检索结果-南通市图书馆

蛋白激酶PKR的克隆表达及与其相互作用的蛋白质的亲和纯化

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第6期28卷 592-595页

作者：谢炯夏君张佩芬李玉叶吴敏昊黄曦张萍中山大学中山医学院免疫学教研室热带病教育部重点实验室广东广州510080

目的:克隆并表达双链RNA调节的蛋白激酶(PKR)基因,以纯化分离与PKR相互作用的蛋白质。方法:设计特异性引物,PCR扩增分别得到FLAG-PKR-HA和HA-PKR-FLAG基因片段,克隆至表达载体pSG5中。将重组质粒通过脂质体法转染PKR稳定沉默(PKRkd)的H... 详细信息

目的:克隆并表达双链RNA调节的蛋白激酶(PKR)基因,以纯化分离与PKR相互作用的蛋白质。方法:设计特异性引物,PCR扩增分别得到FLAG-PKR-HA和HA-PKR-FLAG基因片段,克隆至表达载体pSG5中。将重组质粒通过脂质体法转染PKR稳定沉默(PKRkd)的HeLa细胞,Western blot检测PKR及标签表达情况;最后,利用HA、FLAG串联亲和纯化系统(TAP)纯化分离与PKR相互作用的蛋白,Western blot技术及银染SDS-PAGE验证PKR蛋白复合物的纯化和分离情况。结果:成功构建了PKR融合蛋白表达载体及FLAG、HA亲和纯化系统,SDS-PAGE和银染结果显示TAP系统分离得到了PKR蛋白带和两条可能与PKR相互作用的蛋白质片段。结论:成功纯化和分离了与PKR相互作用的蛋白质,为进一步研究奠定了基础。

关键词： PKR 亲和纯化相互作用

肺结核患者外周血 CD4＋CD8＋T 细胞的检测及临床意义

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中华微生物学和免疫学杂志 2014年第10期34卷 781-786页

作者：廖春信方毅敏詹晓霞胡胜锋吴永坚吴敏昊黄曦广州市胸科医院呼吸内科 510095 中山大学中山医学院免疫学教研室 510080

目的：探讨结核病患者外周血中胸腺外CD4＋CD8＋T细胞（ CD4＋CD8＋double-positive T，DPT）的表达、抗结核功能和记忆表型。方法采用流式细胞术检测结核病患者和健康人外周血DPT细胞的表达，分析其与结核病发生发展以及转归的相关性... 详细信息

目的：探讨结核病患者外周血中胸腺外CD4＋CD8＋T细胞（ CD4＋CD8＋double-positive T，DPT）的表达、抗结核功能和记忆表型。方法采用流式细胞术检测结核病患者和健康人外周血DPT细胞的表达，分析其与结核病发生发展以及转归的相关性；检测DPT细胞因子的分泌水平（ IFN-γ和TNF-α）、活化标记和记忆表型，分析DPT细胞的抗结核免疫应答能力。结果与健康对照组相比，结核病患者外周血中DPT细胞比例显著升高（P＜0．005），随着治疗时间逐渐下降，恢复至正常水平；DPT细胞表面活化受体CD25表达高于CD4＋T细胞和CD8＋T细胞（P＜0．005）；结核抗原肽刺激下细胞因子IFN-γ和TNF-α分泌能力均明显增加（ P＜0．005）；DPT细胞具有记忆T细胞表型特性。结论结核病患者外周血DPT细胞具有抗结核免疫能力，其比例变化反映抗结核治疗的疗效，监测外周血DPT细胞表达可以评估患者预后是否良好。

关键词：结核病细胞免疫 DPT细胞

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整合医学背景下的医学教育改革和实践

中华医学教育探索杂志 2018年第2期17卷 113-116页

作者：郭开华黎孟枫吴敏昊中山大学中山医学院广州510080

随着现代医学走上专业细化和专科分化的发展道路,以“分”为主的发展模式促进了医学知识的爆炸式增长.与此同时,基于医学知识的诊疗实践也在一定程度上呈现出碎片化倾向,甚至逐渐远离“以人为本”的核心价值.在这一背景下,现代医学具有... 详细信息

随着现代医学走上专业细化和专科分化的发展道路,以“分”为主的发展模式促进了医学知识的爆炸式增长.与此同时,基于医学知识的诊疗实践也在一定程度上呈现出碎片化倾向,甚至逐渐远离“以人为本”的核心价值.在这一背景下,现代医学具有如何重新整合的模式转变需求,并由此对医学人才培养提出加强整体观和整合诊疗能力的要求.一批医学院校对整合理念下的医学教育模式进行探索,积极策划和推动教学改革,大力推进教学领域的学科整合或融合.目前,医学课程体系设计和教学方法创新等方面已开始渗透整合医学理念,未来还需为适应整合医学模式发展而深化教改内涵.

关键词：整合医学医学教育医学教学

固有免疫调控蛋白PKR串联亲和纯化系统的建立及应用

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第6期31卷 487-491页

作者：李玉叶梁兆端吴思宇谢炯何军芳吴敏昊黄曦张萍中山大学中山医学院免疫学教研室热带病教育部重点实验室广州510080

目的构建固有免疫调控蛋白——双链RNA（dsRNA）调控的蛋白激酶（PKR）的串联亲和纯化系统（TAP），初步研究PKR蛋白功能，以用于与PKR相互作用的新蛋白的鉴定与功能分析。方法通过PCR扩增PKR目的基因，克隆至真核表达载体pcTAP—A中。... 详细信息

目的构建固有免疫调控蛋白——双链RNA（dsRNA）调控的蛋白激酶（PKR）的串联亲和纯化系统（TAP），初步研究PKR蛋白功能，以用于与PKR相互作用的新蛋白的鉴定与功能分析。方法通过PCR扩增PKR目的基因，克隆至真核表达载体pcTAP—A中。将重组质粒pcTAP-PKR通过脂质体法转染PKR稳定沉默（PKRkd）的HeLa细胞，并检测PKR对固有免疫信号通路之一，即促分裂素原活化蛋白激酶（MAPK）激活的调控；最后利用串联亲和纯化试剂盒纯化分离与PKR相互作用的蛋白，验证PKR蛋白复合物的纯化情况。结果将重组质粒pcTAP-PKR转染PKRkd HeLa细胞后，24h后即可检测到PKR融合蛋白，相对分子质量约为75×10^3，其表达量随着转染时间的增加而减少；PKR的过表达可发生自我磷酸化，并引起了MAPK信号通路的激活；Westernblot结果显示，小规模TAP纯化试验成功分离纯化了PKR蛋白。结论成功建立了一个PKR表达和串联亲和纯化系统，并证明PKR具有调控MAPK信号通路活性，为今后鉴定与PKR相互作用的蛋白研究奠定了基础。

关键词：双链RNA 蛋白激酶PKR 亲和纯化

TREM-1在细菌性化脓性角膜炎中的作用及其分子机制

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中山大学学报（医学科学版） 2012年第3期33卷 305-310页

作者：聂鑫鑫朱敏李美玉苏家豪李海波刘畅吴敏昊黄曦中山大学中山医学院免疫学教研室//免疫学研究所广东广州510080 中山大学人类病毒学研究所广东广州510080 中山大学热带病防治研究教育部重点实验室广东广州510080 中山眼科中心广东广州510080

【目的】探讨髓样细胞诱发受体1(TREM-1)在铜绿假单胞菌(PA)感染角膜炎中的作用及其分子机制。【方法】为了揭示TREM-1在细菌性角膜炎中的作用,我们建立了PA角膜炎小鼠模型和PA感染的腹腔巨噬细胞模型,real-timePCR和免疫荧光法检测感... 详细信息

【目的】探讨髓样细胞诱发受体1(TREM-1)在铜绿假单胞菌(PA)感染角膜炎中的作用及其分子机制。【方法】为了揭示TREM-1在细菌性角膜炎中的作用,我们建立了PA角膜炎小鼠模型和PA感染的腹腔巨噬细胞模型,real-timePCR和免疫荧光法检测感染前后TREM-1的表达水平;用丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)的抑制剂或磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂预处理巨噬细胞,再用脂多糖(LPS)和TREM-1活化抗体刺激,real-time PCR检测IL-1β、MIP-2、TNF-α和IL-6等促炎因子的表达水平,进一步探讨TREM-1调控PA角膜炎的分子机制;用Th1细胞因子IFN-γ或者Th2细胞因子IL-4、IL-10刺激巨噬细胞,real-time PCR检测Th1/Th2细胞因子对TREM-1表达的调控。【结果】PA感染的C57BL/6小鼠角膜中TREM-1表达高于BALB/c小鼠;体外研究显示PA感染和LPS刺激均诱导TREM-1高表达;TREM-1通过MAPK和PI3K-Akt通路调节促炎因子生成;Th1细胞因子促进TREM-1表达,而Th2细胞因子不影响TREM-1的表达。【结论】PA感染上调TREM-1的表达,TREM-1通过调控Th1/Th2细胞因子的表达进一步放大炎症,导致角膜溃疡穿孔,这一发现可能为化脓性角膜炎的防治提供了新的理论依据。

关键词：铜绿假单胞菌角膜炎 TREM-1 Th1/Th2 细胞因子巨噬细胞

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周扬家书一束

新文学史料 2024年第3期 148-164页

作者：吴敏崔丹华南师范大学文学院

周扬写给夫人苏灵扬的信,纸张大小不一,厚薄和颜色不同,有些比较粗脆,有的就是几行字的小便条,有的还留着毛糙的斜边,好像就是随手撕下的纸片,也有些工工整整的毛笔字或钢笔字写在质地较好的大张白纸上,还有几封用了印有红色或油印的竖... 详细信息

周扬写给夫人苏灵扬的信,纸张大小不一,厚薄和颜色不同,有些比较粗脆,有的就是几行字的小便条,有的还留着毛糙的斜边,好像就是随手撕下的纸片,也有些工工整整的毛笔字或钢笔字写在质地较好的大张白纸上,还有几封用了印有红色或油印的竖格条纹的陕甘宁边区教育厅、中共晋察冀中央局、新华通讯社北平分社、中宣部的信头纸。

关键词：新华通讯社周扬陕甘宁边区毛笔字

Clovibactin:一种对病原体展现致死效应且低耐药性的革命性抗生素

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Science Bulletin 2024年第5期69卷 570-573页

作者：李翔吴敏帅建伟 Department of Physics and Fujian Provincial Key Lab for Soft Functional Materials ResearchXiamen UniversityXiamen 361005China Joint Research Centre on Medicine The Affiliated Xiangshan Hospital of Wenzhou Medical UniversityNingbo 315700China Wenzhou Institute University of Chinese Academy of SciencesWenzhou 325000China Oujiang Laboratory(Zhejiang Lab for Regenerative Medicine Vision and Brain Health)Wenzhou 325001China

The decades spanning from the 1940s to the 1960s are renowned as the heyday of antibiotic *** was during this era that game-changing antibiotics such as streptomycin,vancomycin,and tetracycline were unearthed,fundamentally reshaping the landscape of modern ***,antibiotic discovery faces alarming challenges and traditional screening has not yielded new drugs in many *** crisis of antimicrobial resistance(AMR)emerges as a consequence of the unintended disruption of the antibiotic discovery pipeline and the subsequent uncontrolled proliferation of resistant pathogens[1].According to the World Health Organization(WHO),in 2019,approximately1.2 million people worldwide died of bacterial infections exacerbated by AMR,surpassing the number of deaths caused by HIV/*** this trend continues,by 2050,AMR could potentially result in over 10 million deaths,surpassing the mortality rate attributed to ***,we are in dire need of new antibiotics to counter the rising resistance of bacteria to most currently employed clinical antibiotics.

关键词： passing landscape attributed

CORC电缆中超导带材在缠绕、弯曲和扭曲变形下的应变分析

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Acta Mechanica Sinica 2024年第4期40卷 38-48页

作者：彭昱昊苟晓凡 College of Mechanics and Materials Hohai UniversityNanjing211000China

CORC(conductor on round core)超导电缆是一种基于REBCO(rare-earth barium copper oxide)导体的高温超导电缆,已经成为迄今为止最灵活的高温超导(HTS)导体之一.然而,由于超导REBCO陶瓷材料的脆性,临界电流表现出敏感的应变依赖性,即... 详细信息

CORC(conductor on round core)超导电缆是一种基于REBCO(rare-earth barium copper oxide)导体的高温超导电缆,已经成为迄今为止最灵活的高温超导(HTS)导体之一.然而,由于超导REBCO陶瓷材料的脆性,临界电流表现出敏感的应变依赖性,即临界电流与应变密切相关.该材料的应变一旦超过临界值,就会引发明显的衰减.除此之外,由于带材缠绕和电缆绞合后的复杂变形,切实存在一个实际性的挑战,即如何准确预测电缆超导带材在各种变形下的轴向应变.在本文中,我们建立了分析模型,可以用来准确计算CORC电缆的超导带材在电缆内芯上缠绕、电缆弯曲和扭曲变形等实际条件下的轴向应变.并且通过比较分析结果与有限元数值结果和实验数据,验证了分析模型,即超导带的临界电流随CORC电缆的核心直径而变化.在轴向应变结果的基础上,进一步确定了临界参数,即超导层的轴向应变恰好达到临界应变时的参数,如临界核心直径、临界弯曲直径和临界绞距等.对CORC电缆中REBCO超导带材的应变分析研究将有助于CORC电缆的加工和进一步设计高水平的超导线圈和磁体.

关键词：临界电流高温超导电缆超导带材扭曲变形应变分析轴向应变超导线圈临界参数

髓系细胞触发受体1增强肠道抗结核感染免疫的机制研究

维普期刊数据库评论

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热带医学杂志 2021年第5期21卷 566-570,627,I0001页

作者：劳娟凤龚四堂吴敏昊吴永坚中山大学中山医学院免疫学教研室广东广州510080 广州市妇女儿童医疗中心广东广州510623

目的探讨髓系细胞触发受体1(TREM-1)在肠结核疾病中的作用及分子机制。方法收集2018年12月广州市妇女儿童医疗中心的5名健康人和7例克罗恩病、7例肠结核患者肠组织活检样本,苏木素伊红(HE)染色观察组织形态,Real-time PCR、免疫荧光和... 详细信息

目的探讨髓系细胞触发受体1(TREM-1)在肠结核疾病中的作用及分子机制。方法收集2018年12月广州市妇女儿童医疗中心的5名健康人和7例克罗恩病、7例肠结核患者肠组织活检样本,苏木素伊红(HE)染色观察组织形态,Real-time PCR、免疫荧光和流式细胞术方法检测TREM-1在组织和分离的组织原位记忆CD8^(+)T细胞(CD8^(+)T_(RM))的表达。腹腔注射结核菌H37Rv构建10只肠结核幼鼠模型,采用中和抗体阻断TREM-1信号,流式表面染色检测肠道CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、CD19^(+)B细胞、CD11c+树突状细胞、F4/80^(+)巨噬细胞和Gr-1+粒细胞的比例。取肠组织分离单个核细胞,佛波脂和离子酶素刺激6 h,流式胞内染色检测CD8^(+)T细胞干扰素-γ(IFN-γ)水平以及β-catenin表达。取肠和脾脏研磨裂解,细菌平板克隆形成实验检测肠道和脾脏荷菌量。肠组织石蜡包埋切片,HE染色观察肠道病理改变。结果与正常对照和克罗恩患者肠组织相比,肠结核患者肠组织具有明显的结核肉芽肿形成和免疫细胞浸润。Real-time PCR结果显示肠结核组TREM-1 mRNA水平表达升高,与正常对照组和克罗恩病组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光结果发现肠结核患者组织中TREM-1阳性细胞明显多于正常对照组。进一步流式分析发现TREM-1+CD8^(+)T细胞表现为CD69和CD103高表达,即TREM-1+CD8^(+)T细胞主要为CD8^(+)TRM细胞。阻断TREM-1信号可减少肠结核模型小鼠肠道CD8^(+)T细胞比例,但不影响CD4^(+)T细胞、B细胞、树突状细胞、巨噬细胞和Gr-1+粒细胞的比例。阻断TREM-1信号可抑制肠道CD8^(+)T细胞分泌IFN-γ,以及表达胞内连环蛋白β-catenin,与IgG对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。阻断TREM-1信号可增加肠道和脾脏荷菌量,并且肠道病理损伤加重,表现为肠绒毛结构破坏和炎性细胞浸润。结论结核感染后肠道CD8^(+)TRM细胞TREM-1表达升高,TREM-1受体信号激活β-catenin通路,促进CD8^(+)TRM细胞活化,从而起到清除细菌和改善肠道病理损伤的作用,有望成为治疗肠结核的新靶点。

关键词：髓系细胞触发受体1 肠结核组织原位记忆T细胞