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杭州地区猫杯状病毒的分离鉴定及序列分析

杭州地区猫杯状病毒的分离鉴定及序列分析

作者：周孟云南京农业大学

学位级别：硕士

猫杯状病毒(Feline Calicivirus,FCV)是引起猫呼吸道疾病的一种常见病原,呈世界性分布,常在猫群中爆发流行。为了解杭州地区FCV的流行情况及分子生态学特征,本研究首先对杭州地区收集的48份疑似FCV感染病料,进行了PCR鉴定、病毒分离培养... 详细信息

猫杯状病毒(Feline Calicivirus,FCV)是引起猫呼吸道疾病的一种常见病原,呈世界性分布,常在猫群中爆发流行。为了解杭州地区FCV的流行情况及分子生态学特征,本研究首先对杭州地区收集的48份疑似FCV感染病料,进行了PCR鉴定、病毒分离培养,以及基于VP1基因序列的系统发育树分析。RT-PCR鉴定结果显示,有32份病料可判为阳性;这32份病料接种的F81细胞,均出现明显的CPE。VP1基因序列分析显示,32株分离毒间的核苷酸同源性在69.2%-99%之间,氨基酸同源性在82.1%-99.9%之间。与国外分离株相比,32株分离株同国内分离株的同源性更高。系统发育树分析显示,32株分离毒中有12株与国内分离毒遗传关系较近,15株与英国株遗传关系较近,另外4株与多国分离株形成独立分支。对VP1 D-E区的B细胞线性表位分析发现,D区和conE区的2个表位比较保守,而5’HRV区的表位存在较大变异。尽管32个毒株分离于同一地区和相近的时间段,主要抗原VP1基因差异仍然较大,多数达20%-30%不等。其次,研究各分离毒对F81细胞的适应性,测定筛选分离毒的滴度,并绘制多步法生长曲线。32株分离毒对F81细胞适应性结果表明,DF018、DF019、DF026对F81细胞的适应性较差,多步法生长曲线显示,3株分离毒均在24 h时滴度达到高峰,但3者之间存在复制差异。最后,对筛选的分离毒进行全基因组的序列测定及分析。对DF018、DF019、DF026的全基因组序列进行扩增,扩增得到全长分别为7687 bp、7687 bp和7689 bp。进一步遗传进化分析显示,DF018与DF019密切相关,3株分离毒均与南韩参考株12Q087-1与12Q087-5的遗传关系较近。以上结果表明,FCV在杭州地区广泛流行而且呈现明显的遗传多样性,给病毒的分子流行病学监测和疫苗防控带来巨大挑战。

关键词：猫杯状病毒分离鉴定序列分析 VP1基因

杭州地区猫杯状病毒的分离鉴定及VP1基因序列分析

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畜牧与兽医 2020年第4期52卷 103-109页

作者：周孟云陈利苹宋家升杨倩南京农业大学动物医学院江苏南京210095 浙江迪福润丝生物科技有限公司浙江杭州310052

猫杯状病毒(feline calicivims, FCV)是引起猫呼吸道疾病的一种常见病原,呈世界性分布,常在猫群中爆发流行。为了解我国FCV的流行情况及分子生态学特征,本研究对杭州地区收集的48份疑似FCV感染病料,进行了PCR鉴定、病毒分离培养,以及基... 详细信息

猫杯状病毒(feline calicivims, FCV)是引起猫呼吸道疾病的一种常见病原,呈世界性分布,常在猫群中爆发流行。为了解我国FCV的流行情况及分子生态学特征,本研究对杭州地区收集的48份疑似FCV感染病料,进行了PCR鉴定、病毒分离培养,以及基于VP1基因序列的系统发育树分析。RT-PCR鉴定的结果显示,有32份病料可判为阳性;这32份病料接种的F81细胞,均出现明显的细胞病变。VP1基因序列分析显示,32株分离毒间的核苷酸同源性为69.2%~99%,氨基酸同源性为82.1%~99.9%。与国外分离株相比,32株分离株同国内分离株的同源性更高。系统发育树分析显示,32株分离株有12株与国内分离株遗传关系较近,15株与英国株遗传关系较近,别外4株与多国分离株形成独立分支。对VP1 D-E区的B细胞线性表位分析发现,D区和conE区的2个表位比较保守,而5′HRV区的表位存在较大变异。尽管32个毒株分离于同一地区和相近的时间段,主要抗原VP1基因差异仍然较大,多数达20%~30%不等。以上结果表明,FCV在杭州地区广泛流行,且呈现明显的遗传多样性,给病毒的分子流行病学监测和疫苗防控带来巨大挑战。

关键词：猫杯状病毒分离鉴定 VP1基因系统发育树 B细胞线性表位

儿童Gartland Ⅲ型肱骨髁上骨折新术式的护理

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实用手外科杂志 2013年第4期27卷 429-431页

作者：周孟云汤丽董德胜中国人民解放军第98医院全军创伤骨科中心浙江湖州313000

目的探讨儿童Gartland Ⅲ型肱骨髁上骨折所采用的新术式的护理。方法对2007年1月-2012年12月收治的96例儿童肱骨髁上骨折进行术前及术后精心、科学、全面的护理。术后随访1年以上，并按日本骨科学会（JOA）肘关节功能评价法行肘关节功... 详细信息

目的探讨儿童Gartland Ⅲ型肱骨髁上骨折所采用的新术式的护理。方法对2007年1月-2012年12月收治的96例儿童肱骨髁上骨折进行术前及术后精心、科学、全面的护理。术后随访1年以上，并按日本骨科学会（JOA）肘关节功能评价法行肘关节功能评定。结果总优良率达98％，无肘内翻畸形，无继发尺神经损伤。结论儿童Gartland Ⅲ型肱骨髁上骨折行新术式术后及时跟进并革新护理方式。能有效避免其可能引起的各种并发症。

关键词： Gartland Ⅲ型肱骨髁上骨折新术式护理

猪流行性腹泻病毒黏液SIgA抗体ELISA检测方法的建立

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中国兽医科学 2020年第1期50卷 10-19页

作者：王永恒周孟云李昱辰刘朋杨倩南京农业大学动物医学学院

旨在建立一种检测黏液中猪流行性腹泻病毒(PEDV)特异性SIgA的ELISA方法,从而评价PEDV黏膜免疫水平。首先将PEDV的S1D基因(534~789 aa)克隆至质粒载体pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,其表达产物以包涵体形式存在。Wes... 详细信息

旨在建立一种检测黏液中猪流行性腹泻病毒(PEDV)特异性SIgA的ELISA方法,从而评价PEDV黏膜免疫水平。首先将PEDV的S1D基因(534~789 aa)克隆至质粒载体pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,其表达产物以包涵体形式存在。Western-blot验证蛋白大小为32 ku,且具有抗原活性。再以8 mol/L尿素变性蛋白,经纯化、梯度复性后作为包被抗原蛋白,通过优化条件初步建立检测鼻腔和口腔黏液中PEDV特异性SIg A抗体的间接ELISA,并确定其最佳抗原包被浓度为2μg/m L;鼻腔黏液最佳稀释度为1∶1,最佳封闭液为50 g/L脱脂乳;口腔黏液最佳稀释度为1∶2,最佳封闭液为30 g/L BSA;酶标抗体最佳稀释度均为1∶2 000。最后应用该方法分别检测了84份已免疫猪的口腔、鼻腔黏液,其结果与以纯化的PEDV包被的间接ELISA相比,符合率达到95.2%。本研究中建立的检测黏液中PEDV特异性SIgA的方法简便快速,具有较好的敏感性、特异性,这为评价PEDV黏膜免疫水平提供了依据和检测标准。

关键词：猪流行性腹泻病毒黏液 SIgA S1D基因间接ELISA

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品管圈在骨科患者非计划性拔管中的应用

品管圈在骨科患者非计划性拔管中的应用

2014年浙江省骨科学学术年会

作者：汤丽胡丹周孟云魏翠杨芬解放军第九八医院全军骨科创伤修复重建中心四病区

目的探讨品管圈在骨科患者非计划性拔管中的应用效果。方法科室通过成立品管圈组织、确立品管圈主题、制定品管圈活动计划,对骨科患者意外拔管情况进行调查分析,制定整改措施,并对品管圈活动实施前后的相关指标评价。结果科室开展品管... 详细信息

目的探讨品管圈在骨科患者非计划性拔管中的应用效果。方法科室通过成立品管圈组织、确立品管圈主题、制定品管圈活动计划,对骨科患者意外拔管情况进行调查分析,制定整改措施,并对品管圈活动实施前后的相关指标评价。结果科室开展品管圈活动后,骨科患者非计划性拔管率均少于实施前,差异有统计学意义[P<0.05]。结论将品管圈应用到骨科患者非计划性拔管中,有利于减少骨科患者出现意外拔管,值得临床科室借鉴使用。

关键词：品管圈骨科非计划性拔管

来源： cnki会议评论

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品管圈在骨科患者非计划性拔管中的应用

齐鲁护理杂志 2015年第14期21卷 102-104页

作者：汤丽胡丹周孟云魏翠杨芬中国人民解放军第九八医院浙江湖州313000

目的:探讨品管圈在骨科患者非计划性拔管中的应用效果。方法:科室通过成立品管圈组织、确立品管圈主题、制定品管圈活动计划,对骨科患者意外拔管情况进行调查分析,制定整改措施,并对品管圈活动实施前后的相关指标进行评价。结果:科室开... 详细信息

目的:探讨品管圈在骨科患者非计划性拔管中的应用效果。方法:科室通过成立品管圈组织、确立品管圈主题、制定品管圈活动计划,对骨科患者意外拔管情况进行调查分析,制定整改措施,并对品管圈活动实施前后的相关指标进行评价。结果:科室开展品管圈活动后,骨科患者非计划性拔管率均低于实施前,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:将品管圈应用到骨科患者非计划性拔管中,有利于减少骨科患者意外拔管。

关键词：品管圈骨科非计划性拔管

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破伤风抗毒素皮试致过敏性休克与救治1例

医学理论与实践 2012年第16期25卷 2010-2011页

作者：董德胜周孟云李晨冯胜骄解放军第98医院急救中心浙江省湖州市313000 解放军第98医院全军骨科创伤修复中心浙江省湖州市313000

临床上破伤风抗毒素肌肉注射前皮试是防止其肌肉注射后出现严重过敏反应的一项必要措施,皮试过程中出现过敏反应常见为皮试局部皮丘、红肿及瘙痒,罕见有严重过敏反应并导致休克者,我科2010年12月末救治1例破伤风皮试致过敏性休克患者,... 详细信息

临床上破伤风抗毒素肌肉注射前皮试是防止其肌肉注射后出现严重过敏反应的一项必要措施,皮试过程中出现过敏反应常见为皮试局部皮丘、红肿及瘙痒,罕见有严重过敏反应并导致休克者,我科2010年12月末救治1例破伤风皮试致过敏性休克患者,现报道如下。

关键词：破伤风抗毒素皮试过敏休克救治

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低血容量性休克的急救护理

中国当代医药 2012年第32期19卷 152-153页

作者：熊秀萍董德胜周孟云解放军第九八医院急诊科浙江湖州313000 解放军第九八医院全军修复重建中心浙江湖州313000

目的根据抢救休克的"损伤控制复苏(DCR)"新理念,探讨低血容量性休克的急救护理方法。方法针对105例低血容量性休克患者,进行在新理念下的急救护理作回顾性总结分析。结果所有患者经过急诊抢救,仅在急诊室出现1例死亡,后送住院继续治疗... 详细信息

目的根据抢救休克的"损伤控制复苏(DCR)"新理念,探讨低血容量性休克的急救护理方法。方法针对105例低血容量性休克患者,进行在新理念下的急救护理作回顾性总结分析。结果所有患者经过急诊抢救,仅在急诊室出现1例死亡,后送住院继续治疗中也仅有5例死亡。结论针对低血量性休克,本科及时更新急救复苏理念,改进护理措施,进行规范化、程序化及快速有效的急救护理,争取在创伤后"黄金1h"内完成各项急救护理工作,极大地缩短了手术前时间,提高了患者的抢救成功率,为患者下一步的治疗打下基础。

关键词：休克急救护理损伤控制复苏

骨科罹患下肢肌间静脉血栓术前不行规范抗凝直接手术的临床研究

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浙江创伤外科 2022年第4期27卷 653-655页

作者：董德胜张松黎陈明志周文婷周孟云中国人民解放军陆军第七十二集团军医院湖州313000 浙江湖州南太湖医院

目的探讨骨科下肢手术术前合并下肢肌间静脉血栓,术前不行特定周期的规范抗凝治疗,而是预防血栓的同时直接手术是否可行。方法采用回顾性研究,回顾分析5年来,收治141例下肢手术术前合并下肢肌间静脉血栓,住院期间检测血栓向近端扩展... 详细信息

目的探讨骨科下肢手术术前合并下肢肌间静脉血栓,术前不行特定周期的规范抗凝治疗,而是预防血栓的同时直接手术是否可行。方法采用回顾性研究,回顾分析5年来,收治141例下肢手术术前合并下肢肌间静脉血栓,住院期间检测血栓向近端扩展、肺栓塞、抗凝出血的发生率。结果对两组患者住院期间血栓向近端扩展、肺栓塞、出血发生率进行比较,结果显示差异无统计学意义(χ~2=2.014,P=0.569)。两组住院时间存在差异(P=0.00)。结论 (1)手术时机应根据疾病本身及患者自身情况而定,术前无需特定时期的抗凝治疗。(2)下肢肌间静脉血栓危险性并不等同急性近端下肢深静脉血栓,术前无需预防性下腔静脉滤网置入。(3)根据患者自身情况个性化预防性抗凝治疗。

关键词：肌间静脉血栓下肢手术骨科抗凝