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兔感染弓形虫抗体反应动态观察

中国人兽共患病杂志 1995年第5期11卷 55-56页

作者：吴少廷冯友仁王文松廖家智深圳市卫生防疫站同济医科大学寄生虫学教研室

兔感染弓形虫抗体反应动态观察吴少廷，冯友仁，王文松，廖家智弓形虫病（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍｏｓｉｓ）是由刚地弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ）引起的人兽共患病。特别是先天性弓形虫病，ＡＩＤＳ患者和其它免疫缺陷者合... 详细信息

兔感染弓形虫抗体反应动态观察吴少廷，冯友仁，王文松，廖家智弓形虫病（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍｏｓｉｓ）是由刚地弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ）引起的人兽共患病。特别是先天性弓形虫病，ＡＩＤＳ患者和其它免疫缺陷者合并弓形虫感染，日益为人们所重视。我...

关键词：弓形体病抗体兔反应动态弓形体

我国华南间日疟原虫裂殖子表面蛋白1等位基因分型和序列分析

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中国人兽共患病杂志 2002年第2期18卷 57-60页

作者：江钢锋李娟兰吴少廷王善青广东药学院寄生虫学教研室广州510224 深圳市卫生防疫站分子生物学研究室海南省热带病防治研究所

目的　了解我国间日疟原虫MSP1(PvMSP1)的等位基因类型和序列的多态性。方法　用特异的引物通过套式PCR方法体外扩增包含PvMSP1的ICB5与ICB6之间的基因片段 ,并对部分扩增产物进行序列测定和分析。结果　 2 7份间日疟原虫患者血样中 ,有... 详细信息

目的　了解我国间日疟原虫MSP1(PvMSP1)的等位基因类型和序列的多态性。方法　用特异的引物通过套式PCR方法体外扩增包含PvMSP1的ICB5与ICB6之间的基因片段 ,并对部分扩增产物进行序列测定和分析。结果　 2 7份间日疟原虫患者血样中 ,有 16份 (5 9 9% )扩增得到Belem型基因产物 ,2 5 (92 6 % )份扩增出Sal- 1型基因产物 ;两种不同等位基因型虫株的混合感染率为 5 1 9%。序列分析结果发现一个以前未见报告的基因内重组类型。结论　我国间日疟原虫虫株存在两种PvMSP1等位基因型 ,Sal- 1型可能是主导型 ;

关键词：间日疟原虫裂殖子表面蛋白1 基因分型序列分析中国

弓形虫表面抗原P22编码基因片段的克隆及序列测定

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中国人兽共患病杂志 2000年第2期16卷 62-64页

作者：高世同吴少廷林敏梁驹卿占国清深圳市卫生防疫站深圳518020 广东省妇幼保健医院

目的克隆弓形虫表面抗原P22编码基因片段并进行序列测定。方法设计合成1对引物，采用PCR法扩增出P22目的基因片段，以低熔点琼脂糖回收纯化，并以限制性内切酶BamHI和KpnI双酶切后，插入质粒载体p5．6的多克隆位点，构建重组体p5．6／P2... 详细信息

目的克隆弓形虫表面抗原P22编码基因片段并进行序列测定。方法设计合成1对引物，采用PCR法扩增出P22目的基因片段，以低熔点琼脂糖回收纯化，并以限制性内切酶BamHI和KpnI双酶切后，插入质粒载体p5．6的多克隆位点，构建重组体p5．6／P22，并转化大肠杆菌DH5α，快速酸法初筛阳性重组子，并以PCR法与限制性酶切分析对阳性克隆进一步鉴定。被鉴定的重组子以双脱氧链终止法进行序列测定。结果从弓形虫核酸提取物中扩增出约593bpDNA条带，与预期扩增片段大小相符，空白对照无特异性扩增条带；所构建p5．6／P22重组体阳性克隆经双酶切与PCR鉴定与预期结果一致；序列测定的结果确证了插入片段的正确性。结论体外成功扩增、克隆了弓形虫表面抗原P22编码基因片段，并经序列分析所验证，为弓形虫P22表面抗原的表达以及弓形虫疫苗的制备作好铺垫。

关键词： P22表面抗原克隆序列分析弓形体病

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PCR鉴别诊断间日疟及恶性疟的研究

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1997年第6期15卷 373-377页

作者：高世同吴少廷陈观今陈志辉林敏深圳市卫生防疫站深圳518020 中山医科大学寄生虫学教研室广州510089 第二军医大学

目的 :在同一反应体系中建立能鉴别诊断间日疟与恶性疟的 PCR检测方法。方法 :根据红内期疟原虫 SSUr RNA编码基因序列 ,设计合成 3个引物 ,采用聚合酶链反应技术 ,在同一反应体系中 ,间日疟原虫和恶性疟原虫分别预期被扩增出 34 1bp和 ... 详细信息

目的 :在同一反应体系中建立能鉴别诊断间日疟与恶性疟的 PCR检测方法。方法 :根据红内期疟原虫 SSUr RNA编码基因序列 ,设计合成 3个引物 ,采用聚合酶链反应技术 ,在同一反应体系中 ,间日疟原虫和恶性疟原虫分别预期被扩增出 34 1bp和 4 31bp的 DNA条带。结果 :间日疟原虫和恶性疟原虫模板在同一反应体系中分别被扩增出预期大小的 DNA片段 ,并经限制性酶切证实 ;杜氏利什曼原虫、弓形虫、健康人血及空白对照均无特异性扩增条带 ;以该检测体系至少可检出原虫血症为 2 .56× 10 -7间日疟原虫感染和 1.0 8× 10 -5恶性疟原虫感染 ;69份镜检阳性的间日疟和 2份恶性疟患者血样 PCR检测均为阳性 ,1例发热待查患者 PCR诊断为间日疟 ,与镜检复查结果一致 ,所有疟疾阳性标本中未检出混合感染 ,2 0份健康人血 PCR均为阴性。结论 :该检测体系灵敏、特异 ,对于诊断间日疟和恶性疟以及鉴别间日疟原虫和恶性疟原虫混合感染具有一定的应用价值。

关键词：间日疟原虫恶性疟原虫聚合酶链反应诊断

完整弓形虫P35重组蛋白IgM-酶联免疫吸附测定法检测弓形虫急性感染

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生物化学与生物物理进展 2003年第1期30卷 134-137页

作者：吕斌吴少廷周宜开徐顺清张仁利高世同林敏张志仁华中科技大学同济医学院环境医学研究所武汉430030 中国预防医学科学院深圳研究中心深圳518020

为利用重组的完整弓形虫表面抗原P35 GST蛋白对弓形虫感染进行血清学诊断 ,构建了可表达P35 GST的JM10 9细胞株 .采用亲和层析对融合蛋白进行分离和纯化 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹 (Westernblot)分析所表达... 详细信息

为利用重组的完整弓形虫表面抗原P35 GST蛋白对弓形虫感染进行血清学诊断 ,构建了可表达P35 GST的JM10 9细胞株 .采用亲和层析对融合蛋白进行分离和纯化 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹 (Westernblot)分析所表达的蛋白质 ,并用纯化的重组蛋白进行IgM 酶联免疫吸附测定法 (IgM ELISA)检测不同病人血清中的抗 P35抗体 .SDS PAGE分析发现P35 GST重组蛋白的大小约 6 0ku ,为一亲水性蛋白 ,蛋白质印迹分析表明该蛋白与弓形虫阳性感染病人的血清有特异性反应 .利用P35 GST为抗原 ,对 6 0例血清进行IgM ELISA分析 ,发现P35 GST可明显区分近期感染和既往感染 ,在弓形虫的诊断上有很大的应用前景 .

关键词：完整弓形虫表面抗原 P35-GST蛋白弓形虫感染 IgM-酶联免疫吸附测定法

间日疟原虫环子孢子蛋白基因片段的体外扩增、鉴定与克隆

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中国人兽共患病杂志 1998年第4期14卷 18-21页

作者：高世同陈观今吴少廷林敏深圳市卫生防疫站深圳518020 中山医科大学寄生虫学研究所

目的：体外扩增、鉴定并克隆间日疟原虫环子孢子蛋白（CSP）基因约772hP的基因片段，包容CSP基因的Ⅰ区、中央9肽重复区、重复后可变区及Ⅱ区。方法：采用PCR法扩增出CSP目的基因片段，以低熔点琼脂糖回收纯化，并以限制性内切酶BstNI... 详细信息

目的：体外扩增、鉴定并克隆间日疟原虫环子孢子蛋白（CSP）基因约772hP的基因片段，包容CSP基因的Ⅰ区、中央9肽重复区、重复后可变区及Ⅱ区。方法：采用PCR法扩增出CSP目的基因片段，以低熔点琼脂糖回收纯化，并以限制性内切酶BstNI酶切鉴定后，采用T载体连接方案，插入中间载体PUC19的多克隆位点，构建重组体PUC19／CSP，并转化大肠杆菌JM107，蓝白菌斑初筛阳性重组子，并以PCR法与限制性酶切分析对阳性克隆进一步鉴定。结果：从间日疟患者血样核酸提取物中扩增出约772hPDNA条带，而正常人血与空白对照无特异性扩增条带，经酶切鉴定证实为CSP基因片段;所构建的PUC／CSP重组体阳性克隆经双酶切与PCR鉴定与预期结果一致。结论：体外成功扩增并克隆间日疟原虫CSP基因片段，为下一步的基因序列分析及CS诊断抗原的制备打下基础。

关键词：间日疟原虫环子孢子蛋白克隆聚合酶链反应

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梭状肉孢子虫研究

中国人兽共患病杂志 1991年第1期7卷 31-33页

作者：吴少廷刘国元肖树池万明松同济医科大学寄生虫学教研室武汉牛羊加工厂卫检科

电镜观察及人工感染动物试验确认国内水牛有梭状肉孢子虫包囊寄生。此包囊系一大型包囊,其初生包囊壁具呈树枝状分枝之菜花样结构,沿分枝纵轴方向分布之纤维由粗且电子密度高的颗粒充填其内。基质层直接延伸形成隔。人工感染狗、猫试验... 详细信息

电镜观察及人工感染动物试验确认国内水牛有梭状肉孢子虫包囊寄生。此包囊系一大型包囊,其初生包囊壁具呈树枝状分枝之菜花样结构,沿分枝纵轴方向分布之纤维由粗且电子密度高的颗粒充填其内。基质层直接延伸形成隔。人工感染狗、猫试验结果显示,仅猫粪内有其孢子囊排出。从603头屠宰水牛材料中发现,梭状肉孢子虫感染率为89.34％(539/603),每40cm^2的肌肉切面见包囊数最高者达52只。剖检的11种肌肉中,食道肌感染率最高,为87.06％(525/603)。

关键词：梭状肉孢子虫透射电镜动物试验