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作者：吴忠祖中南大学

学位级别：硕士

研究背景和目的心血管疾病是严重危害人类健康的常见病。一氧化氮介导的内皮依赖性血管舒张反应降低是大多数心血管疾病的早期病理表现。大量研究表明,内源性一氧化氮合酶（NOS）抑制物—非对称性二甲基精氨酸（ADMA）是导致血管内皮功... 详细信息

研究背景和目的心血管疾病是严重危害人类健康的常见病。一氧化氮介导的内皮依赖性血管舒张反应降低是大多数心血管疾病的早期病理表现。大量研究表明,内源性一氧化氮合酶（NOS）抑制物—非对称性二甲基精氨酸（ADMA）是导致血管内皮功能不全的重要物质。二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）是内源性ADMA的主要代谢酶。已知DDAH存在两种亚型——DDAH1和DDAH2;前者主要分布于表达神经型NOS的组织,后者则主要分布于表达内皮型NOS的心血管组织;因此,DDAH2是决定心血管系统ADMA含量的关键因素。但目前尚无直接增加DDAH2表达和活性的药物。近年来发现一种来源于人类免疫缺陷病毒HIV-1 Tat（Trans-activator transcription）蛋白的蛋白功能区,称之为PTD区段（Protein transduction domain）,能有效地引导肽段或蛋白质进入细胞,具有蛋白传送功能。因此,本课题将Tat PTD区段融合于人DDAH2蛋白的N端,使DDAH2蛋白具备穿膜能力,定位于细胞内并发挥作用。在此基础上,用多种心血管的危险因子如高糖、同型半胱氨酸、游离脂肪酸如棕榈酸处理培养的人脐静脉内皮细胞系（HUVEC-12）,观察上述因素对细胞内DDAH1和DDAH2表达及DDAH活性的影响;并进一步探讨外源性给予Tat-hDDAH2蛋白能否直接增加细胞中DDAH2蛋白含量,抵抗上述因素对DDAH活性的抑制,从而为大规模开发可应用的重组蛋白产品奠定技术基础,为心血管疾病防治拓开新途径。另一方面,用重组的DDAH2融合蛋白作为抗原,制备家兔来源的抗血清,用于DDAH2表达的检测。方法①构建重组pGEX-6p-1-Tat-hDDAH2原核表达载体:以我室以前构建pcDNA3.1-hDDAH2质粒为模板,用Tat-hDDAH2上下游引物扩增Tat-hDDAH2基因,重组到T载体上,构建pGEM-Tat-hDDAH2质粒,然后再分别用SalⅠ和BamHⅠ双酶切pGEM-Tat-hDDAH2和原核表达载体pGEX-6p-1,连接重组成pGEX-6p-1-Tat-hDDAH2载体;再转化到宿主大肠杆菌BL21体内诱导表达,并通过优化诱导条件提高目的基因的原核表达水平和可溶性融合蛋白的含量。②重组Tat-hDDAH蛋白的纯化:将包涵体形式的重组蛋白溶于8mol/L的尿素溶液中,然后经过复性、透析得到复性蛋白GST-Tat-hDDAH;再将从细菌裂解液上清中的可溶性GST-Tat-hDDAH蛋白和从包涵体中得到的复性蛋白与还原型谷胱甘肽琼脂糖珠（Glutathione Sepharose 4B）充分混匀,经过Glutathione Sepharose4B的亲和吸附得到纯化的GST-Tat-hDDAH2融合蛋白,最后经过PreScission蛋白酶切,获得重组的Tat-hDDAH2蛋白。③抗hDDAH2抗血清的制备:重组pGEX-6p-1-hDDAH2载体;再转化到宿主细菌体内进行诱导表达,得到大量含GST-hDDAH2蛋白的包涵体;经2%的脱氧胆酸钠溶液洗涤后得到较纯化的包涵体,并将其作为抗原与佐剂充分乳化后经皮下注射免疫新西兰大白兔,制备抗DDAH2的多克隆抗体,并用ELISA、western blot检测DDAH2抗体的滴度和特异性,用于后续实验中DDAH2蛋白表达的检测。④重组Tat-hDDAH2蛋白的功能实验:培养人脐静脉内皮细胞系HUVEC-12,分别用心血管疾病的危险因子高糖、同型半胱氨酸、游离脂肪酸如棕榈酸（palmitic acid,PA）孵育HUVEC-12 16～48h,检测这些危险因子对内皮细胞DDAH1和DDAH2蛋白表达和DDAH活性的影响;并观察Tat-hDDAH2蛋白能否逆转上述因素对DDAH活性的损害。结果①经PCR、酶切及测序鉴定,原核表达载体pGEX-6p-1-Tat-hDDAH2（Fig.1～3）和pGEX-6p-1-hDDAH2（Fig.4）构建成功;并转化BL21大肠杆菌诱导表达,通过筛选不同的诱导条件,发现用较低的IPTG浓度（0.05 mM）在低温（25℃）环境下和适当地延长诱导时间（8 h）有利于可溶性融合蛋白GST-Tat-hDDAH2（Fig.5～7）和GST-hDDAH2（Fig.9～11）在细菌体内的表达,但在原核细胞中仍以不溶性的包涵体为主;将包涵体变性、复性后,再经纯化和PreScission蛋白酶酶切,最后获得重组的Tat-hDDAH2（Fig.8）和hDDAH2蛋白（Fig.12）。②将1升含有pGEX-6p-1-Tat-hDDAH2质粒和pGEX-6p-1-hDDAH2质粒的细菌培养液于12000 rpm 4℃离心10 min,去上清,将细菌用100 mlPBS重悬;经超声裂解后于12000 rpm 4℃离心10 min,分离上清中的可溶性融合蛋

关键词：二甲基精氨酸-二甲胺水解酶原核表达蛋白纯化多克隆抗体蛋白转导高糖同型半胱氨酸棕榈酸

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情报学期刊网络参考文献的调查研究

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图书情报知识 2005年第6期22卷 84-86,89页

作者：胡德华方平吴忠祖中南大学医学技术与情报学院医药信息系长沙410013

在正式的学术交流中,对网络学术资源的引用仍然存在争议,并且在引用中也存在着一些问题。本文统计分析了情报学期刊中论文的网络参考文献的被引率、网络参考文献占参考文献的百分比、网址域名的分布及其可获取性,并得出了相关结论。

关键词：情报学期刊网络引文网络参考文献可获取性

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高压输电线对射电望远镜的电磁干扰

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天文研究与技术 2013年第1期10卷 91-98页

作者：詹德志金乘进吴忠祖贵州大学理学院贵州贵阳550025 中国科学院国家天文台北京100012

一方面,根据国际电信联盟(International Telecommunication Union,ITU)关于射电天文的保护标准,结合高压输电线电磁干扰的特性,分析了射电望远镜对高压输电线电磁干扰的限度;另一方面从物理机制出发建立高压输电线电晕放电辐射的电振... 详细信息

一方面,根据国际电信联盟(International Telecommunication Union,ITU)关于射电天文的保护标准,结合高压输电线电磁干扰的特性,分析了射电望远镜对高压输电线电磁干扰的限度;另一方面从物理机制出发建立高压输电线电晕放电辐射的电振子模型,运用电振子的镜像法,研究了其辐射功率随距离的衰减规律。同时还考虑500 m口径球面射电望远镜(Five hundred meters Aperture Spherical Telescope,FAST)的具体情况,分析了在FAST周围架设高压输电线应离开望远镜之间最小距离和应注意的问题。

关键词：电磁干扰电晕放电射电望远镜

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HI absorbers from the $\alpha$.40 of Arecibo Legacy Fast ALFA Survey

HI absorbers from the $\alpha$.40 of Arecibo Legacy Fast ALF...

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中国天文学会2014年学术年会

作者：吴忠祖贵州大学

＜正＞We present some preliminary results of a ongoing study of the HI 21-cm absorption line based on40%of the Arecibo Legacy Fast ALFA（ALFALFA）survey.A number of evident HI absorption lines have been detected,but m...

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射电天文学课程双语教学的探索

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开封教育学院学报 2014年第5期34卷 141-142页

作者：吴忠祖贵州大学理学院贵州贵阳550025

射电天文学是一个相对较新的天文学分支,它使用射电望远镜系统在无线波段研究来自深空(包括各类天体)的射电波。由于射电天文学课程教学在国内并不普及,相应的教材及其他教学材料比较少,很多都是直接采用国外的英文教材或者翻译而成的,... 详细信息

射电天文学是一个相对较新的天文学分支,它使用射电望远镜系统在无线波段研究来自深空(包括各类天体)的射电波。由于射电天文学课程教学在国内并不普及,相应的教材及其他教学材料比较少,很多都是直接采用国外的英文教材或者翻译而成的,因而直接利用双语教学能更好地使学生掌握射电天文学的基础知识,了解国内外射电天文学研究的现状。笔者结合双语教学以及射电天文学课程的特点对射电天文学课程双语教学的开展进行了一些思考与实践。

关键词：射电天文学双语教学

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射电天文学课程教学方法改革初探

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长春教育学院学报 2014年第14期30卷 73-74页

作者：吴忠祖贵州大学理学院博士贵州贵阳550025

射电天文学是一个相对较新的天文学分支,它使用射电望远镜系统在无线波段研究来自深空(包括各类天体)的射电波。自20世纪30年代出现以来,已经有综合孔径方法,脉冲星的发现,宇宙微波背景的发现,脉冲双星的发现和研究,宇宙微波背景辐射的... 详细信息

射电天文学是一个相对较新的天文学分支,它使用射电望远镜系统在无线波段研究来自深空(包括各类天体)的射电波。自20世纪30年代出现以来,已经有综合孔径方法,脉冲星的发现,宇宙微波背景的发现,脉冲双星的发现和研究,宇宙微波背景辐射的黑体谱特征以及非各项同性等重大发现和发明先后获得诺贝尔物理学奖。随着国内一批射电天文望远镜的立项与建设,包括国家天文台在贵州建设的500米口径望远镜(FAST),上海天文台65米射电望远镜,新疆110米射电望远镜等.在高校开展射电天文课程教学对吸引更多的学生选择将来从事射电天文专业以及培养他们射电天文基础知识都将具有重要的意义。射电天文学是一门比较新的课程,在高校中较少开设。本文结合射电天文学科的特点,从课堂教学以及课外实践两个方面介绍了对教学方法改革的一些思考。

关键词：射电天文学多媒体教学研究性教学

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利用Arecibo射电望远镜河外21-cm巡天数据进行中性氢吸收线的探测研究

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天文学报 2015年第2期56卷 112-122页

作者：吴忠祖 HAYNES Martha P GIOVANELLI Riccardo 朱明陈如荣贵州大学理学院贵阳550025 Center for Radiophysics and Space Research Space Sciences Building Cornell Universityithacany14853 中国科学院国家天文台北京100012

利用Arecibo射电望远镜40%的ALFALFA(Arecibo Legacy Fast Arecibo L-band Feed Array)河外中性氢巡天数据,探讨了进行中性氢吸收线"盲寻"的过程与方法,并给出了搜寻吸收线的一些初步结果:(1)探测到的中性氢吸收源的数量共有10个,其中5... 详细信息

利用Arecibo射电望远镜40%的ALFALFA(Arecibo Legacy Fast Arecibo L-band Feed Array)河外中性氢巡天数据,探讨了进行中性氢吸收线"盲寻"的过程与方法,并给出了搜寻吸收线的一些初步结果:(1)探测到的中性氢吸收源的数量共有10个,其中5个为文献中已知源,其余新发现的吸收线源需要进一步的研究与证实.(2)利用探测灵敏度给出了探测区域中性氢柱密度的上限,这些上限的频率统计分布显示阻尼莱曼α吸收线系统(DLAs)中的中性氢气体的平均自旋温度与覆盖因子的比值Ts/f很可能大于500K.射电干扰与驻波是影响Arecibo河外中性氢吸收线探测的两个重要因素,也将进行一定的分析以及讨论相应的解决方法等.正在建设中的500 m口径射电望远镜FAST(The Five-hundred-meter Aperture Spherical Telescope)与Arecibo射电望远镜属于相似类型,但在灵敏度、频带宽度、观测天区范围等方面都将有较大的提高,结合目前的研究进展对将来FAST在中性氢吸收线方面的研究也给出了一定的展望.

关键词：星系星际介质类星体吸收线方法数据分析

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OJ287天体的射电结构研究

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贵州大学学报（自然科学版） 2019年第2期36卷 37-43页

作者：李振旭吴忠祖贵州大学物理学院贵州贵阳550025

OJ287是一个典型的BL Lac型天体,研究该天体对于理解BL Lac型天体有非常重要的意义。为了研究OJ287天体的射电结构、亮温度等性质,本文搜集有关该天体的甚长基线射电望远镜阵(VLBA) 2 cm观测数据(1995—2018年),并把这些观测数据分别单... 详细信息

OJ287是一个典型的BL Lac型天体,研究该天体对于理解BL Lac型天体有非常重要的意义。为了研究OJ287天体的射电结构、亮温度等性质,本文搜集有关该天体的甚长基线射电望远镜阵(VLBA) 2 cm观测数据(1995—2018年),并把这些观测数据分别单个导入DIFMAP程序软件进行成图和分量处理、拟合,得到以下结果:OJ287天体在VLBA 2 cm波段的喷流方向(单侧的且方向向右),该天体的总流量,该天体的喷流各模型成分的流量、大小、方位角,喷流各模型成分离核心的距离,以及该天体的射电亮温度(1011.8"1015.0K)。由此可知,OJ287是一个高光度且光度变化非常快的天体,其喷流结构相当复杂。

关键词： OJ287 BLLac型天体射电喷流亮温度

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Fermi Blazar天体的射电偏振研究

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贵州大学学报（自然科学版） 2018年第3期35卷 52-58页

作者：曹婷婷吴忠祖贵州大学物理学院物理与天文系贵州贵阳550025

由于Blazar天体的高光度、高偏振、高红移等极端性特点,对Blazar天体的研究已成为现代天体物理学研究中最活跃的一个分支。本文选取了1744个射电源的坐标、红移、峰值频率、流量等参量,并使用matlab软件进行了数据分析。结论如下:BL La... 详细信息

由于Blazar天体的高光度、高偏振、高红移等极端性特点,对Blazar天体的研究已成为现代天体物理学研究中最活跃的一个分支。本文选取了1744个射电源的坐标、红移、峰值频率、流量等参量,并使用matlab软件进行了数据分析。结论如下:BL Lac天体偏振分布跨度、偏振度的平均值与中值均比FSRQ和BCU的大。其中,BL Lac天体的偏振度的平均值和中值最大,FSRQ次之,BCU以及其他类型的最小;Fermi Blazar天体在不同尺度巡天中射电偏振的偏振角之间没有相关性;BL Lac天体与FSRQ的射电偏振之间具有一定的相关性,BCU和其他类别的Fermi Blazar天体的射电偏振之间没有相关性;在不同尺度的Fermi Blazar天体巡天中,同步辐射峰值频率低的天体,其射电偏振高,而同步辐射峰值频率高的天体,其射电偏振低。

关键词： Blazar天体 BL Lac天体 FSRQ 射电偏振偏振强度

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特殊BL Lac型天体的VLBI观测研究

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天文研究与技术 2012年第4期9卷 348-352页

作者：吴忠祖蒋栋荣顾敏峰刘怡贵州大学理学院贵州贵阳550025 中国科学院上海天文台上海200030

BL Lac型天体是一类特殊的活动星系核,根据辐射能谱的不同可以分为低峰值频率BL Lac型天体(LBLs),中间峰值频率BL Lac型天体(IBLs),高峰值频率BL Lac型天体(HBLs),以及极高峰值频率BL Lac型天体(UHBLs)。不同类型BL Lac型天体具有不同... 详细信息

BL Lac型天体是一类特殊的活动星系核,根据辐射能谱的不同可以分为低峰值频率BL Lac型天体(LBLs),中间峰值频率BL Lac型天体(IBLs),高峰值频率BL Lac型天体(HBLs),以及极高峰值频率BL Lac型天体(UHBLs)。不同类型BL Lac型天体具有不同的辐射特性,通过射电、光学、X射线、伽玛射线等多波段的观测可以发现很多特殊类型及辐射特性的BL Lac型天体,而甚长干涉测量技术(Very Long Baseline Interferometry,VLBI)是目前分辨率最高的观测技术,也是探测致密核区结构的唯一手段。主要介绍目前对BL Lac型天体的VLBI观测研究概况,以及对其中一些特殊BL Lac型天体VLBI研究的进展及初步结果。

关键词：电磁干扰电晕放电射电望远镜

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