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流行性出血热病毒的化学裂解和自融现象的观察

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浙江医科大学学报 1990年第4期19卷 145-149页

作者：吕新法王可宁胡中荣赵忠良朱智勇浙江医科大学传染病研究所浙江省卫生防疫站

通过EHFV化学裂解和自融现象的研究,揭示乙醚所致的化学裂解属纵深裂解而非浅表式的剥离,因此不管分子大小、是峰形还是非峰形所在处管均具有不同程度的血凝素抗原活性;而在自融现象研究中,意外地发现,在4℃这个特定环境温度中,无牛血... 详细信息

通过EHFV化学裂解和自融现象的研究,揭示乙醚所致的化学裂解属纵深裂解而非浅表式的剥离,因此不管分子大小、是峰形还是非峰形所在处管均具有不同程度的血凝素抗原活性;而在自融现象研究中,意外地发现,在4℃这个特定环境温度中,无牛血清病毒液内的病毒颗粒会自发地不断脱落大量包膜蛋白(主要由血凝素抗原加上极小量核衣壳蛋白组成),从而为制造EHFV亚单位提供了最廉价的简易手段.这种不受约束的外膜脱落现象可能是诱发、推动病毒变异的一种主要力量.

关键词：出血热病毒化学裂解自融现象

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辣根过氧化物酶结合物的质量鉴定

上海免疫学杂志 1983年第2期 91-94页

作者：蒋成淦吕新法张秀芝浙江医科大学传染病研究所

辣根过氧化物酶(HRP)和抗HBs(山羊IgG)按戊二醛二步法、苯醌法和改良过碘酸盐法交联反应分别制成酶结合物,用琼脂扩散、二氨基联苯胺染色法对酶结合物定性,并测定其HRP浓度和活性、羊IgG浓度和抗HBs免疫活性,阐明标记率(A403nm/A280nm)... 详细信息

辣根过氧化物酶(HRP)和抗HBs(山羊IgG)按戊二醛二步法、苯醌法和改良过碘酸盐法交联反应分别制成酶结合物,用琼脂扩散、二氨基联苯胺染色法对酶结合物定性,并测定其HRP浓度和活性、羊IgG浓度和抗HBs免疫活性,阐明标记率(A403nm/A280nm)的含义,通过ELISA检测表明标记率可作为评价酶结合物质量的指标,且其计算简便。

关键词：结合物 HRP 标记率辣根过氧化物酶质量鉴定

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流行性出血热病毒的冻融裂解及其机理探讨

浙江医科大学学报 1990年第2期19卷 49-52页

作者：吕新法胡中荣王可宁徐晓朱智勇赵年丰马亦林浙江医科大学传染病研究所浙江省卫生防疫站浙江医科大学附属第一医院传染病科

本文介绍一种对EHFV兼有灭活和裂解双重效用的分离方法,即低温变性凝胶过滤法,利用低温变性的原理,将病毒材料先于深低温-80℃冻融,继而于-30℃冻融多次,使其钝化与裂解,然后通过凝胶过滤,将残留的毒粒及其裂解产物包膜蛋白、RNA等分离... 详细信息

本文介绍一种对EHFV兼有灭活和裂解双重效用的分离方法,即低温变性凝胶过滤法,利用低温变性的原理,将病毒材料先于深低温-80℃冻融,继而于-30℃冻融多次,使其钝化与裂解,然后通过凝胶过滤,将残留的毒粒及其裂解产物包膜蛋白、RNA等分离出来.三者之间的得率受病毒材料体积大小、病毒浓度高低、以及培养液中有无小牛血清等制约.这是目前获取足量EHFV亚单位和RNA等最廉价的一种手段,

关键词：出血热病毒冻融裂解机理

X射线对小牛胸腺脱氧核糖核酸的隐藏破坏作用

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1961年第1期 26-40页

作者：李载平景沛吕新法钱肖贞中国科学院生物化学研究所中国科学院生物化学研究所上海

(1)用X射线照射小牛胸腺DNA溶液,以还原粘度和紫外吸收光谱的变化为指标,证明射线对DNA大分子除有直接显露的降解之外,还可导致对76度保温不稳定性的出现。这反映了结构上隐藏破坏的存在。隐藏破坏与所接受照射的剂量成比例地增加。(2)... 详细信息

(1)用X射线照射小牛胸腺DNA溶液,以还原粘度和紫外吸收光谱的变化为指标,证明射线对DNA大分子除有直接显露的降解之外,还可导致对76度保温不稳定性的出现。这反映了结构上隐藏破坏的存在。隐藏破坏与所接受照射的剂量成比例地增加。(2)按Zamenhof法制备的DNA样品储存液中合有“保护物质”。在“保护物质”的存在下,DNA溶液可耐受6×10~4r的照射而无直接显露的降解发生。但隐藏破坏却不可避免,在一定剂量下可以单独地存在,并随剂量之增加而发展,当剂量增加到一定程度时,显露的降解随之出现。(3)“保护物质”是可透析的,它具有抗射线的作用,而不是保全已遭受降解的DNA的大小外形。实验结果表明“保护物质”可能是钙-柠檬酸盐。讨论了钙-柠檬酸盐保护作用的机制。(4)比较隐藏破坏单独存在和与直接显露的降解同时存在的实验结果表明,隐藏破坏的本质包括了:1)主链的单侧打断,2)部分氢键的破坏,3)残余氢键不稳定性的增加。在三者之间有平行的比例关系。主链的打断可能是后二者出现的原因。分子的直接降解可能又是隐藏破坏积累的结果。(5)在“保护物质”存在下照射DNA,为人工制造隐藏破坏,研究DNA的结构与功能提供了一个简便的方法。

关键词： DNA 粘度稀溶液粘滞度流动特性脱氧核糖核酸保温紫外吸收光谱小牛胸腺剂量用药量保护物破坏作用

流行性出血热病毒的毒粒多态性和裂解产物多样性

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浙江医科大学学报 1990年第3期19卷 97-100页

作者：吕新法王可宁胡中荣徐晓朱智勇赵年丰马亦林浙江医科大学传染病研究所浙江省卫生防疫站浙江医科大学附属第一医院传染病科

作者将EHFV有关产物经过多种电泳和不同染色剂的对比检测,揭示了EHFV的多态性(呈现六条格外整齐、深浅不一、迁移率互异的染色带)和极端的不稳定性(在-30℃冻存下也会出现裂解等),从而解释了诸多学者在电镜观察中为什么对EHFV大小和形... 详细信息

作者将EHFV有关产物经过多种电泳和不同染色剂的对比检测,揭示了EHFV的多态性(呈现六条格外整齐、深浅不一、迁移率互异的染色带)和极端的不稳定性(在-30℃冻存下也会出现裂解等),从而解释了诸多学者在电镜观察中为什么对EHFV大小和形态作出如此不同的报道,这与他们所用病毒材料和(或)抽提时所用的溶剂、温度以及提纯后贮存期的长短等密切相关.冻融裂解的应用将加速对EHF病毒分子生物学的研究.

关键词：流行性出血热裂解产物病毒粒子

用对比分离纯化法论证人血清抗-HBeIgG的异质性

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浙江医科大学学报 1991年第4期20卷 156-160页

作者：吕新法章明太王可宁胡中荣金建华赵忠良浙江医科大学传染病研究所

本文通过高、低两组不同的人抗-HBe阳性血清用多种分离IgG的方法,进行了对比分离纯化研究.发现人抗-HBe IgG存在着多种异质性表现.从而提出在单克隆抗-HBe尚未普及前提下应如何挑选人抗-HBe阳性血清以及提取多克隆抗体的最佳方法.

关键词：乙型肝炎抗体免疫球蛋白分离

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人淋巴细胞白细胞间素-2的分离纯化