检索结果-南通市图书馆

NF-κB通路在γ辐射所致SH-SY5Y细胞损伤中的作用机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

NF-κB通路在γ辐射所致SH-SY5Y细胞损伤中的作用机制研究

作者：吴子君长江大学

学位级别：硕士

背景:神经母细胞瘤病理分期中危组和高危组的患者,采取放射治疗可以显著增加肿瘤的局部控制率,提高患者生存率。然而,部分神经母细胞瘤患者的放射治疗效果不好,存在放疗抵抗的现象。文献报道,在肿瘤的放疗抵抗作用中,NF-κB(nuclear fac... 详细信息

背景:神经母细胞瘤病理分期中危组和高危组的患者,采取放射治疗可以显著增加肿瘤的局部控制率,提高患者生存率。然而,部分神经母细胞瘤患者的放射治疗效果不好,存在放疗抵抗的现象。文献报道,在肿瘤的放疗抵抗作用中,NF-κB(nuclear factor‐κB,NF‐κB)通路的激活起到重要作用。目的:本研究旨在探讨NF-κB通路在γ辐射所致SH-SY5Y细胞损伤中的作用功能与机制。方法:常规培养人神经母细胞瘤细胞—SH-SY5Y细胞系,不同剂量(0、0.2、0.5、2、5、10和20 Gy)γ射线照射细胞,分别在照射后不同时间点(4、8、24和48小时)收集细胞。(1)使用倒置显微镜观察SH-SY5Y细胞形态学改变。(2)采用MTT(Thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)实验检测SH-SY5Y细胞增殖数量。(3)采用PI染色流式细胞术检测SH-SY5Y细胞周期变化与凋亡细胞比例。(4)采用Western blot观察DNA损伤相关蛋白、NF-κB通路蛋白、凋亡通路相关蛋白的表达情况。(5)采用荧光定量PCR观察SH-SY5Y细胞凋亡通路相关基因、NF-κB通路基因和细胞增殖基因的表达情况。(6)P65-DNA结合实验检测NF-κB(P65)蛋白与DNA的结合活性。(7)双荧光素酶报告基因实验检测NF-κB(P65)蛋白的转录活性。结果:(1)SH-SY5Y细胞受到γ射线照射后,细胞肿胀,边缘毛糙,触角增多。随着照射后时间延长和照射剂量增大,上述形态学改变越明显。(2)与对照组相比,γ射线照射组的细胞数量呈现剂量依赖性减少(P<0.01)。(3)与对照组相比,γ射线照射组的细胞凋亡比例和G2/M期细胞比例呈现剂量依赖性增加(P<0.01)。(4)与对照组相比,γ射线照射组的细胞DNA损伤相关蛋白γH2ax、NF-κB通路蛋白p65与磷酸化p65、凋亡通路蛋白Cleaved Caspase-3与Parp的表达量增加。(5)与对照组相比,γ射线照射组的细胞NF-κB通路基因p65的表达上调(P<0.01),凋亡通路基因Caspase-3、Bax和Parp的表达上调(P<0.05),细胞增殖基因Pcna下调(P<0.01),细胞周期调控基因p21上调(P<0.01)。(6)与对照组相比,γ射线照射组的细胞NF-κB(P65)蛋白与DNA的结合活性增加(P<0.05),NF-κB(P65)蛋白的转录活性增加(P<0.01)。结论:(1)γ辐射可激活炎症、凋亡、DNA损伤通路,导致SH-SY5Y细胞损伤。辐射损伤效应包括促进SH-SY5Y细胞的凋亡、G2/M期阻滞和增殖抑制。(2)γ辐射可能通过NF-κB通路的激活导致SH-SY5Y细胞的损伤,p65蛋白是其中关键的转录因子。

关键词：辐射损伤辐射抵抗 NF-κB 神经母细胞瘤

铜绿假单胞菌产脂肪酶发酵条件及其酶学性质研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

铜绿假单胞菌产脂肪酶发酵条件及其酶学性质研究

作者：吴子君河南工业大学

学位级别：硕士

脂肪酶是一种能够分解甘油三酯的水解酶,可以在油水界面将甘油三酯转化为甘油和脂肪酸。研究表明,许多菌株具有产脂肪酶能力,但脂肪酶活力高的菌株却很少。为丰富现有的高效脂肪酶生产菌种资源,以满足工业应用需求,本研究从产脂肪酶微... 详细信息

脂肪酶是一种能够分解甘油三酯的水解酶,可以在油水界面将甘油三酯转化为甘油和脂肪酸。研究表明,许多菌株具有产脂肪酶能力,但脂肪酶活力高的菌株却很少。为丰富现有的高效脂肪酶生产菌种资源,以满足工业应用需求,本研究从产脂肪酶微生物的筛选、产酶条件优化、脂肪酶分离纯化、酶学性质考查、脂肪酶基因的克隆与异源表达等方面进行研究。主要结果如下:(1)应用中性红油脂培养基从发酵芝麻饼中初步筛选得到3株产脂肪酶细菌菌株,采用对硝基苯酚法进行复筛后,确定K-2为产脂肪酶活力较优的菌株。经过对菌落特征与生理生化特性分析,16S r RNA基因的克隆、序列比对以及系统发育树的构建,确定该菌株为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。通过单因素试验考查培养时间、发酵培养基中的接种量、碳源、氮源、金属离子以及培养基的初始p H等因素对菌株发酵产脂肪酶的影响,并选择发酵时间、接种量、和蛋白胨添加量为三个显著性因素,采用Box-Behnken响应面分析法对产酶条件进行优化,得到菌株产酶的最佳发酵条件为:淀粉5 g/L,蛋白胨11.3 g/L,Mg SO·7HO 1 g/L,KHPO1 g/L,初始p H值7.0,培养温度37°C,接种量3%,培养时间67.5 h,在此条件下菌株所产脂肪酶活力达到最大值,为271.28 U/m L。(2)使用硫酸铵盐析与Sephadex G-100凝胶过滤层析的方法分离纯化菌株K-2所产脂肪酶,所得产物比活力为282.84 U/mg,纯化倍数11.5倍,回收率为23%。该脂肪酶最适反应温度为40°C,最适反应p H为9.0,在p H 7.0-10.0时脂肪酶有良好的稳定性,孵育24 h后,脂肪酶活力仍保持70%以上。该酶属于碱性脂肪酶,酶活受酸性条件抑制。1 m M的Mg、Cu、Mn对脂肪酶活性有促进作用;Fe、Zn对脂肪酶有抑制作用;Ca对脂肪酶有显著的激活作用。脂肪酶对有机溶剂有一定的耐受性,溶剂体积分数为10%时,即使是强极性溶剂(乙腈、甲醇),对脂肪酶活性也有着促进作用,相对酶活分别为115.62%、118.24%。脂肪酶最适底物为对硝基苯酚月桂酸酯(C12),可水解菜籽油、玉米油与花生油并产生脂肪酸,使含有酚红指示剂的碱性油脂混合液变为黄色。(3)通过PCR方法克隆得到铜绿假单胞菌K-2的脂肪酶及分子伴侣(Lip AH)基因,该基因序列全长2008 bp,编码668个氨基酸,包含两个开放阅读框,分别为脂肪酶基因及分子伴侣。将克隆所得基因(Lip AH)与p ET-28a(+)质粒载体相连接,转化至*** BL21(DE3)中,在IPTG浓度为0.3 m M,诱导温度20°C,诱导时间24 h时所产脂肪酶活力最高,为123.16 U/m L。经SDS-PAGE分析,重组脂肪酶分子伴侣大多以包涵体形式存在,这可能使脂肪酶不能正确折叠,从而导致工程菌所产脂肪酶酶活低于优化后野生菌的最佳酶活。本论文从发酵芝麻饼中分离筛选得到一株产脂肪酶铜绿假单胞菌菌株,通过菌落特征、生理生化特性与16S r RNA基因序列比对结果对其进行鉴定,并对产酶条件进行优化,考查菌株的产脂肪酶潜力。之后对菌株所产脂肪酶的酶学性质进行研究,并构建工程菌,可以为开发低成本、高酶活的脂肪酶产品提供菌种资源与方法参考。

关键词：脂肪酶铜绿假单胞菌发酵条件酶学性质异源表达

SPIGD干旱指数的建立及其效果检验和应用研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

SPIGD干旱指数的建立及其效果检验和应用研究

作者：吴子君兰州大学

学位级别：硕士

SPI具有计算简单、不受到季节和地形的限制、可在多时间尺度下进行比较等优势,近年来在国内外得到非常广泛的应用。研究指出,SPI计算时最主要的两个不确定因素是累积降水量分布函数的选取及所用数据资料的长度。SPI在计算时以假设累积... 详细信息

SPI具有计算简单、不受到季节和地形的限制、可在多时间尺度下进行比较等优势,近年来在国内外得到非常广泛的应用。研究指出,SPI计算时最主要的两个不确定因素是累积降水量分布函数的选取及所用数据资料的长度。SPI在计算时以假设累积降水量服从伽马分布为前提,且作者建议应该使用至少30年长度的数据进行计算。世界各地气候复杂多变,不同地区的累积降水量未必都可以很好地服从于伽马分布,且30年长度的降水量也未必可以保证得到准确的SPI数值。因此,选择出最符合某一地区累积降水量分布特征的分布函数,并使用最佳长度的降水量数据进行计算,即为改进SPI的关键所在。近些年来,针对SPI中所使用伽马分布的适用性的研究很多,但现有研究均只停留在其他分布和伽马分布的对比与讨论上,还没有研究正式提出使用更具适用性的其他分布代替伽马分布,以得到更为准确的新SPI的改进方法。并且,目前还没有研究深入地分析在不同时间尺度下使用多长的降水量资料进行计算时得到的SPI数值才能达到稳定。因此,本文从这两个角度出发,使用1961-2013年我国760个气象测站的月值降水数据,分别在一、三、六、九、十二、二十四个月这六个时间尺度下,选择广义极值分布、韦伯分布、对数正态分布、正态分布和瑞利分布与伽马分布进行对比,在全国范围内进行讨论与分析,结果发现:(1)在一个月时间尺度下,伽马分布和韦伯分布的K-S检验通过率最高,从三个月时间尺度开始,均是广义极值分布的通过率最高;且在各时间尺度下,广义极值分布成为最优分布的百分率也均是最高的。对最小的两个时间尺度分季节讨论后发现:在一个月时间尺度下,春、夏、秋三季中,广义极值分布都是最适于描述我国累积降水量分布特征的函数;而冬季伽马分布表现更优。三个月时间尺度下,夏冬两季均是广义极值分布能够最好的描述我国累积降水量的分布特征。(2)根据K-S检验结果对各分布进行综合评分,结果显示,在全国范围内,无论是在所有时间尺度的综合评分中,还是季节性讨论评分中,广义极值分布都是表现最好的分布。伽马分布的分数也相对较高,评分位居第二。(3)使用年均降水量将我国划分为干旱区、半干旱区、半湿润区、湿润区,在各气候区内分别在各时间尺度和各季节下进行了详细的K-S检验,发现只有在少雨的干旱区,伽马分布的检验结果和广义极值分布并列排在第一位。而在其它三个气候区内,都是广义极值分布的检验结果最好,其次才为伽马分布。(4)以平凉站点为例,对分别使用不同分布计算得到的SPI进行对比,发现在一个月时间尺度下各分布的概率分布函数图像差异最大,之后随着时间尺度的增大,各分布图像之间的差异也逐渐减小。之后从数值差异及对干旱等级的判断两个方面对各分布的SPI进行了对比,发现在这两个方面,均是对数正态分布和正态分布之间得到的SPI差值最大,而SPI在数值上差异最小的是伽马分布与韦伯分布,对干旱等级判定不符的比例最小的是伽马分布和对数正态分布。(5)以更适合描述我国累积降水量分布特征的广义极值分布代替伽马分布,将改进后的新指数命名为SPID,给出SPID的详细计算公式。并使用SPID3分别对2009年全国秋季的干旱情况及1986年甘肃武威的干旱情况进行了分析,发现SPID3对旱情发生的范围、程度及时间都有较好的描述,且和资料中记载的实况吻合度较高。又分别使用SPID1和SPI1对1987年河南省夏季的一次干旱事件进行分析,发现SPI1对豫西地区旱情发生的范围和程度的监测上出现较大失误,而SPID1对旱情的监测更为准确,与实际情况的符合度更高。(6)继续以平凉站点为例,分别使用5年-50年长度的降水量资料,得到使用不同长度的降水量资料时各分布的参数及概率密度函数图像,发现各分布均是在使用较短的资料长度时,参数和函数图像的变化非常剧烈,而随着所用资料的长度逐渐增长,参数值和图像的变化也逐渐稳定下来。(7)得到各分布在各时间尺度下使用每一个长度的降水量资料来计算出的平凉站点2012年3月的SPI值,同样发现所有分布在每一个时间尺度下,均是使用较短长度的降水量资料时,SPI数值的变化非常剧烈,而随着降水量资料的长度逐渐增长,SPI的数值也逐渐稳定下来。并且随着时间尺度的增大,SPI数值达到稳定时所需的资料长度也在增大。最后总结出各分布在各时间尺度下SPI数值达到稳定时的降水量资料长度,并对实际应用中使用不同时间尺度下的SPI和SPID时应当选择多长的降水量资料进行计算分别给出针对性建议。

关键词： SPI 累积降水量 SPIGD 干旱监测资料长度

植物促生菌在重金属污染农田土壤中的促生作用及其分子生态效应

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

植物促生菌在重金属污染农田土壤中的促生作用及其分子生态效应

作者：吴子君南昌大学

学位级别：硕士

植物促生菌（Plant growth-promoting bacteria,PGPB）可通过促进植物生长、提高植物的重金属耐受性来强化植物修复效率。由于PGPB所应用土壤环境的复杂性及其适应性问题,对于开发利用污染地区域的具有多重抗性的优势本土PGPB资源有着... 详细信息

植物促生菌（Plant growth-promoting bacteria,PGPB）可通过促进植物生长、提高植物的重金属耐受性来强化植物修复效率。由于PGPB所应用土壤环境的复杂性及其适应性问题,对于开发利用污染地区域的具有多重抗性的优势本土PGPB资源有着迫切需求。此外,目前利用PGPB强化植物修复重金属污染土壤的研究主要集中在修复效果的评价上,很少有研究关注PGPB在土壤中的环境行为及其生态效应。本研究的目的为:从江西省鄱阳湖-乐安河流域段重金属污染农田土壤中分离筛选鉴定一批具有多重重金属抗性的土著PGPB;研究PGPB在原位土壤中对植物生长及重金属修复的促进作用;评估施加PGPB对重金属污染农田土壤土著微生物群落的影响及其生态效应。（1）从重金属污染农田土壤中共分离筛选得到34株具有Cu（100mg/L）、Pb（1200mg/L）、Zn（3200mg/L）、As（800mg/L）抗性的土著PGPB。选取其中10株具有较高的植物促生特性（ACC脱氨酶活性、产IAA能力、产铁载体能力、溶磷能力、产氨能力）的菌株进行系统发育学鉴定,分别鉴定为伯克霍尔氏菌属（Burkholderia sp.6株）、贪铜菌属（Cupriavidus sp.2株）、假单胞菌属（Pseudomonas sp.1株）和劳尔氏均属（Ralstonia sp.1株）。其中,Pseudomonas monteilii strain S2-3、Burkholderia anthina strain S9-17、Burkholderia latens strain S7-22分别具有最高的产IAA能力、产铁载体能力和溶磷能力,Burkholderia anthina strain S6-1具有最高的ACC脱氨酶活性和产氨能力。所有分离得到的菌株都表现出了良好的重金属抗性、抗生素抗性、耐酸碱性和耐盐性。（2）土著植物促生菌*** strain S2-3和*** strain S6-1相比于不接菌的对照组显著增加了高粱的株高、地上部分鲜重和干重以及总氮含量。而脯氨酸含量、丙二醛含量、可溶性蛋白含量、CAT、POD、SOD则没有表现出显著差异。接种S2-3和S6-1相比于对照组显著提高了土壤中可培养细菌数量和总氮含量。处理组S2-3高粱地下部分Cu含量和地上部分Zn含量显著高于对照组,同时植物对于Zn的转移系数、富集系数和修复系数以及对Cu的修复系数也显著提高。处理组S6-1高粱Pb含量和Zn的转运系数显著高于对照组。（3）施加PGPB到重金属污染土壤中没有对土壤理化性质及重金属含量产生显著影响。各接菌处理组土壤理化性质、细菌群落结构、细菌群落功能均随采样时间呈现出一致的变化趋势。土壤16S r RNA基因拷贝数和PGPB所占比例随接菌后时间的延长而逐渐降低。分子生态网络分析结果表明,CK与不同接菌处理下的细菌群落共现网络均呈现出模块化结构。并且,施加PGPB菌株*** strain S2-3、*** strain S6-1和*** UW4与不接菌对照组及施加非PGPB菌株Pseudomonas fluorescens 17400的处理组相比,土壤细菌网络中主要模块间的连接度增加,作为连接者的物种数量菌增多。综上所述,分离得到土著菌株*** strain S2-3和*** strain S6-1是其中综合表现最好的PGPB,同时其他菌株也具有良好的植物促生特性和和各项抗性特征。土著植物促生菌*** strain S2-3和*** strain S6-1在原位土壤中表现出一定的促进高粱生长和重金属修复的效果,可以作为候选的植物促生菌运用到植物修复实践中。施加PGPB的措施没有显著的影响土壤理化环境、细菌群落结构和功能,由此说明,PGPB的施加并未对土壤产生不良的生态风险。分子生态网络分析表明,具有良好植物促生特性的PGPB促进了细菌群落的物种间相互作用,增加了细菌群落主要物种间的相互作用并使得物种间联系更加紧密,有利于增强整体微生物群落的代谢功能和稳定性。本研究首次从江西省鄱阳湖-乐安河流域段重金属污染农田土壤中分离筛选得到一批具有多重重金属及其他抗性特征的土著PGPB,为利用植物-微生物修复技术修复重金属污染土壤的实际应用提供一批宝贵的土著微生物资源。从土壤理化性质、重金属含量变化以及微生物群落结构、功能和物种间相互作用等多层面探究施加PGPB对土壤土著微生物群落的影响及其生态效应,为利用PGPB强化植物修复重金属污染土壤的实际应用潜力提供更加全面的科学依据。

关键词：重金属污染植物修复 PGPB 生态效应微生物群落

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

呼叫中心一站式服务能力管控工具设计及应用

科技尚品 2016年第9期 154-156页

作者：吴子君中国移动通信集团南方基地客户服务中心

目的——设计呼叫中心一站式服务能力管控工具包,分析生产人员考核指标数据,从而细化分析颗粒度,提高分析数据准确性科学性,节省分析人员大量重复分析工作,达到管理工作准确且高效的效果.方法——以excel为技术载体,针对人员服务效能、... 详细信息

目的——设计呼叫中心一站式服务能力管控工具包,分析生产人员考核指标数据,从而细化分析颗粒度,提高分析数据准确性科学性,节省分析人员大量重复分析工作,达到管理工作准确且高效的效果.方法——以excel为技术载体,针对人员服务效能、质量数据从整体到个体,从'发现问题、找出弱点、分析弱点、效果跟踪'层层解剖分析,达到一站式数据分析管理效果,同时引入可视化交互功能,帮助管理者定位效能质量问题点,从而精准制定管理提升策略.结论——通过实际应用,方便一线数据管理工作,帮助管理人员定位多项人员和业务问题.

关键词：分群管理一站式集中化可视化动态图表

半夏白术天麻汤辅助治疗原发性高血压的效果及对血清Hcy、CysC和UA水平的影响

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

慢性病学杂志 2019年第7期19卷 1104-1106页

作者：吴子君深圳市宝安区中医院心血管病科

目的探讨半夏白术天麻汤辅助西药治疗原发性高血压的效果及对血清中同型半胱氨酸(Hcy)、胱抑素-C(CysC)及尿酸(UA)水平的影响。方法选取深圳市宝安区中医院2017年1月—2018年5月收治的60例原发性高血压患者,按照随机数字法分为研究组和... 详细信息

目的探讨半夏白术天麻汤辅助西药治疗原发性高血压的效果及对血清中同型半胱氨酸(Hcy)、胱抑素-C(CysC)及尿酸(UA)水平的影响。方法选取深圳市宝安区中医院2017年1月—2018年5月收治的60例原发性高血压患者,按照随机数字法分为研究组和对照组,每组30例。其中对照组予以苯磺酸氨氯地平治疗,研究组予以半夏白术天麻汤辅助苯磺酸氨氯地平治疗,两组患者均治疗4周。比较两组患者治疗前后血压值、眩晕头重、胸闷恶心、纳呆痰多、神疲乏力等中医症状积分、血清UA、Hcy及CysC水平。结果两组患者治疗前舒张压、收缩压比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组舒张压、收缩压均较治疗前显著降低,且研究组低于对照组(P0.05),治疗后均较治疗前显著降低,且研究组低于对照组(P0.05),治疗后两组血清UA、Hcy及CysC水平均较治疗前显著降低,且研究组低于对照组(P<0.05)。结论半夏白术天麻汤辅助西药治疗原发性高血压可显著改善患者临床症状,控制血压水平,降低血清UA、Hcy及CysC水平。

关键词：原发性高血压半夏白术天麻汤同型半胱氨酸胱抑素C 尿酸