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加味桂枝人参汤对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响

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中国中医基础医学杂志 2012年第4期18卷 373-375页

作者：齐峰邱昌龙杨晓溪赵舒喇孝瑾王志文河北联合大学中医学院河北唐山063000

目的:探讨加味桂枝人参汤(MGD)溶液对胰岛素抵抗(IR)HpeG-2细胞模型的保护作用及机理。方法:成功复制HepG2细胞IR模型后,采用MGD溶液进行干预,并与罗格列酮进行对照,观察细胞形态学变化、各孔细胞的葡萄糖消耗量、细胞的数目与活力。结... 详细信息

目的:探讨加味桂枝人参汤(MGD)溶液对胰岛素抵抗(IR)HpeG-2细胞模型的保护作用及机理。方法:成功复制HepG2细胞IR模型后,采用MGD溶液进行干预,并与罗格列酮进行对照,观察细胞形态学变化、各孔细胞的葡萄糖消耗量、细胞的数目与活力。结果:MGD对模型细胞的增殖并无明显影响(P>0.05),但可以增加其葡萄糖消耗量(P0.05)。结论:中药MGD与罗格列酮具有同等的改善模型细胞IR的作用,可能与其增加HepG2细胞的葡萄糖消耗量,促进葡萄糖的摄取有关。

关键词：加味桂枝人参汤胰岛素抵抗 HpeG-2细胞

双益方剂及其有效成分对胰岛素抵抗小鼠胰岛β细胞株胰岛素分泌、增殖、凋亡的影响

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山东医药 2017年第39期57卷 23-26页

作者：田春雨马雷雷喇孝瑾华北理工大学河北唐山063210

目的观察双益方及其有效成分对胰岛素抵抗的小鼠胰岛β细胞株Min6胰岛素分泌水平和细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法培养Min6细胞并分为正常组、IR模型组、二甲双胍组、双益方组、双益方组方单味中药组(山茱萸、黄芪、黄连... 详细信息

目的观察双益方及其有效成分对胰岛素抵抗的小鼠胰岛β细胞株Min6胰岛素分泌水平和细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法培养Min6细胞并分为正常组、IR模型组、二甲双胍组、双益方组、双益方组方单味中药组(山茱萸、黄芪、黄连、葛根、桑白皮、佩兰)及双益方有效成分组(1-脱氧野尻霉素、小檗碱、黄芪甲苷、熊果酸、马钱苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、葛根素)。正常组加入无酚红培养液正常培养;其余各组加入葡萄糖和棕榈酸制作胰岛素抵抗的Min6细胞模型。二甲双胍组加入100μg/L的二甲双胍。双益方组、山茱萸组、黄芪组、黄连组、葛根组、桑白皮组、佩兰组、葛根素组、1-脱氧野尻霉素组、小檗碱组、黄芪甲苷组、马钱苷组、熊果酸组、毛蕊异黄酮葡萄糖苷组分别加入50、100、200μg/L的相应药物。各组于给药24 h后进行胰岛素分泌实验,检测胰岛素分泌水平。各组分别于给药24、48 h采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力。于给药24 h后采用双染法检测正常组、IR模型组、二甲双胍组、双益方组的凋亡细胞,计算细胞凋亡率;采用Western blotting法检测细胞中的ERK1/2、p-ERK1/2、MEK1/2蛋白。结果 IR模型组细胞高糖、低糖刺激下胰岛素分泌水平均低于正常组(P均<0.05)。二甲双胍组、黄芪组、葛根组、双益方组、黄芪甲苷组、山茱萸组、1-脱氧野尻霉素组、葛根素组、小檗碱组胰岛素分泌水平高于IR模型组(P均<0.05)。IR模型组细胞增殖能力低于正常组(P均<0.05);二甲双胍组、双益方组、黄芪组、黄芪甲苷组、1-脱氧野尻霉素组、山茱萸组细胞增殖能力高于IR模型组(P均<0.05)。IR模型组细胞凋亡率高于正常组,双益方各组细胞凋亡率均低于IR模型组(P均<0.05)。IR模型组细胞中MEK1/2、ERK1/2、pERK1/2蛋白相对表达量低于正常组(P均<0.05);二甲双胍组及双益方组细胞中MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白相对表达量高于IR模型组(P均<0.05)。结论双益方及其黄芪、葛根、黄芪甲苷、山茱萸、1-脱氧野尻霉素、葛根素、小檗碱等成分可有效提高胰岛素抵抗的Min6细胞的胰岛素分泌水平,促进细胞增殖并抑制其凋亡,作用机制可能与ERK1/2、p-ERK1/2、MEK1/2蛋白表达上调有关。

关键词：双益方 2型糖尿病胰岛素抵抗胰岛素分泌实验细胞增殖细胞凋亡小鼠胰岛β细胞株

针刺对哮喘大鼠BALF中嗜酸性粒细胞及肺组织p38MAPK的影响

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时珍国医国药 2014年第1期25卷 243-245页

作者：王亚喇孝瑾崔建美林清刘慧娟孙娜王洪彬河北联合大学河北唐山063000

目的观察针刺对支气管哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞,肺组织p38蛋白激酶(p38MAPK)蛋白表达的影响,探讨针刺对哮喘大鼠气道炎症的改善机制。方法将SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组(C组)、哮喘模型组(M组)、哮喘模型针刺组(A组)... 详细信息

目的观察针刺对支气管哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞,肺组织p38蛋白激酶(p38MAPK)蛋白表达的影响,探讨针刺对哮喘大鼠气道炎症的改善机制。方法将SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组(C组)、哮喘模型组(M组)、哮喘模型针刺组(A组),每组10只。制作卵蛋白致敏哮喘大鼠模型,取大椎、肺俞(双)、风门(双)穴位给予针刺,隔日一次,共针7次。针刺干预实验结束时,计数哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞;用Western Blot技术检测大鼠肺组织p38MAPK的蛋白含量。结果 M组大鼠BALF中嗜酸性粒细胞数较C组显著增多(P<0.05);A组大鼠BALF中白细胞和嗜酸性粒细胞数明显低于M组(P<0.05)。M组大鼠肺组织p38MAPK蛋白表达较C组增多(P<0.05);A组大鼠肺组织p38MAPK蛋白表达低于M组(P<0.05)。结论针刺对哮喘的治疗作用与降低大鼠BALF中嗜酸性粒细胞数目,降低肺组织p38MAPK蛋白表达有关。

关键词：关键词支气管哮喘针刺支气管肺泡灌洗液 p38MAPK

基于转录组学探讨滋肾清肝方改善2型糖尿病糖、脂代谢的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第8期30卷 109-117页

作者：王景存田春雨张帆喇孝瑾吴范武朱亮马雷雷华北理工大学河北唐山063210 河北省中西医结合防治糖尿病及其并发症重点实验室河北唐山063210 唐山市中药药理重点实验室河北唐山063210

目的:基于网络药理学及转录组学探讨滋肾清肝方(ZSQGF)改善2型糖尿病(T2DM)模型大鼠糖、脂代谢的作用机制。方法:基于网络药理学分析ZSQGF与T2DM的差异基因,进行基因本体(GO)富集分析与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并... 详细信息

目的:基于网络药理学及转录组学探讨滋肾清肝方(ZSQGF)改善2型糖尿病(T2DM)模型大鼠糖、脂代谢的作用机制。方法:基于网络药理学分析ZSQGF与T2DM的差异基因,进行基因本体(GO)富集分析与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并通过分子对接分析对接能,验证成分与靶点结合。通过高脂喂养及注射链脲佐菌素的方法建立T2DM大鼠模型,并随机分为正常组、模型组、二甲双胍组(二甲双胍72 mg·kg^(-1))和ZSQGF高、中、低剂量组(分别折合生药量4.8、2.4、1.2 g·kg^(-1)的药液);监测大鼠的生活状态;检测大鼠血清总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量;对肝脏组织进行苏木素-伊红(HE)染色和油红O染色;通过肝脏转录组学分析差异基因、进行GO与KEGG富集分析,绘制蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图筛选核心靶点;结合网络药理学与转录组学分析结果进行蛋白通路验证,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏核转录因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶(MMP-1、MMP-9)的蛋白表达量,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)验证B细胞淋巴瘤(Bcl)-2修正因子(BMF)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶4(NOX4)、脂肪酸合酶(FASN)的mRNA表达,通过免疫荧光染色检测MMP-1、MMP-9在肝脏的表达情况。结果:转录组学与网络药理学分析ZSQGF可能通过糖脂代谢通路、炎症通路作用于糖脂代谢、保护肝脏。实验证明给药8周后大鼠体质量、血糖、血清指标、病理染色结果均有改善,Western blot结果表明ZSQGF组肝脏NF-κB、MMP-1、MMP-9蛋白相对表达量降低,Real-time PCR结果表明ZSQGF高剂量组BMF、NOX4、FASN转录表达降低,免疫荧光结果ZSQGF组肝脏MMP-1、MMP-9蛋白表达量降低。结论:ZSQGF可以抑制FASN的表达、减少脂质合成,并通过调节NF-κB信号通路改善糖脂代谢。

关键词：滋肾清肝方 2型糖尿病糖脂代谢网络药理学转录组学

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三清降糖方对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

中国实验方剂学杂志 2012年第17期18卷 247-249页

作者：高秀娟吴范武江春花李继安喇孝瑾河北联合大学中医学院河北唐山063000

目的:观察三清降糖方对α-葡萄糖苷酶活性的影响。方法:提取大鼠小肠的α-葡萄糖苷酶,测定其含量,通过正交试验确定最佳反应体系,制备三清降糖方水提制剂和醇提制剂,分别配制成25,2.5,0.25,0.025,0.002 5 g.L-1的溶液,以阿卡波糖为阳性... 详细信息

目的:观察三清降糖方对α-葡萄糖苷酶活性的影响。方法:提取大鼠小肠的α-葡萄糖苷酶,测定其含量,通过正交试验确定最佳反应体系,制备三清降糖方水提制剂和醇提制剂,分别配制成25,2.5,0.25,0.025,0.002 5 g.L-1的溶液,以阿卡波糖为阳性药对照组,用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量,计算抑制率。结果:三清降糖方水提制剂、醇提制剂对α-葡萄糖苷酶活性的抑制有明显的浓度-效应关系。质量浓度为25 g.L-1三清降糖方水提制剂对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率为(64.85±10.5)%,与2.5 g.L-1的阿卡波糖抑制率相当。结论:三清降糖方具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用。

关键词：三清降糖方水提制剂醇提制剂 α-葡萄糖苷酶

针刺对哮喘大鼠肺组织pan-Ras/c-fos蛋白表达的影响

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中国中医基础医学杂志 2013年第5期19卷 540-542页

作者：崔建美杨晓溪刘慧娟孙娜喇孝瑾王洪彬河北联合大学中医学院河北唐山063000

目的:探讨针刺对哮喘大鼠肺组织中pan-Ras、c-fos蛋白表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组,采用HE染色法、免疫组化法观察大鼠肺组织病理变化及pan-Ras、c-fos蛋白的表达程度。结果:针刺组大鼠肺组织病理改变较模... 详细信息

目的:探讨针刺对哮喘大鼠肺组织中pan-Ras、c-fos蛋白表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组,采用HE染色法、免疫组化法观察大鼠肺组织病理变化及pan-Ras、c-fos蛋白的表达程度。结果:针刺组大鼠肺组织病理改变较模型组减轻但较空白组重,针刺组大鼠肺组织pan-Ras、c-fos蛋白表达(AOD值)低于模型组(P<0.05)。结论:针刺能明显抑制pan-Ras、c-fos蛋白的表达,其作用机制可能与抑制Ras-MAPK途径的激活有关。

关键词：哮喘针刺 pan-Ras c-fos 免疫组化

通莲汤对胃癌MGC803细胞周期及NF-κBs信号通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2013年第22期19卷 213-217页

作者：王亚贾永森喇孝瑾田炜韩炳生李继安郝小惠 Hegyi Gabriella 河北联合大学中医学院河北唐山063000 深圳市中医院外科广东深圳518020 河北联合大学医学实验研究中心河北唐山063000 佩奇大学

目的：研究通莲汤对胃癌MGC803细胞形态、生长周期的调节作用及细胞核转录因子κB（NF-κB）信号通路的影响,以探讨该方抑制胃癌细胞增殖的机制.方法：将MGC803细胞以1×104个细胞/孔的密度接种于96孔细胞培养板,以含5％胎牛血清DMEM培... 详细信息

目的：研究通莲汤对胃癌MGC803细胞形态、生长周期的调节作用及细胞核转录因子κB（NF-κB）信号通路的影响,以探讨该方抑制胃癌细胞增殖的机制.方法：将MGC803细胞以1×104个细胞/孔的密度接种于96孔细胞培养板,以含5％胎牛血清DMEM培养液培养,37℃,5％饱和湿度的CO2培养箱孵育,细胞贴壁24 h,分别加入浓度为25～800 mg·L-倍比梯度的通莲汤提取液,以10 ～ 160 mg·L-1倍比浓度的氟脲嘧啶为阳性对照组,孵育48 h后,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT比色法检测细胞增殖变化,曲线拟合法计算通莲汤和氟脲嘧啶50％抑制浓度（IC50）;以两者48 h IC50浓度处理细胞48 h,流式细胞技术（FCM）测定细胞周期,Western blot法测定细胞IκB激酶β（IKKβ）,NF-κB,phosph-NF-κB蛋白水平.结果：通莲汤和氟脲嘧啶48 h IC50值分别为192.74 mg.L-1,23.61 mg·L-1;与空白对照组相比,通莲汤显著影响MGC803细胞周期中G2期,氟脲嘧啶显著影响MGC803细胞周期中G1期（P＜0.05）;通莲汤和氟脲嘧啶均能显著抑制IKKβ与NF-κB的蛋白表达.结论：通莲汤抑制MGC803细胞生长与抑制细胞于G2期,下调NF-κB通路中IKKβ,NF-κB蛋白的表达有关.

关键词：胃癌 MGC803细胞通莲汤氟脲嘧啶细胞周期 IκB激酶β 核转录因子κB

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二精丸提取工艺的实验研究

时珍国医国药 2010年第9期21卷 2260-2261页

作者：喇孝瑾白素芬刘倩喇万英华北煤炭医学院河北唐山063000

目的优选二精丸的提取工艺。方法采用水提醇沉法,以浸膏得率和多糖含量为指标,用正交实验法优选工艺条件。结果最佳条件为:药材脱脂后,加10倍量水于80℃水浴中温浸3次,每次2h,离心(***-1)20min,合并上清液。加入乙醇使含醇量为80%。结... 详细信息

目的优选二精丸的提取工艺。方法采用水提醇沉法,以浸膏得率和多糖含量为指标,用正交实验法优选工艺条件。结果最佳条件为:药材脱脂后,加10倍量水于80℃水浴中温浸3次,每次2h,离心(***-1)20min,合并上清液。加入乙醇使含醇量为80%。结论优选工艺稳定,安全,简便易行。

关键词：二精丸正交实验提取工艺水提醇沉

Impacts of acupuncture on inflammatory cells in BALF for the asthma model rats

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World Journal of Acupuncture-Moxibustion 2013年第2期23卷 34-37,47页

作者：林清崔建美喇孝瑾杨晓溪孙娜刘慧娟王亚 WANG Fang 河北联合大学中医学院

Objective To explore the impacts of acupuncture on leukocyte （LEU） and eosinophilic granulocyte （EOS） in bronchoalveolar lavage fluid （BALF） in asthma model rats. Methods Thirty SPF-grade male SD rats were randomized into a blank group, a model group and an acupuncture group, 10 rats in each one. In the acupuncture group and the model group, the intraperitoneal injection of ovalbumin （OVA） was adopted to establish asthma model. In the model group, only the animal model was established but no intervention of acupuncture was given, in the acupuncture group, at the same time of the model establishment, acupuncture was provided at Dazhui （大椎 GV 14）, Feishu （肺俞 BL 13） and Fengmen （风门 BL 22）. The intervention was given once every two days, totally 7 treatments were required （2 weeks）. In the blank group, no any management was applied. The lung lavage method was adopted to collect BALF after 2 weeks for the rats in each group. Under optical microscope, the total LEU count was calculated. With Wright＇s staining, the total EOS count was calculated. Results In the model group, LEU and EOS counts in BALF in the rats were increased apparently compared with the blank group （both P〈0.05）. LEU and EOS counts in BALF in the rats in the acupuncture group were reduced apparently compared with the model group （both P〈0.05）. In BALF, the proportion of EOS in LEU in the rats in the model group was higher than that in the blank group （P〈0.05）. In BALF, the proportion of EOS in LEU in the rats in the acupuncture group was lower than that in the model group （P〈0.05）. Conclusion Acupuncture intervention reduces apparently LEU and EOS counts in BALF in asthma model rats so that asthma is relieved.

关键词： acupuncture asthma eosinophilic granulocyte (EOS)