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不同转座子在猪和鼠胎儿成纤维细胞中转座活性的比较研究

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不同转座子在猪和鼠胎儿成纤维细胞中转座活性的比较研究

作者：周家庆扬州大学

学位级别：硕士

转座子(Transposon, Tn),是染色体上可自主复制和移位的基本单位,普遍存在生物体基因组内,转座子从一个基因位点插入到另一个基因位点的过程称为转座。Sleeping beauty (SB)、piggyBack(PB)、Tol2是目前研究应用较多的3种DNA转座子。为... 详细信息

转座子(Transposon, Tn),是染色体上可自主复制和移位的基本单位,普遍存在生物体基因组内,转座子从一个基因位点插入到另一个基因位点的过程称为转座。Sleeping beauty (SB)、piggyBack(PB)、Tol2是目前研究应用较多的3种DNA转座子。为了探讨此3个转座子系统的转座特性,本研究将含转座元件的重组表达载体转染哺乳动物猪和小鼠胎儿成纤维细胞(PEF和MEF),通过优化相关参数,系统比较了转座活性差异,为转基因和功能基因捕获研究提供重要参考。本实验主要包括：1.用高保真PCR法克隆绿色荧光蛋白eGFP编码区,经序列测定正确后,亚克隆至载体pGL3-SV40启动子下游,然后将SV40-EGFP表达框克隆至SB转座子载体pT2-HB,构建成转座子表达载体,命名为pT2-SV40-EGFP。将此重组质粒经脂质体Lipo-fectamineTM2000包裹转染猪胎儿成纤维细胞(PEF),48小时后通过荧光显微镜观察报告基因的表达。结果表明,PEF细胞转染率较高(大于50%),且PT2-SV40-EGFP能有效表达。提示Lipo-fectamineTM2000可高效包裹转座子载体转染胎儿成纤维细胞,为后继实验提供参考。2.用分子克隆方法将PB和To12转座元件克隆至pT2-HB,从而构建成含三种转座子的重组载体,命名为pT3-PST:再用内切酶将CAG-GFP表达盒从载体pCAG-GFP中切出,亚克隆至pT3-PST,构建成表GFP的多转座子载体,命名为pT3-PST-CAG-GFP载体。将此重组载体用上述方法转染猪胎儿成纤维细胞(PEF)和小鼠胎儿成纤维细胞(MEF),结果表明,pT3-PST-CAG-GFP载体在两种细胞中均能有效转染和表达,提示该载体构建成功,可用于转座特性研究。3.为了比较SB11、SB16、SB100x三种转座酶的转座活性,按照DNA质量比10：1比例将pT3-PST-CAG-GFP和表达上述三种转座酶的载体分别混合,经脂质体包裹转染PEF和MEF。通过荧光显微镜和荧光定量PCR法(RT-QPCR)检测GFP表达水平和插入效率。结果表明,SB100x介导外源基因插入基因组拷贝数及GFP转录水平均显著高于SB11和SB16,提示SB100x具有较高转座活性,可用于SB转座系统特性研究。4.为了比较SB、PB和To12转座子的转座效率,将pT3-PST-CAG-GFP分别和三种转座酶载体SB100x、PBase及Tol2TBase共转染PEF和MEF细胞,同时设置不同的质量比梯度：10：1、5：1、1：1、1：5和1：10。通过荧光显微镜和RT-QPCR法检测GFP表达水平和插入效率。结果表明,SB介导外源基因插入基因组拷贝数及GFP转录水平均显著高于PB和Tol2,提示SB系统转座活性优于PB和Tol2。结果还表明三者获得最高转座率的转染质量比不同,其中SB、PB在PEF及MEF中最高转座率的转染质量比相同,SB系统为1：1,PB系统为1：10,Tol2系统在PEF及MEF中最高转座率的转染质量比不同,PEF中为1：10,MEF中为1：5。上述实验结果表明：SB、PB和Tol2三种转座子介导的表达载体均能在PEF和MEF细胞高效转座和表达;SB转座活性高于PB和To12;SB系统存在转座酶过量抑制效应,而PB和Tol2则不存在明显的过量抑制效应。

关键词： SB转座子 PB转座子 Tol2转座子胚胎成纤维细胞转座活性

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中外食品安全法律制度比较

中外食品安全法律制度比较

作者：周家庆大连海事大学

学位级别：硕士

食品的安全关系到全人类的生命健康与安全,关系到社会的和谐与国家的稳定。从1996年英国爆发的疯牛病到2008年国内三鹿等知名奶粉的“三聚氰氨”等一系列的食品安全事件的发生,更使食品安全成为公共健康面临的面主要的威胁之一。尤其是... 详细信息

食品的安全关系到全人类的生命健康与安全,关系到社会的和谐与国家的稳定。从1996年英国爆发的疯牛病到2008年国内三鹿等知名奶粉的“三聚氰氨”等一系列的食品安全事件的发生,更使食品安全成为公共健康面临的面主要的威胁之一。尤其是我国加入WTO以后,对外贸易中的绿色壁垒对于我国食品出口贸易的影响也日益明显。在这种情况下,加强和完善我国食品安全法律体系,已经显得尤为重要。而就我国目前法律监管现状而言,于2009年2月28日颁布了《中华人民共和国食品安全法》,另外已经有了以《传染病防治法》、《产品质量法》、《消费者权益保护法》及《食品安全法实施条例》等法律法规在内构成的食品安全法律体系,但仍存在很多缺陷,如缺乏统一性和协调性,食品安全的相关执法存在多头执法、监管权责不明等诸多问题。我国现有食品安全相关法律体系存在很多缺陷,即尚欠统一和整体协调,食品安全监管存在多头执法和监管权责不明等诸多问题,已无法适应现代社会发展之需。我国在食品安全法律制度方面的研究与发达国家存在一定程度上的差距。对食品安全法律制度进行研究,对于改进食品安全监管的现状、推动食品产业健康发展、提高监管机构的监管效率、维护社会的稳定都有重大意义。本文试图通过对中外食品安全法律制度的比较,分析了我国食品安全法律制度现状和存在的问题,在借鉴国外先进的食品安全法律体系、食品安全标准体系及相应监管体系等法律制度比较研究成果的基础上,结合我国实际,对食品安全的概念、我国食品安全立法现状、食品安全法律制度的缺陷和完善进行初步探讨,对完善我国食品安全法律体系提出有一定可行性的建议。

关键词：食品安全法律体系立法缺陷完善

基于多通道盲去卷积算法的单透镜图像复原技术研究

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基于多通道盲去卷积算法的单透镜图像复原技术研究

作者：周家庆国防科技大学

学位级别：硕士

目前,光学成像系统为了满足人们对图像质量的要求,其结构设计、系统研发和后期处理变得越来越先进。传统复杂光学系统为消除透镜成像的图像模糊,结构设计越来越复杂,这提高了生产和使用成本。计算摄影技术是近年来被大量研究的一种计算... 详细信息

目前,光学成像系统为了满足人们对图像质量的要求,其结构设计、系统研发和后期处理变得越来越先进。传统复杂光学系统为消除透镜成像的图像模糊,结构设计越来越复杂,这提高了生产和使用成本。计算摄影技术是近年来被大量研究的一种计算机成像技术,该技术运用计算机,结合数字传感器进行数字化处理,以代替沉重昂贵的组合镜头。本文的研究所基于单透镜成像系统的镜头由1到3个镜片组成。为了消除单透镜成像系统拍摄过程中所造成的图像模糊,论文提出一种图像复原算法,主要研究内容如下:（1）研究分析单透镜系统成像导致图像模糊的退化过程和原理;分析单透镜成像系统特殊的光学特性造成的模糊核的结构特点,将单透镜图像复原问题转化为一个多通道盲去卷积问题,在此框架下对单透镜图像复原问题建模。（2）针对由单透镜成像系统所得到的模糊图像,论文提出基于多通道约束的单透镜图像复原算法,该算法利用新的模糊核与图像先验信息,以增加所估计的模糊核,即点扩散函数的精确度,进而提高最终图像复原质量。（3）采用稳健交替方向乘子法优化算法对图像复原凸优化问题进行迭代求解,该算法基于交替方向乘子法优化算法框架,对参数具有一定稳健性,增加了算法的适用性和单透镜计算成像系统的实用性。（4）基于仿真图片和实际单透镜成像图片对提出的算法进行实验验证,结果表明:本文提出的算法基于多通道先验,利用了更多的单透镜图像的结构特性,在解决单透镜模糊图像的盲去模糊问题中,相比各自独立的,分别处理的单通道盲去模糊算法,体现出更好的效果。单透镜计算成像系统利用计算摄影技术,将简单光学系统代替复杂光学系统。这其中带来的技术革命和制造成本的大大减小,使得单透镜成像系统成为近几年数字图像处理研究领域中的热点,在后续的工业制造和产品使用上必将带来更多的应用。论文所研究内容刚刚起步,尚处在理论方法研究阶段,还需要更多创新性的研究工作,不断完善计算成像技术,使之形成成熟的应用。

关键词：单透镜图像复原多通道盲去卷积点扩散函数

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相机阵列多视角图像盲去模糊方法

计算机辅助设计与图形学学报 2018年第8期30卷 1446-1456页

作者：周家庆吴越曾向荣龙鑫金光国防科技大学信息系统与管理学院长沙410072

提出了一种基于正则化方法的多视角盲去模糊方法,对相机阵列拍摄的一系列初始模糊图像进行图像恢复处理.该方法分为3个步骤:首先,基于光流算法对多个镜头获取的同一场景图像进行配准;然后,将配准图像运用多图盲去模糊算法估计出各自的... 详细信息

提出了一种基于正则化方法的多视角盲去模糊方法,对相机阵列拍摄的一系列初始模糊图像进行图像恢复处理.该方法分为3个步骤:首先,基于光流算法对多个镜头获取的同一场景图像进行配准;然后,将配准图像运用多图盲去模糊算法估计出各自的模糊核;最后,根据估计出的模糊核采用非盲去模糊算法准确估计出各自的清晰图像.实验结果表明:相比对每一视角图像单独使用单图盲去模糊算法进行处理,多视角盲去模糊方法对噪声具有良好的鲁棒性;应用于自己构建的相机阵列系统拍摄的多视角图像,该方法在2种无参考图像指标NIQE和SSEQ下分别提高了4.20%和55.60%.

关键词：相机阵列图像恢复盲去模糊

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基于Linux的网络管理系统研究与实现

微电子学与计算机 2003年第5期20卷 97-100页

作者：周家庆赵建民浙江师范大学计算机科学与工程学院金华321004

本文首先给出SNMP协议的原理,接着设计了基于Linux的网络管理系统的信息通信模型,然后给出了SNMP网管系统中的核心部分:MIB编译器、MIB调入系统、SNMP消息封装、收发的设计与实现。

关键词：网络管理系统 SNMP协议 Linux 计算机网络信息通信模型管理信息库

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基于SNMP网络管理的MIB编译器的实现

微电子学与计算机 2002年第8期19卷 34-37页

作者：周家庆赵建民浙江师范大学金华321004

文章首先介绍SNMP网络管理的MIB编译器的功能,以及选择Perl语言作为开发工具的原因,并给出MIB编译器实现的程序流程图,在分析了两个TC类型的和五个与MIB对象或模块的格式定义有关的Perl正则表达式的基础上,提出了基于Perl的MIB编译器的... 详细信息

文章首先介绍SNMP网络管理的MIB编译器的功能,以及选择Perl语言作为开发工具的原因,并给出MIB编译器实现的程序流程图,在分析了两个TC类型的和五个与MIB对象或模块的格式定义有关的Perl正则表达式的基础上,提出了基于Perl的MIB编译器的实现方法。

关键词： SNMP 网络管理 MIB编译器计算机网络管理信息库正则表达式简单网络管理协议

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一个新的差别矩阵及其求核方法

四川大学学报（自然科学版） 2007年第2期44卷 277-283页

作者：聂红梅周家庆浙江师范大学信息科学与工程学院金华321004

作者针对已有的利用差别矩阵来求粗糙集中核的方法存在的不足,将粗糙集的代数观与信息观结合起来研究,给出一个新的差别矩阵的定义和求核方法.

关键词：粗糙集差别矩阵核

1988年湖北工业消费品价格上涨的成因分析

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价格月刊 1989年第5期 20-22页

作者：刘孝新周家庆

一、1988年工业消费品价格变动态势纵观1988年湖北工业消费品市场价格变动形势,有以下几个特点:1、调价频繁。1～7月国家和省级物价部门分别调整了烟、酒、糖、肥皂、洗衣粉、搪瓷面盆、口杯、彩色电视机、书写纸、有光纸、针、棉制品... 详细信息

一、1988年工业消费品价格变动态势纵观1988年湖北工业消费品市场价格变动形势,有以下几个特点:1、调价频繁。1～7月国家和省级物价部门分别调整了烟、酒、糖、肥皂、洗衣粉、搪瓷面盆、口杯、彩色电视机、书写纸、有光纸、针、棉制品、医药等80多种商品价格(8月份以后未出台调价项目),全年零售价提价金额为13.8亿元。与此同时,地方物价部门也多次调高多种商品价格,企业自行调价的商品更多。可以说,1988年是改革十年来工业消费品价格变动最为频繁和剧烈的一年。

关键词：工业消费品价格上涨价格变动商品价格流通环节物价部门生产资料出厂价格工业品彩色电视机

UG NX 4.0三维造型设计应用范例 4

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