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运用荧光光谱学研究AzoR与底物酸性红的相互作用

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光谱学与光谱分析 2016年第S1期36卷 375-376页

作者：吴清勤胡奇洲冯娟电子科技大学生命学院四川成都610054

运用荧光光谱学手段研究了含有FMN的大肠杆菌偶氮还原酶AzoR以及R59G突变体与底物酸性红之间的相互作用,发现伴随底物酸性红浓度的增加,FMN在520nm左右的荧光强度显著降低。通过标准结合方程拟合获得了酶与底物的结合常数,发现25℃野生... 详细信息

运用荧光光谱学手段研究了含有FMN的大肠杆菌偶氮还原酶AzoR以及R59G突变体与底物酸性红之间的相互作用,发现伴随底物酸性红浓度的增加,FMN在520nm左右的荧光强度显著降低。通过标准结合方程拟合获得了酶与底物的结合常数,发现25℃野生型AzoR与酸性红的结合常数为2.84×106 L·mol-1,而突变体R59G的则降到了4.75×105 L·mol-1;此外,通过对野生型及其突变体进行变温实验、并计算焓变和熵变,发现当第59位精氨酸突变成甘氨酸后会导致底物与酶之间的相互作用类型从离子键向范德华力转变。

关键词：偶氮还原酶突变体结合常数

一种近红外荧光蛋白PAiRFP1及其突变体V276G的光活化效率研究

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光谱学与光谱分析 2017年第11期37卷 3379-3385页

作者：白英男冯娟胡奇洲吴清勤周雨刘贻尧电子科技大学生命科学与技术学院四川成都610054

PAiRFP1是一种以根癌农杆菌中细菌光敏色素Agp2为基础,经过蛋白工程手段改造后获得的近红外荧光蛋白。与其他近红外荧光蛋白不同,PAiRFP1具有光活化行为。这一特性可以有效改善近红外荧光蛋白在体内的成像信噪比。然而,关于光活化行为... 详细信息

PAiRFP1是一种以根癌农杆菌中细菌光敏色素Agp2为基础,经过蛋白工程手段改造后获得的近红外荧光蛋白。与其他近红外荧光蛋白不同,PAiRFP1具有光活化行为。这一特性可以有效改善近红外荧光蛋白在体内的成像信噪比。然而,关于光活化行为的影响因素却研究甚少。主要采用荧光光谱学手段研究了PAiRFP1蛋白浓度、pH、金属离子、氧化还原环境对于PAiRFP1光活化行为的影响,结果发现:(1)PAiRFP1的最大光活化效率与该近红外荧光蛋白的浓度不呈线性关系;(2)随着pH从6.5升高至7.8和9.0,PAiRFP1的最大光活化效率从36.8%提高至52.0%和60.8%;(3)金属离子K^+,Na^+,Ca^(2+)的加入对于PAiRFP1的最大光活化效率没有显著影响;类似现象在H_2O_2和DTT的处理的情况下也被观察到。除了上述影响因素外,还发现当PAiRFP1中276位的缬氨酸被突变为甘氨酸产生V276G突变体后,蛋白的最大光活化效率从~50.0%下降至19.4%。DTT处理后导致V276G突变体最大光活化效率从19.4%提高到了27.1%。此外,比较研究了各种影响因素对于光活化速率的影响。以上结果为今后更好地将此类光激活的近红外蛋白应用于活体成像中提供了更好地理论指导和优化解决方案。

关键词：细菌光敏色素近红外荧光蛋白光活化效率突变体

运用二维相关光谱手段研究甲基橙的TiO2光催化降解过程

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运用二维相关光谱手段研究甲基橙的TiO2光催化降解过程

第十八届全国分子光谱学学术会议

作者：吴清勤周雨冯娟电子科技大学生命学院

运用紫外可见吸收光谱、荧光光谱等手段检测了TiO光催化降解甲基橙过程中的光谱学变化。通过对吸收光谱进行二维同步、异步处理,发现该降解过程是一个非均相过程;此外,我们还采用2D手段处理了△λ=60 nm的同步荧光发射谱,发现各种DOM的... 详细信息

运用紫外可见吸收光谱、荧光光谱等手段检测了TiO光催化降解甲基橙过程中的光谱学变化。通过对吸收光谱进行二维同步、异步处理,发现该降解过程是一个非均相过程;此外,我们还采用2D手段处理了△λ=60 nm的同步荧光发射谱,发现各种DOM的含量均呈现出增加趋势,且变化速率Humic类成分>Trp类成分>Tyr类成分。

关键词：光催化降解 2D相关光谱溶解氧物质

大肠杆菌偶氮还原酶催化机理的光谱学初步研究

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大肠杆菌偶氮还原酶催化机理的光谱学初步研究

第十八届全国分子光谱学学术会议

作者：周雨吴清勤冯娟电子科技大学生命学院

运用荧光光谱等手段检测了含有FMN的大肠杆菌偶氮还原酶AzoR在与辅因子NADH,底物甲基红反应过程中的光谱学变化,发现FMN首选从NADH接受电子,然后被还原的FMN能将电子传递给底物,自身恢复;而NADH的荧光在加入甲基红之后发生了强烈猝灭,... 详细信息

运用荧光光谱等手段检测了含有FMN的大肠杆菌偶氮还原酶AzoR在与辅因子NADH,底物甲基红反应过程中的光谱学变化,发现FMN首选从NADH接受电子,然后被还原的FMN能将电子传递给底物,自身恢复;而NADH的荧光在加入甲基红之后发生了强烈猝灭,相关机理尚待深入研究。

关键词：偶氮还原酶乒乓机制荧光发射谱

运用CLARITY技术获取完整透明的小鼠大脑的研究

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运用CLARITY技术获取完整透明的小鼠大脑的研究

第十二次全国中西医结合实验医学专业委员会暨第七次湖南省...

作者：吴清勤冯娟夏阳尧德中电子科技大学生命科学与技术学院

CLARITY是一项能使脑透明并且提供完整神经网络三维成像的新型脑组织处理技术,对脑结构及其功能研究具有重要意义。目前,该技术已经开展运用于疾病模型的研究。在本文中,我们通过自制、并优化电泳装置,获得了光学上完全透明的小鼠大脑,... 详细信息

CLARITY是一项能使脑透明并且提供完整神经网络三维成像的新型脑组织处理技术,对脑结构及其功能研究具有重要意义。目前,该技术已经开展运用于疾病模型的研究。在本文中,我们通过自制、并优化电泳装置,获得了光学上完全透明的小鼠大脑,这位后续深入开展AD干预的研究提供了样品的保证。

关键词： CLARITY 脑科学 3D成像

运用CLARITY技术获取完整透明的小鼠大脑的研究

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运用CLARITY技术获取完整透明的小鼠大脑的研究

第十二次全国中西医结合实验医学专业委员会暨第七次湖南省中西医结合神经科专业委员会学术年会

作者：吴清勤冯娟夏阳尧德中电子科技大学生命科学与技术学院

关键词： CLARITY 脑科学 3D成像

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杞柳高产栽培技术

现代农业科技 2013年第18期 170-171页

作者：夏英三吴清勤山东金正大生态工程股份有限公司山东临沭276720 国家缓控释肥工程技术研究中心

介绍杞柳高产栽培技术,包括田块和品种选择、整地施肥、栽植、田间管理、病虫害防治、割条等方面内容,以供柳农参考。

关键词：杞柳高产栽培技术

基于被动扩散原理的CLARITY大鼠海马透明技术

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基于被动扩散原理的CLARITY大鼠海马透明技术

第十二次全国中西医结合实验医学专业委员会暨第七次湖南省...

作者：张云翔吴清勤冯娟郭大庆夏阳尧德中电子科技大学神经信息教育部重点实验室

目的:2013年Deisseroth等人在《nature》上报道了一种透明(Clarity)技术,该技术是一种将完整的组织迅速转化成光学透明和高分子可渗透的纳米孔径水凝胶结构,同时保留组织精细结构和重要生物大分子的技术。目前Clarity技术已经成功用于... 详细信息

目的:2013年Deisseroth等人在《nature》上报道了一种透明(Clarity)技术,该技术是一种将完整的组织迅速转化成光学透明和高分子可渗透的纳米孔径水凝胶结构,同时保留组织精细结构和重要生物大分子的技术。目前Clarity技术已经成功用于斑马鱼、小鼠全脑、以及人脑切片的透明,并开始应用于一些脑疾病模型研究。Clarity技术中的一个关键环节是在保留蛋白质和核酸的基础上快速除去脂质。通常采用电泳或被动扩散的方法去除脂质,但电泳时温度太高可能导致蛋白质变性、组织变黄,进而影响透明效果。本研究中,我们运用基于被动扩散原理的clarity技术将大鼠的海马透明。方法:对SD雄性大鼠进行心脏灌注后取得大鼠全脑,依次进行多聚甲醛组织固定、聚丙烯酰胺水凝胶包埋、剥离海马、用Cleaning Buffer进行海马透明,通过拍照记录结果。结果:多聚甲醛固定和聚丙烯酰胺水凝胶包埋后的大鼠全脑呈乳白色,从其中剥离出的海马也呈乳白色且柔软富有弹性;Cleanigg Buffer洗涤后的海马组织从周边开始逐渐透明化,至洗涤第7天时呈现完全透明状态,完全透明之后的海马与透明之前的海马相比体积发生了较大膨胀,提示限制组织结构的脂质去除后水凝胶吸水膨大。结论:本文采用基于被动扩散原理建立的Clarity技术,在尽量保存脑组织精细结构的情况下对大鼠的海马进行了透明,该方法不仅操作简便,而且可以尽量避免电泳过程对脑组织结构的破坏,同时,用于局部脑组织透明的周期短,本工作可为进一步研究海马相关的脑功能和脑疾病(如癫痫等)提供一种新的实验手段。

关键词： CLARITY 海马脑功能

基于被动扩散原理的CLARITY大鼠海马透明技术

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基于被动扩散原理的CLARITY大鼠海马透明技术

第十二次全国中西医结合实验医学专业委员会暨第七次湖南省中西医结合神经科专业委员会学术年会

作者：张云翔吴清勤冯娟郭大庆夏阳尧德中电子科技大学神经信息教育部重点实验室

关键词： CLARITY 海马脑功能