检索结果-南通市图书馆

作者：吴遥遥浙江大学

学位级别：硕士

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)常引起持续性感染,导致慢性肝炎,并引起肝硬化和肝细胞癌。HBV感染引起慢性化的机制尚不清楚,但病毒编码的蛋白对机体免疫应答的调节作用是其中之一,随着固有免疫应答的深入研究,HBV对固有免疫的调... 详细信息

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)常引起持续性感染,导致慢性肝炎,并引起肝硬化和肝细胞癌。HBV感染引起慢性化的机制尚不清楚,但病毒编码的蛋白对机体免疫应答的调节作用是其中之一,随着固有免疫应答的深入研究,HBV对固有免疫的调节作用也日益受到重视,同时通过诱导固有免疫应答有望在慢性HBV的治疗中发挥一定的作用。固有性免疫(innate immunity)应答是机体快速抵抗微生物病原体的重要机制。表达于免疫细胞的模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)通过识别病原相关分子模式(pathogen-associated molecular pattern,PAMP),启动一系列信号转导途径,诱导保护性细胞因子如Ⅰ型干扰素(IFN-α/β)和前炎症细胞因子的表达,发挥抗病毒固有免疫作用,并调节适应性免疫(adaptive immunity)应答。以Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)为代表的PRR是抗病毒固有免疫的关键性识别结构,TLR3,TLR7,TLR8和TLR9主要与病毒的识别有关,如TLR3识别病毒双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)类似物聚肌苷-聚胞嘧啶核苷酸(polyinosinic-poly cytosine nucleotide,polyⅠ:C)。TLRs与特异性配体结合后,通过MyD88依赖性和TRIF依赖性途径,激活NF-κB和干扰素调节因子3(interferonregulatory factor3,IRF3),诱导抗病毒免疫分子的表达。此外,胞浆内的PRR如视黄酸诱导基因Ⅰ(retinoic acid-inducible gene I,RIG-I)和黑素瘤分化相关基因5(melanoma differentiation-associated gene 5,MDA5)等也能识别病毒PAMP如dsRNA,诱导IFN-β的表达。在TLRs和RIG-I样受体(RIG-I like receptors,RLRs)介导的固有免疫应答信号通路中均能激活TANK结合激酶1(TANK-bindingkinase-1,TBK1),表明其在机体固有免疫应答中起着至关重要的作用。通过激活TBK1,活化的TBK1能诱导IRF3二聚化并转入核内,从而增强Ⅰ型干扰素的表达,调节机体的固有免疫应答,并影响适应性免疫,有可能在慢性病毒感染如HBV和HCV感染的治疗中发挥一定的作用。目的:本研究以肝癌细胞株HepG2和整合HBV的肝癌细胞株HepG2.2.15为细胞模型,研究dsRNA诱导肝细胞表达IFN-β的信号转导特点;HBcAg真核表达质粒体外转染及其重组蛋白处理HepG2细胞,观察HBcAg对dsRNA诱导肝细胞表达IFN-β的调节作用;TBK1真核表达质粒体外转染HepG2细胞和HepG2.2.15细胞,观察TBK1的抗HBV作用。本研究以期为阐明肝细胞内抗病毒免疫机制和HBV慢性感染的分子机制,同时也为研制新型慢性乙肝治疗药物提供实验和理论依据。方法:***对dsRNA诱导肝细胞表达IFN-β的调节作用:1.1 pcDNA3-HBc质粒的构建:以HBV ayw亚型全长质粒pCP10为模板,PCR扩增编码HBcAg的基因,将其插入真核表达质粒载体pcDNA3。1.2 polyⅠ:C刺激HepG2细胞诱导IFN-β的表达:取对数生长期HepG2细胞,polyⅠ:C以0μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml刺激细胞12h、24h,刺激后提取细胞总RNA,荧光定量PCR检测IFN-βmRNA表达。1.3 pcDNA3-HBc转染HepG2细胞对polyⅠ:C诱导表达IFN-β的作用:取对数生长期HepG2细胞,将质粒pcDNA3-HBc以1.2μg转染细胞,培养24h后,100μg/ml polyⅠ:C刺激细胞24h,定量PCR检测IFN-βmRNA表达;ELISA检测细胞上清中IFN-β浓度。1.4 HBcAg重组蛋白对polyⅠ:C诱导肝细胞表达IFN-β的调节作用:取对数生长期HepG2细胞,HBcAg重组蛋白以0μg/ml、10μg/ml处理细胞48h后,100μg/ml polyⅠ:C刺激细胞24h。定量PCR检测IFN-βmRNA表达;ELISA检测细胞上清中IFN-β浓度。2 TBK1对dsRNA诱导肝细胞表达IFN-β的调节作用:2.1 pcDNA3-hTBK1质粒的构建:以hTBK1 DNA为模板,PCR扩增目的基因,将其插入真核表达质粒载体pcDN

关键词：固有性免疫 TLR IFN-β HBcAg TBK1

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基于CdSe/ZnS量子点及其微球的多靶标病原微生物免疫检测技术研究

基于CdSe/ZnS量子点及其微球的多靶标病原微生物免疫检测技术研究

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作者：吴遥遥青岛科技大学

学位级别：硕士

鼠疫菌、大肠杆菌O157:H7和乙型副伤寒沙门氏菌是严重危害人类生命健康安全的病原微生物。因此,快速高效的检测手段对于这类病原微生物的早期检测非常重要。测流免疫层析技术是一种优秀的即时快速检测方法,但它的检测精度和定量能力有... 详细信息

鼠疫菌、大肠杆菌O157:H7和乙型副伤寒沙门氏菌是严重危害人类生命健康安全的病原微生物。因此,快速高效的检测手段对于这类病原微生物的早期检测非常重要。测流免疫层析技术是一种优秀的即时快速检测方法,但它的检测精度和定量能力有待提高。本文基于CdSe/ZnS量子点和CdSe/ZnS量子点微球作为测流免疫层析的荧光标记物,对鼠疫菌、大肠杆菌O157:H7和乙型副伤寒沙门氏菌的单靶标测流免疫层析技术进行了优化和评价,并在此基础上,采用十通道联排的方式进行了多靶标测流免疫层析技术的研发,以实现对多种病原微生物的快速定量检测。主要研究结果如下:1.通过热注入和微乳液聚合的方法制备的CdSe/ZnS量子点和CdSe/ZnS量子点微球荧光强度优秀,尺寸分布均一。2.两种荧光标记物的单靶标测流免疫层析检测卡针对鼠疫菌、大肠杆菌O157:H7和乙型副伤寒沙门氏菌的检测表现如下:（1）检测精准性CV均小于15%,拟合曲线线性R均大于90%,测流免疫层析检测卡具有优秀的定量检测能力。（2）检出浓度表现优秀（10～3 CFU/m L）,尤其是对于尺寸较小的量子点标记项目（鼠疫菌和大肠杆菌O157:H7）,有效检出浓度甚至达到了10～2 CFU/m L。（3）检出梯度上单颗粒荧光强度高的量子点微球表现更加优秀。（4）量子点标记的特异性评价中,针对15种其他常见病原微生物表现出良好的检测特异性。3.多靶标测流免疫层析检测卡性能评价中:各通道间统一性表现优秀;与单靶标相比在精准度、检出浓度、线性具有一致性;通道各类菌的单菌检测特异性优秀;通道各类菌的混菌检测兼容性优秀。综上所述,本研究通过CdSe/ZnS量子点和CdSe/ZnS量子点微球的研制及其优化运用于单靶标和多靶标的测流免疫层析检测领域,实现了对鼠疫菌、大肠杆菌O157:H7和乙型副伤寒沙门氏菌的快速定量检测。

关键词：测流免疫层析技术多靶标病源微生物量子点量子点微球

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名词语义和语法的多重性

名词语义和语法的多重性

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作者：吴遥遥华东师范大学

学位级别：硕士

本文是对名词语义和语法的多重性的考察和研究。主要采用“三个平面”理论，将语义分析与句法功能研究相结合：在语义分析上，应用认知语言学的相关理论对同一名词各义项的关系加以解释，或采用语义特征分析法分析各义项的语义特征;在... 详细信息

本文是对名词语义和语法的多重性的考察和研究。主要采用“三个平面”理论，将语义分析与句法功能研究相结合：在语义分析上，应用认知语言学的相关理论对同一名词各义项的关系加以解释，或采用语义特征分析法分析各义项的语义特征;在句法功能研究上，借鉴结构主义分布理论，对同一名词各义项的句法结合能力及所搭配的语义小类进行考察和分析。第一章绪论，介绍论文的相关情况，包括论文缘起、研究对象和意义、所采用的理论和方法，以及论文框架。第二章是对名词语义多重性的研究。包括两方面内容：(一)对同一名词已在词典上列出的各个义项(本文称作“已登录义项”)，分析各义项的派生关系及机制。(二)对同一名词未在词典上列出的几个义项(本文称作“未登录义项”)，分析其在语义特征上的差异。除此以外，本章还分析探讨了名词语义多重性产生的根本原因是由于人类认识事物、掌握概念的需要，而语境的激活作用则是名词语义多重性产生的直接原因。第三章是对名词语法多重性的研究。本章选取三小类名词，包括信息．载体名词、动物．食物名词，以及机构．处所名词。考察其不同义项在句法功能上表现的异同，以及即使具有同样的句法功能，其所选择的搭配词语也分属不同的语义小类。另外，本章也对名词语法多重性产生的原因进行了探讨，认为名词语义多重性的存在是其内在原因和动力，而多层级组合关系中搭配词语的限定作用则成为名词语法多重性产生的外在原因。第四章是全文总结。

关键词：名词语义特征句法功能认知语言学

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α-细辛醚的黏胶分散型经皮贴剂研究

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中国新药杂志 2009年第10期18卷 949-952,916页

作者：胡英吴遥遥吴争梁文权高建青浙江医药高等专科学校宁波315100 浙江大学药物制剂研究所杭州310058

目的:研究α-细辛醚黏胶分散型经皮贴剂制备及其体外释放及透皮性质。方法:采用Eudragit E100为压敏胶材料制备α-细辛醚黏胶分散型贴剂,并筛选出最佳贴剂处方,进行黏附性和释放试验研究,并用Franz扩散池体外评价不同透皮促渗剂对皮肤... 详细信息

目的:研究α-细辛醚黏胶分散型经皮贴剂制备及其体外释放及透皮性质。方法:采用Eudragit E100为压敏胶材料制备α-细辛醚黏胶分散型贴剂,并筛选出最佳贴剂处方,进行黏附性和释放试验研究,并用Franz扩散池体外评价不同透皮促渗剂对皮肤的渗透情况。结果:所筛选得到药物黏胶分散型贴剂对皮肤无刺激性,合用油酸和肉豆蔻酸异丙酯可显著提高贴剂的透皮效果,药物最大渗透速率为(1.41±0.20)μg·cm-2·h-1。结论:以Eudragit E100为压敏胶材料,油酸、肉豆蔻酸异丙酯为联合促渗剂,制得的α-细辛醚的黏胶分散型经皮贴剂,有望满足临床的治疗要求。

关键词： α-细辛醚黏胶分散型贴剂促渗剂经皮渗透

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垃圾填埋气新利用

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走近科学 2003年第5期 50-51页

作者：吴遥遥

1997年1月，国家环保总局开始实施全球环境基金组织有关“推动中国城市垃圾填埋气体收集利用”示范项目。全球环境基金组织是由联合国组建的，其任务是争取发达国家的捐款来帮助发展中国家开展改善全球环境工作。6年过去了，这个项目已... 详细信息

1997年1月，国家环保总局开始实施全球环境基金组织有关“推动中国城市垃圾填埋气体收集利用”示范项目。全球环境基金组织是由联合国组建的，其任务是争取发达国家的捐款来帮助发展中国家开展改善全球环境工作。6年过去了，这个项目已基本完成，它给我国城市生活垃圾的处理和利用带来怎样的变化呢？

关键词：中国发展中国家城市生活垃圾垃圾处理垃圾利用焚烧法填埋法垃圾沼气汽车燃料

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自来水的故事

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走近科学 2001年第6期 51-53页

作者：齐望达吴遥遥

今天．自来水已经成了我们生活的必需．京城自来水在这近一个世纪的变化中有着许多故事．却鲜为人知。

关键词：自来水变化生活

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TBK-1基因免疫增强HBcAg核酸疫苗的特异性免疫应答

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现代免疫学 2010年第6期30卷 443-447页

作者：韩斌刘慧吴遥遥陈建忠浙江大学免疫学研究所杭州310058

研究TBK-1基因免疫对HBcAg核酸疫苗诱导小鼠特异性体液免疫及细胞免疫的影响。采用pcDNA3.1(+)作为载体,构建真核表达质粒pcTBK-1;用HBcAg核酸疫苗(pc HBc)单独或联合质粒pcTBK-1免疫BALB/c小鼠,分别在第0、3、6周进行免疫,在第8周检测... 详细信息

研究TBK-1基因免疫对HBcAg核酸疫苗诱导小鼠特异性体液免疫及细胞免疫的影响。采用pcDNA3.1(+)作为载体,构建真核表达质粒pcTBK-1;用HBcAg核酸疫苗(pc HBc)单独或联合质粒pcTBK-1免疫BALB/c小鼠,分别在第0、3、6周进行免疫,在第8周检测特异性抗体,脾脏淋巴细胞增殖,细胞因子IFN-γ及IL-4表达水平以及HBcAg特异性CTL活性等免疫学指标。结果显示,pc HBc联合pcTBK-1免疫小鼠的抗-HBc水平显著增高(P0.05);单独pc HBc免疫及联合免疫的小鼠中,HBcAg特异性CTL杀伤率均高于对照组,其中联合免疫组小鼠的CTL杀伤率显著增高(P<0.05)。提示TBK-1能够增强HBcAg核酸疫苗诱导的特异性体液免疫及细胞免疫应答,主要通过Th1型免疫应答途径,为HBV DNA疫苗的研究奠定了基础。

关键词：乙肝核心抗原 DNA疫苗 TBK-1 佐剂

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Toll样受体介导的抗乙型肝炎病毒免疫应答

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国际流行病学传染病学杂志 2009年第6期36卷 424-427页

作者：吴遥遥陈建忠浙江大学医学院免疫学研究所杭州310058

Toll样受体（TLRs）在抗病毒固有免疫应答中起着重要作用，并指导和调节适应性免疫庄答。HBV是引起慢性病毒性肝炎的主要病原体，其引起慢性乙型肝炎的机制尚不清楚。此文对TLRs介导的同有免疫应答与慢性乙型肝炎的发生及其在抗HBV中所... 详细信息

Toll样受体（TLRs）在抗病毒固有免疫应答中起着重要作用，并指导和调节适应性免疫庄答。HBV是引起慢性病毒性肝炎的主要病原体，其引起慢性乙型肝炎的机制尚不清楚。此文对TLRs介导的同有免疫应答与慢性乙型肝炎的发生及其在抗HBV中所起的作用和机制作了综述。

关键词：肝炎病毒,乙型 Toll样受体固有免疫

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免疫复合物解离剂研制及实验条件的研究

免疫复合物解离剂研制及实验条件的研究

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2012年浙江省检验医学学术年会

作者：成军戴玉柱孙长贵吴遥遥王国政解放军第117医院

目的研制免疫复合物解离剂,建立解离法定量测定免疫复合物中抗原和抗体的方法。方法以HBsAg-抗-HBs免疫复合物为例,采用多因素和单因素联合设计,通过对免疫复合物的浊度、抗原和抗体的解离率及解离曲线等指标进行比较,以选择和确定免疫... 详细信息

目的研制免疫复合物解离剂,建立解离法定量测定免疫复合物中抗原和抗体的方法。方法以HBsAg-抗-HBs免疫复合物为例,采用多因素和单因素联合设计,通过对免疫复合物的浊度、抗原和抗体的解离率及解离曲线等指标进行比较,以选择和确定免疫复合物的最佳沉淀参数、解离条件及测定时间。结果免疫复合物的沉淀参数为高速离心机RCF 29703g(18000rpm/min)、5min或低速离心机RCF 3072g(4000rpm/min)、20min;抗原解离条件为选择pH1.2的解离剂、56℃、30min,测定时间为2h内完成抗原测定;抗体解离条件为选择pH1.8的解离剂、15℃、10min,测定时间为10-30min内完成抗体测定;在抗原和抗体的最佳解离条件下,解离率分别达到84.95%和59.2%。结论免疫复合物解离剂使用方便、操作简单,检测结果重复性好、准确特异,适合在临床实验室推广应用。

关键词：免疫复合物抗原抗体解离剂研制检测

来源： cnki会议评论

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临床免疫学试验5类18种标本稀释液的实验评价及选择原则

临床免疫学试验5类18种标本稀释液的实验评价及选择原则

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2011年浙江省检验医学学术年会

作者：成军孙长贵戴玉柱王国政吴遥遥金美彤张群周华君王磊浙江杭州解放军第117医院

目的对临床免疫学试验5类18种常用标本稀释液进行实验评价,确定临床免疫学实验室最佳通用稀释液,并提出选择和评价临床免疫学标本稀释液的基本原则。方法对5类18种标本稀释液的空白值、最小检测限、干扰试验、线性评价、重复性等5种参... 详细信息

目的对临床免疫学试验5类18种常用标本稀释液进行实验评价,确定临床免疫学实验室最佳通用稀释液,并提出选择和评价临床免疫学标本稀释液的基本原则。方法对5类18种标本稀释液的空白值、最小检测限、干扰试验、线性评价、重复性等5种参数进行检测,并依据制订的判断标准及评分方法进行综合评分,以综合评分高者为临床免疫学试验最佳通用稀释液。结果 18种标本稀释液中专用稀释液评价得分最高(430分),其次是自配的含10%小牛血清的等渗的pH7.4 PBS(424.5分),混合人血清和不含胶体介质的稀释液得分最低(<300分),不同稀释液主要是对检测指标的分析灵敏度、回收率和相关系数等三个参数产生影响。结论专用稀释液应用范围窄,含10%小牛血清的等渗的pH7.4 PBS可以作为临床免疫学实验室高值检测指标的通用稀释液,它具有配制简单、使用方便、应用范围广等特点。

关键词：标本稀释液免疫学试验影响因素评价

来源： cnki会议评论

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