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氟中毒对小鼠睾丸中不同免疫细胞浸润状态的影响

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氟中毒对小鼠睾丸中不同免疫细胞浸润状态的影响

作者：吴盼红山西农业大学

学位级别：硕士

[目的]本文通过对比氟中毒模型与实验性自身免疫性睾丸炎(experimental autoimmune orchitis,EAO)模型下小鼠睾丸中不同免疫细胞的浸润状态,来对氟中毒造成的睾丸炎症有更深一步的了解,为氟的生殖毒性机理的研究提供更多的证据。[方法]... 详细信息

[目的]本文通过对比氟中毒模型与实验性自身免疫性睾丸炎(experimental autoimmune orchitis,EAO)模型下小鼠睾丸中不同免疫细胞的浸润状态,来对氟中毒造成的睾丸炎症有更深一步的了解,为氟的生殖毒性机理的研究提供更多的证据。[方法]将ICR、BALB/C以及C57三种品系的雄性小鼠,每种品系的12只健康雄性小鼠随机分为对照组与EAO组,每组6只。对小鼠进行皮下注射,每次0.2mL,注射3次,每次间隔2周。对照组小鼠皮下注射完全弗氏佐剂(complete Freund adjuvant,CFA)乳化的磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS):EAO组小鼠皮下注射CFA的同系睾丸匀浆。在第一次免疫注射50d后,取小鼠附睾尾与输精管检测精液品质;取小鼠睾丸制作切片,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色后用于组织病理学观察。判定EAO的建立情况,可知BALB/C品系的小鼠容易建立EAO模型。接着本文将30只BALB/C小鼠,随机分为5组,即对照组、低氟组、中氟组、高氟组以及EAO组,每组6只。对照组以及EAO组供给去离子水,低氟组、中氟组以及高氟组分别给于含25、50、100mg/L氟化钠(sodium fluoride,NaF)去离子水。EAO组诱导EAO,方法同上。饲养期间,观察评估小鼠的生长状况。在150d,取小鼠股骨用氟离子电极法检测股骨氟含量;取小鼠血清检测抗睾丸抗体,并确定其抗原表达部位;取小鼠睾丸制作切片通过HE染色判断睾丸损伤情况,通过免疫荧光技术研究各种炎性细胞浸润状态,并用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)检测各种细胞因子的表达情况。[结果]不同品系小鼠EAO模型建立的结果表明:与对照组相比,三种品系小鼠EAO组的精子活力和活率都显著降低(P<0.05);BALB/C小鼠EAO组的精子密度显著降低(P<0.05);睾丸组织形态学结果显示,BALB/C小鼠EAO组的睾丸损伤严重。氟对睾丸免疫细胞浸润结果表明:1.小鼠的股骨氟含量检测显示,与对照组相比,低氟组显著升高(P<0.05),中氟组与高氟组升高极显著(P<0.01)。2.生长性能检测显示,与对照组相比,高氟组小鼠体增重显著降低(P<0.05);EAO组睾丸指数显著降低(P<0.05)。3.精液质量检测显示,与对照组相比,高氟组的精子密度显著降低(P<0.05),EAO组降低极显著(P<0.01);高氟组精子活力显著降低(P<0.05),EAO组极显著降低(P<0.01);中氟组、高氟组以及EAO组精子活率降低极显著(P<0.01)。4.小鼠的睾丸组织切片HE染色显示,相比于对照组,中氟组、高氟组以及EAO组存在显著的生精障碍(P<0.05,P<0.01)。***检测IL-6、TNF-α、IFN-γ以及IL-1 β,结果显示,与对照组相比,对于IL-6、TNF-α以及IFN-γ的含量检测,高氟组与EAO组显著升高(P<0.05,P<0.01),其他组的变化无显著差异;然而关于IL-1β的表达含量检测,所有组的变化均无显著差异。6.血清中抗睾丸抗体的检测及其反应部位的确定:Western Blot结果显示,三个氟化钠处理组的小鼠血清中都发现抗睾丸分子量约为15、25、35、40以及50kDa蛋白组分的抗体,并且这些抗体在EAO组小鼠血清中都可发现;免疫组化结果显示,与对照组相比,低氟组睾丸曲细精管里无明显染色;中氟组、高氟组以及EAO组,都可观察到曲细精管里精子细胞与精子都被染成棕黄色。而且除阴性对照外,所有组睾丸间质都被染色。7.小鼠的睾丸组织切片免疫荧光化学染色,与对照组相比,CD68的表达在中氟组和高氟组显著上升(P<0.05,P<0.01);CD56的表达无显著差异;CDllc的表达在中氟组、高氟组和EAO组显著升高(P<0.05,P<0.01);CD3的表达在低氟组、中氟组、高氟组和EAO组都呈极显著升高(P<0.01)。由此可知,在三个氟化钠处理组中,巨噬细胞(CD68)、树突细胞(CDllc)以及T细胞(CD3)存在不同程度的浸润;EAO组中,树突细胞与T细胞发生浸润;自然杀伤细胞(CD56)在三个氟处理组以及EAO组中均无浸润。[结论]***/C品系的小鼠比ICR与C57小鼠更易诱导EAO。2.从氟对睾丸免疫细胞浸润结果可以发现,氟诱导的睾丸炎症与EAO是相似的。

关键词：氟中毒睾丸炎实验性自身免疫性睾丸炎(EAO) 免疫细胞浸润

氟对小鼠睾丸间质组织中炎症细胞因子mRNA表达的影响

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山西农业大学学报（自然科学版） 2018年第6期38卷 8-12页

作者：吕晓倩裴雪静吴盼红孙子龙王俊东山西农业大学动物科技学院山西太谷030801

[目的]研究氟中毒时睾丸中炎症相关因子的表达情况,探讨其与自身免疫性睾丸炎的相同与不同点。[方法]试验将24只雄性小鼠随机平均分为3组,分别为对照组、NaF组、实验性自身免疫性睾丸炎(EAO)模型组,对照组与EAO组饮用去离子水,NaF组饮... 详细信息

[目的]研究氟中毒时睾丸中炎症相关因子的表达情况,探讨其与自身免疫性睾丸炎的相同与不同点。[方法]试验将24只雄性小鼠随机平均分为3组,分别为对照组、NaF组、实验性自身免疫性睾丸炎(EAO)模型组,对照组与EAO组饮用去离子水,NaF组饮用含有100mg·L-1的NaF去离子水,50d后取材,HE染色观察睾丸组织结构的变化,通过qRT-PCR检测睾丸间质组织细胞中炎症相关细胞因子mRNA含量表达量的改变。[结果]试验表明NaF组与EAO组睾丸结构均有不同程度破坏,均出现了生精细胞脱落等情况,在炎症相关因子mRNA的表达情况上,与对照组相比,EAO组IL-6、IL-1β、TNF-α的表达量均显著升高,而IL-23的表达量显著下降,NaF组IL-6、IL-23的表达量显著升高,IL-1β与TNF-α无显著性。[结论]过量氟不仅对睾丸造成了明显的病理学损伤,而且影响了睾丸间质组织炎症因子mRNA的表达,与EAO模型具有一定相似性。

关键词：氟中毒睾丸细胞因子炎症

不同品种小鼠实验性自身免疫性睾丸炎模型的建立

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山西农业大学学报（自然科学版） 2018年第6期38卷 13-16,21页

作者：吴盼红吕晓倩裴雪静孙子龙王俊东山西农业大学动物科技学院山西太谷030801

[目的]研究ICR、BALB/C以及C57三种品系的雄性小鼠对实验性自身免疫性睾丸炎(EAO)的易感性。[方法]将每种品系的12只健康雄性小鼠随机分为对照组与EAO组,每组6只。对小鼠进行皮下注射,每次0.2mL,注射3次,两次间隔2周。对照组小鼠皮下注... 详细信息

[目的]研究ICR、BALB/C以及C57三种品系的雄性小鼠对实验性自身免疫性睾丸炎(EAO)的易感性。[方法]将每种品系的12只健康雄性小鼠随机分为对照组与EAO组,每组6只。对小鼠进行皮下注射,每次0.2mL,注射3次,两次间隔2周。对照组小鼠皮下注射完全弗氏佐剂(CFA)乳化的PBS;EAO组小鼠皮下注射完全弗氏佐剂乳化的同系睾丸匀浆。在第一次免疫注射50d后,取小鼠附睾尾与输精管检测精液品质;取小鼠睾丸制作切片,HE染色后用于组织病理学观察。[结果]结果显示,与对照组相比,BALB/C小鼠EAO组的精子密度显著降低,ICR与C57小鼠EAO组的精子密度无显著变化;3种品系小鼠EAO组的精子活力和活率都显著降低;BALB/C小鼠EAO组的睾丸损伤严重,ICR与C57小鼠EAO组的睾丸损伤不太明显。[结论]由此表明,BALB/C品系的小鼠比ICR与C57小鼠更易诱导EAO。

关键词：实验性自身免疫性睾丸炎精液品质睾丸组织病理学

氟中毒对小鼠睾丸间质组织细胞中IL-17相关基因的影响

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山西农业大学学报（自然科学版） 2018年第6期38卷 17-21页

作者：裴雪静吴盼红吕晓倩孙子龙王俊东山西农业大学动物科技学院山西太谷030801

[目的]旨在研究氟中毒对小鼠睾丸间质组织细胞IL-17相关基因表达的影响。[方法]将24只健康的ICR雄性小鼠随机分成对照组,中氟组和高氟组3组,每组8只,对照组饮用去离子水,其余2组分别饮用含50mg·L-1和100mg·L-1 NaF的去离子水。染氟50d... 详细信息

[目的]旨在研究氟中毒对小鼠睾丸间质组织细胞IL-17相关基因表达的影响。[方法]将24只健康的ICR雄性小鼠随机分成对照组,中氟组和高氟组3组,每组8只,对照组饮用去离子水,其余2组分别饮用含50mg·L-1和100mg·L-1 NaF的去离子水。染氟50d,取出附睾及输精管进行精子质量的检测,取出睾丸撕膜后通过I型胶原酶分离提取出睾丸间质组织细胞,采用qRT-PCR技术检测IL-17A,IL-17RA和IL-17RC基因表达水平。[结果]结果显示,与对照组相比,在中氟组和高氟组精子活力和活率显著降低(P<0.05),在高氟组精子密度显著降低(P<0.05),在中氟组和高氟组精子畸形率显著升高(P<0.05);IL-17A,IL-17RA和IL-17RC的基因表达水平在高氟组中都显著升高(P<0.05)。[结论]表明过量NaF摄入小鼠体内会增加睾丸间质组织细胞中IL-17相关基因的表达,产生睾丸炎,进而引起睾丸生殖毒性。

关键词：氟中毒睾丸间质组织细胞 IL-17

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氟对斑马鱼甲状腺内分泌功能的干扰效应

环境科学学报 2019年第4期39卷 1340-1347页

作者：郭文静王天玉薛文娟王国栋贺鑫晋吴盼红陈剑杰曹谨玲山西农业大学动物科技学院山西省生态畜牧与环境兽医学重点实验室太谷030801 渭南职业技术学院渭南714000 安阳工学院生物与食品工程学院安阳455000

为探究氟对斑马鱼甲状腺内分泌功能的干扰效应,本研究以雌性斑马鱼成鱼为研究对象,分别以不同浓度氟(0、20、 40、80 mg·L^(-1))暴露45 d和90 d,对斑马鱼的生长发育指数进行测定,用组织学方法对斑马鱼甲状腺组织结构进行显微观察,用酶... 详细信息

为探究氟对斑马鱼甲状腺内分泌功能的干扰效应,本研究以雌性斑马鱼成鱼为研究对象,分别以不同浓度氟(0、20、 40、80 mg·L^(-1))暴露45 d和90 d,对斑马鱼的生长发育指数进行测定,用组织学方法对斑马鱼甲状腺组织结构进行显微观察,用酶联免疫吸附法检测血浆中T3和T4激素水平,并用实时荧光定量PCR方法检测HPT轴上内分泌相关基因的表达.结果显示,与对照组相比,氟暴露组雌性斑马鱼的生长发育指数随着暴露浓度和时间的增加而呈下降趋势(p<0.05);甲状腺组织病变程度随着氟暴露浓度的增大和时间的延长而加重;氟暴露45 d时,T3和T4水平呈升高趋势,90 d时,T4水平呈下降趋势且在80 mg·L^(-1)组下降显著(p<0.05);氟暴露45 d时,40 mg·L^(-1)组除crh处,其他mRNA表达均显著下降(p<0.05),80 mg·L^(-1)组除tg、nis、ttr外其他mRNA表达均显著下降(p<0.05);暴露90 d时tg、dio1、dio2的mRNA表达水平在40 mg·L^(-1)和80 mg·L^(-1)组显著上升(p<0.05),ugt1ab mRNA表达在80 mg·L^(-1)组显著下降(p<0.05).综上,氟可通过影响雌性斑马鱼的生长发育、甲状腺组织结构、激素水平及HPT轴上内分泌相关基因的表达,从而对其甲状腺内分泌功能产生一定程度的干扰,进而影响机体的生长发育.本研究结果对水环境中氟的生态毒性效应及风险评估提供了理论资料.

关键词：氟化钠雌性斑马鱼甲状腺激素水平 mRNA表达

基于IKHCMAC神经网络的建筑冷/热负荷预测研究

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山东建筑大学学报 2018年第1期33卷 46-50页

作者：邹明君丁绪东吴盼红段培永山东建筑大学信息与电气工程学院山东济南250101 山东省智能建筑技术重点实验室山东济南250101 山东师范大学信息科学与工程学院山东济南250014

随着能源危机的爆发,建筑节能已成为我国可持续发展战略的重要组成部分,研究一种精准有效的建筑负荷预测方法是实现建筑供能系统的节能优化运行的重要基础。文章基于人工神经网络研究了一种建筑冷/热负荷智能预测新方法,采用改进的HCMA... 详细信息

随着能源危机的爆发,建筑节能已成为我国可持续发展战略的重要组成部分,研究一种精准有效的建筑负荷预测方法是实现建筑供能系统的节能优化运行的重要基础。文章基于人工神经网络研究了一种建筑冷/热负荷智能预测新方法,采用改进的HCMAC神经网络作为预测模型,将粒子群优化与K-means聚类算法相结合,构建了一种新型的IKHCMAC神经网络预测模型,并借助TRNSYS模拟实验平台获得实验数据,与基于Kmeans聚类算法的HCMAC神经网络模型(KHCMAC)及经典IHCMAC神经网络模型相比较。结果表明:IHCMAC神经网络模型的迭代次数最高,收敛速度较慢,IKHCMAC神经网络模型较IHCMAC模型相比,迭代次数降低了75.86%,收敛速度更快;IKHCMAC模型的训练误差为0.29,在3种模型的训练误差中最小,IKHCMAC神经网络模型的学习精度更高;与IHCMAC模型相比,KHCMAC模型的泛化误差较之降低了26.67%,而IKHCMAC模型较之降低了93.33%,其泛化能力更强。

关键词：建筑冷/热负荷 HCMAC神经网络 IKHCMAC神经网络 K-means聚类

芝麻素对氟暴露斑马鱼生长性能及肠组织形态学的影响

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中国畜牧兽医 2019年第8期46卷 2338-2345页

作者：郭文静王天玉王国栋吴盼红贺鑫晋陈剑杰曹谨玲罗永巨山西农业大学动物科技学院山西省生态畜牧与环境兽医学重点实验室太谷030801 安阳工学院生物与食品工程学院安阳455000 广西水产科学研究院南宁530021

为探讨芝麻素对氟暴露斑马鱼生长性能及肠组织形态学的影响,本试验将720尾斑马鱼随机分为6组,分别为对照组(CK)、芝麻素Ⅰ组(1 g,S1)、芝麻素Ⅱ组(2 g,S2)、80 mg/L氟暴露组(F)、80 mg/L氟暴露+芝麻素Ⅰ组(1 g,FS1)、80 mg/L氟暴露+芝... 详细信息

为探讨芝麻素对氟暴露斑马鱼生长性能及肠组织形态学的影响,本试验将720尾斑马鱼随机分为6组,分别为对照组(CK)、芝麻素Ⅰ组(1 g,S1)、芝麻素Ⅱ组(2 g,S2)、80 mg/L氟暴露组(F)、80 mg/L氟暴露+芝麻素Ⅰ组(1 g,FS1)、80 mg/L氟暴露+芝麻素Ⅱ组(2 g,FS2),每组3个重复,每个重复40尾。并在试验第45、90天测量各组斑马鱼体长、体重、增长率(LGR)、增重率(WGR)、特定生长率(SGR),组织学法观察各组斑马鱼的肠组织结构,用Imageproplus图像软件系统测量肠道绒毛高度。结果发现,第45天时,与CK组相比,F组斑马鱼体重显著下降(P0.05)。试验第90天时,与CK组相比,F组斑马鱼体重和体长显著下降(P0.05)。在45和90 d时,F组LGR、WGR、SGR较对照组均下降,而FS1和FS2组较F组呈上升趋势。斑马鱼肠道组织切片观察发现,芝麻素还可在一定程度上改善氟暴露对斑马鱼肠道组织造成的负面效应。综上所述,芝麻素可对氟致斑马鱼生长及肠道组织的毒性效应产生一定缓解作用。

关键词：氟芝麻素斑马鱼生长性能肠道组织

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一种多协议嵌入式网关开发

建筑电气 2018年第3期37卷 52-55页

作者：张震段培永丁绪东尹春杰吴盼红吕东岳山东建筑大学信息与电气工程学院济南市250101 山东师范大学济南市250014

针对ZigBee无线传感器分布分散、多协议异构的问题以及需要多区域传输数据信息的需求,设计了一种嵌入式网关:采用STM32控制芯片、CC243l ZigBee芯片和穿透性能优越的433 MHz无线模块构成硬件平台。通过对网关软件平台的设计,解决了协议... 详细信息

针对ZigBee无线传感器分布分散、多协议异构的问题以及需要多区域传输数据信息的需求,设计了一种嵌入式网关:采用STM32控制芯片、CC243l ZigBee芯片和穿透性能优越的433 MHz无线模块构成硬件平台。通过对网关软件平台的设计,解决了协议转换问题。

关键词： ZigBee 多协议嵌入式网关信息交互 433MHz 远距离穿透性能协议转换

基于GIHCMAC神经网络的建筑电负荷预测方法

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计算机系统应用 2019年第8期28卷 142-147页

作者：吴盼红段培永丁绪东尹春杰姬晓娃邱钟山东建筑大学信息与电气工程学院济南250101 山东省智能建筑技术重点实验室济南250101 山东师范大学信息科学与工程学院济南250358

随着能源供应与经济快速发展的矛盾日益加剧,建筑节能成为可持续发展战略的一个关键环节,研究一种快速、精准的建筑用电量预测方法是实现建筑节能优化控制的重要前提.本文将遗传算法与蚁群聚类算法相融合,对基于聚类的IHCMAC (Improveme... 详细信息

随着能源供应与经济快速发展的矛盾日益加剧,建筑节能成为可持续发展战略的一个关键环节,研究一种快速、精准的建筑用电量预测方法是实现建筑节能优化控制的重要前提.本文将遗传算法与蚁群聚类算法相融合,对基于聚类的IHCMAC (Improvement Hyperball CMAC)神经网络的网络节点进行改进,将GIHCMAC (Genetic Algorithm Ant Colony Clustering Algorithm based on IHCMAC)作为建筑电力负荷预测模型,对潍坊某一办公建筑用电负荷进行预测.研究结果表明,该预测模型迭代次数最小、准确度较高,其迭代次数、训练误差、泛化误差分别为9、0.0045、0.0014,较IHCMAC、KHCMAC (K-means Hyperball CMAC)、IKHCMAC (Improvement K-means Hyperball CMAC)模型的收敛速度更快,精度更高,泛化能力更强.

关键词：建筑电负荷预测 IHCMAC 神经网络 GIHCMAC 神经网络遗传算法蚁群聚类算法