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《红楼梦》对中国古典小说叙事方式的创拓及其意义

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红楼梦学刊 1992年第3期 93-113页

作者：周子燕

《红楼梦》作为中国古典小说的峰巅,究竟对中国古典小说叙事艺术做出了什么贡献?如果我们运用当代叙事学的方法,将《红楼梦》与清代以前的小说加以比较,就不难发现,它对中国古典小说叙事方式进行了重要的创拓和扩展,其中孕含着极为深刻... 详细信息

《红楼梦》作为中国古典小说的峰巅,究竟对中国古典小说叙事艺术做出了什么贡献?如果我们运用当代叙事学的方法,将《红楼梦》与清代以前的小说加以比较,就不难发现,它对中国古典小说叙事方式进行了重要的创拓和扩展,其中孕含着极为深刻的文化意义。当代叙事学所说的叙事方式一般包括叙事角度、心理描写方式、叙事结构、人物转述语等方面,《红楼梦》

关键词：红楼梦中国古典小说叙事方式心理描写限制叙事当代叙事学叙事者三国演义叙事角度转述语

CRISPR/Cas9介导的全基因组敲除鉴定鼻咽癌放射敏感性和放射抵抗性关键功能基因的研究

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CRISPR/Cas9介导的全基因组敲除鉴定鼻咽癌放射敏感性和放射抵抗...

作者：周子燕广西医科大学

学位级别：硕士

研究背景:据流行病学统计,鼻咽癌在广西壮族自治区的发病率居全球第1位,而且明显高于全国平均水平。在广西,每年有2000多人死于鼻咽癌,其调整死亡率为4.63/10万,占全部恶性肿瘤死亡率的11.63%,在所有恶性肿瘤死亡人数中居第3位。由于鼻... 详细信息

研究背景:据流行病学统计,鼻咽癌在广西壮族自治区的发病率居全球第1位,而且明显高于全国平均水平。在广西,每年有2000多人死于鼻咽癌,其调整死亡率为4.63/10万,占全部恶性肿瘤死亡率的11.63%,在所有恶性肿瘤死亡人数中居第3位。由于鼻咽癌的解剖局限性和较高的放射敏感性,放疗治疗是鼻咽癌的主要治疗方法。尽管目前放疗设备日益更新,放疗技术随着科技不断进步,但是局部晚期鼻咽癌的预后仍较差,5年生存率小于60%。癌细胞对放射线抗拒是治疗失败的重要原因之一,因此,增加肿瘤细胞对放射治疗的敏感性是提高鼻咽癌放射治疗效果的关键。CRISPR是细菌用于抵抗外来遗传物质入侵的一种获得性免疫机制,具有设计简单、特异性强、效率高,以及可在目标位点产生多种类型的编辑结果等优势。近年来CRISPR-Cas9技术大放异彩,通过设计sgRNA混合文库,CRISPR切割的靶点可以将全基因组覆盖,而且特异性高,既可通过诱导基因突变进行功能缺失型筛选,又可通过激活转录进行功能获得型筛选,并且于DNA水平抑制基因表达,可以研究那些需要基因敲除才能显现的表型,与RNAi技术相比具有相对较低的脱靶效率和更广泛的作用位点,因而逐渐成为功能性基因筛选的热点方法。目前尚无关于利用CRISPR/Cas9文库筛选鼻咽癌放射敏感及放射抵抗性功能基因的研究报道。研究目的:本研究首次利用全基因组CRISPR/Cas9-sgRNA文库病毒筛选鼻咽癌放射敏感及放射抵抗性功能基因,为进一步研究鼻咽癌放射敏感性的机制奠定基础,为发现新的治疗靶点和开发提高鼻咽癌细胞放射治疗敏感药物提供依据。研究方法:1.对鼻咽癌细胞放射处理后,应用CRISPR/Cas9文库慢病毒进行筛选,对放射敏感性有调控作用的基因所对应的sgRNA会被选择性富集或丢失,结合二代测序技术识别特异性sgRNA,筛选出放射敏感性及放射抵抗性候选功能基因。2.对单个候选基因分别敲除后利用蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR进行验证,并对稳定低表达候选基因的细胞株进行放射处理,通过克隆形成实验、细胞增殖实验验证筛选的功能基因在鼻咽癌细胞中的放射敏感及放射抵抗性作用。3.建立鼻咽癌放射抵抗细胞株C666-1-Rs和5-8F-Rs,利用实时荧光定量PCR分析候选基因的差异表达水平,进一步验证其在鼻咽癌细胞中的放射增敏及放射抵抗作用。4.对目标基因进行GO及KEGG分析,预测与鼻咽癌放疗抵抗性相关的信号通路,为后续研究提供指导和帮助。研究结果:1.利用CRISPR/Cas9文库慢病毒筛选出210个放射敏感性及放射抵抗性功能基因,结合生物信息学分析筛选鉴定出11个鼻咽癌放射敏感性及放射抵抗性功能基因(放射敏感性基因:FBLN5、FAM3C、MUS81、DNAJC17、CALD1;放射抵抗性基因:TOMM20、CDKN2AIP、SNX22、SP1、PSIP1、TLNI)。2.与对照组相比,FBLN5、FAM3C、MUS81、DNAJC17单基因敲除后,鼻咽癌细胞C666-1和CNE1经放射处理后克隆形成和增值能力显著增强,而CDKN2AIP、SP1、CALD1单基因敲除后,C666-1和CNE1细胞经放射处理后的克隆形成和增值能力显著下降(p<0.05)。3.在放射抵抗细胞株C666-1-R和5-8F-R中,FBLN5、FAM3C、MUS81、DNAJC17基因表达水平显著降低(p<0.05),而TOMM20、CDKN2AIP、SNX22、SP1基因表达水平显著升高(p<0.05)。***富集分析表明,潜在的信号通路有助于NPC的放射敏感性或放射抵抗性,包括范可尼贫血信号通路和TGF-beta信号通路。研究结论:通过CRISPR/Cas9介导的全基因组敲除技术,筛选鉴定出9个与鼻咽癌细胞放射敏感性或放射抗性相关的基因:4个鼻咽癌放疗敏感功能基因:FBLN5、FAM3C、MUS81、DNAJC17;2个鼻咽癌放疗抵抗基因:CDKN2AIP、SP1;而TOMM20和SNX22是潜在的放疗抵抗基因,CALD1是潜在的放疗敏感基因。MUS81的鼻咽癌的放射抵抗性可能与范可尼贫血信号通路有关,SP1的鼻咽癌放射敏感性可能与TGF-beta信号通路有关。。

关键词：鼻咽癌放射敏感放射抵抗 CRISPR/Cas9 功能基因

烯唑醇对辣椒和番茄安全性评价及对其主要病菌毒力作用的研究

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烯唑醇对辣椒和番茄安全性评价及对其主要病菌毒力作用的研究

作者：周子燕安徽农业大学

学位级别：硕士

本文研究了在辣椒和番茄的不同生育期喷施烯唑醇对辣椒和番茄产生的影响。用烯唑醇对番茄和辣椒进行药剂浸种;苗期和成株期进行叶面喷施。在苗期测定了辣椒和番茄的株高和叶绿素、木质素的含量。在成株期检测了这两种植株中的木质素和... 详细信息

本文研究了在辣椒和番茄的不同生育期喷施烯唑醇对辣椒和番茄产生的影响。用烯唑醇对番茄和辣椒进行药剂浸种;苗期和成株期进行叶面喷施。在苗期测定了辣椒和番茄的株高和叶绿素、木质素的含量。在成株期检测了这两种植株中的木质素和叶绿素的含量,观察烯唑醇对番茄和辣椒次生木质部的影响。研究了烯唑醇在两种植株中的残留降解动态。测定了烯唑醇及其与多菌灵、福美双混配剂对辣椒和番茄主要病害的毒力作用。主要的研究结果如下:1.烯唑醇不宜用于辣椒的种子处理剂,剂量在30μg/mL,会严重抑制辣椒出芽率;在用作番茄种子处理剂时,剂量不宜高于60μg/mL。在番茄、辣椒苗期喷雾使用时,烯唑醇剂量不应超过30μg/mL,否则,该药剂会严重抑制番茄和辣椒的生长,并导致两种作物后期严重矮化,叶面皱缩,植株茎杆加粗。2.烯唑醇使用浓度高于30μg/mL时,在苗期使用会导致辣椒叶色浓绿,检测结果显示药剂处理后植株叶绿素含量增加,并且叶绿素含量随施药浓度的增大而递增。在辣椒成株期施药,也会增加植株叶绿素含量,但对植株的叶色影响不明显,叶面无皱缩。在番茄苗期施药浓度高于30μg/mL时,番茄的叶色浓绿,叶绿素含量增加;在番茄成株期施药对叶色无影响,但叶绿素含量增加。3.在番茄和辣椒移栽3周后叶面喷施烯唑醇会导致:番茄、辣椒植株茎杆中的木质素含量增加,随着施药浓度的增加,木质素含量递增。4.烯唑醇处理后对番茄和辣椒茎杆的次生木质部细胞的形态结构没有明显的影响。施药浓度为100μg/mL时,会导致导管细胞直径显著增大,细胞长度缩短。使得植株枝条在一定横截面上的导管细胞数目有所减少。烯唑醇对缩短番茄和辣椒茎杆次生木质部中的管胞细胞细胞长度作用较小,对缩小细胞直径作用较大。5.烯唑醇与多菌灵复配剂对番茄灰霉菌毒力测定:烯唑醇与多菌灵以10:1的比例混配,其增效系数SR值为1.52大于1.5,表现为增效作用,其他配比均表现出相加作用。烯唑醇与多菌灵复配剂对辣椒炭疽菌的毒力测定:各配比中SR值没有大于1.5的,均表现为相加作用。烯唑醇和福美双复配剂对番茄灰霉菌的毒力测定结果为:烯唑醇与福美双混配比为5:1时,其增效系数SR值为1.72,显著大于1.5表现出增效作用。6.烯唑醇的残留动态研究:12.5%烯唑醇可湿性粉剂正常推荐药剂剂量为3000倍,本试验结果表明,喷施1500倍,1次,施药后2h,烯唑醇在辣椒中的原始沉积量为0.590mg/kg;施药后3d,烯唑醇在辣椒中残留量降解了44.71%。施药后45d,烯唑醇在辣椒中的消解率已经达到98.96%。得出该药在辣椒的残留降解曲线方程为: C=0.3715e-0.0574t,降解符合公式C=C0·e-kt,相关系数R=0.9614,其残留半衰期T1/2=-In2/k=12.08d。其结果具有较高的相关性,烯唑醇在辣椒中降解的速度比较快,不会造成较长期的残留。同样在番茄中喷施1500倍,1次,施药后2h,烯唑醇在番茄中的原始沉积量为0.599mg/kg;施药后3d,烯唑醇在番茄中残留量降解了39.52%。施药后45d,烯唑醇在番茄中的消解率已经达到92.65%。进行统计分析得出该药在番茄的残留降解曲线方程为:C=0.365e-0.056t,降解符合公式C=C0·e-kt,相关系数R=0.9082,其残留半衰期T1/2=-ln2/k=12.38d。其结果具有较高的相关性,烯唑醇在番茄中降解的速度比较快,不会造成较长期的残留。因此,12.5%烯唑醇可湿性粉剂在番茄和辣椒上按推荐使用的稀释倍数3000倍液,对番茄和辣椒无公害果品的生产也是较安全的。

关键词：烯唑醇生长发育残留降解动态防治效果

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烯唑醇对辣椒、番茄生长和叶绿素含量的影响

植物保护 2006年第6期32卷 107-110页

作者：周子燕高同春檀根甲张勇安徽农业大学植物保护学院合肥230036 安徽省农业科学院植物保护研究所合肥230031

研究了烯唑醇的不同使用剂量对番茄和辣椒不同生育期生长的影响,结果表明:药剂浸种表现在抑制种子发芽;苗期叶面喷药后主要表现为抑制株高,植株叶面皱缩叶色浓绿;成株期叶面喷药后对番茄和辣椒无明显抑制作用,但有叶色差异。

关键词：烯唑醇辣椒番茄叶绿素生长

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三唑类杀菌剂的研究进展

安徽农业科学 2008年第27期36卷 11842-11844页

作者：周子燕李昌春高同春檀根甲安徽省农业科学院植物保护研究所安徽合肥230031 安徽农业大学植保学院安徽合肥230036

对三唑类活性化合物近20年的研究成果及发展状况进行了总结,综述了三唑类化合物对作物的生长调节作用。同时,分析了三唑类化合物抗药性产生的原因。

关键词：三唑类化合物杀菌谱抗药性生长调节作用

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几种药剂对稻纵卷叶螟的毒力测定

安徽农业科学 2008年第12期36卷 5064-5064,5068页

作者：胡本进李昌春石立周子燕安徽省农业科学院植保研究所安徽合肥230031

[目的]测定几种常用药剂对稻纵卷叶螟的毒力,为控制稻纵卷叶螟的危害提供依据。[方法]将供试7种药剂稀释成5个系列浓度,3龄中期幼虫为试材,浸虫法测定,处理后48 h(氟铃脲96 h)调查试虫死亡情况。[结果]杀虫单对水稻稻纵卷叶螟毒力最低,L... 详细信息

[目的]测定几种常用药剂对稻纵卷叶螟的毒力,为控制稻纵卷叶螟的危害提供依据。[方法]将供试7种药剂稀释成5个系列浓度,3龄中期幼虫为试材,浸虫法测定,处理后48 h(氟铃脲96 h)调查试虫死亡情况。[结果]杀虫单对水稻稻纵卷叶螟毒力最低,LC50为306.624 2 mg/L,毒力最高的为阿维菌素,LC50达到了0.221 0 mg/L,氟虫腈对稻纵卷叶螟的LC50为7.237 5 mg/L,仅次于阿维菌素。7种药剂对稻纵卷叶螟毒力的高低顺序为阿维菌素>氟虫腈>毒死蜱>氟铃脲>三唑磷>丙溴磷>杀虫单。1.8%阿维菌素乳油用量8.1 g(a.i)/hm2和40%丙溴磷乳油480 g(a.i)/hm2,药后10 d防效分别达到86.68%和81.72%。[结论]丙溴磷、阿维菌素、氟虫腈、氟铃脲对稻纵卷叶螟的防效均较好,混配使用可达到理想的防治效果。

关键词：稻纵卷叶螟药剂毒力测定

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不同天气两种农药对板栗膏药病药效试验

安徽农业科学 2008年第9期36卷 3759-3759,3764页

作者：李昌春胡本进周子燕石立翟田俊安徽省农业科学院植物保护研究所安徽合肥230031 安徽省舒城县林业局森防站安徽舒城231300

[目的]更好地防治板栗膏药病。[方法]以清水为对照,研究小雨天、晴天施用90%增效柴油乳剂和石硫合剂对板栗膏药病的防治效果。[结果]晴天施药后30 d,90%增效柴油乳剂和石硫合剂的防效分别为93.93%、78.12%,药后60 d的防效分别为84.60%、... 详细信息

[目的]更好地防治板栗膏药病。[方法]以清水为对照,研究小雨天、晴天施用90%增效柴油乳剂和石硫合剂对板栗膏药病的防治效果。[结果]晴天施药后30 d,90%增效柴油乳剂和石硫合剂的防效分别为93.93%、78.12%,药后60 d的防效分别为84.60%、72.44%;小雨天施药后30 d,90%增效柴油乳剂和石硫合剂的防效分别为96.50%、88.03%,药后60 d的防效分别为87.51%7、5.29%。无论是晴天还是小雨天气施药,90%增效柴油乳剂对板栗膏药病的防治效果都优于石硫合剂,且差异显著。同种药剂在不同天气施用防效有显著差异。[结论]90%增效柴油乳剂和石硫合剂小雨天施用的防效高于晴天施用的防效。

关键词：板栗膏药病 90%增效柴油乳剂石硫合剂天气

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微生物对两种农药降解的初步研究

安徽农业科学 2007年第35期35卷 11598-11598,11622页

作者：李昌春魏先敏周子燕石立胡本进安徽省农业科学院植物保护研究所安徽合肥230031

[目的]研究微生物对农药的降解效果。[方法]用双耐2号、亚热1号菌种降解10%吡虫啉和40%三唑磷,检测残留量,比较降解力。[结果]接种双耐2号和亚热1号后,发满菌丝1d吡虫啉在双耐2号、亚热1号中的残留量分别为4.00、9.60mg/kg,三唑磷在双耐... 详细信息

[目的]研究微生物对农药的降解效果。[方法]用双耐2号、亚热1号菌种降解10%吡虫啉和40%三唑磷,检测残留量,比较降解力。[结果]接种双耐2号和亚热1号后,发满菌丝1d吡虫啉在双耐2号、亚热1号中的残留量分别为4.00、9.60mg/kg,三唑磷在双耐2号、亚热1号中的残留量分别为19.43、19.06mg/kg,均与对照差异极显著。菌丝发满15d后,吡虫啉被双耐2号全部降解,在亚热1号菌种袋中含量为0.30mg/kg,明显低于三唑磷的18.50mg/kg。发满菌丝25d后吡虫啉被双耐2号、亚热1号完全降解,三唑磷在两种农药的残留量分别为3.41、3.09mg/kg,显著低于对照。2菌种对吡虫啉的降解力高于对三唑磷的降解力;双耐2号的降解力稍高于亚热1号。[结论]亚热1号和双耐2号菌种对吡虫啉和三唑磷有一定的降解力。

关键词：微生物吡虫啉三唑磷双耐2号菌亚热1号菌

亚洲玉米螟miR-1a-5p表达与Cry1Ab蛋白敏感性的关系

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2020年第10期48卷 99-107页

作者：徐丽娜胡飞周子燕何康来胡本进安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所安徽合肥230031 中国农业科学院植物保护研究所北京100193

【目的】探索亚洲玉米螟miR-1a-5p表达与Cry1Ab蛋白敏感性的关系,为揭示miRNA在昆虫Bt抗性产生过程中的作用提供依据。【方法】通过荧光定量PCR,研究亚洲玉米螟Cry1Ab抗性品系(ACB-AbR)和Bt敏感品系(ACB-BtS)表皮及中肠组织中miR-1a-5p... 详细信息

【目的】探索亚洲玉米螟miR-1a-5p表达与Cry1Ab蛋白敏感性的关系,为揭示miRNA在昆虫Bt抗性产生过程中的作用提供依据。【方法】通过荧光定量PCR,研究亚洲玉米螟Cry1Ab抗性品系(ACB-AbR)和Bt敏感品系(ACB-BtS)表皮及中肠组织中miR-1a-5p的表达差异。以Sf9细胞为研究对象,通过转染miR-1a-5p促进剂(Mimics)或抑制剂(Inhibitor)改变细胞中miR-1a-5p的表达量,测定不同处理细胞对Cry1Ab蛋白的敏感性,探讨miR-1a-5p表达量改变后Sf9细胞对Cry1Ab蛋白的敏感性变化。通过荧光素酶报告试验,研究miR-1a-5p对潜在靶标基因Unigene12370_All的调控作用。【结果】ACB-AbR表皮组织中miR-1a-5p的表达量显著高于ACB-BtS表皮组织,ACB-AbR中肠组织中miR-1a-5p的表达量显著低于ACB-BtS中肠组织;ACB-AbR和ACB-BtS幼虫表皮组织中miR-1a-5p的表达量均显著高于其中肠组织。Sf9细胞miR-1a-5p表达量升高导致Sf9细胞对Cry1Ab蛋白的敏感性增强,反之亦然。荧光素酶报告试验结果提示,miR-1a-5p与靶标基因Unigene12370_All可以结合。【结论】亚洲玉米螟miR-1a-5p表达量的变化与其对Cry1Ab蛋白敏感性的改变有关。

关键词：亚洲玉米螟 microRNA miR-1a-5p Sf9 Cry1Ab蛋白敏感性