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RNA干扰联合氧化苦参碱抑制VEGF治疗子宫内膜癌的实验研究

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RNA干扰联合氧化苦参碱抑制VEGF治疗子宫内膜癌的实验研究

作者：夏宝妹南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:观察RNA干扰联合氧化苦参碱(Oxymatrine,Oxy)对子宫内膜癌Ishikawa细胞株血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的基因表达及细胞增殖的影响.方法:针对VEGF基因RNA干扰的有效作用位点,利用pRNAT-CMV3.2-Neo载体,设计并构建能在肿瘤细胞内表达siRNA的质粒pRNAT-CMV3.2-Neo-VEGF,以及阴性对照表达质粒pRNAT-CMV3.2-Neo-neg;将构建的表达质粒转染子宫内膜癌Ishikawa细胞株,并加入中药Oxy,采用RT-PCR检测VEGF mRNA表达的变化,Western印迹法检测VEGF蛋白的表达,MTT比色法检测细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期,显微镜下进行细胞形态学观察,人工重组基底膜侵袭小室(Transwell)观察细胞的侵袭能力。结果:构建的表达质粒成功转染Ishikawa细胞株,RNA干扰联合Oxy可下调细胞中VEGFmRNA及其蛋白的表达,明显抑制Ishikawa细胞的增殖,细胞周期发生改变,G1期细胞比例增加,S期细胞则减少,荧光显微镜可见细胞凋亡形态学变化,Ishikawa细胞侵袭基底膜的能力明显被抑制。结论:RNA干扰联合Oxy可抑制Ishikawa细胞增殖,诱导Ishikawa细胞凋亡及分化,降低肿瘤细胞的侵袭能力;其作用机制可能与成功下调VEGF基因的表达有关。RNA干扰联合Oxy效果强于单用中药治疗或单用RNA干扰效应,证实了基因治疗联合药物治疗肿瘤的可行性和有效性,为其它肿瘤的基因治疗探索了一条新的途径。

关键词：子宫内膜癌 Ishikawa细胞株血管内皮生长因子 RNA干扰氧化苦参碱

华蟾素对子宫内膜癌Ishikawa细胞株裸鼠皮下移植瘤生长及RRM2基因表达的影响

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中国中西医结合杂志 2010年第11期30卷 1183-1185页

作者：冯坤周怀君胡娅莉寻庆英夏宝妹南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科南京210008 南京大学医院南京210093 东南大学生理教研室

目的研究华蟾素对子宫内膜癌Ishikawa细胞株裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及对肿瘤组织中核糖核苷酸还原酶亚单位M2(ribonucleotide reductase subunit M2,RRM2)基因表达的影响。方法应用人子宫内膜癌Ishikawa细胞株建立子宫内膜癌裸鼠... 详细信息

目的研究华蟾素对子宫内膜癌Ishikawa细胞株裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及对肿瘤组织中核糖核苷酸还原酶亚单位M2(ribonucleotide reductase subunit M2,RRM2)基因表达的影响。方法应用人子宫内膜癌Ishikawa细胞株建立子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机将11只裸鼠分为2组,分别应用华蟾素和生理盐水瘤体内注射治疗1周。观察治疗前后移植瘤体积的变化;计算肿瘤增殖抑制率;RT-PCR方法检测肿瘤组织中RRM2 mRNA表达;Western blot方法检测RRM2蛋白表达。结果华蟾素治疗组移植瘤体积为(0.1314±0.0304)cm3,对照组为(0.3600±0.1145)cm3,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组肿瘤增殖抑制率为43.46%。治疗组肿瘤组织中RRM2 mRNA及蛋白质光密度比值与对照组比较差异均有统计学意义(P=0.019,P=0.001)。结论华蟾素具有抑制子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用,这可能与其抑制肿瘤组织中RRM2表达有关。

关键词：华蟾素裸鼠核糖核苷酸还原酶亚单位M2 子宫内膜癌

上肢机器人对脑卒中偏瘫患者上肢运动功能的研究

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按摩与康复医学 2022年第3期13卷 7-9,13页

作者：刘雅静夏宝妹南京特殊教育师范学院江苏南京210023 无锡君瑞中医门诊江苏无锡214000

目的:研究上肢机器人训练对脑卒中偏瘫患者上肢运动功能的影响。方法:选取40例脑卒中偏瘫患者,随机分为对照组和研究组,对照组予以常规的康复训练,研究组在常规康复训练基础上结合上肢机器人训练。两组均连续训练4周。治疗前、后分别采... 详细信息

目的:研究上肢机器人训练对脑卒中偏瘫患者上肢运动功能的影响。方法:选取40例脑卒中偏瘫患者,随机分为对照组和研究组,对照组予以常规的康复训练,研究组在常规康复训练基础上结合上肢机器人训练。两组均连续训练4周。治疗前、后分别采用Fugl-Meyer运动功能量表上肢部分(FMA-UE)以及Barthel指数(BI)评定患者上肢运动功能及日常生活能力。结果:两组病例康复训练后的Barthel指数评分均有显著提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,研究组患者的Fugl-Meyer运动功能量表上肢部分评分显著增高(P<0.05)。结论:上肢机器人训练可有效提高脑卒中偏瘫患者的上肢运动功能和运动质量。

关键词：脑卒中偏瘫上肢机器人运动功能

数字化虚拟解剖技术在康复治疗学解剖教学中的应用

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中国中医药现代远程教育 2022年第17期20卷 3-5页

作者：夏宝妹陈寒昱肖源李永南京特殊教育师范学院康复科学学院江苏南京210038

数字化虚拟解剖技术,能够提供三维解剖学的立体图像和精确结构,现在被越来越多地用于解剖课程的教学。此研究采用美国VH Dissector数字化虚拟解剖技术,评估康复治疗学专业学生解剖教学的应用效果。结果发现数字化虚拟解剖技术与传统解... 详细信息

数字化虚拟解剖技术,能够提供三维解剖学的立体图像和精确结构,现在被越来越多地用于解剖课程的教学。此研究采用美国VH Dissector数字化虚拟解剖技术,评估康复治疗学专业学生解剖教学的应用效果。结果发现数字化虚拟解剖技术与传统解剖教学方法相结合,能够激发康复治疗专业学生的解剖课程学习兴趣,提高学生的学习效率,具有更好的教学效果。

关键词：数字化虚拟解剖技术解剖康复治疗

氧化苦参碱抑制子宫内膜癌细胞株Ishikawa的实验研究

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现代妇产科进展 2009年第4期18卷 278-281页

作者：夏宝妹周怀君胡娅莉寻庆英南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科南京210008 东南大学基础医学院生理学教研室

目的:观察不同浓度氧化苦参碱(oxymatrine,Oxy)对人子宫内膜癌细胞株Ishikawa增殖抑制及诱导凋亡作用。方法:培养人子宫内膜癌细胞株Ishikawa,通过细胞形态学观察、CCK-8比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期人工重组... 详细信息

目的:观察不同浓度氧化苦参碱(oxymatrine,Oxy)对人子宫内膜癌细胞株Ishikawa增殖抑制及诱导凋亡作用。方法:培养人子宫内膜癌细胞株Ishikawa,通过细胞形态学观察、CCK-8比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期人工重组基底膜侵袭小室(transwell)观察细胞的侵袭力。结果:Oxy明显抑制Ishikawa增殖,并呈时效和量效关系,24h、48h、72h的IC50分别为8.07,4.62,3.22mg/ml;细胞周期发生明显改变。随着药物浓度增高,G1期细胞比例增加,S期细胞减少;流式细胞仪可检测到细胞凋亡现象,当Oxy浓度为10mg/ml时,细胞凋亡率65.4%;荧光显微镜可见细胞凋亡形态学变化;Ishikawa细胞侵袭基底膜的能力明显被抑制。结论:Oxy可抑制Ishikawa增殖,诱导Ishikawa细胞凋亡,有可能成为治疗子宫内膜癌的有效药物。

关键词：氧化苦参碱子宫内膜肿瘤细胞株Ishikawa 增殖细胞凋亡侵袭,肿瘤

以岗位胜任力为导向的康复治疗师人才培养模式探究

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中国中医药现代远程教育 2022年第16期20卷 154-156页

作者：陈寒昱夏宝妹袁丹张浩文南京特殊教育师范学院康复科学学院江苏南京210038 南京特殊教育师范学院管理学院江苏南京210038 南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院江苏南京210046

随着内科康复及围手术期康复迅速发展、残疾人群体日渐庞大、人口老龄化日趋明显,我国康复医疗需求骤增,而现有康复治疗师数量与服务质量均难以满足社会需求,提高康复治疗师的医疗服务质量迫在眉睫。胜任力导向的医学教育作为第三次医... 详细信息

随着内科康复及围手术期康复迅速发展、残疾人群体日渐庞大、人口老龄化日趋明显,我国康复医疗需求骤增,而现有康复治疗师数量与服务质量均难以满足社会需求,提高康复治疗师的医疗服务质量迫在眉睫。胜任力导向的医学教育作为第三次医学教育改革的核心特征,为康复治疗师培养方法改革开辟了新思路。此文结合康复治疗师岗位胜任力要求,以规范化培训作为教育模式改革的突破口,探索以岗位胜任力为导向的康复治疗师人才培养模式改革。

关键词：康复治疗师岗位胜任力医学教育规范化培训人才培养

青蒿琥酯对人子宫内膜癌细胞血管生成素-2基因表达及细胞增殖的影响

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中国实用妇科与产科杂志 2010年第4期26卷 260-262页

作者：何荣荣周怀君胡娅莉夏宝妹南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科江苏南京210008

目的探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)对人子宫内膜癌细胞血管生成素-2(angiopoietin-2,ang-2)基因表达及细胞增殖的影响。方法2007年12月至2008年8月于南京大学医学院附属鼓楼医院实验室培养人子宫内膜癌ishikawa细胞株,利用RT-PCR方法检... 详细信息

目的探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)对人子宫内膜癌细胞血管生成素-2(angiopoietin-2,ang-2)基因表达及细胞增殖的影响。方法2007年12月至2008年8月于南京大学医学院附属鼓楼医院实验室培养人子宫内膜癌ishikawa细胞株,利用RT-PCR方法检测不同浓度Art对ishikawa细胞ang-2mRNA基因表达的影响;Westernblot方法检测Art对ang-2蛋白表达的影响,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定Art对ishikawa细胞增殖的影响;荧光显微镜观察ishikawa细胞形态学的变化;transwell实验检测Art对ishikawa细胞侵袭能力的影响。结果人子宫内膜癌ishikawa细胞ang-2mRNA基因及其蛋白质表达水平均显著下降(P<0.01);增殖被抑制(P<0.01),抑制率达70.25%;部分ishikawa细胞形态改变,甚至形成凋亡小体;侵袭能力明显下降(P<0.01)。结论Art能抑制ang-2表达,同时抑制ishikawa细胞增殖,促进凋亡。

关键词：青蒿琥酯 ishikawa细胞血管生成素-2

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围产期抑郁引发代际性抑郁障碍及机制

心理科学进展 2017年第12期25卷 2082-2088页

作者：吴如燕夏宝妹王薇徐桂华陈刚扬州大学医学院医学心理学教研室江苏省中西医结合重点实验室江苏扬州225001 南京特殊教育师范学院康复科学学院医学康复教研室南京210038 南京中医药大学心理学院南京中医药大学转化系统生物学与神经科学研究中心中医脑病重点实验室南京中医药大学护理学院南京210023

围产期抑郁(peripartum depression,PPD)可对母亲及子女产生不良影响,显著增加其子女罹患情感障碍的风险,并且这种影响可代际(transgenerational)持续。PPD引发代际性抑郁障碍的发病机制较为复杂,经典抗抑郁药物难以起到较好的治疗作用... 详细信息

围产期抑郁(peripartum depression,PPD)可对母亲及子女产生不良影响,显著增加其子女罹患情感障碍的风险,并且这种影响可代际(transgenerational)持续。PPD引发代际性抑郁障碍的发病机制较为复杂,经典抗抑郁药物难以起到较好的治疗作用,因此,深入研究PPD引发情感障碍及代际性影响的分子机制具有重要意义。本文对下丘脑-垂体-肾上腺轴(hypothalamic–pituitary–adrenal axis,HPA)、催产素(oxytocin,OT)及其信号、突触可塑性以及表观遗传学机制在PPD引发代际性抑郁情感障碍的作用进行讨论,以期为下一步研究提供依据。

关键词：围产期抑郁代际遗传影响机制表观遗传学

孕前应激诱导的产后抑郁模型小鼠海马精神分裂症断裂基因1的表达变化

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中国医学科学院学报 2017年第2期39卷 230-235页

作者：夏宝妹陈畅张海楼周欣陶伟伟吴顥昕陈刚南京特殊教育师范学院康复科学学院医学康复教研室南京210038 南京中医药大学基础医学院脑病重点实验室南京210023 南京中医药大学第三附属医院脑病科南京210001

目的以孕前应激诱导方式建立产后抑郁症(PPD)小鼠模型,评估母鼠产后的异常行为,检测母鼠海马精神分裂症断裂基因1(DISC1)及血清雌二醇、皮质酮的变化,揭示产后抑郁的发病机制。方法将32只Balb/c母鼠采用随机数字表法分为对照组和模型组... 详细信息

目的以孕前应激诱导方式建立产后抑郁症(PPD)小鼠模型,评估母鼠产后的异常行为,检测母鼠海马精神分裂症断裂基因1(DISC1)及血清雌二醇、皮质酮的变化,揭示产后抑郁的发病机制。方法将32只Balb/c母鼠采用随机数字表法分为对照组和模型组,每组16只,对照组小鼠不给予任何刺激,模型组小鼠给予慢性束缚刺激。3周后对照组和模型组均予雌雄合笼交配怀孕,分娩后即为对照组和孕前应激诱导PPD模型组。于分娩后3周对母鼠进行旷场测试、悬尾测试及糖水偏爱测试以评价造模是否成功。取海马检测DISC1基因及蛋白的表达,眼眶取血检测血清雌二醇及皮质酮水平。结果产后3周,与对照组相比,PPD模型组在旷场测试中自发活动无改变(P>0.05),在悬尾测试中的绝望不动时间显著增加(t=-4.950,P0.05)。结论慢性孕前应激可诱导Balb/c母鼠表现出产后抑郁样症状,其发病机制可能与调控海马DISC1的基因和蛋白表达有关。

关键词：产后抑郁孕前应激精神分裂症断裂基因1 雌二醇皮质酮