检索结果-南通市图书馆

作者：吴会玲华南农业大学

学位级别：硕士

甲萘威是一种广泛应用于农业生产中的氨基甲酸酯类农药,其残留在环境或食品后可通过空气暴露、食物链等多种方式被人体摄入而产生危害。甲萘威经人体代谢后形成稳定的标志性代谢物1-萘酚,并随尿液排出。因此检测尿液中的1-萘酚浓度可有... 详细信息

甲萘威是一种广泛应用于农业生产中的氨基甲酸酯类农药,其残留在环境或食品后可通过空气暴露、食物链等多种方式被人体摄入而产生危害。甲萘威经人体代谢后形成稳定的标志性代谢物1-萘酚,并随尿液排出。因此检测尿液中的1-萘酚浓度可有效判断甲萘威的暴露情况,为公共安全预警提供技术支持。来源于骆驼科动物的纳米抗体具有热稳定性好、易表达、水溶性好等优点。基于此,本研究以1-萘酚为研究对象,通过免疫骆驼,构建噬菌体展示文库,筛选获得抗1-萘酚纳米抗体,并建立间接竞争酶联免疫（ic ELISA）和比率荧光免疫分析法（RIFA）,用于检测暴露人群尿液中的1-萘酚。主要结果如下:（1）抗1-萘酚噬菌体展示纳米文库的构建、筛选及活性分析采用1-NAP-B-LF免疫原对骆驼进行免疫,构建了库容量为2.66×10～7 cfu/m L的抗1-萘酚纳米抗体文库。经辅助噬菌体救援后得到噬菌体展示文库滴度为1011 pfu/m L。对文库进行3轮亲和淘筛,筛选得到6株纳米抗体阳性克隆。当1-萘酚药物浓度为100 ng/m L时,纳米抗体Nb-CC4活性抑制率最高,达86.7%,因此选择该抗体用于后续方法开发研究。纳米抗体Nb-CC4经*** BL21（DE3）系统表达,表达量为1 mg/L。热稳定性分析表明,纳米抗体Nb-CC4在80°C加热5 min和35 min后,分别仍有95%和46%的活性,而对应的单克隆抗体在相同温度条件下已失活。在进一步的研究中发现,纳米抗体与单克隆抗体的有机溶剂耐受性无明显差异,随着有机试剂浓度的增大,两者与抗原的结合活性均下降。具体地,纳米抗体Nb-CC4在40%甲醇、乙腈、丙酮以及DMSO溶液的结合活性分别为25%、15%、55%和25%,表明纳米抗体Nb-CC4对丙酮的耐受能力最强。同源建模和分子对接研究了纳米抗体与1-萘酚的相互作用机理,结果表明氢键和疏水作用是两种主要相互作用力。（2）基于纳米抗体的1-萘酚ic ELISA方法建立建立了基于纳米抗体Nb-CC4检测1-萘酚的ic ELISA方法,通过优化抗原抗体浓度和反应缓冲体系中的离子浓度、p H值、添加甲醇浓度等工作条件,以p H为6.4的0.04 M PBS作为最佳的工作缓冲液,所建立的方法IC50为8.21 ng/m L,线性范围为2.61-25.84 ng/m L,检测限为1.44 ng/m L。在特异性测试中,与甲萘威、1,5-二羟基萘、1,6-二羟基萘和1,8-二羟基萘的交叉反应率分别为5.5%、2.0%、2.9%和2.1%,与其余类似物交叉反应率均低于0.1%。尿液样本的添加回收实验结果表明,回收率为85.9%-124.4%,变异系数为6.1%-14.9%。ic ELISA方法与HPLC-FLD的检测结果的相关系数为0.984,说明所建立的ic ELISA方法准确性良好,可用于检测人尿液样本中的1-萘酚。（3）基于聚集诱导发射增强的比率荧光免疫分析方法建立成功构建p ET22b-Nb-CC4-AP载体,经*** BL21（DES）系统表达,得到碱性磷酸酶融合的重组纳米抗体蛋白Nb-CC4-AP,用于开发一步式RIFA。该方法的IC50为1.81 ng/m L,线性范围为0.05-66.35 ng/m L,检测限为0.01 ng/m L。尿液样本的添加回收实验表明,回收率为83.5%-117.5%,变异系数小于14.1%。RIFA方法与HPLC-FLD的检测结果的相关系数为0.992,说明本论文建立的RIFA方法准确性良好,可应用于人尿液中1-萘酚的检测。本文研究制备了抗1-萘酚的特异性强和灵敏度好的纳米抗体,基于此建立了简便、高效、准确的两种免疫分析方法。RIFA灵敏度高于传统的ic ELISA,且检测线性范围宽,预期可为甲萘威的暴露风险评估提供技术支撑。

关键词：农药暴露 1-萘酚纳米抗体免疫分析比率荧光免疫分析法

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基于SD的我国大中型工业企业自主创新能力研究

基于SD的我国大中型工业企业自主创新能力研究

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作者：吴会玲哈尔滨理工大学

学位级别：硕士

2007年党的十七大报告明确强调要提高自主创新能力、建设创新型国家。自此企业自主创新成为热点研究问题。2012年党的十八大报告再一次强调要坚持走中国特色自主创新道路，在实施创新驱动发展战略下提高原始创新能力、集成创新能力和引... 详细信息

2007年党的十七大报告明确强调要提高自主创新能力、建设创新型国家。自此企业自主创新成为热点研究问题。2012年党的十八大报告再一次强调要坚持走中国特色自主创新道路，在实施创新驱动发展战略下提高原始创新能力、集成创新能力和引进消化吸收基础上的再创新能力。可见，增强自主创新能力已被提升到国家战略发展高度，加快提高自主创新能力、转变经济发展方式是顺应经济发展规律要求的战略选择。大中型工业企业作为国家自主创新的主体，其自主创新能力水平将关系到整个国民经济素质和国际竞争力的提高。因此，有效提升大中型工业企业自主创新能力和国际竞争力具有十分重要的战略现实意义。在借鉴国内外有关企业自主创新及影响因素相关理论研究的基础上，针对影响我国大中型工业企业自主创新能力提升的因素和作用机理展开研究。在对我国大中型工业企业和自主创新能力的涵义进行界定的基础上，从自主创新环境支持能力、投入能力、活动能力和产出能力四个方面对影响我国大中型工业企业自主创新能力的因素进行了分析，运用系统动力学方法，对影响我国大中型工业企业自主创新系统的因素建立了系统的因果关系模型，实现对系统的因果关系分析。在定性分析的基础上建立自主创新系统的系统动力学流图，并通过建立系统动力学方程式确定因素之间的逻辑和数量关系，在检验所建立的仿真模型有效性的前提下，选取企业自筹资金、科技人员人均劳务费支出和研发经费支出对我国大中型工业企业自主创新能力提升的影响进行动态仿真实证研究，实现对系统的定量分析。本文通过实证仿真分析了影响因素对系统的作用机理，并参考仿真结果给出了提升我国大中型工业企业自主创新能力的对策建议，这也将为其他企业的发展提供借鉴和指导作用。

关键词：大中型工业企业自主创新能力影响因素系统动力学

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我国大中型工业企业自主创新能力影响因素研究

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经济纵横 2013年第4期 64-69页

作者：陈春明吴会玲吴昕运哈尔滨理工大学管理学院黑龙江哈尔滨150080

企业自主创新能力的提升受到多种因素的影响,不同影响因素的作用和影响程度各异。系统动力学的理论与方法恰恰为研究系统内不同影响因素的非线性因果反馈作用和影响程度提供了良好的解决方案。本文以自主创新经费筹集及投入和自主创新... 详细信息

企业自主创新能力的提升受到多种因素的影响,不同影响因素的作用和影响程度各异。系统动力学的理论与方法恰恰为研究系统内不同影响因素的非线性因果反馈作用和影响程度提供了良好的解决方案。本文以自主创新经费筹集及投入和自主创新活动运行两方面为出发点,对影响大中型工业企业自主创新能力提升的因素进行了实证分析,发现经费筹集与自主创新活动经费支出不同分配比例对自主创新产出绩效有着很大影响。这对其他企业的发展具有借鉴和指导作用。

关键词：大中型工业企业自主创新系统影响因素

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肝硬化患者自发性腹膜炎腹水病原菌及耐药性分析

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中华医院感染学杂志 2014年第5期24卷 1131-1133页

作者：曾娟张彦亮吴会玲申玉英南京医科大学附属南京医院感染科江苏南京210006

目的探讨肝硬化合并自发性腹膜炎(SBP)患者腹水病原菌的分布及耐药性,为临床治疗选择敏感性抗菌药物提供依据。方法回顾性分析2008年4月-2012年2月住院治疗70例肝硬化合并SBP且腹水细菌培养阳性患者的临床资料,分析其腹水细菌培养和药... 详细信息

目的探讨肝硬化合并自发性腹膜炎(SBP)患者腹水病原菌的分布及耐药性,为临床治疗选择敏感性抗菌药物提供依据。方法回顾性分析2008年4月-2012年2月住院治疗70例肝硬化合并SBP且腹水细菌培养阳性患者的临床资料,分析其腹水细菌培养和药物敏感试验结果。结果 70例患者腹水中共分离出72株病原菌,革兰阴性菌51株占70.8%,革兰阳性菌18株占25.0%,真菌3株占4.2%,其中产ESBLs大肠埃希菌6株占24.0%,产ESBLs肺炎克雷伯菌1株占11.1%;对革兰阴性菌耐药性较高的是头孢类及喹诺酮类抗菌药物,对革兰阳性菌耐药性较高的是氨苄西林和哌拉西林。结论肝硬化合并SBP患者中腹水病原菌以革兰阴性菌为主,耐药现象严重,应根据药物敏感试验报告合理选用抗菌药物,从而达到有效抗菌目的,并抑制或延缓耐药菌株的出现。

关键词：肝硬化自发性腹膜炎病原菌耐药

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蹭行运动和胞外藻酸盐在铜绿假单胞菌生物被膜形成中的作用

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华中科技大学学报（医学版） 2009年第6期38卷 729-733页

作者：吴会玲田德英陈安群宋世会谢琳卡华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科武汉430030

目的比较3株铜绿假单胞菌即含新的mucA基因突变的黏液型PA17、mucA基因经典突变的黏液型PDO300、含野生型mucA基因的非黏液型PAO1生物被膜早期形成和成熟形态,探讨铜绿假单胞菌纤毛介导的蹭行运动和胞外基质藻酸盐在黏液型及非黏液型铜... 详细信息

目的比较3株铜绿假单胞菌即含新的mucA基因突变的黏液型PA17、mucA基因经典突变的黏液型PDO300、含野生型mucA基因的非黏液型PAO1生物被膜早期形成和成熟形态,探讨铜绿假单胞菌纤毛介导的蹭行运动和胞外基质藻酸盐在黏液型及非黏液型铜绿假单胞菌生物被膜形成中的作用。方法用PA17、PAO1、PDO300的单菌落穿刺接种1%琼脂糖平板,肉眼观察细菌纤毛介导的蹭行运动,测定细菌运动环评估3株细菌的蹭行运动能力;在生物被膜形成早期采用结晶紫对膜内黏附细菌染色,测定其吸光度(A)值,建立24 h内3株细菌的黏附曲线;建立未饱和铜绿假单胞菌生物被膜模型,检测早期和成熟期的胞外藻酸盐分泌;将含绿色荧光蛋白的pUCP/UV质粒转化3株铜绿假单胞菌,在激光共聚焦显微镜下观察静态生物被膜不同时期的形态和结构。结果黏液型PA17、非黏液型PAO1菌株蹭行运动的直径小于黏液型PDO300(P0.05);激光共聚焦显微镜下PA17菌株在生物被膜形成中,不可逆黏附形成明显迟于非黏液型PAO1和黏液型PDO300,PA17成熟生物被膜形态呈薄膜状,与非黏液型PAO1成熟生物被膜类似;而PDO300不可逆黏附形成早,成熟生物被膜形态呈蘑菇状。结论纤毛介导的蹭行运动是早期生物被膜形成中黏附的重要方式,可能影响成熟生物被膜的形态;而藻酸盐不是早期黏附的主要决定因素,与成熟生物被膜形态无关。

关键词：铜绿假单胞菌生物被膜 mucA基因突变细菌黏附

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