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芒果甙对白血病HL-60细胞周期的影响及其作用机制的研究

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芒果甙对白血病HL-60细胞周期的影响及其作用机制的研究

作者：姚奕斌广西医科大学

学位级别：硕士

目的探讨芒果甙对急性髓细胞白血病细胞株HL-60细胞周期分布及对细胞周期相关调控基因表达的影响,以进一步研究芒果甙抗白血病的作用机制。方法不同浓度芒果甙作用HL-60细胞24h、48h后,应用流式细胞术(FCM)检测HL-60细胞周期的分布;用RT... 详细信息

目的探讨芒果甙对急性髓细胞白血病细胞株HL-60细胞周期分布及对细胞周期相关调控基因表达的影响,以进一步研究芒果甙抗白血病的作用机制。方法不同浓度芒果甙作用HL-60细胞24h、48h后,应用流式细胞术(FCM)检测HL-60细胞周期的分布;用RT-PCR技术检测细胞周期相关调控基因CDC2、CyclinB1、CyclinA、Chk1、CDC25C和Wee1mRNA表达水平。结果芒果甙能诱导HL-60细胞G2/M期阻滞。作用24h后,随着芒果甙作用浓度增加,G2/M期阻滞越明显,160μmol/L时G2/M期细胞数达到峰值(28.9%),较对照组G2/M期细胞(5.2%)明显增多(P0.05)。结论芒果甙在作用早期可诱导HL-60细胞G2/M期阻滞,其诱导G2/M期阻滞作用与上调HL-60细胞CDC2、CyclinB1、CyclinA、Wee1、CDC25C和Chk1mRNA的表达水平有关,芒果甙诱导HL-60细胞G2/M期阻滞可能是其抗白血病作用的分子机制之一。

关键词：芒果甙 HL-60细胞 G2/M期阻滞细胞周期调控基因

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一例特别的淋巴结边缘区淋巴瘤

中华临床医师杂志（电子版） 2023年第2期17卷 232-233页

作者：李忠清黄春妮罗琳姚奕斌许玉玲罗军广西医科大学第一附属医院血液内科南宁530021

B细胞慢性淋巴增殖性疾病(B cell chronic lymphoproliferative diseases,B-CLPD)的诊断与鉴别诊断是临床工作中的难点。本中心曾接诊1例B-CLPD的患者,因肿瘤细胞存在毛刺,BRAF V600E突变阳性,未能除外毛细胞白血病(hairy cell leukemia... 详细信息

B细胞慢性淋巴增殖性疾病(B cell chronic lymphoproliferative diseases,B-CLPD)的诊断与鉴别诊断是临床工作中的难点。本中心曾接诊1例B-CLPD的患者,因肿瘤细胞存在毛刺,BRAF V600E突变阳性,未能除外毛细胞白血病(hairy cell leukemia,HCL)。后经过反复推敲,最终确诊为淋巴结边缘区淋巴瘤(nodal marginal zone lymphoma,NMZL)。该患者“艰难的”确诊过程,对这类疾病诊断及鉴别诊断,有较大的参考价值,现报道如下。

关键词：毛细胞白血病诊断与鉴别诊断诊断及鉴别诊断边缘区淋巴瘤反复推敲 BRAF 淋巴结

紫杉醇和奎扎替尼单药及其联用对AML细胞株MV4-11及其STAT5信号通路的作用

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中国实验血液学杂志 2022年第3期30卷 671-687页

作者：白子文吴梅青周宝文石泽延姚奕斌刘振芳庞如利赵卫华广西医科大学第一附属医院血液内科广西南宁530000

目的:探讨紫杉醇、奎扎替尼单药及二者联合对人白血病细胞株MV4-11(FLT3-ITD;)增殖、凋亡的影响,以及对FLT3/STAT5通路的作用。方法:分别用不同浓度紫杉醇、奎扎替尼单药作用于MV4-11细胞24、48、72 h,在48 h时间点两种药物分别选取两... 详细信息

目的:探讨紫杉醇、奎扎替尼单药及二者联合对人白血病细胞株MV4-11(FLT3-ITD;)增殖、凋亡的影响,以及对FLT3/STAT5通路的作用。方法:分别用不同浓度紫杉醇、奎扎替尼单药作用于MV4-11细胞24、48、72 h,在48 h时间点两种药物分别选取两种浓度联合使用,比较细胞增殖抑制情况;选用一种药物浓度组合用流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光定量PCR法测定FLT3、STAT5 mRNA表达水平,Western blot法测定FLT3、p-FLT3、STAT5、p-STAT5蛋白的表达水平。结果:不同的紫杉醇、奎扎替尼联合用药组均有协同抑制作用,联合用药组的细胞存活率明显低于单药组(P<0.05),联合用药组细胞的凋亡率均明显高于单药组(P<0.001)。联合用药组FLT3 mRNA的表达量均显著高于单药组(P<0.001);联合用药组STAT5 mRNA的表达量高于奎扎替尼单药组(P<0.01),但与紫杉醇单药组比较差异无统计学意义。联合用药组p-FLT3、p-STAT5蛋白的表达水平均显著低于单药组(P<0.05,P<0.05)。结论:紫杉醇联合奎扎替尼可以协同抑制MV4-11细胞株的增殖,可能通过抑制FLT3/STAT5通路活性促进MV4-11细胞株凋亡。

关键词：白血病紫杉醇奎扎替尼 FLT3/STAT5

芒果苷对白血病HL-60细胞周期及CDC2/CyclinB1表达的影响

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中药材 2010年第1期33卷 81-85页

作者：姚奕斌彭志刚刘振芳杨杰罗军广西医科大学第一附属医院血液内科广西南宁530021

目的:观察芒果苷对白血病HL-60细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期分裂基因2(CDC2)表达的影响,以进一步探讨芒果苷抗白血病的分子作用机制。方法:应用MTT比色法测定芒果苷对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术(F... 详细信息

目的:观察芒果苷对白血病HL-60细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期分裂基因2(CDC2)表达的影响,以进一步探讨芒果苷抗白血病的分子作用机制。方法:应用MTT比色法测定芒果苷对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术(FCM)检测芒果苷对细胞周期的影响;用RT-PCR技术检测CyclinB1及CDC2 mRNA表达水平。结果:芒果苷呈剂量及时间依赖性抑制HL-60细胞的生长,作用24 h后,G2/M期细胞增多,出现G2/M期阻滞;CyclinB1 mRNA和CDC2 mRNA的表达随药物质量浓度的增加而逐渐增强,在芒果苷质量浓度80μmol/L时表达达到峰值。结论:芒果苷可抑制HL-60细胞增殖,阻滞细胞周期于G2/M期,显著上调HL-60细胞CyclinB1 mRNA和CDC2 mRNA的表达水平。芒果苷诱导HL-60细胞G2/M期阻滞可能是其抗白血病作用的分子机制之一。

关键词：芒果苷 HL-60细胞 G2/M期阻滞 CDC2 CyclinB1

伴AML1/ETO融合基因的急性髓系白血病中枢神经系统复发1例病例报告及文献复习

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内科 2023年第1期18卷 103-104,F0003页

作者：张怡婷庞华生杨植林雨石泽延姚奕斌赵卫华广西医科大学第一附属医院血液内科南宁市530021

患者于2012年10月确诊为急性髓系白血病并伴有AML1/ETO融合基因,经2年的诱导、巩固化疗后缓解,随访期间病情稳定。2020年8月因视力下降检查确诊为白血病中枢神经系统复发,脑脊液荧光原位杂交技术检测提示AML1-ETO阳性。予全身化疗、腰... 详细信息

患者于2012年10月确诊为急性髓系白血病并伴有AML1/ETO融合基因,经2年的诱导、巩固化疗后缓解,随访期间病情稳定。2020年8月因视力下降检查确诊为白血病中枢神经系统复发,脑脊液荧光原位杂交技术检测提示AML1-ETO阳性。予全身化疗、腰椎穿刺加鞘内注射,治疗过程中病情进展,出现马尾神经综合征,自动出院后随访期间病情得到缓解,更长久的疗效还需持续跟踪。

关键词： AML1/ETO融合基因急性髓系白血病中枢神经系统缓解复发病例报告

基于高通量测序及公共数据库探索紫杉醇抑制T细胞淋巴瘤机制

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中国实验血液学杂志 2021年第3期29卷 741-750页

作者：李丝竹姚奕斌唐中源石泽延吴泽广罗彬彭志刚广西医科大学第一附属医院血液内科广西南宁530021

目的:通过二代测序技术对紫杉醇作用下T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat基因表达谱进行计算生物学分析,以在基因层面探讨紫杉醇抗T细胞淋巴瘤的可能分子机制。方法:采用CCK-8法确定紫杉醇作用于Jurkat细胞的IC50,应用二代测序技术获得紫杉醇作用... 详细信息

目的:通过二代测序技术对紫杉醇作用下T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat基因表达谱进行计算生物学分析,以在基因层面探讨紫杉醇抗T细胞淋巴瘤的可能分子机制。方法:采用CCK-8法确定紫杉醇作用于Jurkat细胞的IC50,应用二代测序技术获得紫杉醇作用Jurkat细胞后基因表达谱,同时从GEO数据库中筛出与人T细胞淋巴瘤相关的基因芯片数据(其中包括720例T细胞淋巴瘤和153例正常对照组织),结合测序数据结果二者取交集并筛选差异表达基因(DEG);使用DAVID数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析,确定和可视化DEG的功能条目,并绘制DEG的蛋白质相互作用网络图。使用RT-qPCR验证基因的表达水平。结果:CCK-8结果显示紫杉醇对Jurkat细胞抑制率有明显的浓度依赖性;紫杉醇作用于Jurkat细胞48 h后进行转录组测序(RNA-seq),对RNA-seq和GEO芯片中的基因,以P <0.05,|log2(FC)|≥1为DEG筛选标准,共发现351个DEG,其中包括323个上调基因,28个下调基因;GO功能注释及KEGG通路富集分析结果表明,紫杉醇抗T细胞淋巴瘤的作用主要富集在蛋白质异源二聚活动、核小体装配以及癌症中的转录失调信号通路等;RT-qPCR基因表达结果与测序结果一致,验证本次测序的可靠性。结论:紫杉醇可以通过上调JUN基因和孤儿核受体NR4A家族基因以及组蛋白家族基因来影响T细胞淋巴瘤的增殖和凋亡。

关键词： T细胞淋巴瘤紫杉醇转录组测序差异表达基因计算生物学

自体造血干细胞移植治疗非霍奇金淋巴瘤的研究进展

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实用肿瘤杂志 2015年第4期30卷 315-319页

作者：姚奕斌彭志刚广西医科大学第一附属医院血液科广西南宁530021

近年来，随着很多新药如单克隆抗体利妥昔单抗等的不断出现，非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin’s lymphoma NHL）的临床疗效得到较大提高，患者总体生存改善。但仍有部分患者对化疗耐药，

关键词：淋巴瘤非霍奇金造血干细胞移植淋巴瘤 B细胞淋巴瘤 T细胞

芒果苷对柔红霉素所致大鼠心肌细胞损伤的影响及机制研究

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中药材 2013年第4期36卷 626-629页

作者：殷万斐彭志刚赵卫华杨杰姚奕斌吴泽广石泽延广西医科大学第一附属医院血液内科广西南宁530021

目的:研究芒果苷对柔红霉素所致大鼠心肌细胞毒性损伤影响及SIRT1介导的信号通路的变化。方法:取原代培养心肌细胞以4μmol/L柔红霉素建立心肌细胞损伤模型,以不同浓度芒果苷(25、50、100μmol/L)干预,选择白藜芦醇(25μmol/L)作为阳性... 详细信息

目的:研究芒果苷对柔红霉素所致大鼠心肌细胞毒性损伤影响及SIRT1介导的信号通路的变化。方法:取原代培养心肌细胞以4μmol/L柔红霉素建立心肌细胞损伤模型,以不同浓度芒果苷(25、50、100μmol/L)干预,选择白藜芦醇(25μmol/L)作为阳性对照药物,用RT-PCR方法检测SIRT1、FOXO3a、BIM的mRNA表达水平的变化,用免疫细胞化学染色法检测SIRT1、FOXO3a、BIM的蛋白水平的变化。结果:芒果苷作用于柔红霉素所致心肌损伤模型后,SIRT1 mRNA及蛋白的表达量有显著的提高,并且随着芒果苷浓度的增高,SIRT1的表达量逐渐增高;其下游因子FOXO3a与BIM mRNA及蛋白的表达量均显著降低,并呈一定量效关系。结论:芒果苷能改变柔红霉素所致心肌细胞损伤模型中SIRT1、FOXO3a、BIM的表达水平,提示SIRT1可能是芒果苷保护柔红霉素致心肌损伤模型的重要作用因子,并通过进一步调控且其下游FOXO3a和BIM两因子的表达来发挥保护损伤心肌的作用。

关键词：芒果苷柔红霉素心脏毒性 SIRT1 FOXO3a BIM

多发性骨髓瘤患者外周血CD34阳性细胞计数对普乐沙福干细胞动员效果的预测价值

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白血病．淋巴瘤 2022年第5期31卷 282-285页

作者：李忠清罗琳周莉李桥川刘练金施玲玲姚奕斌许玉玲刘容容陈英华刘燕晔罗军广西医科大学第一附属医院血液科南宁530021

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血CD34阳性细胞计数对普乐沙福干细胞动员效果的预测价值。方法回顾性分析2019年12月至2021年2月广西医科大学第一附属医院使用普乐沙福进行干细胞动员的12例MM患者临床资料。分析普乐沙福动员前后外周... 详细信息

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血CD34阳性细胞计数对普乐沙福干细胞动员效果的预测价值。方法回顾性分析2019年12月至2021年2月广西医科大学第一附属医院使用普乐沙福进行干细胞动员的12例MM患者临床资料。分析普乐沙福动员前后外周血CD34阳性细胞计数的变化及干细胞采集情况。结果共有12例患者纳入研究,国际分期系统(ISS)分期Ⅱ~Ⅲ期,诱导方案以VRD为主。不论在普乐沙福前用何种方案进行干细胞动员,患者在使用普乐沙福后CD34阳性细胞计数均升高,使用普乐沙福前后中位CD34阳性细胞计数分别为3.63/μl(0.72~13.53/μl)和32.11/μl(8.52~53.68/μl),差异有统计学意义(Z=-0.40,P<0.001),中位升高倍数为11.50倍(1.61~23.71倍)。12例患者中有1例动员失败,该患者在使用普乐沙福前外周血CD34阳性细胞计数<1/μl,使用普乐沙福后CD34阳性细胞计数虽然提高了11.83倍,但仍<10/μl。Pearson相关分析结果显示,在使用普乐沙福前CD34阳性细胞计数<4/μl的患者中,使用普乐沙福前后CD34阳性细胞计数呈正相关(r=0.80,P=0.032)。结论MM患者外周血CD34阳性细胞计数对普乐沙福干细胞动员效果有一定的预测价值。

关键词：多发性骨髓瘤普乐沙福 CD34阳性细胞计数造血干细胞动员自体造血干细胞移植