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我国跨境贸易人民币结算发展历程与思考

武汉金融 2012年第8期 49-51页

作者：吴克良中国人民银行荆州市中心支行湖北荆州434000

跨境贸易人民币结算试点正式启动三年多来,业务量呈暴发式增长势头,初步显现出跨境贸易结算对人民币国际化的巨大推动作用,但总体规模较小,具有巨大的发展空间。本文通过分析自2009年启动试点以来的相关情况,认为制约人民结算发展的主... 详细信息

跨境贸易人民币结算试点正式启动三年多来,业务量呈暴发式增长势头,初步显现出跨境贸易结算对人民币国际化的巨大推动作用,但总体规模较小,具有巨大的发展空间。本文通过分析自2009年启动试点以来的相关情况,认为制约人民结算发展的主要因素在于人民币国际化程度不高、外贸产业竞争力不强、缺乏人民币结算正面引导机制和人民币流出渠道等,必须在这些方面采取有效措施,以扩大结算额,提升人民币的国际货币竞争力。

关键词：跨境贸易人民币结算历程思考

淋巴细胞核移植重构胚的构建及其CD分子表达的初步研究

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淋巴细胞核移植重构胚的构建及其CD分子表达的初步研究

作者：吴克良山东大学

学位级别：硕士

在哺乳动物核移植研究中按照核供体细胞来源的不同可以分为两类：以胚胎卵裂球为核供体的胚胎细胞核移植和以各种体细胞为核供体的体细胞核移植。小鼠作为重要的试验模式动物在核移植研究中起着不可替代的作用。目前对于小鼠卵的显微操... 详细信息

在哺乳动物核移植研究中按照核供体细胞来源的不同可以分为两类：以胚胎卵裂球为核供体的胚胎细胞核移植和以各种体细胞为核供体的体细胞核移植。小鼠作为重要的试验模式动物在核移植研究中起着不可替代的作用。目前对于小鼠卵的显微操作方面也有许多，但大部分方法的实施需要借助于特殊的装置(如Piezoimpact装置、Spindle-View偏振光系统)或对卵的后期发育有明显副作用。为了能够找出一种既容易操作，又不需要特殊设备的核移植方法，本论文对以前的核移植方法进行了改进并用来构建重构胚。即首先以预先吸有细胞核或细胞的注射针在固定于持卵针上的卵母细胞透明带上穿刺两个孔，然后一边缓慢的将注射针回拔至卵周隙中，一边逐渐增加持卵针中的负压，直至极体与目标核质被完整的吸入持卵针中而完成去核，最后在不拔出注射针的情况下直接注射细胞核或完整细胞进而完成重构胚的构建。通过对重构胚去核效率和成活率的分析统计表明，用此方法可以在只有倒置显微镜和显微操作仪的条件下一次性快速的完成去核和注核，大大提高了细胞核移植的效率和重构胚成活率;更重要的是该方法操作简单，可以很快被新手掌握，易于在实际工作中推广应用。本论文还利用淋巴细胞作为供核细胞构建重构胚，在重构胚发育的特定时间段对供体细胞核在重构胚中所处的状态进行观察，并用CD分子单克隆抗体对重构胚表面CD分子以及供体细胞CD分子残留进行检测。结果表明移核重组淋巴细胞其基因组再程序化过程短于24小时，期间如果不能实现基因组的再程序化可造成重组细胞的死亡;在重组淋巴细胞基因组再程序化过程中，仍有淋巴细胞特定分化抗原的表达，但在其后的细胞分裂过程中此类抗原的基因表达被关闭。提示基因组在卵母细胞质特定成分的作用下启动再程序化的过程中存有基因转换表达的递进程序。当细胞核的生理时钟重新调回到它的胚胎初始状态时，即以特定的时空表达程序向胚胎发育的方向进行程序化表达。该论文为进一步研究供核细胞基因组再程序化的分子机制提供了必要的技术和初步理论平台，将有助于阐明核一质重组细胞的基因组编程规律及细胞定向分化的分子机制，并在当今生物医学领域中具有重要的实践意义。

关键词：重构胚核移植再程序化去核注核

新型管式冷冻载体在人类胚胎库管理方面的应用

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作者：吴克良

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现代妇产科进展 2017年第9期26卷 695-698页

作者：李城赵海滨李梅马水英张淏禛吴克良山东大学生殖医学研究中心医院国家辅助生殖与优生工程技术研究中心生殖内分泌教育部重点实验室山东省生殖医学重点实验室济南250001

目的:针对现有玻璃化冷冻载体在胚胎库管理方面的不足,探讨新型管式冷冻载体的囊胚冷冻效果及其在人类胚胎库管理方面的应用。方法:选取D5、D6单囊胚玻璃化复苏移植的患者,其中杆式冷冻载体1257例,新型管式冷冻载体564例,比较复苏后的... 详细信息

目的:针对现有玻璃化冷冻载体在胚胎库管理方面的不足,探讨新型管式冷冻载体的囊胚冷冻效果及其在人类胚胎库管理方面的应用。方法:选取D5、D6单囊胚玻璃化复苏移植的患者,其中杆式冷冻载体1257例,新型管式冷冻载体564例,比较复苏后的胚胎存活率及临床妊娠率。结果:杆式冷冻载体与管式冷冻载体存活胚胎率分别为99.05%(1245/1257)、100%(564/564),差异有统计学意义(χ~2=5.4199,P=0.0199),临床妊娠率分别为58.80%(732/1245)、60.28%(340/564),差异无统计学意义(χ~2=0.3562,P=0.5506)。管式冷冻载体相比杆式冷冻载体更节约空间,胚胎定位精确,取放速度更快。结论:与杆式冷冻载体比较,新型管式冷冻载体的临床妊娠率无显著差异,但在空间利用、位置准确性及拿取时间方面存在优势,更适用于实际的临床操作及胚胎库的管理。

关键词：玻璃化冷冻囊胚临床妊娠率空间利用位置准确性胚胎库管理

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激光照射中华大蟾蜍4细胞期胚胎动态观察

应用激光 2006年第3期26卷 201-203,212页

作者：时永香刘洁吴克良张楠白增亮张少军山东大学生命科学学院济南250100 山东大学晶体材料国家重点实验室 250100

应用YAG倍频激光器选择不同能量密度激光微束对中华大蟾蜍4细胞期胚胎进行照射,观察胚胎的生长、发育状况,随时将畸胚挑出单独培养,观察、记录其各时期变化,并跟踪拍照。实验结果表明:激光照射后,畸胚主要出现于鳃盖褶期之前,主要有以... 详细信息

应用YAG倍频激光器选择不同能量密度激光微束对中华大蟾蜍4细胞期胚胎进行照射,观察胚胎的生长、发育状况,随时将畸胚挑出单独培养,观察、记录其各时期变化,并跟踪拍照。实验结果表明:激光照射后,畸胚主要出现于鳃盖褶期之前,主要有以下几类:1)原肠外突,2)腹部畸变,3)头部畸变,4)尾部畸变;畸胚类型与照射激光强度没有相关性;畸胚皆于变态前死亡。

关键词：激光早期胚胎发育畸胚中华大蟾蛉

UVB影响中华大蟾蜍早期胚胎发育的初步研究

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四川动物 2007年第2期26卷 297-301,I0006页

作者：张楠时永香王世芳刘洁吴克良白增亮山东大学生命科学学院济南250000 山东省荣军总医院放射科

为了研究UVB对两栖类动物早期胚胎发育的影响,以中华大蟾蜍为研究对象,用UVB分别以不同强度和不同时间照射其二细胞期胚胎,观察记录胚胎的发育过程、统计死亡率并在形态学上对UVB照射诱导的畸胚进行分析。结果表明,30μW/cm2强度的UVB... 详细信息

为了研究UVB对两栖类动物早期胚胎发育的影响,以中华大蟾蜍为研究对象,用UVB分别以不同强度和不同时间照射其二细胞期胚胎,观察记录胚胎的发育过程、统计死亡率并在形态学上对UVB照射诱导的畸胚进行分析。结果表明,30μW/cm2强度的UVB分别照射二细胞期胚胎20 s、60 s和80μW/cm2强度分别照射20 s、60 s、120 s后,对中华大蟾蜍早期胚胎发育有促进作用,使发育过程中的死亡率降低,畸胚出现的类型较少且畸变程度低;80μW/cm2强度的UVB照射二细胞期胚胎600 s,100μW/cm2强度的UVB照射20 s、60 s、600 s,120μW/cm2强度的UVB照射20 s,导致胚胎发育过程中死亡率明显升高,畸胚数量多且畸变程度高。结论:UVB照射剂量和时间不同,对中华大蟾蜍早期胚胎发育的影响有明显差异。

关键词： UVB 早期胚胎中华大蟾蜍畸胚死亡率

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D3胚胎活产结局的预测模型

现代妇产科进展 2022年第10期31卷 726-730页

作者：张京业王苗苗吴克良山东大学生殖医学研究中心(山东大学附属生殖医院) 济南250012

目的:探讨授精后第三天(D3)胚胎动力学参数与胚胎活产结局的相关性,并建立预测模型用于D3移植胚胎的挑选。方法:利用time-lapse(延时摄像)技术分析来自434例患者的845枚已知活产结局的D3胚胎,找出与胚胎活产最相关的动力学参数,以此为... 详细信息

目的:探讨授精后第三天(D3)胚胎动力学参数与胚胎活产结局的相关性,并建立预测模型用于D3移植胚胎的挑选。方法:利用time-lapse(延时摄像)技术分析来自434例患者的845枚已知活产结局的D3胚胎,找出与胚胎活产最相关的动力学参数,以此为基础结合形态学评分建立预测模型。利用受试者工作特征曲线(ROC)的曲线下面积(AUC)来确定模型的预测价值,五倍交叉验证来检验模型的鲁棒性。最后与两个广泛适用的模型进行预测能力比较。结果:与活产组相比,非活产组胚胎发生直接分裂(DC)的比例显著增高,差异有统计学意义(17.8%vs 4.3%,P=0.000)。胚胎在(t4-tPNf15.13h)范围的活产率,差异有统计学意义(48.8%vs 34.1%,P=0.000)。胚胎在(t8-tPNf31.30h)范围的活产率,差异有统计学意义(52.0%vs 38.3%,P=0.000)。利用t4-tPNf和t8-tPNf结合形态学评分来建立预测模型。所建立模型的ROC曲线下面积为0.664,其鲁棒性得到了五倍交叉验证法的验证。与文献中模型进行比较时,该预测模型的AUC高于Liu模型的0.622和KIDScore模型的0.618。结论:time-lapse技术的动力学参数和常规形态学评分相结合建立的胚胎预测模型,对D3移植胚胎的活产结局有较好的预测作用。

关键词：动力学参数形态学评分预测模型受试者工作特征曲线下面积(AUC)

新的囊胚活检方法——囊胚活检不再纠结和繁琐

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生殖医学杂志 2017年第4期26卷 324-327页

作者：吴克良山东大学附属生殖医院济南250001

囊胚活检目前是进行胚胎植入前遗传学诊断/筛查(PGD/PGS)以及单基因疾病诊断的前提。目前常规使用的提前打孔的囊胚活检方法,会出现囊胚孵出时间不确定、内细胞团处于孵出部位以及囊胚过早孵出等异常现象,给囊胚活检带来了一定的困难,... 详细信息

囊胚活检目前是进行胚胎植入前遗传学诊断/筛查(PGD/PGS)以及单基因疾病诊断的前提。目前常规使用的提前打孔的囊胚活检方法,会出现囊胚孵出时间不确定、内细胞团处于孵出部位以及囊胚过早孵出等异常现象,给囊胚活检带来了一定的困难,并部分地影响到囊胚最终移植的临床结局。新的非提前打孔囊胚活检法,利用透明带本身的束缚作用减少激光的创面,可以最大程度地减少活检时异常情况的出现,使得活检更加简单并且可控,可以在一定程度上改善移植胚胎的临床结局。

关键词：囊胚活检透明带打孔囊胚孵出内细胞团

PGT-A前冷冻囊胚活检与新鲜囊胚活检的比较分析

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现代妇产科进展 2021年第12期30卷 910-912,918页

作者：张京业张晓丽吴克良山东大学生殖医学研究中心(山东大学附属生殖医院) 济南250012

目的针对常规体外授精(IVF)/胞浆内单精子注射(ICSI)周期中有剩余冷冻囊胚,却反复种植失败、反复流产或流产物基因检测有异常的患者,探讨将其剩余冷冻囊胚活检并行染色体整倍体性检测以改善妊娠结局的可行性。方法研究分为两组,IVF/ICS... 详细信息

目的针对常规体外授精(IVF)/胞浆内单精子注射(ICSI)周期中有剩余冷冻囊胚,却反复种植失败、反复流产或流产物基因检测有异常的患者,探讨将其剩余冷冻囊胚活检并行染色体整倍体性检测以改善妊娠结局的可行性。方法研究分为两组,IVF/ICSI周期中冷冻囊胚活检的患者为冻胚活检组,胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)周期中新鲜囊胚活检的患者为鲜胚活检组。比较两组囊胚冷冻复苏后的存活率及妊娠结局。结果冻胚活检组(96例患者)与鲜胚活检组(104例患者)囊胚解冻后总的囊胚存活率比较,差异无统计学意义(96.5%vs 98.9%,P=0.211),移植后的胚胎着床率(61.9%vs 65.2%,P=0.630)和流产率(18.5%vs 18.3%,P=0.985)比较,差异均无统计学意义。冻胚活检组的胚胎整倍体率显著高于鲜胚活检组,差异有统计学意义(57.4%vs 48.6%,P=0.027)。结论冻胚活检法作为一种非常规的PGT-A活检方法安全有效。提高此类患者的胚胎利用率,可在一定程度上改善此类患者的妊娠结局。

关键词：冻胚活检鲜胚活检解冻存活率胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)