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GhROP6及其互作因子GhGDI1在棉花抗黄萎病中的功能研究

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GhROP6及其互作因子GhGDI1在棉花抗黄萎病中的功能研究

作者：周雪慧华中农业大学

学位级别：硕士

棉花是我国纺织品行业的重要原料来源。在实际生产中,棉花种植受到的最大威胁之一便是黄萎病。探究棉花抗病机制,寻找抗性基因,创新种质资源对棉花可持续发展意义重大。ROP(Rho of plant)是植物特有的小G蛋白。已有研究表明ROPs基因在... 详细信息

棉花是我国纺织品行业的重要原料来源。在实际生产中,棉花种植受到的最大威胁之一便是黄萎病。探究棉花抗病机制,寻找抗性基因,创新种质资源对棉花可持续发展意义重大。ROP(Rho of plant)是植物特有的小G蛋白。已有研究表明ROPs基因在水稻、拟南芥、大麦等植物中参与抗病反应,但目前对棉花ROPs基因家族的鉴定报道很少。本研究鉴定了陆地棉ROPs家族,并探讨了GhROP6及其互作因子GhGDI1在棉花抗黄萎病中的功能。主要研究结果如下:1、在陆地棉数据库中鉴定到28个ROPs,进化树分析表明陆地棉ROPs家族可分为四个亚家族。氨基酸序列比对发现GhROPs都含有ROP蛋白结构,包括四个GTP或GDP结合域、与下游靶蛋白结合的效应子区域和C末端的可变区域。染色体定位分析发现陆地棉ROPs家族有3个基因特异分布在D亚基因组,1个基因定位于scaffold,其余24个基因对称分布在A亚基因组和D亚基因组中。组织表达模式分析发现GhROPs在不同组织中的表达量差异较大,在花瓣、种子和纤维发育过程中的表达量较高,这表明ROPs在棉花中具有相对的组织特异性,功能上可能存在特异性分化。转录组分析发现GhROP6在大部分组织中的表达丰度较高。2、亚细胞定位试验表明GhROP6及CA-GhROP6(组成型激活态,Constitutively active)和DN-GhROP6(功能失活态,Dominant negative)均定位于细胞膜。接种鉴定分析发现,CA-GhROP6超表达拟南芥对黄萎病的抗性显著提高,DN-GhROP6超表达拟南芥更感黄萎病。激素和木质素含量测定发现CA转基因系CA2和CA3的JA-Ile、木质素含量均高于WT,但DN转基因系DN18和DN19的JA-Ile、木质素含量均低于WT。基因表达量检测发现,CA2和CA3的JA信号和木质素合成路径相关基因表达水平高于WT,DN18、DN19的JA信号和木质素合成路径相关基因表达水平低于WT。以上结果说明GhROP6参与JA信号和木质素合成路径介导植物对黄萎病菌抗性,组成型激活GhROP6增强拟南芥对黄萎病菌抗性。3、通过酵母双杂鉴定和双分子荧光互补试验证实GhROP6可以与GhGDI1互作。组织表达模式发现,GhGDI1在根、花瓣、子房和柱头中的表达量较高。接种病原后的表达分析发现,GhGDI1在棉花接种黄萎病菌48 h后,表达水平显著上调。4、利用VIGS抑制GhGDI1表达会显著增强棉花对黄萎病菌抗性。激素含量测定发现抑制GhGDI表达的植株中JA和JA-Ile的含量显著升高。木质素含量测定结果显示,抑制GhGDI表达的植株中木质素含量增加。基因表达量检测发现,抑制GhGDI表达提升JA信号路径相关基因LOX2、AOS4、OPR3-3和ERF2的表达量以及木质素合成代谢相关基因PAL-1、4CL-1、HCT和F5H-1的表达水平。这表明GhGDI1负调控JA信号和木质素合成影响棉花对黄萎病菌抗性。以上研究表明GhROP6与其互作因子GhGDI1可调控JA信号和木质素合成路径来影响棉花对黄萎病菌的抗性,但是两者的抗病分子机制及具体的互作方式需进一步探究。

关键词：陆地棉黄萎病 GhROP6 GhGDI1 茉莉酸木质素

GhROP6通过调控茉莉酸合成与木质素代谢参与棉花抗黄萎病反应

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棉花学报 2022年第2期34卷 79-92页

作者：周雪慧高二林王钰静李焱龙袁道军朱龙付华中农业大学/作物遗传改良国家重点实验室武汉430070

【目的】克隆抗病相关基因Gh ROP6,解析其作用机制,为开展棉花抗病分子育种提供理论基础。【方法】利用生物信息学方法系统分析了陆地棉Rho鸟苷三磷酸酶基因(Rho-related guanosine triphosphatase from plants, ROP)家族成员在染色体... 详细信息

【目的】克隆抗病相关基因Gh ROP6,解析其作用机制,为开展棉花抗病分子育种提供理论基础。【方法】利用生物信息学方法系统分析了陆地棉Rho鸟苷三磷酸酶基因(Rho-related guanosine triphosphatase from plants, ROP)家族成员在染色体上的分布及组织表达模式。克隆了GhROP6 (Gh_A01G1392.1)基因,通过实时荧光定量聚合酶链式反应、病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing, VIGS)技术、拟南芥遗传转化技术及代谢物测定等对该基因进行功能分析。【结果】在陆地棉中鉴定到28个ROP,其编码的多肽均含有ROP结构,包括4个GTP/GDP结合域、与下游靶蛋白结合的效应结构域和C末端的可变区域。染色体定位分析发现陆地棉ROP家族中24个基因对称分布在A亚基因组和D亚基因组中,另有3个基因分布在D亚基因组。实时荧光定量聚合酶链式反应分析发现,GhROP6在棉花不同器官表达量不同,在花瓣、柱头、开花后10 d的纤维中表达量较高,并受茉莉酸甲酯诱导上调表达。抑制GhROP6表达会降低茉莉酸生物合成相关基因GhLOX1、GhOPR3-1、Gh OPR3-3、GhAOC1、Gh AOS和茉莉酸信号通路相关基因Gh MYC2的表达水平,削弱木质素合成相关基因GhCCR-1、GhF5H-1、GhCCoAOMT-2和GhCCoAOMT-3的表达,从而降低棉花对黄萎病的抗性;超表达组成型激活的GhROP6能增加转基因拟南芥茉莉酸-异亮氨酸含量和木质素含量,增强其对黄萎病菌抗性。【结论】GhROP6可能通过茉莉酸合成和信号通路以及木质素合成代谢参与棉花抗黄萎病反应。

关键词：棉花黄萎病 GhROP6 抗病性茉莉酸木质素信号通路

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江苏果蔬供应链物流系统建设探析

江苏农业科学 2013年第4期41卷 414-417页

作者：金丽馥周雪慧江苏大学管理学院江苏镇江212013

通过分析江苏果蔬产业的现状及物流系统存在的问题,应用供应链系统管理思想改建当前江苏果蔬物流系统,以提高果蔬产业的发展质量,促进产业升级,为江苏果蔬产业更好、更快地发展提供新思路。

关键词：果蔬供应链物流系统建设探要

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乙型肝炎表面抗原低效价阳性价值调查

人民军医 1992年第9期35卷 34-35页

作者：潘华周雪慧刘彦芳空军昆明医院

众所周知,HBsAg反向被动血凝法(RPHA)是临床诊断乙肝病毒(HBV)感染应用最广泛的方法,其高效价阳性的乙肝符合率几乎达100%。但是,RPHA法低效价阳性中有关假阴性,假阳性,尤其是假阴性的报道较少。我们用酶联免疫吸附试验(EIA)对326份RPH... 详细信息

众所周知,HBsAg反向被动血凝法(RPHA)是临床诊断乙肝病毒(HBV)感染应用最广泛的方法,其高效价阳性的乙肝符合率几乎达100%。但是,RPHA法低效价阳性中有关假阴性,假阳性,尤其是假阴性的报道较少。我们用酶联免疫吸附试验(EIA)对326份RPHA法效价1:2～1:16的血清进行对照检查,现将结果报道如下。材料和方法 1.材料来源昆明某设计院1600余人体检中检出的326例HBsAg RPHA低效价阳性者,其中,效价为1:2者111例,1:4者136例,1:8者53例,1:16者26例。 2.

关键词：乙型肝炎表面抗原诊断性实验

基于思政案例的《作业治疗学》教学方法探索及实践研究

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才智 2024年第2期 165-168页

作者：孙瑞雪周雪周启慧佳木斯大学康复医学院护理学院

《作业治疗学》属于一门理论性与实践性相对较强的学科，充分体现了“以人为核心”的课程基础理论与模式，其紧紧围绕“活动”“机能”及“参与”障碍及其背景因素之间的相互作用进行，贯穿于患者康复始终。近年来，随着现代康复治疗学... 详细信息

《作业治疗学》属于一门理论性与实践性相对较强的学科，充分体现了“以人为核心”的课程基础理论与模式，其紧紧围绕“活动”“机能”及“参与”障碍及其背景因素之间的相互作用进行，贯穿于患者康复始终。近年来，随着现代康复治疗学的不断发展，《作业治疗学》教学成为当前研究的热点。作为一名合格的康复治疗师，除了需要具备扎实的理论基础外，亦需要具有娴熟的专业技能，树立正确的“三观”及社会责任感。因此，在《作业治疗学》教学过程中融入理想信念，强化其道德培养，形成良好的职业素养，不仅是社会主义核心价值观的体现，亦是医院及社会所需。通过设计思政案例，强调思政案例在《作业治疗学》教学中的作用及价值，能实现知识、思想及积极情感相互融合的教学效果；通过融入思政元素，能拓展课程思政的构建。

关键词：《作业治疗学》思政案例教学方法教学效果社会主义核心价值观

大鼠单克隆抗体——Ⅶ.用降植烷和福氏佐剂预处理大鼠后腹水产生及单克隆抗体产量的增加

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单克隆抗体通讯 1990年第1期6卷 70-72页

作者： J.P.Kints 周雪慧

作者研究了腹腔注射降植烷、福氏不完全佐剂(IFA)以及上述两种佐剂的混合物(V/V)(称PIFA)对Louvain大鼠腹水产生及单克隆抗体(McAb)产量的影响。当腹腔注射杂交瘤或免疫细胞瘤细胞的同时注射2ml PIFA可获得最佳结果。若与未经处理的对... 详细信息

作者研究了腹腔注射降植烷、福氏不完全佐剂(IFA)以及上述两种佐剂的混合物(V/V)(称PIFA)对Louvain大鼠腹水产生及单克隆抗体(McAb)产量的影响。当腹腔注射杂交瘤或免疫细胞瘤细胞的同时注射2ml PIFA可获得最佳结果。若与未经处理的对照大鼠相比,腹水产生增加4.7倍,单克隆抗体产量增加6倍多。大鼠-大鼠杂交瘤系统有以下优点:①在小鼠系统不适宜的情况下。

关键词：大鼠单克隆抗体降植烷福氏佐剂

基于岗位胜任力的一线班组长培养模式研究——以厦门A企业为例

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海峡科学 2019年第5期 74-76页

作者：周雪慧厦门华天涉外职业技术学院

A企业近年来发展快速,发展前期主抓市场拓展及车间产量提高,忽视班组人员培训,班组长采用直接任命和外聘方式,导致班组长岗位胜任能力跟不上企业发展。而班组长素质高低直接关系到班组管理水平,培育具有岗位胜任力的高素质班组长,决定... 详细信息

A企业近年来发展快速,发展前期主抓市场拓展及车间产量提高,忽视班组人员培训,班组长采用直接任命和外聘方式,导致班组长岗位胜任能力跟不上企业发展。而班组长素质高低直接关系到班组管理水平,培育具有岗位胜任力的高素质班组长,决定了企业的各项生产计划能否按期、按量、按质、安全地完成,是企业的重要工作之一。该文通过分析A企业班组长培养模式现状,提出构建基于岗位胜任力培训多能工、储备班组长,从中选拔合格班组长的培养模式。

关键词：车间班组长岗位胜任力企业管理

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浅谈临床实验室管理

中华临床医学卫生杂志 2007年第2期5卷 82-83页

作者：周雪慧解放军478医院检验科云南昆明650200

21世纪将是科学技术，特别是生物科学迅速发展的时代，随着生命奥秘不断被提示，将会有更多更新的技术应用于检验医学，特别是近年来，我国检验医学迅速发展，检验设备不断更新，手工为主的操作已被自动化仪器替代，影响检验质量的主要... 详细信息

21世纪将是科学技术，特别是生物科学迅速发展的时代，随着生命奥秘不断被提示，将会有更多更新的技术应用于检验医学，特别是近年来，我国检验医学迅速发展，检验设备不断更新，手工为主的操作已被自动化仪器替代，影响检验质量的主要因素也由技术人员个人水平转换为实验室整体管理水平。从医学检验到检验医学的转变，使检验科的工作定位和观念也发生了变化，基础医学的发展与临床医学的密切结合，要求实验室的工作更加密切地结合临床，不断地与临床医护人员进行学术交流和信息沟通，把有限的实验数据变为高效的诊断信息，更多地，更直接地参与临床的诊断和治疗。临床实验室主要服务对象是临床，服务临床，服务病人是我们一切工作出发点和归宿。那么临床和病人对检验科的要求就是及时、准确地提供检验报告，以协助临床医生为病人及时作出正确诊断。如何才能做到这一点，这就需要更规范、更科学的科学管理办法，本文就《临床实验室管理》从几个角度阐述了一些体会和看法。

关键词：临床实验室管理检验医学临床医护人员诊断信息科学技术服务对象自动化仪器生物科学

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浅谈土家族传统观念转型

清江论坛 2005年第1期 66-67页

作者：周雪慧宣恩县政协

恩施州土家族传统伦理道德的不断更新和转型影响着本地经济与社会的发展。土家族传统伦理道德的现代转型要抛弃农耕文化观念,逐步适应、建构社会主义市场经济的价值体系,以便营造良好的经济发展软环境。

关键词：创新转型传统伦理道德土家族