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巴戟天抗骨质疏松活性成分及品质评价

巴戟天抗骨质疏松活性成分及品质评价

作者：吴岩斌福建中医学院

学位级别：硕士

巴戟天是茜草科植物巴戟天Morinda officinalis How的根,是我国传统中药,为《中华人民共和国药典》所收录,具有强筋骨、补肾助阳、增强免疫的功效。在亚洲东北部,巴戟天也做为治疗阳萎、月经紊乱和一些炎症疾病,如类风湿性关节炎和皮炎... 详细信息

巴戟天是茜草科植物巴戟天Morinda officinalis How的根,是我国传统中药,为《中华人民共和国药典》所收录,具有强筋骨、补肾助阳、增强免疫的功效。在亚洲东北部,巴戟天也做为治疗阳萎、月经紊乱和一些炎症疾病,如类风湿性关节炎和皮炎,已有2000多年的历史。通过活性成分导向分离,我们从巴戟天乙醇提取物种成功的分离到具有抗骨质疏松活性的化合物。通过体外细胞实验,发现巴戟天乙酸乙酯部位具有显著的抗骨质疏松活性,对乙酸乙酯部位进一步跟踪分离,得到7个具有抗骨质疏松活性的蒽醌类化合物和1个香豆素,分别是化合物1-8,大黄素甲醚(1)、甲基异茜草素-1-甲醚(2)、2-羟基-1-甲氧基蒽醌(3)、甲基异茜草素(4)、1,3,8-三羟基-2-甲氧基蒽醌(5)、2-羟甲基-3-羟基蒽醌(6)、2-甲氧基蒽醌(7)和莨菪亭(8),同时还分离到12个其他的化合物,β-谷甾醇(9)、棕榈酸(10)、熊果酸(11)、齐墩果酸(12)、丁二酸(13)、蔗糖(14)、胡萝卜苷(15)、正丁基-β-D-吡喃果糖苷(16)、甲基-α-D-呋喃果糖苷(17)、甲基-β-D-呋喃果糖苷(18)、正丁基-α-D-呋喃果糖苷和(19)和巴戟天内酯甲(20),其中化合物20为新化合物,化合物5、6、7、8、11、12、15、16、17、18和19为首次从巴戟天中分离得到。采用HPLC-UV的方法对32个不同来源的巴戟天样品进行指纹图谱研究,并对其2-羟甲基-3-羟基蒽醌、2-羟基-1-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚和甲基异茜草素的含量进行测定,建立巴戟天药材的品质评价方法。结果发现,不同产地的巴戟天样品化学成分差异较大,而且2-羟甲基-3-羟基蒽醌、2-羟基-1-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚和甲基异茜草素的含量也有很大差异。研究发现2-羟甲基-3-羟基蒽醌、2-羟基-1-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚和甲基异茜草素在采集样品中均为主要特征成分,2-羟甲基-3-羟基蒽醌、2-羟基-1-甲氧基蒽醌、甲基异茜草素-1-甲醚和甲基异茜草素的同时测定更有利于巴戟天质量的控制。建立多化学成分的质量控制指标对于评价药材的品质至关重要,巴戟天药材的道地性和加工方法等还有待进一步的研究和开发。

关键词：巴戟天骨质疏松蒽醌指纹图谱品质评价含量测定

霸王花不同部位粗多糖的结构组成及体外抗氧化活性

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中国现代应用药学 2021年第2期38卷 189-195页

作者：冯峰杨淑玲张奇吴岩斌福建省级机关医院福建卫生职业技术学院附属医院药剂科福州350003 福建卫生职业技术学院药学系福州350101 福建中医药大学药学院福州350122

目的研究霸王花不同部位粗多糖的结构组成和体外抗氧化活性。方法利用水提醇沉法制备霸王花4个不同部位(花瓣、花萼、雌蕊、雄蕊)的粗多糖,通过苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法、凝胶排阻色谱联用多角度激光光散射和示差折光仪法[size exclus... 详细信息

目的研究霸王花不同部位粗多糖的结构组成和体外抗氧化活性。方法利用水提醇沉法制备霸王花4个不同部位(花瓣、花萼、雌蕊、雄蕊)的粗多糖,通过苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法、凝胶排阻色谱联用多角度激光光散射和示差折光仪法[size exclusion chromatography(SEC) coupled with multiangle laser light scattering(MALLS)and refractive index detector(RID),SEC-MALLS-RID]、高效液相色谱法、傅里叶红外光谱法(Fourier transform infrared spectrometer,FTIR)分析比较霸王花不同部位粗多糖结构特征;以对2,2-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除作用为指标,评价霸王花不同部位粗多糖的体外抗氧化活性。结果霸王花不同部位粗多糖中多糖含量为52.20%~61.52%,蛋白质含量为1.17%~3.21%;霸王花不同部位粗多糖均含有D-甘露糖、L-鼠李糖、D-葡萄糖醛酸、D-半乳糖醛酸、葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、D-阿拉伯糖,但单糖的比例有差异;4个不同部位粗多糖的SEC色谱图、重均分子质量及其分布、FTIR色谱图具有相似性;霸王花不同部位粗多糖具有体外抗氧化活性。结论霸王花不同部位粗多糖结构组成具有较高的相似性,均具有良好的抗氧化活性,在保健食品和药品等领域具有良好的开发利用前景。

关键词：霸王花多糖单糖组成凝胶排阻色谱联用多角度激光光散射和示差折光仪法红外光谱分析法

菌核侧耳菌核水提物对对乙酰氨基酚诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

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食用菌学报 2020年第4期27卷 85-90页

作者：邹思易骏吴岩斌吴锦忠吴建国福建中医药大学药学院福建福州350122 福建教育学院理科部福建福州350001

研究了菌核侧耳(Pleurotus tuber-regium)菌核低、中、高剂量水提物(PTRs)(剂量分别为100、200、400 mg·kg^-1)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导C57BL/6小鼠急性肝损伤的保护作用。结果表明:与模型组比较,PTRs各剂量组小鼠血清... 详细信息

研究了菌核侧耳(Pleurotus tuber-regium)菌核低、中、高剂量水提物(PTRs)(剂量分别为100、200、400 mg·kg^-1)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导C57BL/6小鼠急性肝损伤的保护作用。结果表明:与模型组比较,PTRs各剂量组小鼠血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量极显著下降,中、高剂量组谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)含量极显著下降,高剂量组碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)含量极显著下降。PTRs中、高剂量组小鼠肝脏中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量极显著降低,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量极显著升高;高剂量组谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)含量极显著升高。PTRs可以改善小鼠肝细胞脂肪性病变、坏死及炎性浸润,并明显减轻肝细胞损伤。提示PTRs能够显著提高小鼠的抗氧化能力,对APAP所致的急性肝损伤具有明显的保护作用。

关键词：菌核侧耳菌核水提物单糖组成抗氧化保肝作用

长片金线兰多糖对四氯化碳诱导急性肝损伤小鼠的保护作用

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中草药 2021年第19期52卷 5932-5938页

作者：江颖倩彭梦超吴建国吴岩斌吴锦忠福建中医药大学药学院福建福州350122

目的研究长片金线兰多糖的结构特征以及对四氯化碳(CCl_(4))致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法从长片金线兰中提取多糖,分析其相对分子质量、单糖组成、紫外与红外吸收特征。将48只ICR小鼠随机分为对照组、模型组、联苯双酯(150 mg/kg)... 详细信息

目的研究长片金线兰多糖的结构特征以及对四氯化碳(CCl_(4))致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法从长片金线兰中提取多糖,分析其相对分子质量、单糖组成、紫外与红外吸收特征。将48只ICR小鼠随机分为对照组、模型组、联苯双酯(150 mg/kg)组和长片金线兰多糖低、中、高剂量(100、200、400 mg/kg)组,给予相应药物干预9 d后,除对照组外,其余各组ip CCl_(4)造成急性肝损伤,16 h后检测各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性;测定各组大鼠肝脏组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性以及谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组小鼠肝脏组织病理变化。结果长片金线兰多糖的相对分子质量为4.254×105,由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖组成(物质的量比为1∶0.11∶0.19∶11.15∶0.87∶0.36∶0.18),紫外与红外光谱扫描结果推测其可能为一种吡喃型杂多糖。与模型组比较,长片金线兰多糖能够显著降低CCl_(4)致肝损伤小鼠血清中ALT、AST和LDH活性(P<0.05、0.01),提高肝脏组织中SOD、CAT活性和GSH含量(P<0.05、0.01),降低MDA含量(P<0.01),减轻CCl_(4)对肝组织的病理损伤。结论长片金线兰多糖对CCl_(4)致小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化有关。

关键词：长片金线兰多糖四氯化碳急性肝损伤保护作用

模拟胃液条件下广叶绣球菌多糖抗氧化及对血管紧张素Ⅰ转化酶抑制活性

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食用菌学报 2021年第6期28卷 117-125页

作者：冯彩玲程明翠吴岩斌吴锦忠吴建国福建中医药大学药学院福建福州350122

测定广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SLPs)的总糖含量和单糖组成,SLPs通过体外模拟胃液处理不同时间(0.5、1、2、4、6和8 h)的还原糖含量、相对分子质量、体外抗氧化活性和对血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)抑制率。结果表明:SLPs总糖含... 详细信息

测定广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SLPs)的总糖含量和单糖组成,SLPs通过体外模拟胃液处理不同时间(0.5、1、2、4、6和8 h)的还原糖含量、相对分子质量、体外抗氧化活性和对血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)抑制率。结果表明:SLPs总糖含量为(59.66±0.80)%;单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖(摩尔比为1∶0.7∶10.9∶3.6)。与对照(0 h)比较,SLPs模拟胃液处理2 h后开始发生水解,随时间延长其还原糖含量显著增加。SLPs通过模拟胃液处理不同时间的色谱洗脱峰具有差异,0 h处理样品具有2个峰,0.5、1 h处理样品具有4个峰,处理2 h后的样品具有5个峰;在20~35 min均存在相对分子质量大于2.0×10^(6)多糖组分。与对照(0 h)比较,模拟胃液处理6、8 h的0.50、1.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液,处理4、6、8 h的2.00、4.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液对DPPH自由基清除率显著增加;处理4、6、8 h的0.50 mg·mL^(-1) SLPs溶液,处理2、4、6、8 h的1.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液,处理6、8 h的2.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液,处理4、6、8 h的4.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液对·OH自由基清除率显著增加;处理4 h的0.25 mg·mL^(-1) SLPs溶液、处理2 h的0.50 mg·mL^(-1) SLPs溶液和处理8 h的2.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液对ABTS+自由基清除率显著增加。与对照比较,处理1、2、6、8 h的0.25、0.50 mg·mL^(-1) SLPs溶液,处理2、4、6、8 h的1.00、2.00 mg·mL^(-1) SLPs溶液对ACE抑制率显著增加。研究结果可为SLPs体内代谢规律研究提供参考。

关键词：广叶绣球菌多糖模拟胃液抗氧化活性血管紧张素Ⅰ转化酶抑制活性

广叶绣球菌乙醇提取物及蛋白体外抗氧化对血管紧张素Ⅰ转化酶活性的抑制作用

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福建中医药 2023年第7期54卷 53-56页

作者：程明翠冯彩玲白云丽吴岩斌吴锦忠吴建国福建中医药大学药学院福建福州350122

目的研究广叶绣球菌Sparassis latifolia的乙醇提取物及蛋白的体外抗氧化和对血管紧张素Ⅰ转换酶(ACE)活性的抑制作用。方法通过95%乙醇和0.15 mol/mL NaCl溶液制备广叶绣球菌乙醇提取物和蛋白,蛋白质定量(BCA)法测定广叶绣球菌蛋白的... 详细信息

目的研究广叶绣球菌Sparassis latifolia的乙醇提取物及蛋白的体外抗氧化和对血管紧张素Ⅰ转换酶(ACE)活性的抑制作用。方法通过95%乙醇和0.15 mol/mL NaCl溶液制备广叶绣球菌乙醇提取物和蛋白,蛋白质定量(BCA)法测定广叶绣球菌蛋白的总蛋白含量;采用体外DPPH、·OH和ABTS+自由基清除法测定广叶绣球菌乙醇提取物及蛋白的体外抗氧化活性;高效液相色谱法测定广叶绣球菌乙醇提取物及蛋白对ACE活性的抑制率。结果广叶绣球菌的总蛋白含量为(43.56±2.24)%。当广叶绣球菌乙醇提取物和蛋白浓度均为4.0 mg/mL时,对DPPH、·OH、ABTS+自由基清除率均达到最高,其中广叶绣球菌乙醇提取物对DPPH、·OH、ABTS+自由基清除率分别为89.58%、60.44%、13.93%,广叶绣球菌蛋白对DPPH、·OH、ABTS+自由基清除率分别为25.69%、40.09%、13.60%。广叶绣球菌乙醇提取物和蛋白在4.0 mg/mL浓度时,对ACE活性的抑制率均达到最高,分别为24.82%、61.25%。结论广叶绣球菌乙醇提取物和蛋白均具有一定的体外抗氧化作用,并对ACE活性具有一定的抑制作用,其中广叶绣球菌乙醇提取物的体外抗氧化活性高于蛋白,广叶绣球菌蛋白对ACE活性的抑制作用强于乙醇提取物,这为广叶绣球菌的开发利用提供初步的实验参考。

关键词：广叶绣球菌乙醇提取物蛋白自由基清除活性血管紧张素Ⅰ转化酶

慢加急性肝衰竭关键基因的生物信息学探究及潜在中药预测验证

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中国实验方剂学杂志 2023年第22期29卷 79-87页

作者：吴忠吴斌魏秀岩沈阳药科大学生命科学与生物制药学院沈阳110016

目的:应用生物信息学方法探究慢加急性肝衰竭(ACLF)的关键基因,预测潜在治疗中药并实验验证其作用机制。方法:利用Perl和R软件分析GSE142255数据集获取差异表达基因(DEGs),基于CytoHubba插件的5种算法鉴定DEGs蛋白质-蛋白质相互作用(PPI... 详细信息

目的:应用生物信息学方法探究慢加急性肝衰竭(ACLF)的关键基因,预测潜在治疗中药并实验验证其作用机制。方法:利用Perl和R软件分析GSE142255数据集获取差异表达基因(DEGs),基于CytoHubba插件的5种算法鉴定DEGs蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络中的关键基因,并借助受试者工作特征(ROC)曲线和GSE168048数据集对关键基因进行验证分析;Coremine Medical数据库映射关键基因对应中药并分析其四气、五味、归经;中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和DEGs获取高频中药治疗ACLF的交集靶点,Cytoscape软件绘制关键基因-高频中药-活性成分-交集靶点网络图,并进行基因本体(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析及体外实验。结果:共获取388个DEGs,7个关键基因分别为CD4、整合素亚基αM(ITGAM)、CD2、淋巴细胞特异蛋白酪氨酸激酶(LCK)原癌基因,CC基序趋化因子配体5(CCL5)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Fcε受体IG(FCER1G)。潜在治疗中药多为寒性、苦味、归肝经的药物,其中高频中药如白花蛇舌草、灵芝、黄芪和活性成分槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇的潜在治疗价值重大。富集分析显示,中药除调控关键基因外,仍对自噬、氧化应激、炎症因子等多靶点、多通路发挥作用。L02细胞实验表明,与D-氨基半乳糖(D-GaLN)组比较,槲皮素组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)水平和泛素结合蛋白p62、MMP-9蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),而超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)水平和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)蛋白表达明显增加(P<0.05,P<0.01),且3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理可抑制槲皮素对L02细胞自噬激活作用。结论:基于ACLF的关键基因,预测所得潜在治疗中药及活性成分具有重大研究价值,其中槲皮素对D-GaLN诱导L02细胞氧化应激、炎症反应的抑制及MMP-9的调控而具有治疗ACLF的潜力,其机制可能与其激活自噬相关。

关键词：慢加急性肝衰竭关键基因生物信息学中药预测自噬

闽产长梗黄精和多花黄精氨基酸及微量元素含量分析

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福建中医药 2023年第4期54卷 39-41,44页

作者：张艺勤吴岩斌杨成梓福建中医药大学药学院福建福州350122

目的研究闽产长梗黄精与多花黄精中氨基酸和微量元素含量的差异,为长梗黄精的开发利用提供实验数据支持。方法采用氨基酸分析仪测定来自福建省不同地区的长梗黄精与多花黄精氨基酸含量,采用电感耦合等离子体质谱仪测定其微量元素含量... 详细信息

目的研究闽产长梗黄精与多花黄精中氨基酸和微量元素含量的差异,为长梗黄精的开发利用提供实验数据支持。方法采用氨基酸分析仪测定来自福建省不同地区的长梗黄精与多花黄精氨基酸含量,采用电感耦合等离子体质谱仪测定其微量元素含量。结果测得闽产长梗黄精与多花黄精均含有17种氨基酸,总氨基酸含量分别为55.41、45.99 mg/g,其中长梗黄精的酪氨酸(Tyr)和脯氨酸(Pro)含量均显著高于多花黄精(P均<0.05),长梗黄精氨基酸比值系数评价得分(SRC)高于多花黄精,分别为80.77、76.48分;长梗黄精与多花黄精均含有21种微量元素,其中长梗黄精的镁(Mg)、钒(V)、铕(Eu)、钪(Sc)、铈(Ce)元素含量均显著高于多花黄精(P均<0.05),长梗黄精的镥(Lu)元素含量显著低于多花黄精(P<0.05)。结论闽产长梗黄精与多花黄精的氨基酸及微量元素种类基本一致,表明长梗黄精在食用价值与多花黄精具有较好的相似性;长梗黄精氨基酸评分高于多花黄精,表明长梗黄精氨基酸营养价值高于多花黄精,具有很好的开发利用价值。

关键词：长梗黄精多花黄精氨基酸微量元素

牛樟芝提取物调控Nrf2/HO-1通路对酒精性肝损伤的保护作用

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菌物学报 2021年第9期40卷 2433-2444页

作者：冯彩玲杨彬君吴岩斌易骏吴锦忠吴建国福建中医药大学药学院福建福州350122 福建教育学院理科部福建福州350001

研究不同剂量(100、200和400mg/kg)的牛樟芝水提物(WE)、醇提后水提取物(WEE)和醇提物(EE)对酒精诱导的ICR小鼠急性肝损伤的保护作用和对Nrf2/HO-1抗氧化信号通路的影响。研究结果表明:与模型组比较,400mg/kg的WE和WEE均能显著抑制血清... 详细信息

研究不同剂量(100、200和400mg/kg)的牛樟芝水提物(WE)、醇提后水提取物(WEE)和醇提物(EE)对酒精诱导的ICR小鼠急性肝损伤的保护作用和对Nrf2/HO-1抗氧化信号通路的影响。研究结果表明:与模型组比较,400mg/kg的WE和WEE均能显著抑制血清ALT和AST水平的升高,200mg/kg的WE和WEE分别显著降低血清ALT和AST含量。各剂量的WE、WEE和EE均能显著降低肝脏MDA含量,200和400mg/kg的WE和不同剂量的WEE均可明显提高肝脏的SOD和CAT活力。H&E染色结果表明WE、WEE和EE对酒精诱导的肝损伤均有一定的改善作用,EE处理组的效果相对较差。免疫组化染色结果表明各剂量的WE、WEE和EE均能促进Nrf2的核转位,诱导HO-1的表达,提高肝脏的抗氧化能力,对酒精诱导的急性肝损伤具有明显的保护作用。提示牛樟芝能通过调节Nrf2/HO-1抗氧化信号通路发挥解酒保肝功效。

关键词：牛樟芝提取物酒精性肝损伤 Nrf2/HO-1抗氧化信号通路保护作用