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反相高效液相色谱法定量检测重组人心钠素

中国新药与临床杂志 2004年第7期23卷 437-438页

作者：周国卫于志江陈旭周兆平深圳国家生化工程技术开发中心广东深圳518057

目的 :建立反相高效液相色谱法 (RP HPLC)测定重组人心钠素 (rhANP)含量的方法。方法 :在WatersAlliance 2 6 90高效液相色谱仪上 ,以WatersYMC PackC18柱 (2 5 0mm× 4 .6mm ,5μm)为分离柱 ,996紫外可见分光光度检测器 ,检测波长 2 15... 详细信息

目的 :建立反相高效液相色谱法 (RP HPLC)测定重组人心钠素 (rhANP)含量的方法。方法 :在WatersAlliance 2 6 90高效液相色谱仪上 ,以WatersYMC PackC18柱 (2 5 0mm× 4 .6mm ,5μm)为分离柱 ,996紫外可见分光光度检测器 ,检测波长 2 15nm ,流动相A :0 .1%三氟乙酸水溶液 ;流动相B :0 .1%三氟乙酸乙腈。进行线性梯度洗脱 ,B相 0 ,30 ,35min比例依次为 0 % ,6 0 % ,10 0 %。结果 :rhANP在 2 .12～ 2 1.2 0mg·L- 1浓度范围内呈现良好的线性关系 (r =0 .9996 ,n =5 ) ,平均回收率大于 95 %。结论 :RP HPLC法测定rhANP的方法准确、快速、可行。

关键词：色谱法高压液相重组蛋白质类心钠素重组人心钠素

巴氏杀菌和超巴氏杀菌对牛乳清蛋白结构及热稳定性的影响

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农业工程学报 2019年第6期35卷 307-313页

作者：王喜波张安琪王玉莹崔强周国卫王琳东北农业大学食品学院哈尔滨150030

为了研究巴氏杀菌与超巴氏杀菌处理对牛乳清蛋白结构的影响,采用热力学和光谱学等方法测定乳清蛋白结构及稳定性。红外光谱分析结果显示巴氏杀菌处理对乳清蛋白二级结构影响不显著,而经超巴氏杀菌处理后的乳清蛋白中α-螺旋结构含量显... 详细信息

为了研究巴氏杀菌与超巴氏杀菌处理对牛乳清蛋白结构的影响,采用热力学和光谱学等方法测定乳清蛋白结构及稳定性。红外光谱分析结果显示巴氏杀菌处理对乳清蛋白二级结构影响不显著,而经超巴氏杀菌处理后的乳清蛋白中α-螺旋结构含量显著减少,无规则卷曲结构含量显著增多,结构转变的更为无序,其稳定性更好;荧光光谱分析结构表明经121℃、5 s超巴氏杀菌处理的乳清蛋白样品发生红移,说明超巴氏杀菌改变了乳清蛋白二级和三级结构;差示扫描量热法分析结果显示121℃、5 s热处理的乳清蛋白样品热变性温度为99.9℃,高于巴氏杀菌处理的乳清蛋白样品,表明超巴氏杀菌处理后的乳清蛋白样品的稳定性显著提高,期望为制备高品质乳提供理论基础。

关键词：热处理结构分析热性能巴氏杀菌超巴氏杀菌乳清蛋白

大豆分离蛋白与单糖、双糖、多糖共价复合物的冻融特性及结构表征

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食品科学 2020年第12期41卷 28-35页

作者：王玉莹张安琪周国卫王琳王喜波东北农业大学食品学院黑龙江哈尔滨150030

研究糖种类对大豆分离蛋白(soybean protein isolate,SPI)-糖共价复合物冻融特性的影响,以改性产物的乳化性质和乳析指数为指标,研究SPI与葡萄糖(glucose,G)、麦芽糖(maltose,M)和葡聚糖(dextran,D)共价复合产物冻融特性的变化,并分析... 详细信息

研究糖种类对大豆分离蛋白(soybean protein isolate,SPI)-糖共价复合物冻融特性的影响,以改性产物的乳化性质和乳析指数为指标,研究SPI与葡萄糖(glucose,G)、麦芽糖(maltose,M)和葡聚糖(dextran,D)共价复合产物冻融特性的变化,并分析改性产物的出油率、接枝度、傅里叶变换红外光谱、荧光光谱变化情况。结果表明,在反应温度80℃、反应时间3 h、蛋白质量分数4%、SPI与M质量比4∶1的条件下,SPI-麦芽糖共价复合物(SPI-M)的乳化活性和乳化稳定性分别是对照样品的1.41倍和1.29倍,经过3次冻融循环后,乳析指数分别降低了29.68%、28.3%、29.57%,出油率分别降低了4.8%、16.8%、22.6%,SPI-M的冻融稳定性显著提高,且SPI-M的乳化性和冻融稳定性均好于SPI-葡萄糖共价复合物(SPI-G)和SPI-葡聚糖共价复合物(SPI-D)。接枝度分析表明SPI-M的接枝度明显高于SPI-G和SPI-D的接枝度;傅里叶变换红外光谱分析表明糖分子以共价键的形式接入到SPI分子中;荧光分析表明蛋白结构发生改变。

关键词：大豆分离蛋白乳化性乳析指数冻融循环冻融稳定性

超声时间对大豆-乳清混合蛋白结构及乳化性质的影响

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农业机械学报 2020年第8期51卷 358-364页

作者：王喜波王琳周国卫乔金文张安琪王玉莹东北农业大学食品学院哈尔滨150030

通过混合动植物蛋白得到具有全新口感和对人体健康更有益的双蛋白食品越来越受到重视。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、傅里叶红外光谱、紫外光谱、8-苯胺-1-萘磺酸荧光探针等手段研究了超声时间对大豆-乳清混合蛋白(SPI-WPI)结构及乳化性质... 详细信息

通过混合动植物蛋白得到具有全新口感和对人体健康更有益的双蛋白食品越来越受到重视。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、傅里叶红外光谱、紫外光谱、8-苯胺-1-萘磺酸荧光探针等手段研究了超声时间对大豆-乳清混合蛋白(SPI-WPI)结构及乳化性质的影响。结果表明:超声处理不会使混合蛋白发生降解,但对其二级、三级结构影响显著;随超声时间的增加,SPI-WPI二级结构中α-螺旋和β-折叠含量降低、β-转角含量增加,无规则卷曲含量也略有增加;由表面疏水性可知,超声处理后混合蛋白分子构象发生了改变,蛋白分子内部多肽链部分展开,蛋白结构变得更加舒展,疏水基团暴露,表面活性增强,乳化性增高;超声处理后,蛋白浊度显著降低,说明超声处理产生的空穴效应使蛋白粒子更加分散;混合蛋白体系乳化活性指数与乳化稳定性指数先增加、后降低,超声处理30 min时,混合蛋白体系乳化性最好。

关键词：大豆分离蛋白乳清分离蛋白超声波处理结构特性乳化特性

热处理对糖基化大豆蛋白乳液冻融稳定性的影响

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农业机械学报 2020年第7期51卷 389-396页

作者：王喜波周国卫王小丹王琳张安琪王玉莹东北农业大学食品学院哈尔滨150030

以大豆分离蛋白(Soy protein isolate,SPI)、大豆分离蛋白水解物(Soy protein isolate hydrolysate,SPH)和葡聚糖(Dextran,D)为原料,采用湿热法制备SPI-D和SPH-D糖基化产物,研究不同温度(30、50、70、90℃)处理对糖基化大豆蛋白乳液冻融稳定性的影响。试验采用SDS-PAGE鉴定大豆分离蛋白糖基化产物,并以粒径、聚结程度、出油率、乳析指数和乳液的微观结构作为乳液稳定性的评价指标。SDS-PAGE表明,SPI和葡聚糖发生了美拉德反应,并形成共价复合物。研究发现,所有热处理样品的冻融稳定性均有所提高。与对照相比,热处理后的乳液在3次冻融循环后粒径减小,聚结程度和出油率也降低,SPI的聚结程度从未处理的3403.90%降低到90℃处理的348.75%,SPI-D从1181.49%降低到191.59%,SPH-D从806.17%降低到138.73%,出油率也分别降低了62.53%、43.26%和42.62%。随着温度(30~90℃)的升高,SPI的乳析指数呈下降的趋势,当温度达到90℃时,乳析指数降低了22.46%,而SPI-D和SPH-D在热处理(30~90℃)后乳析指数也呈现总体下降的趋势。通过显微镜观察发现,热处理乳液经过3次冻融循环后仍具有较小的油滴尺寸。

关键词：大豆分离蛋白冻融稳定性热处理糖基化

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辐照辅助接枝反应提高大豆蛋白乳液冻融性质

食品科学 2020年第11期41卷 135-140页

作者：王玉莹张安琪王琳周国卫徐宁王喜波东北农业大学食品学院黑龙江哈尔滨150030

采用辐照技术辅助大豆分离蛋白(soybean protein isolate,SPI)与麦芽糖(maltose,M)发生接枝反应,进而改善SPI乳液的冻融性质,研究SPI质量分数、m(SPI)∶m(M)、辐照剂量对改性产物的接枝度、褐变程度和乳析指数的影响。结果表明,在SPI质... 详细信息

采用辐照技术辅助大豆分离蛋白(soybean protein isolate,SPI)与麦芽糖(maltose,M)发生接枝反应,进而改善SPI乳液的冻融性质,研究SPI质量分数、m(SPI)∶m(M)、辐照剂量对改性产物的接枝度、褐变程度和乳析指数的影响。结果表明,在SPI质量分数4%、m(SPI)∶m(M)为4∶1和辐照剂量7.5 kGy的条件下,经历1、2、3次冻融循环后,与SPI相比,改性SPI乳析指数分别降低了23.58%、29.9%和31.2%。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果证实SPI与麦芽糖发生接枝反应。改性SPI乳液经过冻融循环的出油率与SPI相比得到明显改善。光学显微镜观察结果也证实优化后的SPI微观结构更稳定。研究表明辐照能够辅助接枝反应,提高大豆蛋白乳液冻融性质,为综合改性技术提供新思路。

关键词：大豆分离蛋白辐照接枝反应乳液冻融性质

柠檬酸钆配合物对宫颈癌细胞作用的蛋白质组学研究

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中国稀土学报 2009年第3期27卷 435-440页

作者：李艳晖刘琼倪嘉缵刘建军周国卫深圳大学生命科学学院广东深圳518056 深圳市疾病控制中心广东深圳518000 深圳大学生化中心广东深圳518056

为研究稀土化合物抗癌作用及其机制,本文采用差异蛋白质组学方法研究钆对宫颈癌细胞(HeLa)的作用,以四噻唑蓝比色法(MTT法)检测柠檬酸钆配合物([Gd(Cit)2]3-)对HeLa细胞生长的影响,并用Hoechst33258染色法观察细胞凋亡形态,利用双向凝... 详细信息

为研究稀土化合物抗癌作用及其机制,本文采用差异蛋白质组学方法研究钆对宫颈癌细胞(HeLa)的作用,以四噻唑蓝比色法(MTT法)检测柠檬酸钆配合物([Gd(Cit)2]3-)对HeLa细胞生长的影响,并用Hoechst33258染色法观察细胞凋亡形态,利用双向凝胶电泳技术分离[Gd(Cit)2]3-作用HeLa细胞前后的蛋白,经图像分析后对差异点,进行MALDI-TOF-MS鉴定和数据检索。结果表明0.005～1mmol.L-1浓度范围内的[Gd(Cit)2]3-对HeLa细胞生长的影响存在浓度依赖性。Hoechst33258染色结果表明0.07mmol.L-1[Gd(Cit)2]3-作用24h对HeLa细胞的生长的抑制率为34%。质谱共鉴定出12个差异表达蛋白质点,包括延伸因子2、过氧化酶6、亲环蛋白A、烯醇酶1等在细胞中分别参与蛋白质转录与翻译、氧化应激、信号传导等过程的蛋白质。提示[Gd(Cit)2]3-可能通过调节胞内氧化应激水平,介导与调控信号转导与蛋白质表达等,从而诱导HeLa癌细胞凋亡。

关键词：柠檬酸钆 HeLa细胞蛋白质组学稀土

超声处理对大豆分离蛋白-乳清分离蛋白混合蛋白功能特性的影响

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食品科学 2019年第23期40卷 111-116页

作者：崔强王琳周国卫董洋洋王喜波江连洲东北农业大学食品学院

为了研究超声处理对大豆分离蛋白(soy protein isolate,SPI)-乳清分离蛋白(whey protein isolate,WPI)混合体系乳化性、凝胶性以及结构状态的影响,采用不同超声功率处理混合蛋白体系,分析混合蛋白乳化活性、乳化稳定性、凝胶强度、持水... 详细信息

为了研究超声处理对大豆分离蛋白(soy protein isolate,SPI)-乳清分离蛋白(whey protein isolate,WPI)混合体系乳化性、凝胶性以及结构状态的影响,采用不同超声功率处理混合蛋白体系,分析混合蛋白乳化活性、乳化稳定性、凝胶强度、持水性等功能特性变化,并采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外光谱、扫描电子显微镜研究其结构特征变化。结果表明:SPI-WPI混合体系在超声功率为300 W时乳化活性与乳化稳定性分别达到最大值(76.46 m2/g和22.83 min);紫外光谱发生轻微红移,说明内部基团暴露,蛋白结构发生改变;SPI-WPI混合体系凝胶强度与持水性在超声功率300 W时均达到最大值,分别为1000.93 g和87.11%,与扫描电子显微镜观察结果一致,混合蛋白凝胶具有致密、规则的三维网状结构。说明超声处理能有效提高SPI-WPI混合蛋白的功能特性。

关键词：大豆分离蛋白乳清分离蛋白乳化性凝胶性超声波

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物理教学中问题创设探究

保山师专学报 2005年第5期24卷 90-91页

作者：周国卫保山市昌宁县第二中学云南昌宁678101

数学家哈尔莫说过“有了问题,思维才有方向;有了问题,思维才有动力;有了问题,思维才有创新。”创设问题,把教学内容“问题”化是教师的一项基本功。一堂课,“问题”创设质量的高低,会直接影响课堂教学的效果,一堂没有“问题”的课,应该... 详细信息

数学家哈尔莫说过“有了问题,思维才有方向;有了问题,思维才有动力;有了问题,思维才有创新。”创设问题,把教学内容“问题”化是教师的一项基本功。一堂课,“问题”创设质量的高低,会直接影响课堂教学的效果,一堂没有“问题”的课,应该说就是有问题的课。因此,认真探讨教学过程中的“问题”创设很有必要,而且很有价值和意义。

关键词：问题创设探究