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伊维菌素抑制结直肠癌细胞增殖的作用及机制研究

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伊维菌素抑制结直肠癌细胞增殖的作用及机制研究

作者：周世灿河南大学

学位级别：硕士

背景当前,结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)是全球癌症中常见癌症之一,排名第三;CRC导致的死亡率分别在全球排名中排第二位和在中国排名中排第五位。2020年美国CRC的新增确诊患者约为14.8万人。2015年我国CRC新发病人数约为38.8万人,CR... 详细信息

背景当前,结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)是全球癌症中常见癌症之一,排名第三;CRC导致的死亡率分别在全球排名中排第二位和在中国排名中排第五位。2020年美国CRC的新增确诊患者约为14.8万人。2015年我国CRC新发病人数约为38.8万人,CRC导致的死亡数约为18.7万人。在不健康生活方式、人口老龄化、环境暴露和工业化进程加快等因素的共同作用下,我国CRC的发病率和死亡率日渐攀升。近年来,CRC给国家和家庭造成沉重的经济负担,已经成为影响国民生命健康的主要疾病之一。目前CRC的治疗多采用以手术治疗为基础,以放化疗、生物治疗和靶向治疗等为辅的综合疗法。化学治疗可以达到降期减瘤,提高手术切除率,消除残余微小肿瘤,延长生存等目的。但由于CRC的发生发展及转移的作用机制非常复杂,目前临床上尚缺少治疗CRC的特效药。因此,深入寻找CRC治疗新药物具有急迫的科学意义和重大临床应用价值,特别是寻找一些安全“老药”的新用途或许是治疗CRC的捷径。伊维菌素(Ivermectin,IVM)是16元环大环内酯类化合物阿维菌素的一种衍生物,最早作为一种抗寄生虫药而被广泛应用于临床。研究发现,IVM可以抑制黄病毒、登革热病毒等多种病毒的增殖。此外,研究表明IVM具有潜在的抗肿瘤作用,可以通过参与多条信号通路来发挥抑制癌细胞增殖、侵袭和转移的作用。IVM可以诱导肿瘤细胞发生多种形式的细胞程序性死亡,包括凋亡、自噬和焦亡等。IVM可以通过增加活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)的含量促使细胞凋亡。此外,IVM还能抑制肿瘤干细胞增殖,逆转药物耐药,增强化疗药物疗效。然而,IVM是否具有抗CRC的作用及其作用机制尚不清楚。目的本研究拟探讨IVM对结直肠癌SW480和SW1116细胞增殖的影响,并进一步探讨IVM通过何种途径抑制结直肠癌细胞的增殖,明确IVM诱导细胞凋亡的分子机制,为开发治疗结直肠癌的新药物提供理论基础。方法与结果(1)CCK-8检测不同浓度(0μM、2.5μM、5μM、10μM、15μM、20μM和30μM)IVM分别处理结直肠癌SW480和SW1116细胞12h、24h和36h后,细胞存活率的变化。结果显示同一时间,不同浓度的IVM处理后,随着浓度的增加,其存活率逐渐下降,并成剂量依赖性(D:P<0.01);同一浓度,不同时间,随着IVM培养时间的增加,细胞的存活率在逐渐下降(T:P<0.01)。IVM对结直肠癌细胞的抑制作用存在药物浓度和处理时间的交互作用(T×D:P<0.01)。IVM处理SW480和SW1116细胞12h、24h和36h后,其IC分别为16.17±0.76μM、15.34±0.81μM、12.11±0.97μM和7.60±0.62μM、6.27±0.70μM、5.76±0.81μM。(2)显微镜下观察不同浓度IVM(0μM、5μM、10μM和20μM)处理结直肠癌SW480和SW1116细胞24h后的细胞形态。结果显示:随着IVM浓度的增加,细胞逐渐皱缩变圆且越来越稀疏,死亡的细胞越来越多。(3)Annexin V-FITC/7-AAD染色结合流式细胞术检测不同浓度IVM(0μM、5μM、10μM和20μM)处理细胞6h后细胞凋亡情况的变化。对于SW480细胞,0μM、5μM、10μM和20μM浓度IVM培养细胞6h后,其凋亡率分别为9.48%、10.5%、19.87和30.5%,即随着IVM浓度增加细胞凋亡比例显著增加。对于SW1116细胞,0μM、5μM,10μM和20μM浓度IVM培养细胞6h后,其凋亡率分别为4.65%、8.51%、12.27%和12.66%,即IVM成剂量依赖性诱导SW1116的凋亡。(4)酶标仪检测不同浓度(0μM、5μM、10μM和20μM)IVM处理结直肠癌细胞6h后,Caspase3/7活性的变化。结果显示:对于结直肠癌SW480和SW1116细胞,随着IVM浓度增加,Caspase3/7活性增加(P<0.05)。(5)Western blot实验检测凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2,PARP和Cleaved-PARP的变化。结果显示随着IVM浓度的增加,Bax/Bcl-2的比值和Cleaved-PARP的含量在逐渐增加。(6)荧光显微镜和流式细胞术检测细胞内和线粒体内ROS含量变化。不同浓度(0μM、5μM、10μM和20μM)的IVM处理结直肠癌SW1116细胞6h后分别使用DCFH-DA和Mito SOX两种荧光染料进行处理,并利用荧光显微镜进行拍照。结果显示无论是细胞内还是线粒体内,随着IVM浓度的增加,荧光强度逐渐增强。(7)流式细胞术结果显示,与不加IVM处理细胞组(Con组)相比,IVM处理后显著增加总ROS和线粒体ROS的产生;NAC(ROS抑制剂)预处理后抑制了总ROS和线粒体ROS产生。CCK-8法检测IVM

关键词：伊维菌素结直肠癌凋亡活性氧细胞周期

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直肠癌术中直肠冲洗的研究进展

中华结直肠疾病电子杂志 2020年第4期9卷 403-407页

作者：周世灿胡军红河南大学淮河医院肛肠外科开封475000

诊疗的规范和技术的进步明显延长了直肠癌患者的生存时间,改善了其生活质量,但是,近10%的局部复发率依然是结直肠外科医生不得不面对和重视的问题。一旦出现局部复发,患者的生活质量和生存时间将会受到严重影响。如何降低术后局部复发... 详细信息

诊疗的规范和技术的进步明显延长了直肠癌患者的生存时间,改善了其生活质量,但是,近10%的局部复发率依然是结直肠外科医生不得不面对和重视的问题。一旦出现局部复发,患者的生活质量和生存时间将会受到严重影响。如何降低术后局部复发率一直是临床医生关注的热点。术中直肠冲洗对减少肠腔内的肿瘤细胞具有积极作用,但能否降低术后局部复发率仍没有定论,本文将以此作为切入点进行讨论。

关键词：直肠肿瘤直肠冲洗术中局部复发

2019版结直肠肿瘤经自然腔道取标本手术专家共识解读

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中华结直肠疾病电子杂志 2020年第3期9卷 222-225页

作者：胡军红李兴旺周世灿王锡山河南大学淮河医院结直肠肛门外科开封475000 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院结直肠外科北京100021

中国医师协会结直肠肿瘤专业委员会于2019年更新发布了《结直肠肿瘤经自然腔道取标本手术专家共识(2019版)》,主要修改意见包括:第一,完善补充了NOSES的部分概念,明确了NOSES、NOTES、TaTME三者的辨证关系。第二,提出了借道NOSES与类-NO... 详细信息

中国医师协会结直肠肿瘤专业委员会于2019年更新发布了《结直肠肿瘤经自然腔道取标本手术专家共识(2019版)》,主要修改意见包括:第一,完善补充了NOSES的部分概念,明确了NOSES、NOTES、TaTME三者的辨证关系。第二,提出了借道NOSES与类-NOSES概念。第三,适当扩充了NOSES的适应证,把取标本的环周直径增加了2 cm。第四,增加了直肠切开,经直肠切口取标本的部分内容,增加了NOSES I式F法的内容。第五,建议对有高危复发风险的结直肠癌患者,特别是肿瘤侵及浆膜、淋巴结转移、腹腔冲洗液细胞学检查游离癌细胞为阳性或可疑阳性者、术中瘤体被过度挤压或瘤体破裂者等可进行腹腔化疗。本文对2019年版《结直肠肿瘤经自然腔道取标本手术专家共识》制定过程中的主要修改意见进行解读。

关键词：结直肠肿瘤经自然腔道取标本手术专家共识

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回肠造口术后肾功能不全的研究进展

河南大学学报（医学版） 2021年第2期40卷 152-156页

作者：张权周世灿吴航李兴旺胡军红河南大学淮河医院肛肠外科河南开封475000 郑州大学第一附属医院肛肠外科郑州450052

吻合口漏是结直肠肿瘤术后常见的并发症之一,严重时极有可能需要二次手术治疗。回肠造口在预防吻合口漏中具有一定的价值,但回肠造口也有其相应的并发症,如造口回缩、造口旁疝、造口狭窄、脱水等。其中高造口输出导致的脱水较为常见,脱... 详细信息

吻合口漏是结直肠肿瘤术后常见的并发症之一,严重时极有可能需要二次手术治疗。回肠造口在预防吻合口漏中具有一定的价值,但回肠造口也有其相应的并发症,如造口回缩、造口旁疝、造口狭窄、脱水等。其中高造口输出导致的脱水较为常见,脱水会影响水电解质平衡,进而影响肾功能。这种影响在回肠造口关闭后仍然存在,并且有发展为新的或更严重的慢性肾病的风险。本文就回肠造口的形成对肾功能的影响进行综述,以期为回肠造口的结直肠肿瘤患者术后肾功能监测提供帮助。

关键词：回肠造口肾功能不全结直肠肿瘤

2016/2018中国麻醉领域临床实践指南质量评价

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河南大学学报（医学版） 2020年第4期39卷 260-265,269页

作者：梁丽敏周世灿张挚郭亚芳张义轩河南大学淮河医院麻醉科河南开封475000

〔目的〕采用AGREE-China指南质量评价工具对我国2016/2018麻醉领域临床实践指南进行质量评价,以期了解我国麻醉领域临床实践指南现状。〔方法〕登录中国知网(CNKI)、万方数据(Wanfang)、维普(VIP)和中国生物医学文献数据库(CBM)4个中... 详细信息

〔目的〕采用AGREE-China指南质量评价工具对我国2016/2018麻醉领域临床实践指南进行质量评价,以期了解我国麻醉领域临床实践指南现状。〔方法〕登录中国知网(CNKI)、万方数据(Wanfang)、维普(VIP)和中国生物医学文献数据库(CBM)4个中文期刊数据库,检索我国近3年制订的麻醉领域相关临床实践指南,检索时限为2016-01-01/2018-12-31。由2位评价员按照纳入与排除标准独立完成文献筛选和资料提取,并采用AGREE-China对纳入指南进行质量评价。〔结果〕共纳入19部指南或共识,其在AGREE-China 5个领域平均得分如下:科学性与严谨性为19.79%,有效性与安全性为52%,经济性为0,可用性与可行性为68.42%,利益冲突为0。〔结论〕我国麻醉领域相关临床实践指南较倾向于临床实用性,但总体质量不高,大部分缺乏循证医学证据。在今后指南制订中要特别注重指南制订的科学严谨性、安全有效性和经济性,提高对利益冲突领域的关注,并及时对指南进行更新修订。

关键词：麻醉学临床实践指南共识质量评价中国临床指南评价体系

新型冠状病毒肺炎疫情下高校研究生的防控及应对措施

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中国医学工程 2020年第2期28卷 30-33页

作者：吴航周世灿张权李兴旺(综述) 胡军红(审校) 河南大学淮河医院肛肠外科河南开封475000

新型冠状病毒肺炎来势汹汹,加上其发生时间基本同步于中国春运和高校寒假,人员流动性较大,导致病毒传播迅速且广泛。高校研究生聚集性大、流动性强,面对相当严峻的疫情防控形势,政府部门和各个高校分别采取防控及应对措施,如加强科普宣... 详细信息

新型冠状病毒肺炎来势汹汹,加上其发生时间基本同步于中国春运和高校寒假,人员流动性较大,导致病毒传播迅速且广泛。高校研究生聚集性大、流动性强,面对相当严峻的疫情防控形势,政府部门和各个高校分别采取防控及应对措施,如加强科普宣传、延期开学及线上教学等一系列举措,有效阻止了疫情进一步加剧,并有效降低了教学损失,为以后突发灾难事件研究生应对提供参考。结合国家卫生健康委员会和教育部相关发布,该文为疫情期间高校研究生疫情防控和学习生活提供建议。

关键词：新型冠状病毒感染疫情高校研究生防控措施心理状况

面对新型冠状病毒住院医师规范化培训学员居家应对策略

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临床医学研究与实践 2020年第S1期5卷 61-62,65页

作者：周世灿吴航张权李兴旺胡军红河南大学淮河医院肛肠外科河南开封475000

自新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在武汉爆发以来,我国各地陆续发生新型冠状病毒肺炎疫情。新型冠状病毒因其传染力强、人群易感性高等的特点对广大人民群众的生命健康造成了严重影响。由于疫情的原因,部分住院医师规范化培训学员无法正常... 详细信息

自新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在武汉爆发以来,我国各地陆续发生新型冠状病毒肺炎疫情。新型冠状病毒因其传染力强、人群易感性高等的特点对广大人民群众的生命健康造成了严重影响。由于疫情的原因,部分住院医师规范化培训学员无法正常返岗工作。学员应在做好居家防护的基础上积极学习临床知识,开展科普宣传,为疫情防控做出自己的一份贡献。

关键词：新型冠状病毒规范化培训居家防护应对策略

中国临床试验注册中心注册的直肠癌临床试验的特征分析

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中国肿瘤外科杂志 2021年第4期13卷 356-361页

作者：吴航周世灿张权李兴旺王晨宇胡军红河南大学淮河医院普外科河南开封475000 郑州大学第一附属医院普外科河南郑州450052

目的分析中国临床试验注册中心(ChiCTR)注册的直肠癌临床试验的特点及发展趋势。方法检索ChiCTR数据库,检索时限从建库至2020年12月31日,搜集所有与直肠癌相关的临床试验,并对其进行分析。结果共纳入有效直肠癌临床试验406项。其中上海... 详细信息

目的分析中国临床试验注册中心(ChiCTR)注册的直肠癌临床试验的特点及发展趋势。方法检索ChiCTR数据库,检索时限从建库至2020年12月31日,搜集所有与直肠癌相关的临床试验,并对其进行分析。结果共纳入有效直肠癌临床试验406项。其中上海(88项)、广东(48项)、四川(46项)3个省市共182项,占注册临床试验总数的44.8%。注册临床试验10项及以上的机构有6个,分别是复旦大学、四川大学、中山大学、中国医学科学院、上海交通大学和青岛大学。365项试验的注册状态为预注册,41项为补注册。经费来源前三位分别为:地方财政(125项,30.8%)、自筹(110项,27.1%)和医院资助(40项,9.9%)。研究类型以干预性研究为主,有215项(52.9%)。176个随机对照试验中,124项(70.5%)在盲法部分的填写为空白/缺失。在406项直肠癌临床试验中,多中心临床试验仅28项,其余均为单中心临床试验。结论 ChiCTR注册直肠癌临床试验数呈逐年递增趋势,但存在地区和机构分布不均衡,高等级基金资助比例低,试验设计不规范,多中心临床试验较少等问题。管理部门应继续加大临床试验注册宣传力度,提升注册者的规范化意识,并建立更完善的注册审核机制。同时,政府部门应增加高级别基金的投入比例。

关键词：直肠癌临床试验中国临床试验注册中心

2016～2018年中国结直肠癌临床实践指南的质量评价

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中国肿瘤外科杂志 2019年第1期11卷 15-20页

作者：周世灿张权李兴旺王晨宇张军杰葛政胡军红河南大学淮河医院肛肠外科河南开封475000

目的了解我国2016年至2018结直肠癌临床实践指南(CPGs)的现状并采用AGREE-China工具对其质量进行评价,为我国规范制定结直肠癌CPGs提供参考并为临床实践提供明确的推荐意见。方法计算机检索中国知网数据库(CNKI)、万方数据库(Wanfang Da... 详细信息

目的了解我国2016年至2018结直肠癌临床实践指南(CPGs)的现状并采用AGREE-China工具对其质量进行评价,为我国规范制定结直肠癌CPGs提供参考并为临床实践提供明确的推荐意见。方法计算机检索中国知网数据库(CNKI)、万方数据库(Wanfang Data)、维普中文科技期刊数据库(VIP)和中国生物医学文献数据库(CBM)4个中文期刊数据库,搜集我国制定的结直肠癌CPGs,检索时限为2016年1月1日至2018年12月31日。由2位评价员按照纳入与排除标准独立筛选文献和提取资料,采用AGREE-China评价纳入的中国结直肠癌CPGs的质量。结果共纳入10部指南。指南在AGREE-China 5个领域平均得分如下:科学性与严谨性为21.10%,有效性与安全性为5.00%,经济性为6.00%,可用性与可行性为63.97%,利益冲突为0。结论我国结直肠癌CPGs总体质量不高,大部分缺乏循证医学证据。在今后指南制定中要特别注重指南制定的科学性与严谨性、有效性与安全性和经济性,提高对利益冲突的关注,并及时对指南进行更新修订。

关键词：结直肠癌临床实践指南共识质量评价中国临床指南评价体系