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泡球蚴囊液对原代培养大鼠肝细胞增殖影响的初步研究

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泡球蚴囊液对原代培养大鼠肝细胞增殖影响的初步研究

作者：周晓涛新疆医科大学

学位级别：硕士

目的1.成功建立大鼠肝细胞的无血清原代培养体系。2.探讨泡球蚴囊液对体外无血清原代培养大鼠肝脏细胞增殖的影响。方法1.以Wistar大鼠作肝细胞供者,采用胶原酶肝脏原位灌流消化法分离大鼠肝细胞,并以1×106的密度接种于I型胶原铺底的直... 详细信息

目的1.成功建立大鼠肝细胞的无血清原代培养体系。2.探讨泡球蚴囊液对体外无血清原代培养大鼠肝脏细胞增殖的影响。方法1.以Wistar大鼠作肝细胞供者,采用胶原酶肝脏原位灌流消化法分离大鼠肝细胞,并以1×106的密度接种于I型胶原铺底的直径35mm的培养皿,分别采用血清和无血清培养24h和48h,并在肝细胞形态学和肝细胞增殖指数上对两者进行比较,建立大鼠肝细胞无血清原代培养体系。2.大鼠肝细胞无血清培养体系建立后,分别用无菌的泡球蚴囊液及无血清培养液与大鼠肝细胞共培养24h和48h,培养期间用荧光倒置显微镜观察大鼠肝细胞的形态学改变,用流式细胞仪测定大鼠肝细胞的细胞周期;同时将分离所得的大鼠肝细胞以1×105的密度接种于I型胶原铺底的96孔培养板,无血清培养后,采用MTT法检测泡球蚴囊液对大鼠肝脏细胞是否有毒性作用。结果1.大鼠肝细胞无血清培养体系的建立:大鼠肝细胞活细胞分离存活率>90%,与血清原代培养的肝细胞相比,无血清原代培养的肝细胞生长良好,24h和48h肝细胞增殖指数略微增加,差异无统计学意义(P>0.05)。2.与对照组相比,与泡球蚴囊液共培养的肝细胞贴壁生长良好;MTT法显示泡球蚴囊液对肝细胞无细胞毒性作用;泡球蚴囊液处理24小时后肝细胞增殖指数(PI)由82.0%±6.0%降至49.35%±4.0%;处理48小时后肝细胞增殖指数(PI)由67%±10%降低至27.61%±6%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.成功建立大鼠肝细胞无血清培养体系。2.泡球蚴囊液对于体外培养的大鼠肝细胞无毒害作用,但对肝细胞的增殖有一定的抑制作用。

关键词：泡球蚴囊液大鼠肝细胞 MTT 细胞增殖

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实践自由与马克思法哲学的当代思维

甘肃社会科学 2015年第2期 43-46页

作者：李朝东周晓涛西北师范大学马克思主义学院兰州730070

现代社会个性的张扬与社会发展的内在协调要求之间日益加深的矛盾,使现代法权的自由观重新回到了人们关注的视野。许多学者力图通过重新解读黑格尔法哲学中关于自由以及将自由纳入具体社会领域加以考虑的思想,找到个人自由与公共自由和... 详细信息

现代社会个性的张扬与社会发展的内在协调要求之间日益加深的矛盾,使现代法权的自由观重新回到了人们关注的视野。许多学者力图通过重新解读黑格尔法哲学中关于自由以及将自由纳入具体社会领域加以考虑的思想,找到个人自由与公共自由和解的途径。其实,马克思的法哲学中关于实践的自由观更加深刻地分析了自由与法的现实物质基础、阶级基础以及社会历史条件,这对于我国当代从自由的角度思考马克思主义的实践法哲学之内在特征有重要的意义。

关键词：马克思法哲学实践的自由法的本质历史逻辑法的当代思维

pET30a-CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4)重组质粒的构建及表达产物的纯化与鉴定

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中国病原生物学杂志 2023年第2期18卷 185-189,196页

作者：李艳敏赵商岐马西智郑佳龚巧巧丁剑冰周晓涛新疆医科大学基础医学院免疫学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的构建pET30a-CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4)原核表达质粒,诱导表达后纯化,获得重组蛋白CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4),并对其免疫学特性进行初步鉴定,对其空间结构进行预测。方法利用DNA重组技术构建重组质粒pET30a-CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4),将测序正确的质粒转化至*** BL21(DE)菌株中,分别采用不同浓度的IPTG在不同诱导时间及温度下诱导表达重组蛋白。取菌液超声破碎,SDS-PAGE分析上清及沉淀中蛋白的表达;通过镍柱亲和层析法纯化蛋白并进行Western blot鉴定。通过生物信息学技术,利用SOPMA、I-TASSER在线数据库预测重组蛋白CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4)的空间结构。结果成功构建pET30a-CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4)重组质粒,转化至*** BL21(DE)后诱导表达相对分子质量为53×10^(3)的重组蛋白CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4)。SDS-PAGE分析CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4)重组蛋白在IPTG浓度为0.7 mmol/L,37℃、4 h条件下上清中表达量较高。镍柱层析纯化用20 mmol/L咪唑浓度洗脱的蛋白浓度及纯度较高。Western blot检测重组蛋白CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4)能被相应抗体识别,反应条带位于53×10^(3)处,与预期相符。生物信息学在线软件分析CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4)中各蛋白均能正常折叠,未对优势表位产生影响。结论利用原核表达成功获得CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4)重组蛋白,并预测出该蛋白的三维结构模型,为细粒棘球蚴重组疫苗的研制提供了重要的实验依据。

关键词：细粒棘球蚴重组质粒 CTLA-4IgV-EgG1Y162-2(4) 原核表达

核心稳定性训练联合重心转移训练对脑卒中偏瘫患者平衡能力及步态的影响

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反射疗法与康复医学 2023年第3期4卷 79-82页

作者：白杨周晓涛马贺潘云泽白城市第三人民医院康复医学科吉林白城137100

目的探讨核心稳定性训练联合重心转移训练对脑卒中偏瘫患者平衡能力及步态的影响.方法选择2020年7月—2022年5月我院收治的78例脑卒中偏瘫患者,根据随机数字表法分为两组,每组39例.对照组进行重心转移训练,观察组在对照组基础上进行核... 详细信息

目的探讨核心稳定性训练联合重心转移训练对脑卒中偏瘫患者平衡能力及步态的影响.方法选择2020年7月—2022年5月我院收治的78例脑卒中偏瘫患者,根据随机数字表法分为两组,每组39例.对照组进行重心转移训练,观察组在对照组基础上进行核心稳定性训练,两组训练均持续3个月.对比两组下肢功能、平衡能力及步态参数.结果两组干预前膝关节伸膝肌峰力矩、膝关节屈膝肌峰力矩、Berg平衡量表(BBS)评分、步频、步速、跨步长比率比较,组间差异无统计学意义(P>0.05);观察组干预后膝关节伸膝肌峰力矩、膝关节屈膝肌峰力矩均高于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05);观察组干预后BBS评分为(42.29±4.56)分,高于对照组的(37.71±4.15)分,差异有统计学意义(P<0.05);观察组干预后步频、跨步长比率均高于对照组,步速快于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).结论将核心稳定性训练与重心转移训练联合应用于脑卒中偏瘫患者中,能显著提升其下肢功能,增强平衡能力,改善患者步态,值得临床应用.

关键词：脑卒中偏瘫核心稳定性训练重心转移训练下肢功能平衡能力步态

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课程思政在医学免疫学教学中的应用初探

教育教学论坛 2023年第35期 157-160页

作者：周晓涛李艳敏徐琦新疆医科大学基础医学院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830011

课程思政是为实现立德树人而形成的一种将思政元素融入各类专业学科的综合教育理念。医学免疫学作为21世纪推动生命科学发展的三大前沿学科以及支柱型学科之一,是医学领域基础研究的代表性学科,更是医学生重要的基础理论学习课程。基于... 详细信息

课程思政是为实现立德树人而形成的一种将思政元素融入各类专业学科的综合教育理念。医学免疫学作为21世纪推动生命科学发展的三大前沿学科以及支柱型学科之一,是医学领域基础研究的代表性学科,更是医学生重要的基础理论学习课程。基于其原理深奥、内容抽象、更新速度快等特点,在教学过程中深入挖掘思政元素并贯穿医学生的教育全过程,发挥对医学生的价值引领作用,使他们明确自己的时代使命和责任担当,全面发展医学生的核心素养,以期实现教书育人一体化。

关键词：课程思政医学免疫学医学生综合素养

新冠肺炎疫情对基础医学专业医学免疫学教学方式的启示

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高教学刊 2022年第22期8卷 108-111页

作者：赵云娟王松徐琦周晓涛徐茜彭磊马海梅新疆医科大学基础医学院免疫学教研室新疆乌鲁木齐830011 乌鲁木齐海关新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院微生物学教研室新疆乌鲁木齐830011

基础医学专业学生旨在成为兼具教学、科研、基础与临床相结合的医学高级专门人才。医学免疫学是基础医学专业学生的必修课之一,有针对性的医学免疫学教学思考和设计显得尤为重要。医学免疫学教学应充分利用包括新冠肺炎在内的疾病、网... 详细信息

基础医学专业学生旨在成为兼具教学、科研、基础与临床相结合的医学高级专门人才。医学免疫学是基础医学专业学生的必修课之一,有针对性的医学免疫学教学思考和设计显得尤为重要。医学免疫学教学应充分利用包括新冠肺炎在内的疾病、网络资源等促进课程改革,将传统教材内容与临床疾病相结合,同时结合疫情期间的感人故事等,培养基础医学专业学生们的使命感、辩证思维能力、全局意识等,全方位开展生物时代医学生的教育。

关键词：新冠肺炎疫情医学免疫学基础医学专业教学

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想象的现象学分析

山西大学学报(哲学社会科学版) 2015年第4期38卷 23-29页

作者：李朝东周晓涛沈斌西北师范大学哲学与政治学研究院

文章通过对想象所属的行为类型的分析,解释了想象行为的"非现时性"和"当下化"或"再现"的意向性特征,最后通过与回忆和期望的比较分析,认为由感知以及奠基于其上的回忆、想象和期望,共同构成了我们丰富多彩的生活。

关键词：感知想象立义当下化回忆

SRTP在病原学重点学科创新型人才培养中的作用

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中国免疫学杂志 2013年第9期29卷 986-988页

作者：丁剑冰王松王红英周晓涛新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011

SRTP即大学生科研训练计划（Student researeh training program,SRTP）,是指高校为了培养大学生的创新意识、科研精神,切实提高大学生的创新能力和实践能力而开展的一项活动。项目的开题、实施、总结和答辩均由学生自主完成,教师仅参... 详细信息

SRTP即大学生科研训练计划（Student researeh training program,SRTP）,是指高校为了培养大学生的创新意识、科研精神,切实提高大学生的创新能力和实践能力而开展的一项活动。项目的开题、实施、总结和答辩均由学生自主完成,教师仅参与指导和解决实验经费,学生参加该项目,

关键词：人才培养重点学科创新型病原学科研精神大学生训练计划创新意识

EG14-3-3真核表达蛋白的纯化及空间结构的生物信息学预测

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中国病原生物学杂志 2022年第5期17卷 532-536页

作者：赵商岐郑佳李艳敏张传山贾海英龚巧巧林仁勇周晓涛新疆医科大学基础医学院免疫学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床研究院新疆维吾尔自治区人民医院检验科

目的构建真核表达载体pcDNA3.1-EG14-3-3-myc-his,经表达、纯化后获得融合蛋白EG14-3-3-myc-his,并通过生物信息学预测EG14-3-3蛋白的空间结构。方法以pet41a-EG14-3-3为模板PCR扩增EG14-3-3基因的CDS区,经限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后连接到真核表达质粒pcDNA3.1-myc-his A(-)中,构建真核表达质粒pcDNA3.1-EG14-3-3-myc-his。将质粒转染入293T细胞中表达EG14-3-3-myc-his蛋白,经亲和层析纯化后进行Western blot鉴定,通过在线网站对EG14-3-3蛋白空间结构进行生物信息学预测。结果成功构建pcDNA3.1-EG14-3-3-myc-his真核表达质粒,表达产物纯化后经SDS-PAGE电泳分析其分子质量为27.9 ku,与预期一致,且以第3次(4℃过夜)洗涤的靶蛋白含量较高。Western blot检测纯化后带有His标签的重组蛋白EG14-3-3-myc-his能被His单克隆抗体识别。生物信息学预测EG14-3-3蛋白无信号肽和跨膜区,其二级结构中的N端为无规则卷曲,之后紧连两个α螺旋,C末端为无规则卷曲和较短的片层结构。结论成功构建了pcDNA3.1-EG14-3-3-myc-his真核表达载体,通过蛋白纯化技术获得高纯度的蛋白。表达的EG14-3-3蛋白含有无规则卷曲,可能为抗原表位所在位置,为进一步研究14-3-3蛋白的功能及应用奠定了实验基础。

关键词：细粒棘球蚴 EG14-3-3 真核蛋白表达生物信息学预测