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miR-194抑制套细胞淋巴瘤增殖的机制研究

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miR-194抑制套细胞淋巴瘤增殖的机制研究

作者：唐聪海福建医科大学

学位级别：硕士

目的:本研究通过检测套细胞淋巴瘤（Mantle Cell Lymphoma,MCL）中KDM5B、miR-194的表达及临床意义,在体外研究KDM5B和miR-194表达在MCL中的功能,初步探讨二者在MCL发生的可能机制。方法:1.病例分组:实验组为经病理组织学及免疫组织化... 详细信息

目的:本研究通过检测套细胞淋巴瘤（Mantle Cell Lymphoma,MCL）中KDM5B、miR-194的表达及临床意义,在体外研究KDM5B和miR-194表达在MCL中的功能,初步探讨二者在MCL发生的可能机制。方法:1.病例分组:实验组为经病理组织学及免疫组织化学证实的临床资料完整的套细胞淋巴瘤（MCL）45例;对照组为反应性增生性淋巴结炎30例;2.MCL细胞系:体外实验选用五株Mino、Z-138、Je Ko-1、RF-1、REC-1细胞株;选取Mino细胞和Je Ko-1细胞,构建下述转基因细胞:（1）构建沉默腺病毒KDM5B sh RNA细胞和过表达腺病毒KDM5B-GFP细胞;（2）构建沉默腺病毒miR-194 inhibitor细胞和过表达腺病毒miR-194 mimic细胞;（3）构建共感染腺病毒miR-194 mimic+KDM5B-GFP细胞;（4）选用5例健康志愿者的外周血单个核细胞作为对照组。3.免疫组织化学方法检测病人组织KDM5B蛋白表达;4.MTT法观察腺病毒感染后对细胞增殖的影响;5.流式细胞术检测腺病毒感染后细胞凋亡率的变化;6.荧光定量PCR检测病人组织及腺病毒感染后细胞的KDM5B m RNA及miR-194表达;7.Western Blot检测腺病毒感染后细胞KDM5B蛋白的表达;8.双荧光素酶报告实验检测KDM5B是否是miR-194靶基因;9.通过KDM5B恢复表达实验,检测细胞的增殖情况;10.统计分析:用SPSS19.0软件分析,常规进行方差齐性检验,正态性检验。计量资料实验数据以均数±标准差（mean±SD）表示。单变量两组资料之间的比较采用t检验,多组资料之间的比较采用单因素方差分析;方差不齐采用非参数;两组间相关性分析采用Spearman分析方法。P＜0.05为差异具有统计学意义。结果：1.KDM5B蛋白高表达率在对照组为16.67%,低于MCL组织的48.89%,而对照组中miR-194表达为0.991±0.245,高于MCL的0.223±0.149,差别有统计学意义（P＜0.05）;Spearman等级相关分析显示KDM5B蛋白及miR-194在MCL存在负相关（P＜0.05）;在对5株MCL细胞系实验中也发现类似结果。统计学分析KDM5B、miR-194表达水平与MCL临床特征的关系,发现KDM5B、miR-194表达水平与MCL患者的年龄、性别、淋巴瘤B组症状水平均无相关性（P＞0.05）;而血清β2-MG水平越高,IPI评分越高、Ann-Arbor临床分期越晚,KDM5B表达水平越高、miR-194表达水平越低,有统计学差异（P＜0.05）。2.干扰腺病毒KDM5B sh RNA能够下调Mino和Je Ko-1细胞KDM5B基因m RNA及蛋白的表达,抑制细胞增殖,诱导细胞的凋亡,与对照组相比,差别有统计学意义（P＜0.05）。腺病毒KDM5B-GFP能够上调Mino和Je Ko-1细胞KDM5B基因m RNA及蛋白表达,能促进Mino细胞增殖,抑制Mino细胞凋亡（P＜0.05）,Je Ko-1细胞的增殖、凋亡未见明显变化（P＞0.05）。3.miR-194 mimic感染Mino和Je Ko-1细胞,可下调Mino和Je Ko-1细胞KDM5B基因的蛋白表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡（P＜0.05）。向Mino和Je Ko-1细胞感染miR-194 inhibitor,可上调Mino和Je Ko-1细胞KDM5B基因的m RNA及蛋白表达,能促进Mino细胞增殖,抑制Mino细胞凋亡（P＜0.05）,Je Ko-1细胞的增殖、凋亡未见明显变化（P＞0.05）。4.双荧光素酶报告实验验证在MCL中KDM5B是miR-194靶基因之一,过表达KDM5B部分抵消miR-194 mimic抑制Mino和Je Ko-1细胞增殖的作用。结论:1.MCL患者中KDM5B高表达,而miR-194低表达,二者呈负相关。KDM5B、miR-194表达与MCL患者的血清β2-MG,IPI评分、Ann-Arbor分期密切相关。2.下调KDM5B的表达可抑制细胞增殖及促进凋亡,而上调其表达可促进细胞增殖及抑制凋亡,KDM5B可能是MCL一个癌基因。3.上调miR-194的表达可抑制细胞增殖及促进凋亡,而下调其表达促进细胞增殖及抑制凋亡,miR-194可能是一个MCL抑癌基因。4.KDM5B是miR-194的靶基因之一,miR-194可以通过下调KDM5B的表达,抑制MCL细胞增殖。

关键词：套细胞淋巴瘤 KDM5B miR-194 细胞增殖细胞凋亡

漳州市医疗机构输血科(血库)设置及安全用血检查情况

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中国输血杂志 2013年第1期26卷 59-61页

作者：唐聪海原敏殷苏华福建医科大学附属漳州市医院福建漳州363000 漳州市中心血站

目的检查漳州市医疗机构输血科(血库)基本设置及安全用血情况,提高全市用血安全水平。方法对全市35家用血医疗机构在制度保障、基本硬件设施建设、输血前实验室检查、质量控制、日常工作记录执行情况、输血病历等方面进行现场检查。结果... 详细信息

目的检查漳州市医疗机构输血科(血库)基本设置及安全用血情况,提高全市用血安全水平。方法对全市35家用血医疗机构在制度保障、基本硬件设施建设、输血前实验室检查、质量控制、日常工作记录执行情况、输血病历等方面进行现场检查。结果 35家医院在输血科(血库)基本设置及安全用血情况方面,三级医院较规范,二级医院次之,民营医院不容乐观。结论多数医院尤其是二级医院及民营医院应加大基础设施建设及人才的培养,保证临床用血科学、合理、安全、有效。

关键词：输血科血库安全用血

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双胞胎新生儿RhE溶血病1例

中国输血杂志 2014年第1期27卷 78-79页

作者：唐聪海原敏林小晶福建医科大学附属漳州市医院福建漳州363000

目的探讨双胞胎新生儿RhE溶血病抗体与母体关系。方法患儿血液溶血相关检测项目为微柱凝胶法直接抗球、抗体筛查;总胆红质、间接胆红质等。结果双胞胎新生儿血型均为A型、RhE(+),DAT(+),血样均检测出Ig-G抗-E阳性。结论母婴血型不合双... 详细信息

目的探讨双胞胎新生儿RhE溶血病抗体与母体关系。方法患儿血液溶血相关检测项目为微柱凝胶法直接抗球、抗体筛查;总胆红质、间接胆红质等。结果双胞胎新生儿血型均为A型、RhE(+),DAT(+),血样均检测出Ig-G抗-E阳性。结论母婴血型不合双胞胎子代Rh-HDN临床表现较重,通过换血治疗效果好。

关键词：新生儿溶血病 Ig—G抗E 抗体筛查换血治疗

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输血不良反应相关因素分析

中国实验血液学杂志 2020年第3期28卷 972-976页

作者：唐聪海黄燕雪林艺璇原敏福建医科大学附属漳州市医院输血科福建漳州363000

目的:分析导致发生临床输血不良反应的可能相关因素,初步探讨降低输血不良反应的预防措施。方法:回顾性分析我院2017年1月-2017年6月输注异体血液的2108例病例资料,统计分析常见输血不良反应的发生特点及相关性因素。结果:2108例患者共... 详细信息

目的:分析导致发生临床输血不良反应的可能相关因素,初步探讨降低输血不良反应的预防措施。方法:回顾性分析我院2017年1月-2017年6月输注异体血液的2108例病例资料,统计分析常见输血不良反应的发生特点及相关性因素。结果:2108例患者共输注血液15244次,有178人发生213次输血不良反应,发生率为1.40%,其中男性为1.31%,女性为1.53%,差异无统计学意义(P>0.05)。常见主要输血不良反应是过敏(73.23%)、非溶血性发热反应(FNHTR)(11.74%)、输血相关循环超负荷(TACO)(10.80%)。引起输血不良反应的成分血液类型中,输注单采血小板组的不良反应发生率(4.31%)均明显高于输注冷沉淀和其他成分血液组(P<0.01)。血液病组发生输血不良反应率(2.56%)明显高于免疫性疾病(1.48%)、肿瘤疾病(1.28%)和其他疾病组(1.08%)(P<0.01)。单采血小板组输血史率42.67%(输血不良反应发生率4.31%)明显高于其它组(P<0.01);冷沉淀物组输血史率4.11%(输血不良反应发生率0.45%)明显低于其它组(P<0.05)。疾病类型中血液病组输血史率(48.79%)输血不良反应发生率(2.56%)明显高于其它组(P<0.01)。有输血不良反应的患者药物过敏史率(11.25%)明显高于无输血不良反应的患者药物过敏史率(4.71%)(P<0.01)。结论:发生输血不良反应的主要因素为成分血液类型、疾病类型、输血史、药物过敏史。因此应多因素管理输血患者,降低输血不良反应的发生。

关键词：输血不良反应疾病类型成分血液类型药物过敏

12例急性自身免疫性溶血性贫血患者体外溶血试验配血与输血研究

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中国实验血液学杂志 2014年第6期22卷 1716-1720页

作者：原敏唐聪海吴阿阳杨惠聪甘玮玮张添新黄燕雪徐卫平福建医科大学附属漳州市医院输血科福建漳州363000 厦门大学附属东南医院输血科福建漳州363000

本研究采用体外溶血试验配血方法,为微柱凝胶抗人球蛋白法配血困难的急性自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者筛查配血相容的红细胞。对照组选择26例AIHA患者,采用微柱凝胶抗人球蛋白法,确定配血结果凝集强度最弱的同型供血者红细胞输注。... 详细信息

本研究采用体外溶血试验配血方法,为微柱凝胶抗人球蛋白法配血困难的急性自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者筛查配血相容的红细胞。对照组选择26例AIHA患者,采用微柱凝胶抗人球蛋白法,确定配血结果凝集强度最弱的同型供血者红细胞输注。实验组为12例微柱凝胶抗人球蛋白法配血困难的急性AIHA患者,采用体外溶血试验配血法,选取配血结果出现不溶血的同型供血者红细胞输注。结果表明,体外溶血试验法输血组与微柱凝胶抗人球蛋白法配血组输血效果相比较,差异有显著性意义(P<0.01)。实验组患者平均每次输注去白细胞红细胞悬液2.26单位,输血后患者血红蛋白、网织红细胞及总胆红素等指标变化与输血前相比较,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:在微柱凝胶抗人球法配血困难时,采取体外溶血试配血可以顺利为AIHA患者筛查到相容红细胞。

关键词：体外溶血试验配血凝集不溶血红细胞急性自身免疫性溶血性贫血

体外溶血试验配血有效避免再次发生急性溶血性输血反应研究

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中国实验血液学杂志 2017年第4期25卷 1194-1198页

作者：唐聪海张添新杨惠聪张志坚原敏福建医科大学附属漳州市医院输血科福建漳州363000

目的:为常规配血结果相容但发生急性溶血性输血反应患者,筛查合适的红细胞输注,避免出现溶血性输血反应。方法:采用体外溶血试验为患者筛选不溶血的供血者红细胞输注。结果:采用体外溶血试验配血方法从15袋血液中筛获不溶血红细胞3 U,... 详细信息

目的:为常规配血结果相容但发生急性溶血性输血反应患者,筛查合适的红细胞输注,避免出现溶血性输血反应。方法:采用体外溶血试验为患者筛选不溶血的供血者红细胞输注。结果:采用体外溶血试验配血方法从15袋血液中筛获不溶血红细胞3 U,给患者输血后效果好,无再次发生溶血性输血反应。结论:当常规方法配血结果相容而输血后发生溶血性输血反应时,可用体外溶血试验配血法再次筛查不溶血红细胞供患者输注。

关键词：体外溶血实验伪相容溶血性输血反应不溶血红细胞

熊果酸改善I型糖尿病大鼠胰岛β细胞损伤的实验研究

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中国比较医学杂志 2024年

作者：宋雨张小莉陈换换唐聪河南中医药大学医学院

目的探究熊果酸（UA）对I型糖尿病（T1DM）大鼠TLR4/NF-κB信号通路及Th17/Treg细胞的影响。方法腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制备T1DM大鼠模型，随机分为空白组（Control组）、模型组（Model组）、二甲双胍组（MET组）和熊果酸组（UA... 详细信息

目的探究熊果酸（UA）对I型糖尿病（T1DM）大鼠TLR4/NF-κB信号通路及Th17/Treg细胞的影响。方法腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制备T1DM大鼠模型，随机分为空白组（Control组）、模型组（Model组）、二甲双胍组（MET组）和熊果酸组（UA组）。记录大鼠体重、血糖等一般情况，灌胃6周后采集大鼠外周血、胰腺组织评估胰岛素干预情况。免疫组化观察胰腺组织病理变化；鲎试剂检测血清脂多糖（LPS）含量变化；qRT-PCR法检测胰腺TLR4、MyD88、IκBα、NF-κBp65mRNA的表达，以及转录因子RORγt、Foxp3mRNA的表达；Westernblot法检测胰腺TLR4、MyD88、IκBα、NF-κBp65蛋白的表达，以及转录因子RORγt、Foxp3蛋白的表达；流式细胞术检测外周血Th17、Treg细胞比例变化；ELISA法检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量变化。结果经STZ诱导的糖尿病大鼠经6周灌胃处理，与模型组相比，二甲双胍组大鼠和熊果酸组大鼠空腹血糖（FBG）均明显下降，体重均明升高；胰岛β细胞炎性浸润减少；TLR4、MyD88、IκBα、NF-κBp65、RORγtmRNA和蛋白的表达明显降低；LPS含量明显下降；IκBα、Foxp3mRNA和蛋白表达明显升高；Th17/Treg比值明显下降；TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显下降。结论 UA可通过减少LPS移位，抑制TLR4/NF-κB通路，下调RORγt并上调Foxp3的表达纠正T1DM大鼠Th17/Treg细胞比例失衡来改善大鼠症状。

关键词： I型糖尿病熊果酸 TLR4/NF-κB通路 Th17/Treg细胞

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微柱凝胶法测定红细胞表面C3b及临床意义

中国输血杂志 2010年第9期23卷 725-726页

作者：原敏唐聪海张添新吴阿阳马旭东福建医科大学附属漳州市医院输血科福建漳州363000

红细胞具有免疫功能,在识别,黏附,杀伤抗原,清除免疫复合物,促进吞噬细胞吞噬,增强T细胞和NK细胞活性,调控免疫分子等功能上正在被越来越多的学者所接受和研究[1 ].红细胞表面补体受体CR1(CD35)黏附补体C3b水平直接关系着机体天然免疫... 详细信息

红细胞具有免疫功能,在识别,黏附,杀伤抗原,清除免疫复合物,促进吞噬细胞吞噬,增强T细胞和NK细胞活性,调控免疫分子等功能上正在被越来越多的学者所接受和研究[1 ].红细胞表面补体受体CR1(CD35)黏附补体C3b水平直接关系着机体天然免疫功能的强弱[ 2 ].我们建立了卡式微柱凝胶法检测红细胞表面补体C3b水平,对健康调查对象和恶性肿瘤,甲型(H1N1)流感,急性白血病,鼻窦炎鼻息肉等疾病患者红细胞表面补体C3b水平差异进行调查,并就红细胞表面补体C3b水平测定的临床意义进行探讨

关键词：红细胞表面补体微柱凝胶法患者

房价溢出对居民消费倾向的影响研究——基于房价趋同视角

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宏观经济研究 2024年第1期 114-127页

作者：牛童李永唐聪聪章容洲同济大学经济与管理学院中国宏观经济研究院对外经济贸易大学金融学院

本文基于各地房价同质化视角,通过70个城市的面板数据,实证分析了异地房价溢出对本地居民平均消费水平的影响。结果表明:异地房价对当地房价的同质化溢出会抑制居民消费水平,即使这种影响并未直接反映在后期房价上,居民仍可能因为察觉... 详细信息

本文基于各地房价同质化视角,通过70个城市的面板数据,实证分析了异地房价溢出对本地居民平均消费水平的影响。结果表明:异地房价对当地房价的同质化溢出会抑制居民消费水平,即使这种影响并未直接反映在后期房价上,居民仍可能因为察觉到这一趋势而调整消费行为;三线城市的同质化水平最高且作为主要的房价溢出接收方,相较于一、二线城市,其挤出效应较财富效应和替代效应更明显,所以房价溢出对居民消费水平的削弱作用更加显著;房地产行业依赖度低的城市,居民在受到压力感知情形下对消费支出有更明显的挤出作用,但限购政策对房价溢出具有“屏蔽”功能,起到了一定缓解作用。

关键词：房价溢出居民消费城市等级限购政策