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长链非编码RNA调节脂肪发育与形成的研究进展

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中南大学学报（医学版） 2018年第8期43卷 912-919页

作者：唐浩能陈雅茹周后德中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所湖南省代谢性骨病重点实验室国家代谢性疾病临床医学研究中心长沙410011 中南大学湘雅二医院检验科长沙410011

长链非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)曾一度被认为是基因组转录"噪音",然而近年来大量研究证实其能调节基因表达,参与人类众多疾病的发生发展。Lnc RNA可分别与蛋白、DNA和RNA相互作用,通过表观修饰水平、转录水平、转录后水平... 详细信息

长链非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)曾一度被认为是基因组转录"噪音",然而近年来大量研究证实其能调节基因表达,参与人类众多疾病的发生发展。Lnc RNA可分别与蛋白、DNA和RNA相互作用,通过表观修饰水平、转录水平、转录后水平调节以及充当生物媒介等方面参与基因表达的调控。近年来随着肥胖及相关疾病的发生率越来越高以及其对人类健康和社会发展产生的严重影响,科学家们也试图进一步从非编码RNA领域来探索肥胖的发病机制。越来越多的lnc RNA被证实参与对脂肪组织(白色脂肪和棕色脂肪)成脂、发育以及能量代谢的调控。

关键词：长链非编码RNA 肥胖脂肪形成

尼尔雌醇和左炔诺孕酮对人成骨肉瘤MG-63细胞株雌激素受体亚型的作用

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中南大学学报（医学版） 2010年第12期35卷 1248-1253页

作者：杨开初廖二元周后德武警广东边防总队深圳医院内科广东深圳518029 中南大学湘雅二医院内分泌研究所长沙410011

目的:观察不同浓度的尼尔雌醇(NYL)和左炔诺孕酮(LNG)对人成骨肉瘤MG-63细胞株ERα和ERβ表达的作用,探讨旁分泌效应对ERα和ERβ基因表达的影响。方法:人成骨肉瘤MG-63细胞株分为(1)空白对照组:用含1%BSA无血清MEM培养液培养48h;(2)阳... 详细信息

目的:观察不同浓度的尼尔雌醇(NYL)和左炔诺孕酮(LNG)对人成骨肉瘤MG-63细胞株ERα和ERβ表达的作用,探讨旁分泌效应对ERα和ERβ基因表达的影响。方法:人成骨肉瘤MG-63细胞株分为(1)空白对照组:用含1%BSA无血清MEM培养液培养48h;(2)阳性对照组:培养液中加入10-8mol/L的17β-estradiol(E2)培养48h;(3)药物处理组:培养液中分别加入10-10,10-8,10-6mol/L的NYL或LNG培养48h;(4)药物处理+换液组:培养液中分别加入10-10mol/L的NYL或10-8mol/L LNG培养48h,每12h更换新的含有相应药物的培养液。用半定量RT-PCR检测各组细胞ERα和ERβ mRNA的表达。结果:NYL及LNG均能诱导ERα和ERβ亚型mRNA表达上调,诱导ERαmRNA表达的最强作用浓度均为10-6mol/L。NYL,LNG对ERβ mRNA表达最强作用浓度分别为10-10,10-8mol/L。每12h更换干预培养液对ERα表达无影响,但可抑制ERβ的表达。结论:NYL和LNG均可诱导MG-63细胞株ERα和ERβ mRNA表达上调,且2种亚型的表达存在相互制约关系;在NYL和LNG诱导ER亚型表达上调过程中ERβ的表达可能受到旁分泌作用的影响。

关键词：尼尔雌醇左炔诺孕酮雌激素,受体亚型旁分泌效应

1,25-二羟维生素D_3对人成骨细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子的作用

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中华内科杂志 2005年第2期44卷 125-128页

作者：郭丽娟罗湘杭谢辉周后德廖二元中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所长沙410011

目的研究1,25-二羟维生素D3 [1α,25(OH)2D3]对人成骨细胞基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-2、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的影响,探讨1α,25(OH)2D3调节骨代谢作用机制. 方法人成骨细胞用1α,25(OH)... 详细信息

目的研究1,25-二羟维生素D3 [1α,25(OH)2D3]对人成骨细胞基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-2、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的影响,探讨1α,25(OH)2D3调节骨代谢作用机制. 方法人成骨细胞用1α,25(OH)2D3干预.Western杂交检测MT1-MMP蛋白质表达.MMP-1、MMP-2、TIMP-1的分泌及MMP-2的活性用ELISA检测. Northern杂交检测维生素 D 受体、 MT1-MMP mRNA表达. 结果 1α,25(OH)2D3对人成骨细胞MMP-1、MMP-2、TIMP-1表达无影响, 10-10～10-8 mol/L 1α,25(OH)2D3干预诱导成骨细胞 MT1-MMP表达呈剂量依赖性(P值均<0.05);促进MMP-2激活呈剂量依赖性[MMP-2活性分别为(42.3 ± 8.6)、(64.4 ± 11.4)、(93.5 ± 9.9)μg/L, P值均<0.05]. 结论由于MT1-MMP在骨吸收过程中起着关键作用,1α,25(OH)2D3可通过诱导成骨细胞MT1-MMP表达刺激骨吸收.

关键词：细胞基质金属蛋白酶 25-二羟维生素D3 MT1-MMP 基质金属蛋白酶抑制因子膜型基质金属蛋白酶 MMP-2 Northern TIMP-1表达 Western ELISA检测人成骨细胞 MMP-1 剂量依赖性维生素D受体 mRNA表达杂交检测蛋白质表达 mol/L

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鼻咽癌癌变的分子机理

生物化学与生物物理进展 2006年第10期33卷 922-931页

作者：李桂源刘华英周鸣周后德李小玲中南大学肿瘤研究所长沙410078

鼻咽癌是一种多基因遗传性肿瘤,在中国南方和国外中国南方移民及后裔中发病率极高,严重危害了我国南方地区人民生命健康.对于这样一种具有明显民族聚集现象和地域差异的恶性肿瘤,目前认为其病理发病机制与遗传和环境因素的共同作用密切... 详细信息

鼻咽癌是一种多基因遗传性肿瘤,在中国南方和国外中国南方移民及后裔中发病率极高,严重危害了我国南方地区人民生命健康.对于这样一种具有明显民族聚集现象和地域差异的恶性肿瘤,目前认为其病理发病机制与遗传和环境因素的共同作用密切相关.现主要阐述鼻咽癌作为一种多基因遗传性肿瘤的病因发病机制,初步建立鼻咽癌易感基因群的概念和鼻咽癌发生发展过程中易感基因群主导的多阶段性多米诺骨牌效应分子机制假说,为寻找鼻咽癌遗传易感风险因子,筛选鼻咽癌高危人群以及探索鼻咽癌靶向性及个体化的诊断和治疗手段奠定实验与理论基础.

关键词：鼻咽癌病因发病机制易感基因群多阶段性多米诺骨牌效应

新的天然免疫保护分子——PLUNC家族蛋白

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生物化学与生物物理进展 2004年第9期31卷 767-771页

作者：周后德李小玲李桂源中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410011

在呼吸道上皮与消化道上皮的表面 ,覆盖有一层由免疫保护分子所组成的蛋白质混合物 ,在上皮组织与外界各种信号之间 ,它们起着信号传递中介与信号执行分子的作用 .我们新克隆的NASG基因为这一混合物添加了新的成员 ,对其结构与功能分析... 详细信息

在呼吸道上皮与消化道上皮的表面 ,覆盖有一层由免疫保护分子所组成的蛋白质混合物 ,在上皮组织与外界各种信号之间 ,它们起着信号传递中介与信号执行分子的作用 .我们新克隆的NASG基因为这一混合物添加了新的成员 ,对其结构与功能分析表明 :它属于腭、肺及鼻咽上皮克隆 (PLUNC)家族中SPLUNC1的全新转录本 .目前发现人类PLUNC家族至少有 8个以上成员 ,分布在人类 2 0号染色体大约 30 0kb的狭窄区域 ,它们具有杀菌 \渗透增强蛋白结构域 ,在进化上高度保守 ,每个成员分别在呼吸道上皮的不同部位特异性表达 ,具有潜在的结合细菌脂多糖的功能 ,能对外来物理及化学刺激做出反应 ,以分泌蛋白的形式进入鼻咽分泌物或唾液中 ,部分家族成员可能具有抗微生物、清除有害化学物质、抗肿瘤等多重功效 .以上说明 ,PLUNC家族可能是上呼吸道的一种新的天然免疫保护分子。

关键词： PLUNC家族上呼吸道天然免疫保护分子

雌二醇和孕酮对人成骨细胞胰岛素受体底物的作用

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中华医学杂志 2005年第11期85卷 743-746页

作者：黄秋霞周后德廖二元胡平安中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所长沙410011

目的观察雌二醇和孕酮对人成骨细胞胰岛素受体底物(IRS)表达的影响。探讨雌、孕激素对绝经后骨质疏松症的作用机制。方法用半定量RTPCR检测细胞IRS1、IRS2mRNA的表达;分别用免疫印迹和免疫共沉淀检测细胞IRS1、IRS2蛋白表达及磷酸化。... 详细信息

目的观察雌二醇和孕酮对人成骨细胞胰岛素受体底物(IRS)表达的影响。探讨雌、孕激素对绝经后骨质疏松症的作用机制。方法用半定量RTPCR检测细胞IRS1、IRS2mRNA的表达;分别用免疫印迹和免疫共沉淀检测细胞IRS1、IRS2蛋白表达及磷酸化。结果雌二醇和孕酮均使人成骨细胞IRS2mRNA的表达上调,分别为对照组的421%±68%(P0.05)。雌二醇、孕酮、雌二醇和孕酮联合干预上调细胞IRS2蛋白的表达,分别为对照组的487%±65%、507%±54%和552%±47%,雌二醇、孕酮、雌二醇和孕酮联合干预使IRS1去磷酸化,分别为对照组的54%±7.6%(P<0.05),37%±4.2%,21.2%±3.0%(P<0.01),对IRS1蛋白的表达无影响。结论雌二醇和孕酮均可使人成骨细胞IRS2mRNA及蛋白的表达上调,并促使IRS2的磷酸化,二者之间存在正性协同效应。虽然二者在转录和翻译水平对IRS1表达无影响,但可促使IRS1蛋白去磷酸化。因而,雌激素与孕激素合用在骨质疏松的防治中可能具有重要的意义。

关键词：雌二醇 IRS-1 孕酮表达人成骨细胞胰岛素受体底物对照组 RNA 去磷酸化蛋白

尼尔雌醇和左炔诺孕酮对人成骨肉瘤MG-63细胞株OPG/OPGL的作用

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中南大学学报（医学版） 2004年第6期29卷 667-670页

作者：杨开初廖二元周后德肖新华武警广东边防总队深圳医院内科深圳518029 中南大学湘雅二医院内分泌所长沙410011

目的 :观察不同浓度的尼尔雌醇 (NYL)和左炔诺孕酮 (LNG)对MG 6 3细胞株OPG/OPGL表达的作用 ,探讨旁分泌效应对其表达的影响。方法 :用半定量RT PCR检测不同浓度的两种药物分别干预的MG 6 3细胞OPG/OPGLmRNA表达。结果 :两种药物均能促... 详细信息

目的 :观察不同浓度的尼尔雌醇 (NYL)和左炔诺孕酮 (LNG)对MG 6 3细胞株OPG/OPGL表达的作用 ,探讨旁分泌效应对其表达的影响。方法 :用半定量RT PCR检测不同浓度的两种药物分别干预的MG 6 3细胞OPG/OPGLmRNA表达。结果 :两种药物均能促进MG 6 3细胞株OPG表达增多 ,最佳作用浓度均为 10 6mol/L。两者均能显著抑制OPGLmRNA表达。更换培养液可使NYL (10 10 mol/L)干预组表达OPG减少。结论 :NYL和LNG均能促进MG 6 3细胞株OPG表达 ,并抑制OPGL的表达。NYL对OPG表达调控过程中可能涉及MG 6

关键词： MG-63细胞 OPG mRNA表达左炔诺孕酮尼尔雌醇成骨肉瘤旁分泌表达调控半定量RT-PCR 培养液

雌激素诱导MG63细胞MT1MMP蛋白表达的信号转导通路

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中华内分泌代谢杂志 2004年第4期20卷 357-359页

作者：金亚廖二元罗湘杭周后德中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所

目的研究雌激素诱导MG63细胞膜型基质金属蛋白酶1(MT1MMP)蛋白表达相关的信号转导途径。方法培养的MG63细胞用雌激素受体阻断剂ICI182780孵育48h后,再用不同浓度的ICI182780、H89、H7、PD98059、SB203580、Genistein、PDTC和17βE2共同... 详细信息

目的研究雌激素诱导MG63细胞膜型基质金属蛋白酶1(MT1MMP)蛋白表达相关的信号转导途径。方法培养的MG63细胞用雌激素受体阻断剂ICI182780孵育48h后,再用不同浓度的ICI182780、H89、H7、PD98059、SB203580、Genistein、PDTC和17βE2共同培养,以阻断核受体、蛋白激酶(PK)A、PKC、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38MAPK、酪氨酸蛋白激酶(PTK)、核因子(NF)κB的信号转导。细胞被干预后,提取细胞蛋白,用免疫印迹法和免疫组化观察MT1MMP蛋白表达。结果免疫印迹显示,雌激素促进MT1MMP表达,NFκB、PTK被阻断后MT1MMP表达下调;免疫组化发现MT1MMP在胞浆和胞膜上均有表达,但胞核无表达。结论雌激素主要通过NFκB和PTK途径调控MG63细胞的MT1MMP表达。

关键词： MT1-MMP MG63细胞雌激素蛋白表达 PTK 诱导 NF-kB 核受体阻断剂蛋白激酶

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生物荧光氧化硅纳米颗粒的研制与应用

物理化学学报 2003年第4期19卷 311-314页

作者：朱诗国唐珂向娟娟吕红斌李小玲聂新民周后德沈守荣李桂源中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078

运用OP-10(壬基酚聚氧乙烯醚)/环己烷/氨水微乳液自组装体系合成了罗丹明B嵌入的荧光氧化硅纳米颗粒.通过电镜检测、光谱分析以及荧光猝灭试验研究了荧光颗粒的特性.将荧光纳米颗粒与培养细胞共培育后,通过激光扫描共聚焦显微镜和流式... 详细信息

运用OP-10(壬基酚聚氧乙烯醚)/环己烷/氨水微乳液自组装体系合成了罗丹明B嵌入的荧光氧化硅纳米颗粒.通过电镜检测、光谱分析以及荧光猝灭试验研究了荧光颗粒的特性.将荧光纳米颗粒与培养细胞共培育后,通过激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞仪研究了不同时间点细胞内荧光信号和荧光强度.结果表明,合成的荧光氧化硅纳米颗粒粒径小(约20nm),分布均匀,形态规则,表面光滑圆润,发光性质稳定.它可被体外培养细胞有效摄入,并可在培养细胞中检测到较强的荧光信号和较高的荧光强度.这提示生物荧光氧化硅纳米颗粒在细胞生物学、超微化学与免疫检测等领域将具有重要应用前景.

关键词：氧化硅纳米颗粒纳米生物标志物罗丹明B 半导体纳米晶壬基酚聚氧乙烯醚环己烷自组装细胞生物学超微化学免疫检测