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花椒窄吉丁气味结合蛋白AzanOBP5的克隆与表达

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植物保护学报 2023年第1期50卷 81-90页

作者：郭莉陈迪贾任航高晓进张泽腾谢寿安吕淑杰西北农林科技大学林学院陕西杨凌712100

为进一步明确花椒窄吉丁Agrilus zanthoxylumi气味结合蛋白AzanOBP5在昆虫嗅觉识别过程中的功能,基于花椒窄吉丁转录组数据(SUB6796283)利用cDNA末端快速扩增技术对花椒窄吉丁气味结合蛋白基因AzanOBP5进行全长克隆并进行生物信息学分析... 详细信息

为进一步明确花椒窄吉丁Agrilus zanthoxylumi气味结合蛋白AzanOBP5在昆虫嗅觉识别过程中的功能,基于花椒窄吉丁转录组数据(SUB6796283)利用cDNA末端快速扩增技术对花椒窄吉丁气味结合蛋白基因AzanOBP5进行全长克隆并进行生物信息学分析;通过实时荧光定量检测技术测定基因AzanOBP5在成虫不同组织中的表达情况。结果显示,克隆获得基因AzanOBP5全长740 bp(GenBank登录号为MT318834),5’端非编码区为172 bp,3’端非编码区114 bp,开放阅读框453 bp,编码150个氨基酸。序列分析表明,AzanOBP5氨基酸序列与苹果小吉丁Agrilus mali AmalOBP5的氨基酸序列一致性最高。成功构建pET-21a-AzanOBP5重组质粒并在大肠杆菌Escherichia coli中表达,经过诱导和纯化条件的优化及Western blot鉴定,得到的融合蛋白His-AzanOBP5大小符合预期。基因AzanOBP5在雌雄成虫的不同组织中均有表达,其中在成虫腹部的表达量最高。表明花椒窄吉丁气味结合蛋白基因AzanOBP5除参与嗅觉识别过程外,还可能具有其他生理功能。

关键词：花椒窄吉丁气味结合蛋白基因克隆组织表达原核表达

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海盐秦山某企业内河码头总平面布置研究

中国水运 2023年第5期 54-57页

作者：张笑笑吕淑杰杭州港湾交通设计咨询有限公司浙江杭州310030

对海盐秦山某企业内河码头项目工程概况进行了分析,着重对设计船型主尺度、泊位作业标准和作业天数、水域主尺度、航道和锚地、主要建设指标及工程量进行了计算,综合比选了内河码头总平面布置的推荐方案,研究成果可为类似内河码头工程... 详细信息

对海盐秦山某企业内河码头项目工程概况进行了分析,着重对设计船型主尺度、泊位作业标准和作业天数、水域主尺度、航道和锚地、主要建设指标及工程量进行了计算,综合比选了内河码头总平面布置的推荐方案,研究成果可为类似内河码头工程布置提供技术参考。

关键词：内河码头总平面布置水域主尺度码头前沿顶面高程

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基于波浪数学模型的防波堤平面布置优化

中国水运 2023年第6期 61-63页

作者：吕淑杰张笑笑杭州港湾交通设计咨询有限公司浙江杭州310030

近岸波浪的传播变形十分复杂,而防波堤的平面布置对波浪传播更是有着多方面的影响。本文以虾峙岛某码头工程为例,对该工程的自然条件、工程概况、现状防波堤情况进行了介绍。在此基础上,本文利用波浪数学模型,根据波浪情况、风速情况模... 详细信息

近岸波浪的传播变形十分复杂,而防波堤的平面布置对波浪传播更是有着多方面的影响。本文以虾峙岛某码头工程为例,对该工程的自然条件、工程概况、现状防波堤情况进行了介绍。在此基础上,本文利用波浪数学模型,根据波浪情况、风速情况模拟了不同防波堤平面整治方案下码头前沿及进港航道水域的波浪特性,定量分析波高变化情况。根据工程不同平面布置方案中的试验结果,确定最优化的防波堤平面布置方案,为港口工程的建设、运营提供了良好的水域环境。

关键词：虾峙岛波浪数学模型波浪特性防波堤平面布置

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隧道地震反应若干影响因素研究

隧道地震反应若干影响因素研究

作者：吕淑杰大连理工大学

学位级别：硕士

地下结构是支持社会活动的重要基础，一旦遭遇地震，将对城市发展和国家政治稳定产生重大影响。我国地处环太平洋地震带，有一半城市位于基本烈度为7度以上的地震区，尤其像北京、天津、西安等重要大城市甚至位于8度的高烈度地震区。因... 详细信息

地下结构是支持社会活动的重要基础，一旦遭遇地震，将对城市发展和国家政治稳定产生重大影响。我国地处环太平洋地震带，有一半城市位于基本烈度为7度以上的地震区，尤其像北京、天津、西安等重要大城市甚至位于8度的高烈度地震区。因此地下结构抗震研究问题具有重要的理论意义和工程应用价值。地震作用下地下结构的运动是土与结构共同作用、相互影响的结果。本文结合辽宁省博士启动基金资助项目(20041077)，以土-结构相互作用为核心理论，动力有限元方法为分析手段，用大型通用有限元软件ANSYS对地震作用下的隧道结构体系建立了合理的相互作用模型，进行了大量计算，总结了地下结构反应一些规律，可为相关工程的抗震计算和设计提供参考和依据。具体工作和结论如下：(1)采用时程分析方法，对一隧道结构进行了地震响应分析。重点研究了不同人工边界方法不同横向截取范围对地震响应的影响。研究结果表明：无论是粘弹性边界、粘性边界还是固定边界，横向截取范围都要大于5倍的计算域高度，计算结果才比较稳定。对比几种常用的人工边界，粘弹性边界是较好的人工边界。文中还比较分析了在地震荷载作用下隧道衬砌的薄弱部位。(2)在上述理论方法和研究结果基础上，进一步对衬砌材料(混凝土标号、衬砌厚度和衬砌密度变化)和地质条件对隧道结构的地震响应的影响进行了探讨。结果表明：地下结构地震反应主要受围岩的影响，与其自身惯性力和结构刚度的关系并不大。因此单纯靠增强结构强度来提高结构抗震性能，把结构设计成能抵抗周围围岩介质的运动和变形的传统观点并不合理。在地下结构的抗震设计中，可以考虑适当增加结构的柔性和延性，来吸收地震时周围地层介质施加给结构的变形，充分发挥围岩自身承受荷载的能力。围岩级别减小，结构位移和应力响应都明显减小。随着混凝土标号提高，材料弹模增大，结构位移略有增加，结构应力明显增大。衬砌厚度增大，结构的位移变化并不明显，同一时刻结构的内力也随之增大，但结构实际最大应力减小。衬砌密度增大，应力和内力响应明显增大，所以要提高隧道的抗震性能可以选用一些轻质衬砌材料。

关键词：隧道地震响应人工边界计算范围有限元

两类调节性T细胞及相关细胞因子在变应性鼻炎发病机制中的作用研究

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两类调节性T细胞及相关细胞因子在变应性鼻炎发病机制中的作用研究

作者：吕淑杰扬州大学

学位级别：硕士

背景:变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)是耳鼻咽喉头颈外科发病率最高的过敏性疾病之一;是变应原与特异性IgE结合所导致的速发型变态反应在鼻腔黏膜的局部表现。AR症状控制不佳会导致夜间睡眠质量受损、白天疲乏,进而显著影响患者的工... 详细信息

背景:变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)是耳鼻咽喉头颈外科发病率最高的过敏性疾病之一;是变应原与特异性IgE结合所导致的速发型变态反应在鼻腔黏膜的局部表现。AR症状控制不佳会导致夜间睡眠质量受损、白天疲乏,进而显著影响患者的工作或学习效率和总体生活质量。AR的发病机制与遗传和环境因素有关,但确切的病因尚不清楚。近年来研究发现与AR发病相关的T细胞模式由传统的Th1/Th2模式转变为与Thl、Th2、Th9、Th17、Tfh及调节性T(Treg)细胞关联型模式;Treg细胞是其中唯一发挥炎症负性调节作用的细胞类型,而其余细胞亚群均与炎症反应呈正相关。Treg细胞在维持自身免疫耐受方面发挥重要作用,其相当一部分免疫调节作用是借助于IL-10、IL-35、TGF-β等负调节细胞因子进行的。最近有研究表明变应性哮喘患者体内CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞数目减少,但是少有研究常年性持续性中重度AR患者体内CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞的变化以及这两种细胞与三种细胞因子之间的联系。目的:本实验主要采用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)分析常年性持续性中重度尘螨过敏AR患者外周血中CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞水平变化、研究这两类Treg细胞在AR发病机制中的作用;采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)技术测定常年性持续性中重度尘螨过敏AR患者外周血中Treg细胞相关细胞因子(IL-10、IL-35、TGF-β)浓度,探究各细胞因子在AR发病中的作用,并进一步分析两类Treg细胞亚群及三种细胞因子在AR发病机制中可能的联动作用。方法:选取从2020年5月至2020年10月之间就诊于江苏省苏北人民医院耳鼻咽喉头颈外科门诊且年龄介于18-60岁之间符合常年性持续性中重度尘螨过敏诊断标准的AR患者40例为实验组,另随机选取年龄与性别匹配的健康志愿者20例为对照组。所有研究对象均采取晨空腹前臂静脉血2份(5ml+5ml),其中一份血样经离心、裂红、洗涤等处理后使用流式荧光标记的鼠抗人细胞表面单克隆抗体(共5种,分别为APC-Cy7标记的细胞表面CD3单抗、FITC标记的细胞表面CD4单抗、BV510标记的细胞表面CD8单抗、BV421标记的细胞表面CD25单抗、BV711标记的细胞表面CD127单抗)染色;调节补偿后上机检测各样本并得出二维流式散点图,按照一定顺序设门分离出CD4+CD25+CD127low/-(CD4+Treg)细胞并观察其占CD4+T淋巴细胞中的百分比(%)、再从淋巴细胞中分离出CD8+CD25+(CD8+Treg)细胞并观察其占CD8+T淋巴细胞中的百分比(%)。另一份经离心冻存后分别使用人IL-10、IL-35和TGF-β ELISA检测试剂盒按照加样、加酶、洗涤、染色等步骤测定各样品中3种细胞因子在450nm波长处的吸光度、代入标品曲线回归方程式并计算出所有实验对象外周血中3种细胞因子的实际浓度(单位pg/mL)。使用SPSS 22.0统计软件进行统计分析,实验组和对照组CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞所占百分比以均数±标准差(X±SD)表示(单位为%),实验组和对照组血清中3种细胞因子浓度以均数±标准差(X±SD)表示(单位为pg/mL)。实验组和对照组之间数据比较采用Mann-Whitney U检验,对实验组CD4+Treg细胞、CD8+Treg细胞亚群与3种细胞因子间的相关性采用Spearman秩相关分析进行分析并计算出相关系数r。P<0.05认为有统计学差异。结果:对于外周血中CD4+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比,实验组(AR患者)较对照组(健康人群)明显降低(P=0.000<0.05);而对于外周血中CD8+Treg细胞占CD8+T淋巴细胞的百分比,实验组(AR患者)较对照组(健康人群)明显降低(P=0.000<0.05)。对于外周血中血清IL-10和IL-35浓度,实验组(AR患者)较对照组(健康人群)均明显降低(P=0.000<0.05,P=0.000<0.05);而对于外周血中血清TGF-β浓度,实验组(AR患者)较对照组(健康人群)明显升高(P=0.000<0.05)。分析实验组(AR患者)外周血中各细胞与细胞因子间关联性后发现仅CD4+Treg细胞百分比与IL-35浓度之间呈现负相关关系(r=-0.334,P=0.035)。结论:1、CD4+Treg细胞数目的减少在AR发病机制中发挥重要作用,可能与其对环境变应原的异常Th2型免疫反应的抑制作用降低有关;2、AR患者中CD8+Treg细胞数目的减少与AR的发病有关,这可能是由于其抑制性作用降低所致;3、IL-10分泌机制受损与AR发病有关,该受损机制可能会导致变应原免疫耐受失调

关键词：变应性鼻炎调节性T细胞 IL-10 IL-35 TGF-β

花椒窄吉丁化学感受蛋白AzanCSP7的三维模型预测及其与寄主挥发物的分子对接

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农业生物技术学报 2023年第6期31卷 1238-1251页

作者：高晓进郭莉陈迪贾任航张泽腾谢寿安吕淑杰西北农林科技大学林学院辽宁省盐碱地利用研究所秦岭国家植物园

昆虫化学感受蛋白(chemosensory proteins, CSPs)在结合及运输气味物质的过程中发挥着重要作用。本研究利用RT-PCR克隆了花椒窄吉丁(Agrilus zanthoxylumi)化学感受蛋白基因AzanCSP7(GenBank No. ON409462)并对其进行了序列分析，结果... 详细信息

昆虫化学感受蛋白(chemosensory proteins, CSPs)在结合及运输气味物质的过程中发挥着重要作用。本研究利用RT-PCR克隆了花椒窄吉丁(Agrilus zanthoxylumi)化学感受蛋白基因AzanCSP7(GenBank No. ON409462)并对其进行了序列分析，结果显示，AzanCSP7基因的CDS区长度为333 bp，编码110个氨基酸，有4个保守的半胱氨酸，符合化学感受蛋白的典型特征。系统发育树分析发现，花椒窄吉丁蛋白AzanCSP7和苹果小吉丁(A. mali) AmalCSP8紧密聚为一支，置信度100%。通过qPCR检测AzanCSP7在雌、雄成虫的头、胸、腹、足、翅的表达情况，结果显示，AzanCSP7在雄虫和雌虫中的表达量均是在头部最高，且在雌虫头部和足部的表达量极显著高于雄虫(P<0.01)。使用RaptorX构建AzanCSP7三维模型后，通过AutoDock Vina与46种寄主挥发物配体进行分子对接，结果显示，寄主挥发物与AzanCSP7有2个主要的结合位置，位置1：由α-2螺旋(Glu29～Asn37)以及α-5螺旋和α-6螺旋之间的无规则卷曲(Gln84～Lys98)形成的凹槽，位置2：由α-4螺旋(Arg60～Arg71)和α-6螺旋(Glu99～Ser108)形成的凹槽；1组链状配体(香叶醇,月桂烯, α-罗勒烯,乙酸芳樟酯和乙酸香叶酯)和5组环状配体(可巴烯,荜澄茄油烯; β-榄香烯,葎草烯;右旋大根香叶烯,萜品油烯;胡椒酮, 4-侧柏醇, β-蒎烯, α-侧柏烯, β-水芹烯;莰烯, 4-蒈烯,倍半水芹烯,柠檬烯和3-蒈烯)分别与蛋白AzanCSP7有相同的作用氨基酸残基；筛选出6种与AzanCSP7结合力较好的配体(可巴烯, β-石竹烯, β-榄香烯,右旋大根香叶烯,荜澄茄油烯和葎草烯)。研究结果表明，AzanCSP7与寄主挥发物有较好的亲和力，参与了识别寄主挥发物的过程。本研究为阐明AzanCSP7在嗅觉机制中的功能提供理论依据。

关键词：花椒窄吉丁化学感受蛋白基因克隆组织表达寄主挥发物分子对接

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我国昆虫生态学的研究与展望

西北林学院学报 2002年第1期17卷 51-54页

作者：谢寿安吕淑杰袁锋赵惠燕西北农林科技大学林学院陕西杨陵712100 西北农林科技大学植保学院陕西杨陵712100

论述了我国昆虫生态学不同分支学科的发展概况和研究现状 ,主要包括昆虫种群生态学、昆虫行为生态学、昆虫化学生态学、昆虫生理生态学和昆虫分子生态学。

关键词：昆虫生态学研究现状发展趋势中国

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秦岭落叶松红瘿球蚜的防治技术

林业科技 2000年第5期25卷 21-23页

作者：谢寿安吕淑杰刘铭汤西北农林科技大学西林校区资源学院昆虫教研室陕西杨凌712100

采用 L9(34 )混合正交设计 ,对 3个施药时期、 3种药剂、 3个浓度梯度进行化学防治落叶松红瘿球蚜效果比较 ,筛选出防治该虫的最佳时期、最佳药剂和最佳浓度。防治试验结果表明 ,用50 %抗蚜威可湿性粉剂防治该虫效果最好 ,防治最佳时期... 详细信息

采用 L9(34 )混合正交设计 ,对 3个施药时期、 3种药剂、 3个浓度梯度进行化学防治落叶松红瘿球蚜效果比较 ,筛选出防治该虫的最佳时期、最佳药剂和最佳浓度。防治试验结果表明 ,用50 %抗蚜威可湿性粉剂防治该虫效果最好 ,防治最佳时期为越冬虫产卵前期 ,即 5月下旬至 6月上中旬 ,防治最佳浓度为 1∶ 2 0 0 0倍。

关键词：落叶松红瘿球蚜药剂防治抗蚜威可湿性粉剂

华山松大小蠹和红脂大小蠹过氧化氢同工酶酶谱的比较

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西北林学院学报 2003年第2期18卷 61-62页

作者：谢寿安吕淑杰袁锋藤华容西北农林科技大学林学院陕西杨陵712100 西北农林科技大学植保学院陕西杨陵712100

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对华山松大小蠹和红脂大小蠹的过氧化氢同工酶进行了分析。研究结果表明,华山松大小蠹和红脂大小蠹成虫的过氧化氢同工酶具有明显的差异,2种大小蠹过氧化氢同工酶种间差异主要表现在酶带带数、迁移率、酶带... 详细信息

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对华山松大小蠹和红脂大小蠹的过氧化氢同工酶进行了分析。研究结果表明,华山松大小蠹和红脂大小蠹成虫的过氧化氢同工酶具有明显的差异,2种大小蠹过氧化氢同工酶种间差异主要表现在酶带带数、迁移率、酶带染色深浅、酶带宽窄等方面。而同种个体之间几乎没有差异。

关键词：华山松大小蠹红脂大小蠹过氧化氢同工酶酶谱比较研究聚丙烯酰胺凝胶电泳森林害虫