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诺如病毒P2结构域的原核表达及其抗血清制备

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中国生物制品学杂志 2023年

作者：陈健伟李浩明雪薇王斌邓建平陆峙金杜云霄蔡璐唐秋阳李再新张智自贡市疾病预防控制中心四川轻化工大学生物工程学院

目的应用原核表达系统表达并纯化5种基因型（GⅠ. 1、GⅡ. 2、GⅡ. 3、GⅡ. 4、GⅡ. 17）诺如病毒（norovirus,NV）的P2结构域，并制备其抗血清。方法利用生物信息学方法分析不同基因型NV P2序列保守性，合成P2 DNA序列，亚克隆至pET... 详细信息

目的应用原核表达系统表达并纯化5种基因型（GⅠ. 1、GⅡ. 2、GⅡ. 3、GⅡ. 4、GⅡ. 17）诺如病毒（norovirus,NV）的P2结构域，并制备其抗血清。方法利用生物信息学方法分析不同基因型NV P2序列保守性，合成P2 DNA序列，亚克隆至pET24a载体，构建重组原核表达质粒，转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞，IPTG诱导表达。表达的重组P2蛋白纯化后免疫30只雌性BALB/c小鼠，制备抗血清。通过ELISA法检测抗血清的滴度和交叉反应，Western blot法检测抗血清的特异性，点杂交法分析抗血清对野生病毒的识别与结合能力。结果表达的重组P2蛋白相对分子质量约15 000，纯度均达90%以上，GⅠ. 1、GⅡ. 2、GⅡ. 3、GⅡ. 4、GⅡ. 17型P2蛋白表达量分别为60、26.4、19.8、16.3和33.3 mg/L。针对5种基因型NV P2抗原的抗血清滴度均达1∶128 000以上，均能很好地识别自身相应的P2抗原，但不与不相关P2抗原相互作用，均不与重组人A组轮状病毒VP7抗原和重组幽门螺杆菌尿酶抗原发生交叉反应，且对野生型NV具有较好的识别与结合能力。结论利用原核表达系统成功表达并纯化了我国流行的5种基因型NV P2抗原，制备的抗血清滴度较高，特异性良好，为NV快速、现场诊断技术的建立奠定了基础。

关键词：诺如病毒 P2蛋白原核表达抗血清

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基于压缩感知的快速弥散张量成像算法的研究

基于压缩感知的快速弥散张量成像算法的研究

作者：唐秋阳吉林大学

学位级别：硕士

弥散张量成像（DTI， Diffusion Tensor Imaging）是磁共振成像技术的一种。DTI是由一系列不同弥散方向的弥散加权成像（DWI，Diffusion Weighted Image）得到的，主要优点是可以表示组织的细微结构和关联，DTI能测得心肌和脑白质的纤... 详细信息

弥散张量成像（DTI， Diffusion Tensor Imaging）是磁共振成像技术的一种。DTI是由一系列不同弥散方向的弥散加权成像（DWI，Diffusion Weighted Image）得到的，主要优点是可以表示组织的细微结构和关联，DTI能测得心肌和脑白质的纤维方向，而在其他MRI技术中这是不能实现的。为了减少采样数据点、提高图像重建质量，在研究压缩感知现有算法的基础上，进一步将压缩感知理论应用到弥散张量磁共振成像应用中研究了各种采样策略对压缩感知弥散张量磁共振成像的影响，并对传统的压缩感知算法针对性的进行了改进。本文研究了一种利用DTI数据的联合稀疏性质来进行DTI快速成像的压缩感知改进算法，即DCS（Distributed compressed sensing）。 DCS为传统CS方法的延伸方法，它利用已通过大量研究获得的多个信号的先验联合稀疏性质，相比于未使用其联合稀疏性质的传统压缩感知方法而使各独立信号分别重建的情况，可使需要获得的先验信息更少或者在一定的先验信息数量的情况下，而得到更好的重建图像质量。本文中利用仿真和实测的数据来进行试验，数据的弥散方向为6个方向，使用k空间欠采数据来进行重建，欠采因子R（acceleration factor）为2到6，DWIs重建时，算法的最小化问题由解l2l1范数来解决，这也是本文的核心问题。同时也研究了不同信噪比下DCS对于重建质量的影响，结果由DTI各个指标的最小均方根误差RMSE（root-mean-square error）和指标图来衡量。研究可知，仿真数据重建中，DCS方法重建效果比传统的CS方法有一定的优越性，同时受加速因子和信噪比影响，而对于实测数据，当加速因子达到4时，DTI的FA、MD和主特征向量的角度差都显示DCS具有更高的精度。压缩感知中采用有限差分（finite-differences）作为稀疏基时，记为TV(m),稀疏函数也被称作TV (total variation)，是整幅图像中绝对差分的总和。当磁共振图像中目标函数中采用其它稀疏变换时，通常也会包括TV惩罚函数，本文研究了小波函数稀疏基参数和TV稀疏基参数对重建的影响。由于弥散张量自身特性，b0图像和其他弥散方向图像的值有较大区别，这种情况可能使DCS重建图像时b0的重建策略将对重建结果产生较大的影响，针对这种情况，我们研究了b0图像的采样和重建策略对DTI重建质量的影响，分别使用三种采样策略才对DTI进行重建，并且对结果进行了比较，结果表明，不同的采样策略对重建质量有较大影响。研究表明，DCS获得更大的加速，并减少DTI数据的采集时间。

关键词：弥散张量成像分布式压缩感知联合稀疏分布快速成像采样

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外伤性感染性眼内炎患者脱盲因素研究

国际眼科杂志 2022年第8期22卷 1402-1406页

作者：唐秋阳施健张俊芳张淑丹桑爱民石海红南通大学附属医院眼科江苏省南通市226001

目的:探讨影响外伤性感染性眼内炎(PTIE)患者脱盲的因素。方法:回顾性分析2010-01/2020-12在南通大学附属医院眼科就诊的PTIE患者169例169眼临床资料。患者接受玻璃体腔注射抗生素(IVIA)和/或玻璃体切除术(PPV)治疗后,末次随访最佳矫正... 详细信息

目的:探讨影响外伤性感染性眼内炎(PTIE)患者脱盲的因素。方法:回顾性分析2010-01/2020-12在南通大学附属医院眼科就诊的PTIE患者169例169眼临床资料。患者接受玻璃体腔注射抗生素(IVIA)和/或玻璃体切除术(PPV)治疗后,末次随访最佳矫正视力(BCVA)≥0.05为脱盲组(103眼)和BCVA<0.05为单眼盲组(66眼),分析影响患者脱盲的因素。结果:PTIE患者治疗后脱盲率为53.5%。单因素分析显示治疗前BCVA≥手动、不伴有视网膜脱离、眼内炎眼底分级<3级以及未培养出毒力强微生物是患者脱盲的有利因素(P<0.05);多因素Logistic分析显示治疗前BCVA分两组,BCVA≥手动(OR=0.253, 95%CI:0.108~0.592)以及不伴有视网膜脱离(OR=0.241, 95%CI:0.103~0.564)是患者脱盲的有利因素。结论:治疗前BCVA较好、不伴有视网膜脱离、眼内炎眼底分级<3级以及未感染毒力强微生物是PTIE患者最终脱盲的有利因素。

关键词：眼内炎开放性眼外伤盲预后

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外伤性枯草芽孢杆菌性眼内炎的临床分析

中华眼外伤职业眼病杂志 2023年第5期45卷 367-373页

作者：施健唐秋阳张淑丹秦柏张俊芳石海红南通大学附属医院眼科南通226001

目的总结外伤性枯草芽孢杆菌性眼内炎(TBSE)的临床特点、治疗以及预后。方法回顾性病例系列研究。分析南通大学附属医院2010年1月至2021年10月收治TBSE者12例(12眼)的临床资料,所有患者入院初期行局部及全身抗炎治疗,根据病情需要再行... 详细信息

目的总结外伤性枯草芽孢杆菌性眼内炎(TBSE)的临床特点、治疗以及预后。方法回顾性病例系列研究。分析南通大学附属医院2010年1月至2021年10月收治TBSE者12例(12眼)的临床资料,所有患者入院初期行局部及全身抗炎治疗,根据病情需要再行手术治疗。术后随访3~6个月。总结其临床特征、治疗方法及治疗结果。结果所有患者中合并眼内异物者6例,角膜环状浸润者8例,伴角膜溶解者7例,发展为全眼球炎者4例。起病时间均在48 h内,在乡村环境受伤者8例。单纯接受抗生素玻璃体内注射者5例,其中3例后至他院就诊,2例后行眼内容摘除,行玻璃体切除手术联合硅油注入者5例,2例直接行眼内容摘除。末次随访最佳矫正视力≥0.05者2例,光感~0.04者5例,5例为无光感。结论TBSE病情凶险,容易出现角膜环状浸润及角膜溶解,视力预后通常较差。改善预后的关键在于防止角膜溶解基础上及早进行玻璃体切除术。

关键词：眼内炎感染性外伤性杆菌枯草芽孢治疗预后

基于用户偏好对比的智能车载交互质量评价方法

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包装工程 2019年第6期40卷 245-250页

作者：吴昊宇郭钢唐秋阳李文博重庆大学重庆400044

目的解决智能车载系统评价缺乏针对性、指标权重确定缺乏客观依据、被试对主观问卷理解存在偏差和评分主观性强等问题,提高智能车载系统可用性。方法分析人机交互质量对用户偏好影响机理,建立智能车载系统客观评价指标体系,并运用三角... 详细信息

目的解决智能车载系统评价缺乏针对性、指标权重确定缺乏客观依据、被试对主观问卷理解存在偏差和评分主观性强等问题,提高智能车载系统可用性。方法分析人机交互质量对用户偏好影响机理,建立智能车载系统客观评价指标体系,并运用三角模糊数构建客观评价模型,然后招募30名被试对手机导航和车载导航对比实验,通过客观评价指标数据确定客观评价指标权重由此评价两款产品交互质量,并对所建立模型进行验证。结果分析实验结果表明手机导航的交互设计质量更高。结论本文所述基于偏好的智能车载系统客观评价模型可用于智能车载系统可用性评价,对产品的开发和优化具有指导意义,并为人机界面设计评价体系提供了实践方法和理论体系。

关键词：车载系统客观评价可用性手指追踪

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汽车人机交互产品用户满意度度量方法研究

包装工程 2019年第6期40卷 239-244页

作者：钟建唐明清唐秋阳李文博许娜郭钢重庆大学重庆400044

目的研究基于面部表情识别技术的用户满意度客观度量方法。方法以两款车载信息系统为载体,以面部表情识别与BP神经网络算法为技术手段,设计用户分别与两款系统进行人机交互的实验,建立用户面部表情与用户主观满意度的映射模型,并进行用... 详细信息

目的研究基于面部表情识别技术的用户满意度客观度量方法。方法以两款车载信息系统为载体,以面部表情识别与BP神经网络算法为技术手段,设计用户分别与两款系统进行人机交互的实验,建立用户面部表情与用户主观满意度的映射模型,并进行用户满意度预测,对比模型预测值与用户主观量表值,分析得出模型的预测能力,验证度量方法的可行性。结论该模型对用户满意度的预测值与用户主观满意度值的整体均方误差为0.165,实现了在较小误差范围内的准确预测。模型通过识别用户与产品进行人机交互时的面部表情,能有效客观地度量用户对产品的满意度。

关键词：面部表情识别人机交互可用性满意度度量模型 BP神经网络

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髓系细胞触发受体-1在眼病发病中的作用

国际眼科纵览 2021年第6期45卷 519-522页

作者：唐秋阳石海红南通大学附属医院眼科 226001

髓系细胞触发受体-1(triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1)属于免疫球蛋白超家族的细胞表面受体,其信号通路参与炎性反应放大,抑制其通路可降低炎症水平。在感染性角膜炎动物模型及临床患者,感染的角膜组织中TREM-... 详细信息

髓系细胞触发受体-1(triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1)属于免疫球蛋白超家族的细胞表面受体,其信号通路参与炎性反应放大,抑制其通路可降低炎症水平。在感染性角膜炎动物模型及临床患者,感染的角膜组织中TREM-1表达较正常角膜均显著增加,其可扩大角膜炎的炎性反应,与炎性介质以及临床炎症评分正相关。而抑制其信号通路则可不同程度降低角膜炎性反应,对角膜炎的临床预后有重要影响。此外,TREM-1在眼弓形虫病、缺血性视神经病变、视网膜新生血管性疾病动物模型的相关组织中表达也明显增加。目前TREM-1阻断剂LR12已进入二期临床试验阶段。

关键词：髓系细胞触发受体-1 角膜炎眼弓形虫病缺血性视神经病变视网膜新生血管

飞秒激光辅助白内障超声乳化术中激光相关并发症的发生率及其原因

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眼科新进展 2020年第8期40卷 747-750,768页

作者：秦苗苗陈威吴坚陈晓娟杨梅缪建国唐秋阳季敏管怀进南通大学附属医院眼科江苏省南通市226001

目的调查飞秒激光辅助白内障超声乳化术中激光相关并发症的发生率及其原因。方法调查2017年6月至2019年9月在南通大学附属医院眼科行飞秒激光辅助白内障超声乳化术的老年性白内障患者498例(678眼)。术中使用Alcon LenSx飞秒激光行晶状... 详细信息

目的调查飞秒激光辅助白内障超声乳化术中激光相关并发症的发生率及其原因。方法调查2017年6月至2019年9月在南通大学附属医院眼科行飞秒激光辅助白内障超声乳化术的老年性白内障患者498例(678眼)。术中使用Alcon LenSx飞秒激光行晶状体前囊膜切开、预劈核、透明角膜切口以及部分弧形角膜松解切口,随后按标准方法完成白内障超声乳化联合人工晶状体植入术。记录术中与激光相关的并发症并用Adobe Photoshop CC 2017进行量化分析,同时探讨上述并发症发生的原因。结果激光相关的并发症的发生率前囊膜切开不完整为6.34%、前囊膜撕裂为2.65%、劈核不完整为1.03%、角膜切口分离不全为6.49%、角膜切口靠内为25.81%、角膜切口倾斜为2.21%、弧形角膜松解切口偏中心为4.92%、负压环脱失为0.59%、结膜下出血为31.12%及瞳孔缩小为7.23%。以上对应并发症发生的最主要原因分别为眼位偏斜占41.86%、前囊膜切开不完整占55.56%、Ⅳ度硬核白内障占42.86%、老年环占45.45%、眼位偏斜占50.28%、眼位偏斜占53.33%、眼位偏斜占44.44%、患者配合不佳占100.00%、高负压占100.00%及前囊膜切口与虹膜太接近占63.27%。结论飞秒激光辅助白内障超声乳化术虽然精准、微创,但仍然有部分患眼因各种原因而出现激光相关的并发症,眼科手术医师应关注这些并发症的防治。

关键词：飞秒激光白内障超声乳化并发症

血管生成拟态与翼状胬肉初发型及复发型的相关性

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眼科学报 2021年第9期36卷 727-733页

作者：贺梦璇杨铃张俊芳秦柏顾宏卫唐秋阳管怀进石海红南通大学附属医院眼科江苏南通226001

目的:探讨血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)与翼状胬肉初发型及复发型的相关性。方法:采用血小板-内皮细胞黏附分子/过碘酸雪夫(platelet endothelial cell adhesion molecule-1/periodic acid-schiff,CD31/PAS)免疫组织化学双重染色法检测139例翼状胬肉组织(初发型105例;复发型34例)和10例正常结膜中VM的表达,分析VM与初发型及复发型翼状胬肉的相关性及其与患者性别、年龄等因素的关系。原代培养人翼状胬肉成纤维细胞(human pterygium fibroblasts,HPFs),免疫细胞化学染色法鉴定,利用三维培养及PAS染色观察初发型和复发型HPFs构成VM管腔个数的差异。结果:10例正常结膜均未见VM结构,初发型翼状胬肉VM阳性率43.81%,复发型翼状胬肉VM阳性率82.35%,差异具有统计学意义(P0.05)。原代培养的HPFs Vimentin表达阳性,符合成纤维细胞特性。细胞三维培养及PAS染色结果提示HPFs具有构建体外VM模型的能力,且复发型HPFs构成的VM管腔数明显高于初发型,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:翼状胬肉组织中存在VM结构,可作为其血供途径之一。VM与翼状胬肉的复发具有密切关系。

关键词：翼状胬肉血管生成拟态三维培养