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玉米大豆间作对玉米产量及节肢动物群落的影响

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应用昆虫学报 2024年第2期 429-441页

作者：张曼刘全俊汤永玉梁晨陈斌杜广祖吴国星高熹云南农业大学植物保护学院

【目的】明确玉米大豆间作对田间节肢动物群落及玉米产量的影响，以期为云南部分地区玉米大豆间作田间害虫综合治理体系的构建提供参考依据。【方法】采用目测法、扫网法、挖穴法及黄板诱集法分别调查记录2019和2020年间玉米大豆间作田... 详细信息

【目的】明确玉米大豆间作对田间节肢动物群落及玉米产量的影响，以期为云南部分地区玉米大豆间作田间害虫综合治理体系的构建提供参考依据。【方法】采用目测法、扫网法、挖穴法及黄板诱集法分别调查记录2019和2020年间玉米大豆间作田节肢动物的种类和数量，利用群落特征指数、稳定性分析及主要害虫和天敌发生量和时间生态位对节肢动物群落进行分析，并对玉米产量进行测定。【结果】2019年玉米大豆间作田共调查到害虫41种，天敌39种，玉米单作田共调查到害虫25种，天敌28种。2020年玉米大豆间作田共调查到害虫40种，天敌30种，玉米单作田共调查到害虫32种，天敌25种。与玉米单作田相比，玉米大豆间作田节肢动物群落的总物种数、多样性指数、丰富度指数、均匀度指数、Ss/Si值、S_n/Sp值、N_n/Np值、Nd/Np均较大，优势度指数、优势度集中性指数和Sd/Sp值均较小；玉米蚜Rhopalosiphum maidis、小绿叶蝉Empoasca flavescens和草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda是优势害虫，瓢虫类、食蚜蝇类、蚜茧蜂类、蜘蛛类是优势天敌。瓢虫类与食蚜蝇类、瓢虫类与玉米蚜、食蚜蝇类与玉米蚜的时间生态位重叠值均较大；2020年食蚜蝇类与草地贪夜蛾的生态位重叠值较大。与玉米单作田相比，2019年玉米大豆间作模式使玉米增产15.12%,2020年玉米大豆间作模式使玉米增产13.56%。【结论】玉米大豆间作模式可提高田间节肢动物群落多样性及稳定性，提高天敌的物种数，并能在一定程度上降低玉米田主要害虫玉米蚜、草地贪夜蛾的发生量并提高单位面积玉米产量。

关键词：节肢动物玉米大豆间作群落结构特征指数时间生态位玉米产量

叉角厉蝽丝氨酸蛋白酶及抑制剂基因的克隆与表达分析

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环境昆虫学报 2024年第3期46卷 659-669页

作者：张曼高平陈晓梁晨汤永玉秦得强吴国星高熹云南农业大学植物保护学院昆明650201

为明确叉角厉蝽Eocanthecona furcellata(Wolff)丝氨酸蛋白酶基因EfSP1及抑制剂基因EfSPI20的基因序列特征和时空转录特征,为其生理功能研究奠定基础。利用PCR克隆技术获得叉角厉蝽唾液腺EfSPI20和EfSP1的完整开放阅读框(Open reading f... 详细信息

为明确叉角厉蝽Eocanthecona furcellata(Wolff)丝氨酸蛋白酶基因EfSP1及抑制剂基因EfSPI20的基因序列特征和时空转录特征,为其生理功能研究奠定基础。利用PCR克隆技术获得叉角厉蝽唾液腺EfSPI20和EfSP1的完整开放阅读框(Open reading frame,ORF)序列,使用生物信息学软件进行序列分析以及系统进化分析,采用实时荧光定量PCR(Real time quantitativate PCR,RT-qPCR)分析两个基因分别在叉角厉蝽不同发育时期和组织中的表达特征。结果表明,EfSPI20与EfSP1基因完整开放阅读框长度分别为378 bp和921 bp,分别编码125个氨基酸和306个氨基酸,预测均为亲水蛋白质,理论分子量分别为13.48 kDa和33.82 kDa,等电点分别为6.68和5.80,分别有30个和23个氨基酸残基的信号肽序列,EfSPI20有跨膜结构域,EfSP1无跨膜结构域。序列比对显示叉角厉蝽EfSPI20与茶翅蝽Halyomorpha halys PPI同源性最高,氨基酸序列一致性达58%;EfSP1与稻绿蝽Nezara viridula SP同源性最高,氨基酸序列一致性达66%;系统发育树显示叉角厉蝽与同为蝽科的茶翅蝽和稻绿蝽物种亲缘关系近。EfSPI20基因在雌雄成虫和唾液腺中高表达,推测EfSPI20可能具有抑制胰蛋白酶活性的功能和与叉角厉蝽的捕食消化相关;EfSP1基因在卵期、卵巢和肠道中高表达,推测EfSP1可能与叉角厉蝽的生殖功能和蛋白消化相关。

关键词：叉角厉蝽丝氨酸蛋白酶丝氨酸蛋白酶抑制剂表达特征

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咖啡炭疽病菌致病性测定及其拮抗菌筛选

热带作物学报 2024年第5期45卷 983-991页

作者：施春兰秦得强秦小萍刘全俊何明川高熹唐萍吴国星云南农业大学植物保护学院云南昆明650201

炭疽病是咖啡的一种常见病害,对咖啡果实的产量和质量造成严重损失,开展引起咖啡炭疽病的病原菌致病性及其生物学特性研究,并筛选有效的拮抗菌,将为咖啡炭疽病的生物防治提供参考依据。对实验室分离并保存的4株咖啡炭疽病病原Wyq1(Colle... 详细信息

炭疽病是咖啡的一种常见病害,对咖啡果实的产量和质量造成严重损失,开展引起咖啡炭疽病的病原菌致病性及其生物学特性研究,并筛选有效的拮抗菌,将为咖啡炭疽病的生物防治提供参考依据。对实验室分离并保存的4株咖啡炭疽病病原Wyq1(Colletotrichum siamense)、Yyq1(C. fructicola)、Xbd1(C. gloeosporioides)、Hb1(C.theobromicola)孢子悬浮液进行致病性测定,并选择致病力最强的菌株进行后续试验;通过平板培养法测定病原菌的生物学特性,采用平板对峙法对病原菌进行拮抗菌筛选。致病性测定结果显示,4株菌株均可侵染健康咖啡叶片,且在4株病原菌中菌株Xbd1的致病力最强;对菌株Xbd1的生物学特性测定结果表明,营养生长最适培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA),最适氮源为胰蛋白胨,最适碳源为葡萄糖,最适温度为28℃,最适pH为7,不同光照对其营养生长的差异不显著。室内拮抗菌筛选中有5株拮抗效果较好,分别是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)MC4-2、特基拉芽孢杆菌(B. tequilensis)D5-8、贝莱斯芽孢杆菌(B. velezensis)MC2-1、弯曲芽孢杆菌(B. flexus)ZLSY3和解淀粉芽孢杆菌(B. amyloliticus)GJ7,其中拮抗效果最好的是枯草芽孢杆菌MC4-2,抑制率达57.8%。通过咖啡炭疽病病原菌致病性测定及其拮抗菌筛选,明确了该病原菌的致病性,筛选得到的5株拮抗菌的拮抗效果均较好,为炭疽病的防治及其生防菌剂的开发奠定基础。

关键词：咖啡炭疽病致病性生物学特性拮抗菌筛选

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球孢白僵菌和爪哇虫草菌对烟草青枯病的防效研究

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微生物学通报 2024年

作者：施春兰吴国星赵长飞杨燕通万丽娜田永明刘正玲谢永辉詹莜国顾小飞云南农业大学植物保护学院云南省烟草公司昆明市公司

【背景】烟草青枯病是青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的土传病害，给烟草生产带来了巨大损失。【目的】探究实验室2株生防菌株球孢白僵菌(Beauveria bassiana) HZXJ、爪哇虫草(Cordyceps javanica) Bd01对青枯劳尔氏菌(R. so... 详细信息

【背景】烟草青枯病是青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的土传病害，给烟草生产带来了巨大损失。【目的】探究实验室2株生防菌株球孢白僵菌(Beauveria bassiana) HZXJ、爪哇虫草(Cordyceps javanica) Bd01对青枯劳尔氏菌(R. solanacearum，简称青枯菌)的抑制作用及防效。【方法】采用平板对峙、载体带毒以及生长曲线法测定2株生防菌株及其发酵液对青枯菌生长的抑制作用；通过室内盆栽试验及大田实验测定HZXJ与Bd01菌株1×108孢子/mL悬浮液对烟草青枯病的防治效果。【结果】平板对峙试验发现，HZXJ与Bd01菌株发酵液在10 d时对青枯劳尔氏菌的抑制率分别为51.28%和47.59%。HZXJ与Bd01的灭菌发酵上清液对青枯劳尔氏菌10 d时的平板抑制率分别为77.26%和44.86%，生防菌与病原菌OD600绘制的生长曲线亦表明HZXJ与Bd01的无菌发酵上清液对青枯劳尔氏菌均有抑制作用。盆栽实验结果表明，HZXJ与Bd01菌株1×108孢子/mL悬浮液处理后15 d对烟草青枯病防效分别为43.33%和19.99%，52%氯尿硫酸铜可溶性粉剂800倍液的防效为39.99%；HZXJ与Bd01处理后30 d对烟草青枯病的防效分别为43.34%和21.86%，52%氯尿硫酸铜可溶性粉剂800倍液的防效为46.90%。大田试验结果表明，HZXJ与Bd01菌株1×108孢子/mL悬浮液处理后15 d对烟草青枯病的防效分别为80%和35%，52%氯尿硫酸铜可溶性粉剂800倍液的防效为40%；HZXJ与Bd01处理后30 d对烟草青枯病的防效分别为52.63%和63.16%，52%氯尿硫酸铜800倍液的防效为53.98%。【结论】菌株HZXJ和菌株Bd01对青枯劳尔氏菌有显著抑制效果。结合盆栽和大田试验可以证明菌株HZXJ和菌株Bd01有作为烟草青枯病生防菌的潜力。

关键词：烟草青枯病青枯劳尔氏菌球孢白僵菌爪哇虫草防效

叉角厉蝽毒液丝氨酸蛋白酶基因EfSP2克隆、表达及捕食功能分析

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南方农业学报 2024年第2期55卷 489-498页

作者：张曼刘炳顺陈晓岳茂婷朱国渊田永明宁婧怡秦得强吴国星高熹云南农业大学植物保护学院云南昆明650201 禄丰市农业技术推广中心云南楚雄651200

【目的】通过对叉角厉蝽[Eocanthecona furcellata(Wolff)]毒液丝氨酸蛋白酶(Serine protease,SP)基因EfSP2的克隆、序列分析、表达谱分析及RNA干扰(RNAinterference,RNAi),解析EfSP2蛋白的功能,为EfSP2基因的分子特征研究及功能注释提供科学依据。【方法】从叉角厉蝽唾液腺转录组中获得EfSP2基因序列,利用PCR技术扩增EfSP2基因完整开放阅读框(Open reading frame,ORF)序列,对其进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR方法分析EfSP2基因在叉角厉蝽不同发育阶段(卵、1~5龄若虫和雌雄成虫)唾液腺及雌成虫不同组织(马氏管、唾液腺、脂肪体、卵巢、中肠、头)中的表达情况;通过RNAi技术检测其对叉角厉蝽雌雄成虫存活及捕食的影响。【结果】克隆获得EfSP2基因ORF序列长861 bp,编码286个氨基酸;EfSP2氨基酸序列中具有1个完整的Tryp-SPc结构域,含有胰蛋白酶N末端保守的起始氨基酸序列(IVGG);含有保守的SP三联体催化活性中心,属于丝氨酸蛋白酶家族的类胰蛋白酶亚家族;与稻绿蝽(Nezara viridula)SP同源性最高,氨基酸序列一致性为44.69%。EfSP2基因在叉角厉蝽雌雄成虫和唾液腺中有极高的表达量。注射dsEfSP2能显著抑制靶标基因的表达(P<0.05,下同),且显著降低叉角厉蝽雌雄成虫的存活率和捕食量。【结论】成功克隆了叉角厉蝽毒液丝氨酸蛋白酶EfSP2基因。时空表达谱及RNAi结果表明,EfSP2可能是叉角厉蝽生长发育、捕食和消化过程中的重要蛋白之一。

关键词：叉角厉蝽唾液腺丝氨酸蛋白酶基因克隆表达模式 RNA干扰

叉角厉蝽不同发育阶段肠道细菌群落组成、多样性及功能预测

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南方农业学报 2024年第1期55卷 13-23页

作者：朱国渊刘炳顺张曼施春兰汤永玉兰明先吴国星次那有若高熹云南农业大学植物保护学院云南昆明650201 云南省热带作物科学研究所云南景洪666100 云南省禄丰市农业技术推广中心云南楚雄651200

【目的】分析天敌昆虫叉角厉蝽[Eocanthecona furcellata(Wolff)]不同发育阶段肠道细菌群落组成及多样性,并预测其功能,为深入了解肠道细菌对叉角厉蝽生长发育和营养获取方式的影响及开发新的害虫生物防治策略提供理论依据。【方法】选... 详细信息

【目的】分析天敌昆虫叉角厉蝽[Eocanthecona furcellata(Wolff)]不同发育阶段肠道细菌群落组成及多样性,并预测其功能,为深入了解肠道细菌对叉角厉蝽生长发育和营养获取方式的影响及开发新的害虫生物防治策略提供理论依据。【方法】选取叉角厉蝽1龄、2龄、5龄若虫和7日龄雌、雄成虫,分别提取其肠道细菌基因组DNA。利用单分子实时测序技术对肠道细菌16S rRNA序列全长进行测序,统计操作分类单元(OTU)数量,分析肠道细菌群落组成结构与多样性,并采用PICRUSt预测肠道细菌功能。【结果】从叉角厉蝽15个肠道样品中共得到202401条有效序列,聚类为222个OTUs,其中共有OTUs为5个。共注释到19门32纲62目103科154属188种细菌,优势门、纲、目、科、属、种分别为变形菌门(Proteobacteria,72.22%)、γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria,72.21%)、肠杆菌目(Enterobacterales,72.11%)、肠杆菌科(Enterobacteriaceae,49.39%)、西地西菌属(Cedecea,49.24%)和奈氏西地西菌(C.neteri,49.24%)。多样性和差异分析结果显示,肠道细菌菌群组成在叉角厉蝽不同发育阶段存在显著差异(P0.05),且不同发育阶段肠道的优势菌群在科、属、种3级分类阶元水平上亦不同。KEGG代谢途径分析发现,叉角厉蝽不同发育阶段肠道菌群的功能相似,主要涉及新陈代谢(74.17%~75.59%)和环境信息处理(10.53%~11.03%),二级代谢功能通路主要为全局和概述图谱、糖类代谢和氨基酸代谢等。【结论】叉角厉蝽不同发育阶段肠道细菌群落组成和多样性存在显著差异,优势菌分布呈动态变化。

关键词：叉角厉蝽肠道微生物细菌多样性单分子实时测序

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浅析“学讲”方式下的初中语文课外阅读辅导

中学课程辅导 2022年第19期 108-110页

作者：吴国星山东省淄博市张店建桥实验学校

教育现代化的不断发展、课程改革的不断创新，给初中语文课外阅读带来机遇的同时也带来了挑战。传统的阅读辅导方式已不能够满足如今学生的需求，“学讲”方式下的初中语文课外阅读辅导，充分发挥了教师的引导作用，调动了学生的主观能... 详细信息

教育现代化的不断发展、课程改革的不断创新，给初中语文课外阅读带来机遇的同时也带来了挑战。传统的阅读辅导方式已不能够满足如今学生的需求，“学讲”方式下的初中语文课外阅读辅导，充分发挥了教师的引导作用，调动了学生的主观能动性，实现了高效课堂的构建。

关键词： “学讲”方式初中语文课外辅导

不同辣木种质资源对辣木瑙螟生长发育和繁殖的影响

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植物保护 2023年第4期49卷 171-177页

作者：桂华敏方雪峰张祖兵高熹吴国星云南省热带作物科学研究所景洪666100 云南农业大学植物保护学院昆明650201 云南农业大学机电工程学院昆明650201

为明确辣木瑙螟Noorda blitealis对不同辣木资源的为害情况,本研究在温度(28±1)℃,相对湿度(75±10)%,光周期L∥D=14 h∥10 h的条件下,通过辣木瑙螟在6种辣木资源(‘中古2号’、北方辣木、狭瓣辣木、‘中古1号’‘PKM1’、多油辣木)上... 详细信息

为明确辣木瑙螟Noorda blitealis对不同辣木资源的为害情况,本研究在温度(28±1)℃,相对湿度(75±10)%,光周期L∥D=14 h∥10 h的条件下,通过辣木瑙螟在6种辣木资源(‘中古2号’、北方辣木、狭瓣辣木、‘中古1号’‘PKM1’、多油辣木)上的生长发育情况,建立种群生命表,评价其在6种辣木资源上的生存适合度。结果表明,取食6种辣木资源的辣木瑙螟均能完成世代发育,其中取食多油辣木时平均世代周期最短,为24.8 d,取食其余资源的辣木瑙螟平均世代周期为26.3~27.0 d;取食多油辣木的辣木瑙螟净增长率最高,为97.24,其次是取食‘PKM1’,为50.25,取食北方辣木时净增长率最低,为42.55;取食6种辣木资源的辣木瑙螟周限增长率都大于1,表明种群数量呈几何级数增长,其中取食多油辣木时内禀增长率和周限增长率均最高。从幼虫发育历期、预蛹期、蛹期、产卵前期、产卵期、单雌产卵量、蛹重、性比等数据综合来看,辣木瑙螟在多油辣木上具有更高的生存适合度。

关键词：辣木种质资源辣木瑙螟生命表生长发育

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车厢内烧炭自杀并违章驾车的定性

中国检察官 2023年第6期 72-75页

作者：张莲凤吴国星上海市人民检察院第二分院第一检察部 200070

一、基本案情2019年,被告人李某某因债台高筑而欲轻生,通过网络查询决定以烧炭方式自杀,并购买了助燃炭、铁盆等工具。某日21时许,李某某在其停放于所居住小区的小型汽车内,用胶带将车辆门窗密封以隔绝空气,并通过持续燃烧炭盆内助燃炭... 详细信息

一、基本案情2019年,被告人李某某因债台高筑而欲轻生,通过网络查询决定以烧炭方式自杀,并购买了助燃炭、铁盆等工具。某日21时许,李某某在其停放于所居住小区的小型汽车内,用胶带将车辆门窗密封以隔绝空气,并通过持续燃烧炭盆内助燃炭的方式,在密闭车厢内实施自杀。后为躲避他人注意,李某某驾驶该车辆驶出小区,在周边公共道路兜转。

关键词：小型汽车公共道路居住小区网络查询持续燃烧自杀