迫应答。Zm AN14与Zm AN13具有高同源性,但在盐和干旱胁迫时,二者却具有向反方向调控的功能。

关键词：玉米锌指蛋白 Zm AN14 非生物胁迫转基因烟草