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早产兔生发基质—脑室内出血后脑组织Caspase-3及VEGF的动态研究

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早产兔生发基质—脑室内出血后脑组织Caspase-3及VEGF的动态研究

作者：吕少广河北医科大学

学位级别：硕士

目的：早产儿生发基质-脑室内出血（germinal matrix hemorrhage-intraventricular hemorrhage，GMH-IVH）及其导致的神经系统后遗症是造成早产儿死亡和儿童神经系统功能障碍的常见疾病，我国早产儿GMH-IVH的发生率明显高于发达国家，... 详细信息

目的：早产儿生发基质-脑室内出血（germinal matrix hemorrhage-intraventricular hemorrhage，GMH-IVH）及其导致的神经系统后遗症是造成早产儿死亡和儿童神经系统功能障碍的常见疾病，我国早产儿GMH-IVH的发生率明显高于发达国家，发生率为56.6%，其中重度出血发生率为16.3%，且存活者约35％遗留慢性神经系统功能障碍，如脑瘫、癫痫、学习困难和认知异常等。目前研究显示GMH-IVH后的继发性脑损伤机制十分复杂，涉及炎症反应、氧化应激、小胶质细胞增生等多方面，但众多因素之间有无关联？有无最终共同途径等目前尚无定论。有动物实验研究报道，成年大鼠发生急性创伤性脑损伤时伴有神经细胞凋亡，并且神经细胞凋亡与天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）表达间具有一致性，因此，有学者提出神经细胞凋亡可能是颅脑创伤后继发性脑损伤的最终途径，但是关于新生动物脑损伤后，尤其是新生早产动物方面，是否有Caspase-3参与，类似研究少见。血管内皮生长因子（Vascularendothelial growth factor，VEGF)，其在脑损伤后发挥的促进新生血管生成、抗细胞凋亡、保护缺血脑组织的作用已在成年动物模型中得到广泛验证，但是关于早产动物脑损伤后，尤其是新生的早产动物方面，是否亦有VEGF的参与并发挥脑保护作用，尚无相关报道。本实验旨在通过动态监测早产兔GMH-IVH后脑组织Caspase-3及VEGF的表达及变化情况，探寻两者是否参与早产兔GMH-IVH后的继发性脑损伤，为早产儿GMH-IVH的治疗提供新的思路。方法：1.将孕29天孕兔进行剖宫产，迅速取幼兔，并给予保温、奶粉喂养。将所取幼兔随机分为实验组及对照组，每组各取18只早产兔。于生后3小时，实验组的早产兔接受50%丙三醇腹腔注射，剂量为10ml/Kg，对照组的早产兔接受等剂量生理盐水腹腔注射。2.对照组与实验组早产兔分别于生后24小时接受头颅超声检查，观察GMH-IVH发生情况。选取接受丙三醇腹腔注射后发生GMH-IVH的早产兔15只，编为GMH-IVH模型组。将GMH-IVH模型组和对照组正常早产兔（15只）分别随机分为生后24小时、48小时、72小时三个亚组，按上述时间点给予安乐死，迅速分离脑组织，选取脑室周边区域组织并制成蜡块，用切片机切成5微米厚的切片，供免疫组化和检测凋亡用。3.免疫组化法检测GMH-IVH模型组与对照组早产兔脑室周边区域组织的Caspase-3和VEGF的表达;TUNEL凋亡检测试剂盒检测上述部位脑组织神经细胞凋亡的情况。免疫组化和TUNEL凋亡检测均使用辣根过氧化物酶标记链霉卵白素工作液显色，以胞浆呈棕黄色颗粒为阳性结果。4.免疫组化和凋亡细胞测定实验中平均阳性细胞表达率的计算：高倍镜下计数，采用imagepro-plus6.0图像分析系统分别测出对照组与GMH-IVH模型组早产兔生后24h、48h、72h3个时间段每张切片阳性细胞表达率（%），每张切片取5个高倍视野，取平均值。5.统计方法：采用SPSS13.0统计学软件、Microsoft Excel2003进行统计学处理，实验数据资料为计数资料，率的比较采用卡方检验，两两间比较采用2×2表卡方检验。检验水准定为0.05，P值小于0.05有统计学意义，P 0.05)。3.脑组织VEGF阳性细胞的表达GMH-IVH早产兔脑组织标本中VEGF平均阳性细胞表达率在生后24h、48h以及72h均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.01-0.05）;GMH-IVH早产兔脑组织标本中VEGF平均阳性细胞表达率在生后24h、48h、72h三个时间点间两两比较差异有统计学意义，以生后24h平均阳性细胞表达率最高，其次是生后48h，最后是生后72h (P<0.01-0.05)，而对照组脑组织标本中VEGF平均阳性细胞表达率在生后24h、48h

关键词：天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3 血管内皮生长因子早产儿生发基质-脑室内出血动物模型细胞凋亡

溶质载体家族12成员1基因突变致新生儿巴特综合征一例

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中华围产医学杂志 2018年第4期21卷 281-283页

作者：吕少广刘芳杜志方中国人民解放军白求恩国际和平医院新生儿科石家庄050082

本文报道了1例溶质载体家族12成员1（solute carrier-family 12 member 1，SLC12A1）基因突变致新生儿巴特综合征的诊疗过程。患儿胎龄30周＋4，生后表现为生长发育迟缓，频繁呕吐、发热、脱水、多尿等；实验室检查显示难以纠正的低钾... 详细信息

本文报道了1例溶质载体家族12成员1（solute carrier-family 12 member 1，SLC12A1）基因突变致新生儿巴特综合征的诊疗过程。患儿胎龄30周＋4，生后表现为生长发育迟缓，频繁呕吐、发热、脱水、多尿等；实验室检查显示难以纠正的低钾血症、低氯血症、代谢性碱中毒及高醛固酮血症；同时，基因检测显示患儿SLC12A1基因为复合杂合突变，确诊为巴特综合征。提示当新生儿临床上出现生长迟缓、多尿，以及难以纠正的低血钾、低氯碱中毒时，应警惕新生儿巴特综合征，尽早行基因检测确诊。

关键词：巴特综合征基因突变溶质载体新生儿家族代谢性碱中毒生长发育迟缓高醛固酮血症

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早产儿108例振幅整合脑电图特点分析

中国实用儿科杂志 2014年第4期29卷 293-296页

作者：郭志梅刘芳鲍丽莎周春风吕少广杜志方中国人民解放军白求恩国际和平医院儿科新生儿中心河北石家庄050082

目的研究不同经后龄（PMA）早产儿振幅整合脑电图（aEEG）的变化规律。方法选取2012年1-10月中国人民解放军白求恩国际和平医院新生儿病区108例不同孕周的早产儿，共分为28～36周9组，每组12例。采用国产脑功能监护仪CFM3000）分别在生... 详细信息

目的研究不同经后龄（PMA）早产儿振幅整合脑电图（aEEG）的变化规律。方法选取2012年1-10月中国人民解放军白求恩国际和平医院新生儿病区108例不同孕周的早产儿，共分为28～36周9组，每组12例。采用国产脑功能监护仪CFM3000）分别在生后12h内连续监测其aEEG波谱带的变化，分析不同PMA早产儿aEEG背景连续性、睡眠一觉醒周期（SWC）、下边界电压振幅和窄带宽度，探讨其变化规律。结果108例早产儿aEEG波形连续性显示：（1）随着PMA增高，连续电压所占比例逐渐升高，不同PMA早产儿连续电压出现的比例分别为28周（0例）、29周[1例（8．33％）]、30周[3例（25％）]、31周[3例（25％）]、32周[7例（58．33％）]、33周[11例（91．67％）]、34周：12例（100．0％）]、35周[12例（100．0％）]、36周[12例（100．0％）]。各组间比较差异有统计学意义（χ2=24．003，P〈0．01）。（2）各孕周的SWC出现率分别为：28周（0例）、29周（0例）、30周[1例（8．33％）]、31周[1例（8．33％）]、32周[3例（25％）]、33周[7例（58．33％）]、34周[11例（91．67％）]、35周[12例（100．0％）]、36周[12例（100．0％）]。各组间比较差异有统计学意义（χ2=36．742，P〈0．01）。30～32周偶有出现SWC，但多数为不成熟周期，33周开始多数出现周期，但周期仍欠成熟，34周以上均有较成熟的SWC。（3）随PMA增长，脑电波下边界逐步增高，下边界从28周后的（4．29±1．08）μV逐步上升到36周的（9．68±1．63）μV（F=56．943，P〈0．01）。（4）波谱带宽度逐步变窄，从28周的（45．4±4．14）μV下降到36周的（8．76±2．71）μV（F=147．936，P〈0．01）。结论早产儿脑发育过程中aEEG有其自身的变化规律，对判断脑发育成熟度有一定的参考价值。

关键词：振幅整合脑电图早产儿经后龄脑发育

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新生儿低血糖脑损伤振幅整合脑电图特征研究

临床儿科杂志 2013年第11期31卷 1019-1023页

作者：郭志梅刘芳周春风暴丽莎吕少广杜志方白求恩国际和平医院儿科NICU 河北石家庄050000

目的探讨新生儿低血糖脑损伤的临床特征,研究低血糖脑损伤时振幅整合脑电图(aEEG)的变化特点,探讨aEEG在低血糖脑损伤时的预测作用。方法选取24例低血糖新生儿,在诊断低血糖当天行MRI检查,当天或隔天行aEEG描记,分析aEEG背景波的变异性... 详细信息

目的探讨新生儿低血糖脑损伤的临床特征,研究低血糖脑损伤时振幅整合脑电图(aEEG)的变化特点,探讨aEEG在低血糖脑损伤时的预测作用。方法选取24例低血糖新生儿,在诊断低血糖当天行MRI检查,当天或隔天行aEEG描记,分析aEEG背景波的变异性、睡眠-觉醒周期、下边界及振幅等变化特点,并与MRI结果比较。结果严重低血糖脑损伤新生儿出现不同程度的癫发作,并在血糖纠正后继续存在。低血糖脑损伤时aEEG的表现为帽状或锯齿形癫发作,睡眠-觉醒周期消失,而对下边界及振幅的影响不大。睡眠-觉醒周期恢复提示脑功能恢复良好。在监测低血糖脑损伤方面,aEEG与MRI有很好的一致性。结论 aEEG在监测低血糖脑损伤时有其特征意义的变化,可用来动态监测低血糖脑损伤。

关键词：低血糖脑损伤振幅整合脑电图磁共振成像新生儿

17p11.2微重复致Potocki-Lupski综合征1例报道及四年随访结果

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发育医学电子杂志 2023年第4期11卷 282-284,315页

作者：吕少广刘芳阴晓伟解放军联勤保障部队第九八〇医院儿科河北石家庄050082

患儿男,2岁,因“智力、语言发育落后,肌张力低下”就诊。患儿胎龄40+5周,顺产,无窒息抢救史,出生体质量3420 g(50~75百分位数),身长50 cm(25~50百分位数),头围32cm(<3百分位数)。其母孕4产2,有不良孕史,第1胎孕4月时产检脑积水引产,第2... 详细信息

患儿男,2岁,因“智力、语言发育落后,肌张力低下”就诊。患儿胎龄40+5周,顺产,无窒息抢救史,出生体质量3420 g(50~75百分位数),身长50 cm(25~50百分位数),头围32cm(<3百分位数)。其母孕4产2,有不良孕史,第1胎孕4月时产检脑积水引产,第2胎(其姐)目前6岁,体健,智力、语言正常。第3胎孕1月时不明原因流产。

关键词：肌张力低下窒息抢救胎孕出生体质量百分位数随访结果脑积水

公共图书馆文旅融合创新服务实践及优化路径——以天津市、区级公共图书馆为例

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图书馆工作与研究 2024年第S1期 88-92页

作者：吕少平天津图书馆

文章分析天津市、区级公共图书馆在打造旅游目的地、建立新型阅读空间、推出特色阅读推广活动、开展研学游、开发文创产品、提供旅游信息服务等方面推出的文旅融合创新举措，提出公共图书馆文旅融合创新服务优化路径，即加强顶层设计，... 详细信息

文章分析天津市、区级公共图书馆在打造旅游目的地、建立新型阅读空间、推出特色阅读推广活动、开展研学游、开发文创产品、提供旅游信息服务等方面推出的文旅融合创新举措，提出公共图书馆文旅融合创新服务优化路径，即加强顶层设计，健全人才队伍；打造亮点要素，提高用户黏性；寻求社会协作，对接旅游资源；注重宣传总结，凝聚引导合力。

关键词：公共图书馆文旅融合图书馆+ 创新服务

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被动降温治疗重度窒息新生儿的临床对照研究

中华实用儿科临床杂志 2014年第14期29卷 1079-1082页

作者：刘芳郭志梅赵晴吕少广司丽英暴丽莎常志霞中国人民解放军白求恩国际和平医院儿科NICU 石家庄050082

目的亚低温已成为足月儿围生期窒息后神经保护的标准治疗方法,但主动降温（头部或全身）成本高,相对复杂,现探讨被动式降温治疗重度窒息足月儿的临床可行性.方法选取重度窒息足月儿32例,患儿均满足亚低温治疗标准,随机分为被动降温组... 详细信息

目的亚低温已成为足月儿围生期窒息后神经保护的标准治疗方法,但主动降温（头部或全身）成本高,相对复杂,现探讨被动式降温治疗重度窒息足月儿的临床可行性.方法选取重度窒息足月儿32例,患儿均满足亚低温治疗标准,随机分为被动降温组（n=17）和主动降温组（n=15）.主动降温组采用MTREALLONTM-体温调节系统,被动降温组采用自然降温法.亚低温治疗时间均为72 h,治疗结束后总结2组患儿的临床表现、生化指标以及临床疗效.结果 2组患儿治疗期间均无心律失常、低血糖、持续代谢性酸中毒、血源性感染,无局部寒冷损伤或出血现象.被动降温组患儿的直肠温度波动范围相对较宽[平均（33.47±0.71）℃],而主动降温组患儿直肠温度波动范围相对较窄[平均（33.66 ±0.29）℃],但2组平均直肠温度差异无统计学意义（t=1.941,P=0.055）.在主动降温组中,1例患儿因窒息合并急性肾衰竭,家长要求放弃治疗,其余31例患儿均存活.2组存活患儿自行吃奶的日龄、住院天数、新生儿神经行为评定评分、颅脑超声及颅脑MRI异常比例差异均无统计学意义（P均＞0.05）.结论被动降温方式在环境温度相对稳定的NICU可以便利地作为重度窒息足月儿的亚低温治疗手段,且无明显的临床不良反应.

关键词：窒息亚低温新生儿被动降温主动降温

早产儿出生第一天血清蛋白质水平影响因素探讨

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临床儿科杂志 2012年第12期30卷 1164-1167页

作者：刘芳暴丽莎吕少广司丽英张智慧郭志梅杜志方中国人民解放军白求恩国际和平医院儿科新生儿中心河北石家庄050082 中国人民解放军白求恩国际和平医院检验科河北石家庄050082

目的探讨早产儿出生第一天血清蛋白水平的影响因素。方法回顾性分析2007年12月至2011年12月的住院早产儿578例,男350例、女228例,孕周(32.44±2.48)周,出生体质量(1771.75±471.59)g。测定血清白蛋白(ALB),总蛋白(TP),前白蛋白(PA),球蛋... 详细信息

目的探讨早产儿出生第一天血清蛋白水平的影响因素。方法回顾性分析2007年12月至2011年12月的住院早产儿578例,男350例、女228例,孕周(32.44±2.48)周,出生体质量(1771.75±471.59)g。测定血清白蛋白(ALB),总蛋白(TP),前白蛋白(PA),球蛋白(GLB)。结果早产儿出生第一天的血清ALB、TP、PA、GLB测量值均呈正态分布。极低出生体重质量(VLBW)和低出生体质量(LBW)早产儿的血清ALB、GLB、TP水平均低于出生体质量>2 500 g的早产儿,差异有统计学意义(P0.05)。随出生孕周增加,早产儿平均血清ALB、GLB、TP水平也逐步增加,差异有统计学意义(P<0.05)。小于胎龄儿(SGA)的PA水平低于适于胎龄(AGA)早产儿,差异有统计学意义(P<0.05)。结论随出生孕周和出生体质量增加,早产儿平均血清ALB、TP、GLB水平逐步增加。PA可能反映了胎儿宫内营养状况。

关键词：早产儿极低出生体体质量儿低出生体质量儿血清白蛋白前白蛋白

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先天型强直性肌营养不良1型1例

中华新生儿科杂志（中英文） 2023年第6期38卷 365-366页

作者：吕少广刘芳栗静梁如佳吕红艳中国人民解放军联勤保障部队第980医院新生儿科石家庄050082 邯郸市妇幼保健院新生儿科邯郸056001

强直性肌营养不良1型(myotonic dystrophy type 1,DM1)是一种罕见的常染色体显性遗传病,可累及肌肉、心脏、晶状体、内分泌腺、中枢神经系统等。临床分为先天型DM1、儿童型DM1、经典成人型DM1、轻症晚发型DM1共4型。先天型DM1症状重、... 详细信息

强直性肌营养不良1型(myotonic dystrophy type 1,DM1)是一种罕见的常染色体显性遗传病,可累及肌肉、心脏、晶状体、内分泌腺、中枢神经系统等。临床分为先天型DM1、儿童型DM1、经典成人型DM1、轻症晚发型DM1共4型。先天型DM1症状重、病死率高,目前国内仅查到1篇文献报道,且患儿于生后28 d内死亡。本文报告1例目前生长发育良好的先天型DM1患儿的临床特征、DMPK基因检测结果、治疗及随访情况。

关键词：强直性肌营养不良1型 DMPK基因 CTG三核苷酸重复新生儿