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mTOR/P70S6K/HIF-1α信号通路在脂多糖诱导Caco-2细胞屏障损伤中的作用及机制

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中国病理生理杂志 2022年第1期38卷 122-129页

作者：姚刘旭滕文彬黄素琴李玉红蒋宗明绍兴文理学院医学院浙江绍兴312000 浙江大学医学院附属第一医院麻醉科浙江杭州310000 树人大学树兰国际医学院附属树兰(杭州)医院麻醉科浙江杭州310004 绍兴文理学院医学院附属第一医院麻醉科(绍兴市人民医院) 浙江绍兴312000

目的:探讨缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的Caco-2细胞屏障损伤中的作用,并探究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian rapamycin target protein,mTOR)/P70核糖体蛋白S6激酶(P70 ribosomal protein S6 kinase,P70S6K)信号通路的调控机制。方法:实验分成两部分,第一部分通过使用HIF-1α激活剂、抑制剂分别处理LPS作用的Caco-2细胞,探讨HIF-1α在LPS诱导的Caco-2细胞屏障损伤中的作用;第二部分则分别采用mTOR抑制剂、激活剂与HIF-1α激活剂、抑制剂联合处理LPS作用的Caco-2细胞,探讨HIF-1α影响LPS诱导的Caco-2细胞屏障损伤的分子机制。分别采用ERS-2电阻仪测量跨膜电阻,荧光法测量荧光右旋糖苷(FD4)浓度,Western blot检测HIF-1α、p-mTOR、p-P70S6K和紧密连接结构蛋白(ZO-1、occludin及claudin-1)的表达。结果:LPS诱导Caco-2细胞损伤,表现为跨上皮细胞电阻值(transepithelial cell resistance,TEER)降低,FD4浓度上升;HIF-1α激活剂DMOG可增加LPS作用的Caco-2细胞TEER、降低FD4浓度,同时上调HIF-1α和紧密连接结构蛋白的表达(P<0.05),而HIF-1α抑制剂BAY87-2243的作用则与DMOG作用相反;mTOR抑制剂雷帕霉素可降低LPS作用的Caco-2细胞TEER、增加FD4浓度,同时下调p-mTOR、p-P70S6K、HIF-1α及紧密连接结构蛋白的表达(P<0.05),而mTOR激活剂MHY1485则可增加LPS作用的Caco-2细胞TEER、降低FD4浓度,上调Caco-2细胞中p-mTOR和p-P70S6K表达水平(P<0.05),但不影响HIF-1α和紧密连接结构蛋白的表达水平。在雷帕霉素基础上加入DMOG,雷帕霉素对LPS处理的Caco-2细胞的效应被逆转;而在MHY1487基础上加入BAY87-2243,MHY1487对LPS处理的Caco-2细胞的效应被逆转。结论:HIF-1α可减轻LPS诱导的Caco-2细胞屏障损伤,其作用受mTOR/P70S6K信号通路调节。

关键词：脓毒症肠道上皮损伤低氧诱导因子1α mTOR/P70S6K信号通路

外泌体lncRNA在结直肠癌液体活检中的研究进展

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基础医学与临床 2023年第2期43卷 317-321页

作者：姚刘旭李玉红蒋宗明绍兴市人民医院麻醉科浙江绍兴312000 绍兴文理学院医学院浙江绍兴312000 浙江树人大学树兰国际医学院附属树兰(杭州)医院麻醉科浙江杭州310004

目前针对结直肠癌(CRC)的诊断技术仍在不断完善。液体活检主要对生物源液体特定成分进行分析,外泌体来源的长链非编码RNA(lncRNA)可以通过液体活检技术分析。

关键词：结直肠癌液体活检外泌体 lncRNA 生物标志物

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不同病理类型胃息肉的临床特征分析

浙江临床医学 2022年第8期24卷 1142-1144页

作者：李薇薇王玉龙姚刘旭李玉红张林绍兴市人民医院 312000 树人大学树兰国际医学院树兰(杭州)医院 310004

目的分析不同病理类型的胃息肉的临床特征.方法回顾性分析2017年6月至2017年11月本院602例胃息肉患者为研究对象,通过临床信息系统、影像归档和通信系统收集胃镜报告等数据信息.病理标本由病理科进行组织学评估和分类.结果胃息肉女... 详细信息

目的分析不同病理类型的胃息肉的临床特征.方法回顾性分析2017年6月至2017年11月本院602例胃息肉患者为研究对象,通过临床信息系统、影像归档和通信系统收集胃镜报告等数据信息.病理标本由病理科进行组织学评估和分类.结果胃息肉女性多于男性(P0.05),病理类型有腺瘤性息肉、胃底腺息肉、增生性息肉、炎性息肉,男、女性比较均无统计学差异(P>0.05),且以近端分布、单发、0.05);不同病理类型胃息肉在年龄、分布部位、数目及大小上均存在统计学差异(P≤0.001),胃底腺息肉大多分布在近端而炎性息肉近远端分布率相近,炎性息肉单发者最多而其余三种胃息肉单发比例相近,腺瘤性息肉以≥1 cm者居多,这与其余三种胃息肉相反.结论胃息肉的病理类型有腺瘤性息肉、胃底腺息肉、增生性息肉、炎性息肉.不同病理类型胃息肉在年龄、分布部位、数目及大小上均存在差异.

关键词：胃息肉病理类型临床特征

大肠息肉和胃息肉的临床特点及病理特征回顾性分析

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中华全科医学 2022年第12期20卷 2050-2054页

作者：李薇薇王玉龙丁倩男姚刘旭李玉红绍兴市人民医院消化内科浙江绍兴312000 绍兴市人民医院麻醉科绍兴市人民医院医学研究中心浙江树人大学树兰国际医学院附属树兰(杭州)医院麻醉科浙江杭州310003

目的分析绍兴市人民医院大肠息肉、胃息肉以及胃息肉合并大肠息肉患者的临床和病理特征。方法回顾性分析2017年6—11月在绍兴市人民医院行内镜检查发现的1001例大肠息肉与1219例胃息肉患者的临床、病理特征以及胃息肉合并大肠息肉患者... 详细信息

目的分析绍兴市人民医院大肠息肉、胃息肉以及胃息肉合并大肠息肉患者的临床和病理特征。方法回顾性分析2017年6—11月在绍兴市人民医院行内镜检查发现的1001例大肠息肉与1219例胃息肉患者的临床、病理特征以及胃息肉合并大肠息肉患者的临床、病理特征。比较不同年龄段、不同性别大肠息肉和胃息肉的检出率、息肉的部位、数目、大小及病理类型等。结果大肠息肉检出率(14.35%)高于胃息肉(8.15%,χ^(2)=200.568,P<0.001);2种息肉的检出率均随着年龄增加呈递增趋势(均P<0.001)。胃息肉检出率女性高于男性(P<0.001),而大肠息肉男性高于女性(P<0.001)。单发大肠息肉(91.71%)较单发胃息肉(73.17%)多见(χ^(2)=232.500,P<0.001);≥1.0 cm的大肠息肉(18.58%)较胃息肉(5.50%)多见(χ^(2)=93.200,P<0.001)。在炎性息肉、腺瘤性息肉的检出率二者差异均有统计学意义(均P<0.001);胃息肉癌变率较大肠息肉低(P<0.001)。胃息肉患者大肠息肉检出率显著高于普通人群(33.43%vs.14.35%,P<0.001),以多部位、多发以及较少癌变为特征。结论胃息肉与大肠息肉,以及胃息肉合并大肠息肉与普通人群具有不同的临床和病理特征,为临床诊断和治疗提供参考。

关键词：大肠息肉胃息肉临床特点病理特征检出率

结直肠癌PDX模型成瘤率的影响因素及临床意义

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基础医学与临床 2023年第4期43卷 596-602页

作者：张燕萍姚刘旭丁倩男黄则勇李玉红黄素琴树兰(杭州)医院麻醉科浙江杭州310004 绍兴市人民医院医学研究中心浙江绍兴312000 浙江树人学院树兰国际医学院附属树兰(杭州)医院麻醉科浙江杭州310004

目的建立结直肠癌(CRC)患者来源的肿瘤组织异种移植(PDX)模型,评估PDX模型成瘤率的影响因素,并初步进行化学治疗实验。方法选取2019年11月至2020年10月绍兴市人民医院择期手术CRC患者。将手术获取的肿瘤组织接种于NSG小鼠右侧腰背部,建... 详细信息

目的建立结直肠癌(CRC)患者来源的肿瘤组织异种移植(PDX)模型,评估PDX模型成瘤率的影响因素,并初步进行化学治疗实验。方法选取2019年11月至2020年10月绍兴市人民医院择期手术CRC患者。将手术获取的肿瘤组织接种于NSG小鼠右侧腰背部,建立PDX模型,并传至F3代,分析PDX模型成瘤率的影响因素;化学治疗药物选择5-氟尿嘧啶、奥沙利铂以及丙泊酚。结果本研究共纳入60例CRC患者,PDX模型成瘤为37例,成瘤率62%;平均成瘤时间为(34±12)d;原发瘤恶性程度(CRC分期和细胞分化程度)、术前癌胚抗原(CEA)水平以及肿瘤位置等因素影响PDX模型成瘤率(P<0.01)。CRC-PDX移植瘤组织与患者肿瘤组织生物学特征高度一致。4种化学治疗方案均能抑制肿瘤生长,致肿瘤组织破坏,丙泊酚可以抑制小鼠腹泻,对肠黏膜具有保护作用。结论本研究建立的CRC-PDX模型,较好地保持原发肿瘤的生物学特性,可作为CRC患者个体化治疗的参考模型。原发肿瘤恶性程度是PDX模型成瘤率的主要影响因素。

关键词：结直肠癌患者来源异种移植影响因素成瘤率个体化治疗

低氧诱导因子-1α对脓毒症肠黏膜屏障的保护作用

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中国临床药理学与治疗学 2021年第3期26卷 264-270页

作者：何锐滕文彬姚刘旭单跃祝胜美李玉红浙江大学医学院附属第一医院麻醉科浙江杭州310000 绍兴市人民医院麻醉科浙江绍兴312000 树人大学树兰国际医学院附属树兰(杭州)医院麻醉科浙江杭州310004

目的:探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对脓毒症肠黏膜屏障的影响及机制。方法:SD大鼠随机分4组:假手术组、脓毒症组、脓毒症+HIF-1α刺激剂组(脓毒症+DMOG组)、脓毒症+HIF-1α抑制剂组(脓毒症+Bay87-2243组),每组6只。采用盲肠结扎穿孔(c... 详细信息

目的:探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对脓毒症肠黏膜屏障的影响及机制。方法:SD大鼠随机分4组:假手术组、脓毒症组、脓毒症+HIF-1α刺激剂组(脓毒症+DMOG组)、脓毒症+HIF-1α抑制剂组(脓毒症+Bay87-2243组),每组6只。采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and perforation,CLP)建立脓毒症模型。ELISA检测大鼠血浆炎性标记物IL-1β、IL-6、TNF-α,氧化应激标记物丙二醛(MDA)以及抗氧化因子超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的水平。Western blot检测大鼠肠黏膜HIF-1α表达。HE染色检测肠黏膜病理学损伤。结果:与假手术组相比,脓毒症大鼠炎症因子、氧化应激因子以及HIF-1α显著上调(P<0.05);给予腹腔注射DMOG明显降低脓毒症大鼠血浆IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平(P<0.05);增加血浆SOD、CAT水平(P<0.05);HIF-1α表达上调(P<0.05),肠黏膜病理损伤减轻,Chiu's评分显著降低(P<0.05)。口服灌胃Bay87-2243则得到相反的结果。结论:HIF-1α对脓毒症肠黏膜损伤具有保护作用,其机制可能与缓解脓毒症炎性反应和抑制氧化应激水平有关。

关键词：脓毒症炎症反应氧化应激反应低氧诱导因子1α 低氧诱导因子1α刺激剂低氧诱导因子1α抑制剂

HIF-1α激动剂或拮抗剂对脓毒症大鼠肠道黏膜通透性的影响

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基础医学与临床 2021年第11期41卷 1618-1623页

作者：王玉龙滕文彬单跃姚刘旭何锐李玉红祝胜美浙江大学医学院附属第一医院麻醉科浙江杭州310000 绍兴市人民医院麻醉科浙江绍兴312000 树人大学树兰国际医学院附属树兰(杭州)医院麻醉科浙江杭州310004

目的探讨脓毒症(sepsis)和HIF-1α激动或拮抗剂对肠道黏膜屏障(IMB)功能的影响。方法将SD大鼠随机分假手术组(sham)、sepsis组[sepsis,用盲肠结扎穿孔(CLP)建立sepsis模型]、(sepsis+HIF-1α激动剂)/(sepsis+DMOG)组[CLP术前连续7 d腹腔注射HIF-1α激动剂DMOG(40 mg/kg)]、(sepsis+HIF-1α拮抗剂)/(sepsis+BAY 87-2243)组,[CLP术前连续3 d口服灌胃HIF-1α抑制剂BAY87-2243(9 mg/kg)],各6只。ELISA检测大鼠血浆肠黏膜通透性标志物二胺氧化酶(DAO)、肠型脂肪酸结合蛋白2(FABP2)、D-乳酸和荧光素标记的右旋糖苷(FD4);HE染色检测大鼠肠黏膜形态学改变;Western blot检测大鼠肠黏膜缺氧诱导因子-1(HIF-1α)以及紧密连接(TJs)蛋白表达。结果Sepsis致大鼠肠黏膜病理形态学破坏、通透性增加(P<0.05)、HFI-1α表达上调、TJs表达下调(P<0.05);加入DMOG能减轻肠黏膜病理损伤、降低肠黏膜通透性(P<0.05);而大鼠经过BAY87-2243处理得出相反的结果。结论HIF-1α激动剂能明显降低sepsis大鼠肠道黏膜通透性,其抑制剂作用相反。表明脓毒性肠黏膜损伤,HIF-1α上调可能对肠黏膜具有保护作用。

关键词：脓毒症肠道黏膜通透性低氧诱导因子1α DMOG BAY87-2243

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单晶炉用铜部件搅拌摩擦焊缝组织及性能

机械工程学报 2023年第14期59卷 116-129页

作者：徐永生杨新岐唐文珅靳立辉姚长娟刘旭光天津大学材料科学与工程学院天津300350 天津环博科技股份有限责任公司天津300071

针对单晶炉用4 mm板厚TU1铜部件进行对接搅拌摩擦焊(Friction stir welding,FSW)工艺试验,探讨焊接工艺参数对焊缝成形、组织特征、力学性能及导电率的影响规律。结果表明,在主轴转速ω=300~1000 r/min与焊接速度v=60~200 mm/min范围内... 详细信息

针对单晶炉用4 mm板厚TU1铜部件进行对接搅拌摩擦焊(Friction stir welding,FSW)工艺试验,探讨焊接工艺参数对焊缝成形、组织特征、力学性能及导电率的影响规律。结果表明,在主轴转速ω=300~1000 r/min与焊接速度v=60~200 mm/min范围内均可获得表面光滑无内部缺陷的对接焊缝,接头外观尺寸可精确控制且基本无残余焊接变形。接头主要由焊核(Stirring zone,SZ)、热影响区(Heat affect zone,HAZ)及母材(Base material,BM)组成,未观察到热力影响区(Thermal mechanical affect zone,TMAZ)。在300 r/min下SZ和HAZ晶粒组织具有明显差异,随主轴转速增加SZ与HAZ组织差异不断减小。在800 r/min时可获得SZ和HAZ与母材基本相同晶粒组织特征,焊接速度变化对SZ和HAZ组织差异影响较小。接头硬度分布不均匀,当转速超过600 r/min时SZ和HAZ存在明显软化现象,最薄弱区位于HAZ。接头电导率在99.5%~102.5%IACS范围变化,其中SZ电导率优于BM、而HAZ电导率低于BM。在焊接工艺300 r/min-60 mm/min下接头抗拉强度达到BM的90%以上,断后伸长率为14.5%以上;断口呈现优异韧性断裂特征。

关键词： TU1无氧铜搅拌摩擦焊组织特征力学性能电导率

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土壤微生物标识物——氨基糖的研究进展

土壤通报 2022年第1期53卷 241-252页

作者：李庭宇李双异刘旭姚港曲天儒刘瑶岑王红博沈阳农业大学土地与环境学院农业农村部东北耕地保育重点实验室土肥高效利用国家工程研究中心辽宁沈阳110866

氨基糖是土壤微生物细胞壁的组成部分,具有较高的稳定性和微生物异源性,作为微生物标识物在土壤有机质积累、微生物群落动态变化以及碳氮循环研究中多有应用。本文综述了氨基糖的种类、来源及其组分对土壤中有机质积累的影响,介绍了目... 详细信息

氨基糖是土壤微生物细胞壁的组成部分,具有较高的稳定性和微生物异源性,作为微生物标识物在土壤有机质积累、微生物群落动态变化以及碳氮循环研究中多有应用。本文综述了氨基糖的种类、来源及其组分对土壤中有机质积累的影响,介绍了目前常用的氨基糖分析测定方法、应用技术,举例说明了以氨基糖为标识开展土壤、环境和生态学方面研究取得的主要成果,并对该领域今后的研究进行展望。

关键词：氨基糖微生物残体物质土壤有机质土壤有机碳氮循环