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梨园气溶胶中梨火疫病菌的定量检测

植物保护 2023年第6期49卷 32-39页

作者：荆珺王杰花韩丽丽陈卫民吴品珊雷荣伊犁职业技术学院伊宁835000 伊犁州农业科学研究所伊宁835000 中国检验检疫科学研究院北京100123

为系统研究梨园气溶胶中梨火疫病菌的含量,本研究于2019年-2021年在新疆库尔勒市人和农场梨园,利用病原菌孢子捕捉器在每年春季(4月下旬)、夏季(6月中旬)、秋季(9月中旬)收集梨园气溶胶,检测梨火疫病菌。结果显示,健康梨园气溶胶中未检... 详细信息

为系统研究梨园气溶胶中梨火疫病菌的含量,本研究于2019年-2021年在新疆库尔勒市人和农场梨园,利用病原菌孢子捕捉器在每年春季(4月下旬)、夏季(6月中旬)、秋季(9月中旬)收集梨园气溶胶,检测梨火疫病菌。结果显示,健康梨园气溶胶中未检测到梨火疫病菌,不同发病程度的梨园气溶胶中均能检测到梨火疫病菌,携菌量均值在102 cfu/(24cm^(2)·h)以上,其中,气溶胶中梨火疫病菌含量最高值为2.81×10^(4) cfu/(24cm^(2)·h),最低值为8.50×10^(2) cfu/(24cm^(2)·h);重度、中度、轻度发病果园收集的气溶胶中含梨火疫病菌总菌落数均值分别为8.74×10^(3)、4.55×10^(3)、2.36×10^(3) cfu/(24cm^(2)·h)。此外,在同一高度收集的气溶胶中,梨火疫病菌菌落数随收集时间的延长而增加。不同季节气溶胶携菌量检测结果表明,秋季发病梨园中气溶胶携菌量明显高于夏季和春季,与梨园梨火疫病发病规律相符。致病性测定结果表明,气溶胶中分离的梨火疫病菌具有致病性。

关键词：梨园气溶胶梨火疫病菌定量检测

新疆野苹果种质资源对梨火疫病菌的抗性鉴定评价

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经济林研究 2024年 145-157页

作者：曹雅芝李克梅刁永强陈卫民张学超吴品珊 1.新疆农业大学农学院 2.新疆农业大学农业农村部西北荒漠绿洲农林外来入侵生物防控重点实验室 3.新疆伊犁森林生态系统国家定位观测研究站 4.新疆伊犁职业技术学院伊犁州外来入侵有害生物监测与防控重点实验室 5.伊犁哈萨克自治州农业科学研究所 6.中国检验检疫科学研究院新疆农业大学农学院新疆农业大学农业农村部西北荒漠绿洲农林外来入侵生物防控重点实验室新疆伊犁森林生态系统国家定位观测研究站新疆伊犁职业技术学院伊犁州外来入侵有害生物监测与防控重点实验室伊犁哈萨克自治州农业科学研究所中国检验检疫科学研究院

【目的】新疆野苹果又称塞威氏苹果，是重要的第三纪孑遗物种和国家二级重点保护野生植物，也是栽培苹果的直系祖先。梨火疫病是2015年6月在新疆伊犁霍城县苹果园苹果树上首次发生的外来入侵检疫性有害生物，8年来危害新疆香梨、苹果产... 详细信息

【目的】新疆野苹果又称塞威氏苹果，是重要的第三纪孑遗物种和国家二级重点保护野生植物，也是栽培苹果的直系祖先。梨火疫病是2015年6月在新疆伊犁霍城县苹果园苹果树上首次发生的外来入侵检疫性有害生物，8年来危害新疆香梨、苹果产业已造成损失，并对新疆乃至全国的林果产业构成了巨大威胁。有报道认为利用抗病品种防治是最经济和有效的方法。通过鉴定评价新疆野苹果抗梨火疫病菌的种质资源，为抗病苹果种质资源的选育提供理论依据。【方法】以国家果树种质新疆野苹果资源圃中塔城野果林的额敏和托里两个自然居群80份新疆野苹果不同类型为试材，采用室内离体叶片和离体枝条接种方法，鉴定评价80份新疆野苹果不同类型对梨火疫病菌的抗性。【结果】梨火疫病菌对80份新疆野苹果不同类型的枝条、叶片均有致病力，离体叶片和离体枝条接种结果存在一定差异，离体叶片接种的抗性资源多于离体枝条接种。抗病的新疆野苹果种质资源来自额敏自然居群较多，托里自然居群较少。80份新疆野苹果不同类型对梨火疫病菌的抗性水平差异性显著，说明塔城野果林80份新疆野苹果不同类型中高抗、抗病种质资源较多，占56.25%；而高感和感病的种质资源较少，占43.75%。【结论】筛选出高抗新疆野苹果种质资源1份，抗病种质资源8份，感病资源6份，高感资源1份。9份新疆野苹果种质资源可作为鲜食或抗病砧木选育的基础材料。

关键词：新疆野苹果种质资源 Erwinia amylovora 接种抗性评价

苜蓿轮枝菌RPA/CRISPR-Cas12a快速检测方法的建立

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菌物学报 2023年

作者：李茗乐雷荣杨藜孙夕雯杨益芬王新一范在丰段维军吴品珊中国农业大学植物保护学院-农业农村部植物检疫性有害生物监测防控重点实验室中国检验检疫科学研究院大连大学宁波检验检疫科学技术研究院成都海关技术中心

苜蓿轮枝菌Verticillium alfalfae是我国重要的进境植物检疫对象，能够对十几种作物造成严重危害。为了快速检测苜蓿轮枝菌，本研究选用苜蓿轮枝菌的特征序列扩增区域（sequence characterized amplified region（SCAR）marker）作为目... 详细信息

苜蓿轮枝菌Verticillium alfalfae是我国重要的进境植物检疫对象，能够对十几种作物造成严重危害。为了快速检测苜蓿轮枝菌，本研究选用苜蓿轮枝菌的特征序列扩增区域（sequence characterized amplified region（SCAR）marker）作为目标基因，设计了特异性引物Va-RPA-F/Va-RPA-R和CRISPR 引导RNA （Va-crRNA），建立了重组酶聚合酶等温扩增技术结合CRISPR-Cas12a的快速检测方法。对该检测体系的反应时间、组分浓度等进行优化，结果显示苜蓿轮枝菌基因组DNA在39℃恒温条件下扩增30 min后，其扩增产物用基于CRISPR-Cas12a的荧光法和侧向流层析试纸条两种方法检测，可检测到10.6 pg 基因组DNA，其灵敏度与实时荧光定量PCR结果相当，加标回收实验结果证明本研究建立的方法可成功用于植物组织中苜蓿轮枝菌的快速检测。

关键词：苜蓿轮枝菌重组酶聚合酶等温扩增 CRISPR-Cas12a检测系统快速检测

玉米霜霉病对我国农业生产的潜在威胁及检疫对策

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植物检疫 1994年第3期8卷 129-134页

作者：王圆吴品珊农业部植物检疫实验所

在玉米霜霉菌（Ｐｅｒｏｎｏｓｃｌｅｒｏｓｐｏｒａｓｐｐ．）中，Ｐ．ｓｏｒｇｈｉ可随高粱种子（尤其是带颖壳的），Ｐ．ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅｎｓｉｓ与Ｐ．ｓａｃｃｈａｒｉ可随甘蔗插条远距离传播。初步分析我国各地发病可能性为... 详细信息

在玉米霜霉菌（Ｐｅｒｏｎｏｓｃｌｅｒｏｓｐｏｒａｓｐｐ．）中，Ｐ．ｓｏｒｇｈｉ可随高粱种子（尤其是带颖壳的），Ｐ．ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅｎｓｉｓ与Ｐ．ｓａｃｃｈａｒｉ可随甘蔗插条远距离传播。初步分析我国各地发病可能性为：黄淮平原零星发生，长江以南湿热地区发生可能性大，热带亚热带地区适于发病。应有针对性实施检疫，防止国内病菌蔓延及国外病菌传入，注意选育抗病品种。

关键词：玉米霜霉病种苗传病检疫

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值得关注的大豆新病害

植物检疫 2003年第4期17卷 226-228页

作者：吴品珊严进国家质检总局动植物检疫所北京100029

大豆病害在世界上报道有上百种,其中大豆疫病菌、菜豆细菌性萎蔫病菌、番茄环斑病毒、烟草环斑病毒等危害大豆的有害生物是我国检疫性有害生物,但近年国外大豆病害的发生情况有了一些变化,一些新兴的、重要的病害引起了广泛的关注.为防... 详细信息

大豆病害在世界上报道有上百种,其中大豆疫病菌、菜豆细菌性萎蔫病菌、番茄环斑病毒、烟草环斑病毒等危害大豆的有害生物是我国检疫性有害生物,但近年国外大豆病害的发生情况有了一些变化,一些新兴的、重要的病害引起了广泛的关注.为防止这些新的危险性有害生物随进口大豆传入我国,避免对国外大豆上病害的了解停留在大豆疫病菌等有害生物上,现着重介绍几个近年在国外发生普遍、经济影响大、中国没有分布、随大豆传入风险高的新的危险性真菌病害,从而对大豆真菌病害有新的认识.

关键词：大豆病害突死综合症茎溃疡病红色基腐病茎褐腐病拟茎点种子腐烂病症状病原

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大豆猝死综合症病菌检测技术研究及风险分析

大豆猝死综合症病菌检测技术研究及风险分析

作者：吴品珊中国农业科学院

学位级别：硕士

大豆猝死综合症（简称SDS）是美国等几个大豆主产国的一种较新的、危害性很大的大豆真菌病害,它分别由两种镰刀菌Fusarium virguliforme和Fusarium tucumaniae引致。SDS是土传病害,病菌可在土壤中存活多年,可随大豆的贸易传入新的地区... 详细信息

大豆猝死综合症（简称SDS）是美国等几个大豆主产国的一种较新的、危害性很大的大豆真菌病害,它分别由两种镰刀菌Fusarium virguliforme和Fusarium tucumaniae引致。SDS是土传病害,病菌可在土壤中存活多年,可随大豆的贸易传入新的地区。中国是美国等SDS疫区大豆的进口大国,为防止大豆猝死综合症病菌随进口大豆传入中国,保护我国的大豆生产,本研究确立了检疫鉴定大豆猝死综合症病菌的检测技术,还确定了该病菌随进口大豆传入中国的风险水平。本研究配制了从土壤中筛选、分离SDS菌的选择性培养基PCNB,它可对SDS菌富集培养,同时抑制其他杂菌的生长;确立了SDS菌的接种方法,明确了大部分中国大豆品种对SDS菌感病;借鉴其他学者设计的两对SDS菌特异性引物Fsg1/Fsg2和FsgEF1/FsgEF2,进行PCR试验,结果否定了这两对引物的特异性;利用Southern杂交技术,将SDS几个不同来源的菌株和近似菌的基因组DNA分别用EcoRⅠ和HindⅢ酶切,与mtDNA探针2u18和4u40杂交,结果显示,在EcoRⅠ酶切的RFLP图谱中,SDS两个菌F.virguliforme,F.tucumaniae和它们的近似种F.phaseoli都独自具有特异性条带。由此确立了,通过选择性培养基分离进口大豆中的土壤,进而以Southern杂交技术鉴定大豆猝死综合症病菌的检测方法。通过风险分析,认为SDS病菌是大豆生产上的毁灭性病害,经济影响大,符合检疫性有害生物的地理和管理标准及经济影响标准,是我国应关注的检疫性有害生物。病菌在中国定殖的可能性大,定殖后扩散的可能性大,随进口大豆进入中国并传播到寄主植物上的可能性大,因此,SDS菌随美国等疫区输华大豆传入中国的风险为高。根据风险评估结果,提出了降低风险的三个管理方案,实施任何一个方案都可降低SDS菌的传入风险。

关键词：大豆猝死综合症检测有害生物风险分析

向日葵黑茎病菌RPA/CRISPR-Cas12a快速检测方法的建立

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植物保护 2022年第6期48卷 69-76,89页

作者：邝瑞瑞雷荣江丽段维军李雪莲符娜范在丰李远吴品珊中国检验检疫科学研究院北京100176 中国农业大学植物保护学院北京100093 重庆医科大学永川附属医院重庆402177 宁波检验检疫科学技术研究院宁波315012 伊犁师范大学伊犁835000

向日葵黑茎病菌是向日葵上的一种毁灭性真菌,是我国的植物检疫性有害生物。为了准确快速检测向日葵黑茎病菌,本研究根据向日葵黑茎病菌及其近似种的ITS序列差异,设计特异性RPA引物和CRISPR-Cas12a crRNA,建立了RPA等温扩增技术结合CRISP... 详细信息

向日葵黑茎病菌是向日葵上的一种毁灭性真菌,是我国的植物检疫性有害生物。为了准确快速检测向日葵黑茎病菌,本研究根据向日葵黑茎病菌及其近似种的ITS序列差异,设计特异性RPA引物和CRISPR-Cas12a crRNA,建立了RPA等温扩增技术结合CRISPR-Cas12a检测的快速检测方法。通过条件优化,RPA/CRISPR-Cas12a检测体系在37℃恒温条件下,RPA反应30 min,CRISPR/Cas12a反应20 min,即可特异性检测向日葵黑茎病菌。荧光法检测灵敏度与实时荧光PCR的灵敏度相当,最低检测量为0.1 pg,试纸条法检测最低检测量为1 pg。由于试纸条检测结果可用肉眼观察,快速便携,操作简单,更适合用于田间和口岸的向日葵黑茎病菌快速早期检测;而荧光检测灵敏度高,对环境要求高,更适合用于实验室检测。

关键词：向日葵黑茎病菌 RPA CRISPR-Cas12a 荧光检测侧向流层析试纸条

分子生物学技术在腥黑粉菌种间分类鉴定的应用

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植物检疫 2004年第6期18卷 355-359页

作者：高强吴品珊戴良英朱水芳湖南农业大学长沙410128 中国检科院动植物检疫研究所

真菌是一类种群数目庞大的微生物,传统分类鉴定主要依据形态学.但是有些真菌形态极为相似,传统的形态学特征有时难以区分,这给真菌的鉴定和分类带来了困难.随着分子生物学的发展,利用分子生物学技术探索出的分类鉴定方法,用以辅助形态... 详细信息

真菌是一类种群数目庞大的微生物,传统分类鉴定主要依据形态学.但是有些真菌形态极为相似,传统的形态学特征有时难以区分,这给真菌的鉴定和分类带来了困难.随着分子生物学的发展,利用分子生物学技术探索出的分类鉴定方法,用以辅助形态学鉴定,使形态学鉴定更加准确和完整.

关键词：形态学鉴定黑粉菌分类鉴定菌种分子生物学技术真菌种群辅助形态学特征微生物

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小麦矮腥黑穗菌辐照灭活试验研究初报

植物检疫 1991年第6期5卷 412-413页

作者：王圆吴品珊农业部植物检疫实验所

应用钴60—γ,射线杀灭小麦矮腥冬孢子,防止病菌随进口粮传入,危害我国小麦生产。本试验对灭菌剂量进行筛选,表明60万拉德可杀死孢子,阻止病菌传入。小麦矮腥黑穗病为我国进口植物检疫对象,进口的小麦原粮常带有矮腥冬孢子,须进行检疫... 详细信息

应用钴60—γ,射线杀灭小麦矮腥冬孢子,防止病菌随进口粮传入,危害我国小麦生产。本试验对灭菌剂量进行筛选,表明60万拉德可杀死孢子,阻止病菌传入。小麦矮腥黑穗病为我国进口植物检疫对象,进口的小麦原粮常带有矮腥冬孢子,须进行检疫处理。曾采用干热。

关键词：小麦矮腥黑穗菌辐射检疫