检索结果-南通市图书馆

周期性机械应力诱导的自噬抑制caspase通路依赖的成肌细胞凋亡

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海口腔医学 2020年第3期29卷 231-236页

作者：田一弘刘美希张强夏晨蕾阎潇袁晓青岛大学附属医院正畸二科山东青岛266555 青岛大学口腔医学院山东青岛266000 青岛市立医院口腔科山东青岛266001

目的:观察大鼠成肌细胞(L6 myoblast,L6)在周期性机械应力作用下细胞凋亡与自噬的水平变化,探讨机械应力诱导的细胞自噬对凋亡的作用.方法:构建大鼠成肌细胞力学刺激模型,加载参数为细胞拉伸形变率15%,加力周期包括3s拉伸及3s舒张,加力... 详细信息

目的:观察大鼠成肌细胞(L6 myoblast,L6)在周期性机械应力作用下细胞凋亡与自噬的水平变化,探讨机械应力诱导的细胞自噬对凋亡的作用.方法:构建大鼠成肌细胞力学刺激模型,加载参数为细胞拉伸形变率15%,加力周期包括3s拉伸及3s舒张,加力时间为6、12、24h,以不加力0h组为对照组.通过Hoechst染色及AnnexinV-F1TC/PI染色观察各组细胞凋亡情况;通过MDC染色及透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)评价各组细胞自噬变化;应用Western免疫印迹检测各组凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax及自噬相关蛋白LC3Ⅱ、LC3 Ⅰ、P62表达变化.加入自噬抑制剂3-MA后重复实验,检测各组细胞凋亡情况.采用SPSS 17.0软件包对数据进行统计学分析.结果:Hoechst染色及AnnexinV-FITC/PI流式结果表明,大鼠成肌细胞在周期性应力诱导下发生凋亡,24 h时达到凋亡最大值.Western免疫印迹结果显示,凋亡相关蛋白表达水平随加力时间延长而逐渐升高,caspase抑制剂z-VAD-fmk有效抑制应力诱导的细胞凋亡.MDC染色及TEM扫描电镜显示,大鼠成肌细胞在周期性应力诱导下发生自噬,24h细胞自噬达到最大值.Western免疫印迹结果显示,LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ随加力时间延长而升高,P62的表达随着加力时间延长而降低.加入自噬抑制剂3-MA后重复试验,发现应力诱导的成肌细胞凋亡被明显抑制.结论:周期性机械应力诱导大鼠成肌细胞发生自噬与caspase通路依赖的细胞凋亡,细胞自噬作为一种代偿机制,保护性地抑制应力诱导的细胞凋亡.

关键词：凋亡自噬 Caspase 机械应力成肌细胞

牙周-正畸联合治疗对侵袭性牙周炎患者牙周功能和龈沟液TSLP、IL-33的影响及其预后的影响因素研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

现代生物医学进展 2022年第20期22卷 3972-3976,3981页

作者：姜文心夏晨蕾丁弦刘美希刘桂荣青岛市市立医院口腔医学中心山东青岛266000

目的:观察牙周-正畸联合治疗对侵袭性牙周炎(AgP)患者牙周功能和龈沟液胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、白介素-33(IL-33)的影响,并分析其预后的影响因素。方法:选择2017年1月至2021年6月期间我院收治的AgP患者119例,根据治疗方式的不同... 详细信息

目的:观察牙周-正畸联合治疗对侵袭性牙周炎(AgP)患者牙周功能和龈沟液胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、白介素-33(IL-33)的影响,并分析其预后的影响因素。方法:选择2017年1月至2021年6月期间我院收治的AgP患者119例,根据治疗方式的不同分为对照组(牙周基础治疗)和联合组(牙周-正畸联合治疗),例数分别为58例和61例。对比两组患者的牙周功能[牙周袋深度(PD)、牙龈指数(GI)、菌斑指数(PLI)、临床附着丧失(AL)]和龈沟液TSLP、IL-33水平,根据PD判断联合组患者的预后情况,采用单因素、多因素Logistic回归分析预后的影响因素。结果:两组治疗后PD、GI、PLI、AL均较治疗前下降,且联合组低于对照组(P<0.05)。两组治疗后龈沟液TSLP、IL-33水平均较治疗前下降,且联合组低于对照组(P<0.05)。61例采用牙周-正畸联合治疗的AgP患者,6个月后复查发现,PD<4 mm的患者有38例(预后良好组),PD≥4 mm患者有23例(预后不良组)。单因素分析结果显示,牙周-正畸联合治疗AgP患者的预后与患牙上下/前后分布位置、患牙最深PD值、牙槽骨高度基线值、PLI、根型态异常情况有关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示:患牙分布位置为下颌牙、根型态存在异常情况、患牙分布位置为前牙、患牙最深PD值偏大、PLI偏高、牙槽骨高度基线值偏高均是牙周-正畸联合治疗AgP患者不良预后的危险因素(P<0.05)。结论:与单纯的牙周基础治疗相比,牙周-正畸联合治疗可有效改善AgP患者的临床症状,控制局部炎性反应。同时,患牙上下/前后分布位置、患牙最深PD值、牙槽骨高度基线值、PLI、根型态异常情况均是牙周-正畸联合治疗AgP患者预后的影响因素,需引起临床重视。

关键词：牙周-正畸联合治疗侵袭性牙周炎牙周功能 TSLP IL-33 预后影响因素

转化生长因子-β3/胰岛素样生长因子-1联合基因转染诱导间充质干细胞成软骨细胞分化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2018年第3期35卷 497-500页

作者：黄辉李海涛蔺媛媛李娅娟杨迭影夏晨蕾夏长所青岛大学附属医院麻醉科 266003 青岛大学附属医院关节外科 266003 青岛大学附属青岛市立医院口腔医学中心 266071

目的重组慢病毒介导转化生长因子（TGF）-β3/胰岛素样生长因子-1（HIGF-1）联合基因转染兔骨髓间充质干细胞，诱导其软骨细胞分化，比较与TGF-β3单基因转染诱导其软骨细胞分化的效率。方法全骨髓贴壁法分离、培养骨髓间充质干细胞，... 详细信息

目的重组慢病毒介导转化生长因子（TGF）-β3/胰岛素样生长因子-1（HIGF-1）联合基因转染兔骨髓间充质干细胞，诱导其软骨细胞分化，比较与TGF-β3单基因转染诱导其软骨细胞分化的效率。方法全骨髓贴壁法分离、培养骨髓间充质干细胞，流式细胞术检测细胞表面抗原，培养后通过重组慢病毒分别转染阴性对照（N组）、TGF-β3单基因（T组）、TGF-β3/HIGF-1联合基因（TB组），培养14 d后，荧光显微镜下观察各组细胞形态，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot分别检测性别决定区Y框蛋白9（SOX9）、蛋白多糖、Ⅱ型胶原在基因水平与蛋白水平的表达量。结果流式细胞术检测造血干细胞标志物（CD34，2.07%）、白细胞表面抗原[人类白细胞抗原DR基因（HLA-DR），1.73%]均为阴性，透明质酸受体（CD44，82.79%）为阳性，荧光显微镜观察诱导后细胞形态多为多角形、方形或者类圆盘状；RT-PCR结果显示：T组SOX9、蛋白多糖、Ⅱ型胶原基因表达量为0.645±0.024、0.587±0.018、0.616 ±0.019，显著高于C组（0.192±0.012、0.241±0.021、0.273±0.015），N组（0.211±0.014、0.224±0.016、0.232±0.022）（P＝0.000）；TB组基因表达量为0.832±0.013、0.746±0.024、0.951±0.026，显著高于T组（P＝0.000）。T组SOX9、蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白表达量为1.36±0.20、0.39±0.05、0.68±0.09，显著高于C组（0.58±0.11、0.12±0.08、0.23±0.15），N组（0.62±0.14、0.13±0.06、0.25±0.02，P＝0.000）；TB组蛋白表达量为1.83±0.13、1.35±0.24、1.51±0.26，显著高于T组（P＝0.000）。结论TGF-β3/HIGF-1联合基因转染骨髓间充质干细胞能诱导其成软骨细胞分化，且联合基因转染效率高于TGF-β3单基因转染。

关键词：骨髓间充质干细胞软骨分化转化生长因子-β3 胰岛素样生长因子-1

周期性张应力下成肌细胞中半胱天冬氨酸蛋白酶9参与力学信号传导

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2014年第15期18卷 2383-2389页

作者：王爽玉王洪玲夏晨蕾丁弦孙仙蕊张强李建平阎潇刘文张月姚如永袁晓青岛大学医学院附属青岛市立医院口腔医学中心山东省青岛市266071 泰安市口腔医院山东省泰安市271000 威海市口腔医院山东省威海市264200 青岛大学医学院附属医院中心实验室山东省青岛市266003

背景:功能矫形使面颌部肌肉发生适应性改建,以纠正错颌畸形。成肌细胞是适应性改建的主要体现者,周期性牵张应力导致成肌细胞凋亡,而半胱天冬氨酸蛋白酶9是线粒体凋亡通路中的重要因子。目的:明确半胱天冬氨酸蛋白酶9在不同时间周期性... 详细信息

背景:功能矫形使面颌部肌肉发生适应性改建,以纠正错颌畸形。成肌细胞是适应性改建的主要体现者,周期性牵张应力导致成肌细胞凋亡,而半胱天冬氨酸蛋白酶9是线粒体凋亡通路中的重要因子。目的:明确半胱天冬氨酸蛋白酶9在不同时间周期性张应力作用下的表达变化。方法:以大鼠L6成肌细胞为实验对象,在成功构建成肌细胞体外培养-力学刺激模型的基础上,通过多通道细胞牵张应力加载系统,分别对待测细胞持续施加1,6,12,24 h的周期性张应力,不加力组为对照组。倒置相差显微镜下观察成肌细胞的形态学改变和生长状况;运用RT-PCR和Western Blot技术检测周期性张应力作用下半胱天冬氨酸蛋白酶9的mRNA和蛋白含量变化。结果与结论:倒置相差显微镜观察结果显示成肌细胞施加周期性张应力后贴壁生长情况良好,细胞无变性并且脱落率极低,说明成功构建了成肌细胞体外培养-力学刺激模型。RT-PCR和Western Blot检测结果显示,随着加力时间的延长,半胱天冬氨酸蛋白酶9 mRNA含量和活化型半胱天冬氨酸蛋白酶9的蛋白含量均显著增加,而半胱天冬氨酸蛋白酶9前体蛋白含量随着加力时间的延长均显著降低。可见半胱天冬氨酸蛋白酶9参与了周期性张应力作用下的力学信号传导。

关键词：组织构建组织工程半胱天冬氨酸蛋白酶9 周期性张应力成肌细胞凋亡线粒体通路国家自然科学基金 Caspase-9

需肌醇酶-1-c-Jun氨基末端激酶通路在周期性应力介导的成肌细胞凋亡中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2015年第5期32卷 1127-1129页

作者：夏晨蕾丁弦孙文娜贺苗王芳姜文心张彩霞张强刘文张月阎潇姚如永袁晓青岛大学医学院附属青岛市立医院口腔医学中心 266071

目的观察在周期性应力介导成肌细胞凋亡中内质网应激需肌醇酶-1（IRE-1）-c-jun氨基端激酶（JNK）信号通路的作用.方法以大鼠L6成肌细胞为实验对象,构建体外培养-力学刺激模型.应用应力加载装置分别加1、2、6、12、24 h的周期性张应... 详细信息

目的观察在周期性应力介导成肌细胞凋亡中内质网应激需肌醇酶-1（IRE-1）-c-jun氨基端激酶（JNK）信号通路的作用.方法以大鼠L6成肌细胞为实验对象,构建体外培养-力学刺激模型.应用应力加载装置分别加1、2、6、12、24 h的周期性张应力（拉伸变形率为15％,频率为10次循环/分）,对照组不加力（0 h）.Hochest 33258染色、膜联蛋白V（Annexin V）-异硫氰酸荧光素（FITC）/碘化丙锭（PI）流式细胞术分别检测凋亡细胞的数目及凋亡率;反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测内质网应激相关因子C/EBP同源蛋白（CHOP）、凋亡信号调节激酶-1（ASK-1）、肿瘤坏死因子受体相关因子2（TRAF2）和JNK mRNA的表达变化;加入IRE-1特异性抑制剂STF-083010,检测ASK-1、TRAF2和JNK mRNA的表达变化.结果随应力加载时间的延长,凋亡细胞的数目、凋亡率呈一致上升趋势,且在24h达峰值[（14.34±0.77）个];CHOP、ASK-1、TRAF2mRNA表达量随着应力加载时间的延长逐渐上升,并在24 h达最高值,分别为4.19±1.76、3.46±0.84、3.78±1.38（P ＜0.05）,JNK mRNA的表达量在0～2h逐渐上升后逐渐下降,随后又逐渐上升在24 h达最高值（3.04±0.79,P＜0.05）;加入大鼠IRE-1特异性抑制剂STF-083010后,TRAF2、ASK-1表达量均明显减少（P＜0.05）.结论周期性张应力可诱导成肌细胞的凋亡,凋亡率随着应力加载时间的延长而升高.CHOP、TRAF2、ASK-1、JNK mRNA的表达量升高,提示内质网相关的凋亡途径参与了应力介导的成肌细胞的凋亡.加入IRE-1抑制剂后,TRAF2、ASK-1、JNK mRNA表达量均明显降低,提示IRE-1-JNK通路参与了应力介导的成肌细胞凋亡.

关键词：需肌醇酶-1 c-jun氨基端激酶内质网应激周期性张应力脱噬作用

成肌细胞体外培养-力学刺激模型与周期性张应力的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究 2014年第5期18卷 669-674页

作者：张强王洪玲丁弦夏晨蕾刘丽娟王爽玉李建平贺苗孙文娜阎潇刘文张月姚如永袁晓青岛大学医学院附属青岛市立医院口腔医学中心山东省青岛市266071 泰安市口腔医院山东省泰安市271000 潍坊市人民医院口腔科山东省潍坊市261000 青岛大学医学院附属医院中心实验室山东省青岛市266003

背景:内质网应激参与多种疾病的发生发展过程,如动脉粥样硬化、糖尿病、阿尔茨海默病,GRP78是内质网应激的标志蛋白,GRP78的表达水平反映内质网应激的程度。目的:研究周期性张应力对L6大鼠成肌细胞GRP78表达的影响,以明确周期性张应力... 详细信息

背景:内质网应激参与多种疾病的发生发展过程,如动脉粥样硬化、糖尿病、阿尔茨海默病,GRP78是内质网应激的标志蛋白,GRP78的表达水平反映内质网应激的程度。目的:研究周期性张应力对L6大鼠成肌细胞GRP78表达的影响,以明确周期性张应力与内质网应激的关系。方法:在成功构建L6大鼠成肌细胞体外培养力学刺激模型的基础上,采用RT-PCR和Western blot法分析周期性张应力对GRP78 mRNA和蛋白表达的影响。加力组分别给予1,6,12,24 h的力学刺激,加载频率为10 cycles/min,拉伸变形幅度为15%。对照组与实验组在同时种板,不给予力刺激。结果与结论:GRP78 mRNA随着加力时间的延长呈一致上升趋势,与对照组相比,差异均有显著性意义(P<0.05);GRP78蛋白在加力1 h后,蛋白表达量开始升高,加力6 h后蛋白表达量显著升高,到24 h达到峰值,与对照组相比,差异均有显著性意义(P<0.05)。由以上结果得出,在一定时间范围内,周期性张应力可引起内质网应激,并且随着时间的延长逐渐增强;持续的应力刺激,可引起严重的内质网应激导致成肌细胞凋亡。

关键词：实验动物组织构建 GRP78 周期性张应力内质网应激 L6 成肌细胞功能矫形国家自然科学基金

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

自噬在应力诱导成肌细胞凋亡中的作用初探

现代生物医学进展 2016年第11期16卷 2045-2048页

作者：孙文娜贺苗夏晨蕾丁弦张强王爽玉王芳张彩霞姜文心阎潇孙同正余海波袁晓青岛大学医学院附属青岛市立医院口腔医学中心山东青岛266071 青岛市市北区人民医院山东青岛266001

目的:探讨自噬在周期性张应力介导的成肌细胞凋亡中的作用,以明确应力诱导内质网应激引起自噬与凋亡之间的关系。方法:在成功构建L6大鼠体外培养--力学刺激模型的基础上,采用Western Blot法分析周期性张应力对自噬相关蛋白LC3蛋白表达... 详细信息

目的:探讨自噬在周期性张应力介导的成肌细胞凋亡中的作用,以明确应力诱导内质网应激引起自噬与凋亡之间的关系。方法:在成功构建L6大鼠体外培养--力学刺激模型的基础上,采用Western Blot法分析周期性张应力对自噬相关蛋白LC3蛋白表达的影响,并通过Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况。加力组分别给予1,6,12,24 h的力学刺激(拉伸变形率为15%,频率为10循环/min),3-MA组和Rapamycin组在加力2 h前分别加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤和自噬激活剂雷帕霉素并且加力24 h,0 h组与实验组在同时种板但是不给予力刺激。采用SPSS17.0统计软件对以上数据进行统计分析。结果:成肌细胞中的LC3II/LC3I值随加力时间延长呈上升趋势,24 h达最高(P<0.05);抑制组的细胞凋亡率(18.75±1.06%)相对于0 h组(0.726±0.13%)和加力24 h组(14.84±1.14%)的明显升高(P<0.05);Rapamycin组相对于加力24 h组的细胞凋亡率明显下降(8.88±1.08%vs 14.84±1.14%),但是细胞凋亡率仍然高于0 h组的(8.88±1.08%vs 0.726±0.13%)。结论:在一定时间范围内,周期性张应力可诱导成肌细胞发生自噬,并且自噬活性与作用时间成正比;自噬可以降低应力介导的成肌细胞凋亡的活性。

关键词：自噬凋亡周期性张应力内质网应激成肌细胞

周期性张应力刺激下成肌细胞钙网蛋白的表达及变化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

现代生物医学进展 2014年第9期14卷 1657-1661页

作者：李建平王洪玲高玉丽丁弦夏晨蕾贾萍萍张强王爽玉阎潇刘文张月姚如永袁晓青岛大学医学院附属青岛市立医院口腔医学中心山东青岛266075 泰安市口腔医院山东泰安271000 青岛大学附属医院山东青岛266555 青岛大学医学院附属医院中心实验室山东青岛266003

目的:检测成肌细胞钙网蛋白(CRT)在循环拉伸应力刺激下的表达变化。方法:体外构建面颌部成肌细胞力学刺激模型。加力组以0.5赫兹的加载频率和10%细胞拉伸变形幅度对细胞进行加力培养1 h,6 h,12 h,24 h,运用实时荧光定量PCR技术跟Western... 详细信息

目的:检测成肌细胞钙网蛋白(CRT)在循环拉伸应力刺激下的表达变化。方法:体外构建面颌部成肌细胞力学刺激模型。加力组以0.5赫兹的加载频率和10%细胞拉伸变形幅度对细胞进行加力培养1 h,6 h,12 h,24 h,运用实时荧光定量PCR技术跟Western Blot技术分别检测在周期性张应力作用下成肌细胞CRT在基因水平及蛋白水平的表达变化。结果:当对细胞加力6 h后,CRT mRNA及蛋白表达量开始增多,加力12 h后CRT mRNA及蛋白表达量到达最多(P<0.01),加力0h组与加力12 h组之间差异有显著的统计学意义(P<0.01)。结论:持续的周期性张应力刺激下CRT mRNA及蛋白表达增加。

关键词：张应力钙网蛋白细胞凋亡功能矫形成肌细胞

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

双黄妇乐栓的制备及含量测定

中国现代应用药学 2016年第12期33卷 1529-1532页

作者：沈炜夏晨柯姜丹蕾陈学奇浙江中医药大学附属第一医院杭州310000 浙江中医药大学药学院杭州310053 浙江中医药大学附属第三医院杭州310003

目的优化妇乐栓的制备工艺,并建立其含量测定方法。方法采用正交设计,以外观性状、重量差异、融变时限为指标,考察不同聚乙二醇比例、加入温度、搅拌速度、搅拌时间和注模温度等因素对栓剂制备工艺的影响;采用HPLC测定双黄妇乐栓中盐酸... 详细信息

目的优化妇乐栓的制备工艺,并建立其含量测定方法。方法采用正交设计,以外观性状、重量差异、融变时限为指标,考察不同聚乙二醇比例、加入温度、搅拌速度、搅拌时间和注模温度等因素对栓剂制备工艺的影响;采用HPLC测定双黄妇乐栓中盐酸小檗碱的含量。结果 PEG-400∶PGE-6000∶S-40=6∶3∶1,加入温度50℃,搅拌时间40 min,搅拌速度150 r·min^(-1),注模温度60℃为双黄妇乐栓的最佳制备工艺,在该工艺下制备的3批双黄妇乐栓中盐酸小檗碱含量分别为2.10,2.14,2.15 mg。结论优选后的处方比例合理,制备工艺稳定易行,含量测定方法可靠。

关键词：栓剂制备工艺优化