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新孢子虫NcSAG1与NcSRS2基因的原核表达与纯化

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中国兽医学报 2013年第10期33卷 1548-1551,1558页

作者：史茜员丽娟季新成于学辉新疆出入境检验检疫局新疆乌鲁木齐830063

PCR扩增新孢子虫NcSAG1与NcSRS2基因,将其构建至原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL-21菌株。对重组表达质粒pET28a/SRS2与pET28a/SAG1IPTG的诱导浓度和诱导温度等条件进行了摸索,确定蛋白最佳诱导时间分别为5、3h,IPTG浓度均为0.8 m... 详细信息

PCR扩增新孢子虫NcSAG1与NcSRS2基因,将其构建至原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL-21菌株。对重组表达质粒pET28a/SRS2与pET28a/SAG1IPTG的诱导浓度和诱导温度等条件进行了摸索,确定蛋白最佳诱导时间分别为5、3h,IPTG浓度均为0.8 mmol/L。经组氨酸标记Ni 2+柱纯化后获得的蛋白纯度均大于93.5%,蛋白质量浓度分别为1.23、1.1g/L。经Western blotting检测证明表达的蛋白具有较好的特异性。用纯化后pET28a/SRS2、pET28a/SAG1和二者等量混合物包被酶标板,经ELISA检测表明,表达的蛋白具有较强免疫活性,2种蛋白等量混合物包被酶标板与各蛋白单独包被酶标板检测比较,并未见D值升高。

关键词：新孢子虫 NcSAG1 NcSRS2 原核表达 Western blotting ELISA

布鲁氏菌和贝纳氏柯克斯氏体双重PCR检测方法的建立与初步应用

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中国生物工程杂志 2014年第2期34卷 78-83页

作者：彭武丽罗展荣季新成员丽娟史茜于学辉石河子大学生命科学学院新疆出入境检验检疫局中国人民解放军69016部队

为建立同步检测布鲁氏菌和贝纳氏柯克斯氏体的双重PCR方法,根据GenBank上公布的布鲁氏菌Bp26基因和贝纳氏柯克斯氏体IS1111a基因,利用Primer premier 5.0软件各设计一对特异性引物,分别扩增出219 bp和130 bp的目的片段,通过优化PCR反应... 详细信息

为建立同步检测布鲁氏菌和贝纳氏柯克斯氏体的双重PCR方法,根据GenBank上公布的布鲁氏菌Bp26基因和贝纳氏柯克斯氏体IS1111a基因,利用Primer premier 5.0软件各设计一对特异性引物,分别扩增出219 bp和130 bp的目的片段,通过优化PCR反应体系和扩增条件,建立起了能够同步快速检测布鲁氏菌和贝纳氏柯克斯氏体的双重PCR方法,该方法具有较好的特异性、可重复性和较高的灵敏性。利用该双重PCR方法对流产牛抗凝全血、血清、流产胎儿及奶液等172份临床样品进行检测,共检测到布鲁氏菌感染阳性样品53份,贝纳氏柯克斯氏体感染阳性样品10份,混合感染阳性样品2份,阳性检出率分别为30.8%、5.8%、1.2%。初步临床应用结果表明,该方法可用来安全、同步、快速、灵敏地对布鲁氏菌和贝纳氏柯克斯氏体进行检测。

关键词：布鲁氏菌病 Q热感染共扩增

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牛病毒性腹泻病毒血清抗体检测

动物医学进展 2011年第9期32卷 51-53页

作者：王文张娟员丽娟季新成新疆动物卫生监督所新疆乌鲁木齐830063 奇台县动物疫病预防控制中心新疆奇台831800 新疆出入境检验检疫局新疆乌鲁木齐830063

采用Svanova公司牛病毒性腹泻病毒血清抗体ELISA抗体检测试剂盒对采自新疆10个不同地区的875份牛血清进行了牛病毒性腹泻病毒血清抗体检测,共检出抗体阳性血清759份,最高阳性率为100%,最低为55.0%,平均为86.7%。检测结果表明该病已在新... 详细信息

采用Svanova公司牛病毒性腹泻病毒血清抗体ELISA抗体检测试剂盒对采自新疆10个不同地区的875份牛血清进行了牛病毒性腹泻病毒血清抗体检测,共检出抗体阳性血清759份,最高阳性率为100%,最低为55.0%,平均为86.7%。检测结果表明该病已在新疆普遍存在,感染没有明确的地域分布规律。根据ELISA检测结果,从中选择15份血清用病毒中和试验进行检测,结果显示,所采用的ELISA检测方法具有较好的敏感性。

关键词：牛病毒性腹泻病毒血清抗体 ELISA 病毒中和试验

秭归地区6个夏橙品种果实主要矿质元素含量和糖酸等营养品质的比较

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华中农业大学学报 2008年第4期27卷 522-526页

作者：张红艳员丽娟宋文化徐娟华中农业大学园艺林学学院/园艺植物生物学教育部重点实验室武汉430070 湖北省秭归县柑橘良种繁育示范场秭归443600

以秭归地区生长的6个夏橙品种的果实为试验材料,比较品种间主要矿质元素含量和糖酸等营养成分的差异。结果表明:该地区生产的夏橙果实完熟期采收,固酸比虽然较低,但适于鲜食。果肉中K、Fe、Cu和Zn的含量品种间差异未达显著水平;无核夏... 详细信息

以秭归地区生长的6个夏橙品种的果实为试验材料,比较品种间主要矿质元素含量和糖酸等营养成分的差异。结果表明:该地区生产的夏橙果实完熟期采收,固酸比虽然较低,但适于鲜食。果肉中K、Fe、Cu和Zn的含量品种间差异未达显著水平;无核夏橙果肉中Ca、Mg元素含量最高,总体矿质营养品质较好。夏橙果汁中可溶性糖以蔗糖、果糖、葡萄糖为主,含有少量肌醇,其总体含量依次递减;无核夏橙的果汁中可溶性糖总量最高,其果糖和葡萄糖的含量显著高于其它品种,伏令夏橙次之,蜜奈夏橙最低;此外,康贝尔和蜜奈夏橙单糖积累高于双糖,而其它品种则双糖含量高于单糖。夏橙果汁中主要有机酸是柠檬酸和苹果酸,奎宁酸含量较少;红夏橙柠檬酸含量最低,其余品种的柠檬酸含量相当;伏令夏橙和奥林达果汁中苹果酸含量显著高于其它品种,蜜奈夏橙和康贝尔夏橙的苹果酸含量显著低于其它品种;各品种果汁中奎宁酸含量无显著性差异。综合本试验结果,认为该地区生产的无核夏橙的营养品质较好,但该品种化渣程度一般,风味较淡,鲜食口味相对较差。

关键词：夏橙[Citrus sinensis(L.)Osbeck] 矿质元素可溶性糖有机酸果实品质

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猪瘟病毒E2基因的扩增及序列分析

中国兽医杂志 2006年第2期42卷 7-9页

作者：曲永利季新成王臣员丽娟李毅北京市顺义区兽医站北京顺义101300 新疆出入境检验检疫局新疆乌鲁木齐830063 河南科技大学河南洛阳471000 北京市密云县兽医站北京密云101500

本研究利用RT—PCR技术，对流行于国内部分地区的9株猪瘟病毒（CSFV）E2基因进行扩增，与C-株等4株参考毒株做了同源性比较，绘制了遗传进化关系发生树，结果表明，所测序列共由442个氮基酸残基组成。可将13株CSFV分为两个组群，其E2基... 详细信息

本研究利用RT—PCR技术，对流行于国内部分地区的9株猪瘟病毒（CSFV）E2基因进行扩增，与C-株等4株参考毒株做了同源性比较，绘制了遗传进化关系发生树，结果表明，所测序列共由442个氮基酸残基组成。可将13株CSFV分为两个组群，其E2基因间的核苷酸序列同源性为81．9％～99．7％，所推导氨基酸序列同源性为88．2％～99．5％，其中9株CSFVE2基因的长度均为1324bp，编码的氨基酸序列均包括完整信号肽序列和跨膜区序列，9株流行毒株与C-株之间核苷酸序列同源性为81．9％～95．3％。所推导氨基酸序列同源性为88．2％～95．5％。说明近期流行毒株的变异呈现一定的多样性，并且多数毒株已向远离疫菌株方向变异。

关键词：猪瘟病毒 E2基因扩增序列分析

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经纬仪在管坡洞和管坡施工测量中的应用

山西水利 2005年第3期21卷 60-60,62页

作者：马宏建员丽娟吕平安平陆县水利水保局山西平陆044300 平陆县三门峡库区管理局山西平陆044300

在电灌站管坡或管坡洞开挖中,采用水准仪控制测量,施测次数多、进度慢、精度低,不能及时准确引导施工,而改用经纬仪配合塔尺测量,则具有快速、简便、精度高等优点,其测量结果可以完全满足施工要求。

关键词：经纬仪管坡施工

松科植物提取物对肉仔鸡生长和屠宰性能的影响

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中国畜牧杂志 2005年第9期41卷 40-42页

作者：王占彬李宏伟王清义杨再陈佳铭员丽娟河南科技大学动物科技学院河南洛阳471003 上海朝翔生物技术研究所上海201600

对从豫西山区野生松科植物松树皮中提取的生物活性物质用于肉仔鸡试验。选取1日龄艾维茵肉仔鸡300只,随机分为3组,每组4个重复。试验1组作对照,试验2和试验3组在肉仔鸡日粮中分别添加0.02%和0.04%松科植物松树皮提取物。经54 d饲喂试验... 详细信息

对从豫西山区野生松科植物松树皮中提取的生物活性物质用于肉仔鸡试验。选取1日龄艾维茵肉仔鸡300只,随机分为3组,每组4个重复。试验1组作对照,试验2和试验3组在肉仔鸡日粮中分别添加0.02%和0.04%松科植物松树皮提取物。经54 d饲喂试验,结果表明:试验2和试验3组的平均日增重、平均日采食量及饲料转化率均高于对照组(P0.05);2和3组肉仔鸡死亡率分别下降40%和60%,成活率明显提高;各试验组间胸肌率、腹脂率、胸肌含水率、胸肌熟肉率没有显著差异(P>0.05),而2组和3组的腿肌率和胸肌pH值显著高于对照组(P<0.05)。

关键词：畜牧学松科植物提取物生长性能屠宰性能肉仔鸡

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UV-B辐射增强对野生绿豆幼苗生长的影响

聊城大学学报（自然科学版） 2008年第4期21卷 69-71,79页

作者：员丽娟张文会聊城大学生命科学学院山东聊城252059

以野生绿豆为试验材料,研究了不同辐照度(10μW/cm2,20μW/cm2)UV-B对野生绿豆幼苗生长及光合作用相关指标的影响.结果表明,UV-B处理抑制株高和生物量的增加,降低叶绿素含量和PS反应中心传递电子的能力,导致光合作用强度下降.作为一种... 详细信息

以野生绿豆为试验材料,研究了不同辐照度(10μW/cm2,20μW/cm2)UV-B对野生绿豆幼苗生长及光合作用相关指标的影响.结果表明,UV-B处理抑制株高和生物量的增加,降低叶绿素含量和PS反应中心传递电子的能力,导致光合作用强度下降.作为一种保护性适应,UV-B辐射诱导了叶片的花青素和类胡萝卜素的合成,导致叶片的花青素含量和类胡萝卜素含量增加.上述抑制作用及诱导作用均具有剂量效应.

关键词： UV—B辐射野生绿豆光合作用

加速溶剂萃取分离-液相色谱法测定五灵脂药材中3种成分的含量

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理化检验（化学分册） 2014年第11期50卷 1373-1376页

作者：巩志国苏敏王静静员丽娟李世雨季新成朱建民新疆出入境检验检疫局技术中心乌鲁木齐830063

取五灵脂药材(1.0g)与海沙3.0g混匀,置于加速溶剂萃取(ASE)仪中,加入萃取溶剂[乙醇-水(75+25)]静态萃取循环3次,每次10min,萃取温度为100℃,压力为15 MPa。萃取液蒸缩至3mL,加C2H5OH-H2O(75+25)至5.0mL,过滤后供液相色谱分析。在色谱分... 详细信息

取五灵脂药材(1.0g)与海沙3.0g混匀,置于加速溶剂萃取(ASE)仪中,加入萃取溶剂[乙醇-水(75+25)]静态萃取循环3次,每次10min,萃取温度为100℃,压力为15 MPa。萃取液蒸缩至3mL,加C2H5OH-H2O(75+25)至5.0mL,过滤后供液相色谱分析。在色谱分离中,以Diamosil ODS C18色谱柱为固定相,用(A)甲醇和(B)乙酸(0.5+99.5)溶液以不同比例的混合液作为流动相进行梯度淋洗。在波长360nm处进行检测。药材中的芦丁、山奈酚和穗花杉双黄酮的质量浓度与相应的峰面积之间呈线性关系,3种组分的检出限(3S/N)在0.3~0.6mg·kg-1之间。在3个浓度水平条件下用标准加入法进行回收试验,测得回收率在80.0%~95.0%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)在3.2%~9.6%之间。

关键词：液相色谱法加速溶剂萃取芦丁山奈酚穗花杉双黄酮五灵脂