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脱水素基因BDN1双元表达载体的构建与农杆菌介导叶盘法转化烟草

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脱水素基因BDN1双元表达载体的构建与农杆菌介导叶盘法转化烟草

作者：唐先兵首都师范大学

学位级别：硕士

随着生物技术的迅速发展，特别是植物基因工程技术的飞速发展，植物耐旱研究已从传统的生理研究转向分子方向的研究。利用植物基因工程技术进行植物耐旱研究，包括耐旱相关基因的克隆、分离、鉴定以及通过遗传转化获得耐旱植株。 ... 详细信息

随着生物技术的迅速发展，特别是植物基因工程技术的飞速发展，植物耐旱研究已从传统的生理研究转向分子方向的研究。利用植物基因工程技术进行植物耐旱研究，包括耐旱相关基因的克隆、分离、鉴定以及通过遗传转化获得耐旱植株。脱水素（dehydrins）是当前植物耐旱研究的一个热点，脱水素通常大量存在于复苏植物、植物种子、或水胁迫条件下的植物体内。在实验中，我们分别构建了以脱水素基因BDN1为目的基因、筛选基因为NPTⅡ 的双元表达载体pBI121BDN1和Bar基因作为抗性筛选基因、在单子叶启动子Ubiquitin promoter启动下表达的基因枪表达载体 pAHC25BDN1。以及利用6-磷酸-海藻糖合酶基因（TIS）作为目的基因， Bar基因作为抗性筛选基因，在单子叶启动子Ubiquitin promoter启动下表达的基因枪表达载体pAHC25TPS。将构建好的双元表达载体 pBI121BDN1转入农杆菌中，用农杆菌介导叶盘燃化烟草W38。共获得20株具有Kan抗性的转化烟草。SDS法提取转化烟草植株的总DNA，并用PCR初步鉴定有8株烟草出现与目的基因大小相同的DNA条带（800bp左右）其余为Kan假阳性。进一步用DIG标记的Southern杂交进行检测，有两株烟草出现相应的杂交带。转化烟草耐旱能力的检测正在进行中。单子叶表达载体pAHC25BDN1、pAHC25TPS转化玉米、草坪草的工作也正在进行中。

关键词：植物耐旱脱水素农杆菌介导叶盘法转化 DIG标记Southern 杂交

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百吨级整体框架式支架搬运车动力学分析研究

煤炭科学技术 2019年第S2期47卷 85-91页

作者：郭爱军唐先兵神华神东煤炭集团有限责任公司陕西神木719315 航天重型工程装备有限公司湖北武汉430040

针对井下煤矿开采过程中,研制开发出用于搬家倒面的运输百吨级液压支架搬运车,整车采用整体框架式设计,采用整体式U型车架、液压独立悬架、多连杆转向机构等挂件技术,通过整车搬运作业特点和井下路面特性,进行整车系统、总成间的匹配优... 详细信息

针对井下煤矿开采过程中,研制开发出用于搬家倒面的运输百吨级液压支架搬运车,整车采用整体框架式设计,采用整体式U型车架、液压独立悬架、多连杆转向机构等挂件技术,通过整车搬运作业特点和井下路面特性,进行整车系统、总成间的匹配优化设计,确保产品综合性能指标最优;通过整车动力学分析,构建整车动力学模型,对整车进行6种工况的分析计算,分析结果可知:支架搬运车的各部分在设定的各个工况下第一主应力、vonMises等效应力以及位移都在安全范围之内,支架车满足使用要求。

关键词：支架搬运车车架有限元分析强度

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矿用百吨级蓄电池铲板车研发

煤炭科学技术 2019年第S2期47卷 92-96页

作者：刘孔林唐先兵神华神东煤炭集团有限责任公司陕西神木719315 航天重型工程装备有限公司湖北武汉430040

为满足百吨级8.8 m超大采高支架搬运需求,以搬运安全、提高效率为目标,提出一种面向井下针对大采高工艺投入使用的8.8 m百吨级液压支架的搬运车。该搬运车为机、电、液一体化产品,针对井下搬家倒面作业应用,用于短距离搬运和安装时摆放... 详细信息

为满足百吨级8.8 m超大采高支架搬运需求,以搬运安全、提高效率为目标,提出一种面向井下针对大采高工艺投入使用的8.8 m百吨级液压支架的搬运车。该搬运车为机、电、液一体化产品,针对井下搬家倒面作业应用,用于短距离搬运和安装时摆放超大采高支架,解决高8.8 m质量近100 t液压支架的搬运工作。研究表明:整车通过各项试验的考核,各项性能满足8.8 m大采高支架的安装及回撤搬运要求。

关键词：百吨级蓄电池铲板车

新一代广谱抗生素药物筛选靶点肽脱甲酰基酶的研究进展

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中国新药杂志 2004年第12期13卷 1093-1098页

作者：唐先兵司书毅张月琴中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所北京100050

肽脱甲酰基酶(peptide deformylase,PDF)存在于所有原核生物中,是其生长、代谢、繁殖必不可少的关键酶,但不存在于人类与其他哺乳动物细胞内,因而被视为新一代广谱抗生素药物筛选的理想靶点。现介绍PDF的结构、功能、理化性质以及作为... 详细信息

肽脱甲酰基酶(peptide deformylase,PDF)存在于所有原核生物中,是其生长、代谢、繁殖必不可少的关键酶,但不存在于人类与其他哺乳动物细胞内,因而被视为新一代广谱抗生素药物筛选的理想靶点。现介绍PDF的结构、功能、理化性质以及作为药物筛选靶点的优良特点,此外,还简单介绍该酶与其抑制剂相互作用机制和以该酶为靶点新药研究进展。

关键词：肽脱甲酰基酶广谱抗生素抗菌药物筛选靶点

肠球菌肽脱甲酰基酶在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达及其活性检测

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中国生物工程杂志 2004年第3期24卷 63-66页

作者：唐先兵司书毅张月琴中国医学科学院医药生物技术研究所北京100050

肽脱甲酰基酶 (peptidedeformylase ,PDF)存在于所有原核生物中是其生长、代谢、繁殖必不可少的关键酶 ,但不存在于人类与其他哺乳动物细胞内 ,因而被视为新一代广谱抗生素药物筛选的理想靶点。将肠球菌 (Enterococcusfaecium)肽脱甲酰... 详细信息

肽脱甲酰基酶 (peptidedeformylase ,PDF)存在于所有原核生物中是其生长、代谢、繁殖必不可少的关键酶 ,但不存在于人类与其他哺乳动物细胞内 ,因而被视为新一代广谱抗生素药物筛选的理想靶点。将肠球菌 (Enterococcusfaecium)肽脱甲酰基酶基因连接到高效蛋白表达载体pET 30 A( + )中 ,并转入宿主大肠杆菌BL2 1 (DE3)中进行诱导表达。在该基因的诱导表达中 ,采用不同表达条件进行诱导表达 ,最终获得表达效率极高且可溶的肽脱甲酰基酶。从宿主细胞中提取分离该酶 ,并进行酶活性检测。

关键词：肠球菌肽脱甲酰基酶大肠杆菌靶点表达活性

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多轴专用汽车转向传动机构的设计

专用汽车 2006年第8期 31-33页

作者：唐先兵陈先枝湖北三江万山特种车辆有限公司湖北孝感432000

以多轴专用车为研究对象,在对转向传动机构的数学模型的分析计算的基础上,介绍了多轴汽车的转向传动机构的工作原理和设计方法。

关键词：多轴专用车转向传动机构工作原理

双向奔赴共建共赢——雨溆两地对口帮扶结硕果

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中国乡村振兴 2023年第11期 38-40页

作者：陈小勇唐先兵湖南省溆浦县社科联湖南省溆浦县乡村振兴局

志合者,不以山海为远;同心者,定能攻坚克难。虽相距300公里,但在通往乡村振兴的大道上,湖南省长沙市雨花区与怀化市澈浦县始终心连心、手挽手、肩并肩。2022年,湖南省委、省政府将澈浦县纳入省级乡村振兴重点帮扶县。雨澈两地按照“113... 详细信息

志合者,不以山海为远;同心者,定能攻坚克难。虽相距300公里,但在通往乡村振兴的大道上,湖南省长沙市雨花区与怀化市澈浦县始终心连心、手挽手、肩并肩。2022年,湖南省委、省政府将澈浦县纳入省级乡村振兴重点帮扶县。雨澈两地按照“1131”工作思路,以“一园一品一机制”为抓手,扎实做好对口帮扶工作,推动一系列成果落实落地。

关键词：乡村振兴对口帮扶长沙市雨花区工作思路手挽手共建共赢怀化市攻坚克难

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植物耐旱与基因工程

植物杂志 2001年第2期28卷 3-4页

作者：唐先兵吴贤婷刘沛首都师范大学生物系98级

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多轴专用车底盘轴荷估算方法

专用汽车 2004年第3期 27-28页

作者：尹俊峰唐先兵詹江中南大学机电工程学院研究生院湖北孝感432100 国营万山特种车辆制造厂湖北孝感432100

在理论计算和实践经验的基础上 ,论述和介绍了多轴 (三轴及三轴以上 )

关键词：专用车底盘轴荷估算