检索结果-南通市图书馆

乙型脑炎减毒活疫苗中猪圆环病毒PCR检测方法的建立及验证

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中国生物制品学杂志 2016年第12期29卷 1346-1348,1354页

作者：黄敏吕冰凌袁良玉易维维吴朔华曲芙莲潘海龙成都生物制品研究所有限责任公司四川成都610023

目的建立乙型脑炎减毒活疫苗中猪圆环病毒1型(porcine circovirus 1,PCV1)和猪圆环病毒2型(PCV2)PCR检测方法,并进行验证及初步应用。方法参照Gen Bank中登录的PCV1(AY193712)及PCV2序列(AY181946)设计引物,以提取的PCV1和PCV2基因组DN... 详细信息

目的建立乙型脑炎减毒活疫苗中猪圆环病毒1型(porcine circovirus 1,PCV1)和猪圆环病毒2型(PCV2)PCR检测方法,并进行验证及初步应用。方法参照Gen Bank中登录的PCV1(AY193712)及PCV2序列(AY181946)设计引物,以提取的PCV1和PCV2基因组DNA为模板,分别经PCR扩增726 bp的PCV1片段和433 bp的PCV2片段,并对PCR反应中的退火温度、引物浓度、Mg2+浓度参数进行优化。将PCR扩增产物分别与p MD18-T载体连接,连接产物转化感受态大肠埃希菌DH5α,挑取阳性克隆,测序并进行同源性分析。对优化的PCR方法进行灵敏度和特异性验证,并用该方法检测3批乙型脑炎减毒活疫苗工作种子批、4批明胶和10批胰蛋白酶中的PCV1和PCV2。结果确定PCR反应的退火温度为54℃,引物浓度为10μmol/L,Mg2+浓度为10 mmol∕L。扩增的目的基因测序结果与Gen Bank中发布的PCV1及PCV2序列的同源性均为100%。建立的PCR方法最低可检出10 pg的目的基因;该方法只对PCV1和PCV2基因组DNA能扩增出特异性条带。用该方法检测乙型脑炎减毒活疫苗工作种子批、明胶和胰蛋白酶,均未检出PCV1和PCV2。结论成功建立了乙型脑炎减毒活疫苗中PCV1和PCV2的PCR检测方法,该方法具有较高的灵敏度和较强的特异性,可用于乙型脑炎减毒活疫苗工作种子批及两种猪源性原材料的PCV1和PCV2污染检测。

关键词：乙型脑炎减毒活疫苗猪圆环病毒1型猪圆环病毒2型聚合酶链反应

2016-2022年北京市人源空肠弯曲菌多重耐药及流行特征分析

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首都公共卫生 2024年第1期18卷 55-58页

作者：张新黄瑛田祎霍达吕冰曲梅贾蕾张代涛北京市疾病预防控制中心 100013

目的对2016-2022年北京地区人源空肠弯曲菌流行特征和多重耐药进行分析。方法对2016-2022年肠道门诊的感染性腹泻患者粪便样本进行滤膜驱动法分离培养空肠弯曲菌并采用琼脂稀释法(MIC)进行耐药实验。结果 2016-2022年共检出人源空肠... 详细信息

目的对2016-2022年北京地区人源空肠弯曲菌流行特征和多重耐药进行分析。方法对2016-2022年肠道门诊的感染性腹泻患者粪便样本进行滤膜驱动法分离培养空肠弯曲菌并采用琼脂稀释法(MIC)进行耐药实验。结果 2016-2022年共检出人源空肠弯曲菌614株,检出月份以4-10月为主,占87.46%(537/614),发病年龄集中在20~<40岁,占51.63%(317/614),男、女性别比为1.52∶1。耐药结果显示,614株菌以萘啶酸耐药率最高,为78.99%(485/614),红霉素耐药率最低,为4.89%(30/614)。614株菌有116种耐药谱型,耐三重及以上耐药菌株占65.64%(403/614),耐药谱以耐萘啶酸、环丙沙星、四环素谱型最多,占23.62%(145/614)。结论空肠弯曲菌引起的腹泻逐年增多,多重耐药严重且谱型复杂。

关键词：空肠弯曲菌流行特征多重耐药

人工模拟条件下藏猪猪粪对土壤pH值及重金属影响的研究

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高原农业 2024年第1期8卷 93-100页

作者：郑敏郭冰凌张贿敏康晓茜肖青青王忠斌西藏农牧学院资源与环境学院西藏农牧学院动物科学学院西藏林芝860000

本研究旨在探究藏猪猪粪有机肥施用田间后对土壤中pH值及铜、锌、砷、铬和镉等重金属含量的影响,于个体农户中搜集藏猪猪粪,经厌氧发酵后配制成粪水作为有机肥料,以林芝市巴宜区百巴镇百巴村农田周围土壤作为供试原始土壤,采用模拟试验... 详细信息

本研究旨在探究藏猪猪粪有机肥施用田间后对土壤中pH值及铜、锌、砷、铬和镉等重金属含量的影响,于个体农户中搜集藏猪猪粪,经厌氧发酵后配制成粪水作为有机肥料,以林芝市巴宜区百巴镇百巴村农田周围土壤作为供试原始土壤,采用模拟试验方法,以0 cm、10 cm、20 cm、40 cm、80 cm、150 cm和300 cm处土层土壤为样本,测定施用藏猪猪粪有机肥30 d后土壤中pH值及铜、锌、砷、铬和镉等重金属含量的变化情况。结果表明:施用藏猪猪粪后,土壤pH值显著提高,表明藏猪猪粪对改善土壤pH值,抑制土壤酸化或修复酸化土壤具有良好效果;施用藏猪猪粪后,土壤中铜、锌、砷、镉和铬等重金属元素含量未见有显著变化,表明藏猪猪粪施用于田间对土壤重金属含量无明显影响,藏猪猪粪可以作为有机肥料参与到农业生产活动中。目前关于藏猪猪粪对土壤的影响未见报道,本研究填补了藏猪猪粪对土壤重金属含量影响的研究空白,同时也为西藏地区农牧民在农业生产活动过程中合理利用藏猪猪粪有机肥资源提供了理论依据。

关键词：藏猪猪粪农田土壤土壤重金属

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组诗教学：在创建关联中落实文化自信

小学语文教与学

乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2全基因组序列测定及基因遗传稳定性

小学语文教与学 2024年第5期

作者：梁冰凌

《义务教育语文课程标准（2022年版）》将“文化自信”列于核心素养之首。中华优秀传统文化作为中华民族最深厚的文化软实力，是文化自信的重要来源。古诗文是中华优秀传统文化的精华，在组诗教学中，关注古诗的形式、内容、表达，关注... 详细信息

《义务教育语文课程标准（2022年版）》将“文化自信”列于核心素养之首。中华优秀传统文化作为中华民族最深厚的文化软实力，是文化自信的重要来源。古诗文是中华优秀传统文化的精华，在组诗教学中，关注古诗的形式、内容、表达，关注组诗组合的内在逻辑，在统整关联中逐步推进，理解内涵意蕴，吸收文化光华，厚植文化底蕴。

关键词：组诗教学文化自信文意通连文思串联文法关联

来源：人大复印报刊资料评论

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人大复印报刊资料

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微生物学免疫学进展 2017年第1期45卷 22-26页

作者：黄敏袁良玉吕冰凌潘海龙卓金蓉成都生物制品研究所有限责任公司质量检定室四川成都610023

目的对乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2株进行全基因组序列测定和分析,并观察该生产株在疫苗制备过程中的基因遗传稳定性。方法根据DNA序列数据库(Gen Bank)公布的SA14-14-2株的序列,设计合成7对引物,提取疫苗生产株SA14-14-2及其工... 详细信息

目的对乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2株进行全基因组序列测定和分析,并观察该生产株在疫苗制备过程中的基因遗传稳定性。方法根据DNA序列数据库(Gen Bank)公布的SA14-14-2株的序列,设计合成7对引物,提取疫苗生产株SA14-14-2及其工作种子批生产的3批原液、3批成品疫苗的病毒RNA,通过RT-PCR方法扩增SA14-14-2株的cDNA片段,分别克隆到pGEM-T载体,转化至大肠埃希菌DH5α中,挑取阳性菌落克隆、鉴定后测定全序列并对序列进行比较分析,观察毒株在传代的过程中病毒滴度的稳定性。结果乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2株基因组全长10 976 bp,编码3 433个氨基酸。3批原液和3批成品疫苗的基因组全长为10 977 bp,比较分析发现,在3'端非编码区10 701处多一个G核苷酸的插入。与DNA序列数据库(Genbank)登录号为D90195的全长序列同源性分别是99.9%、99.9%、99.9%、99.9%、99.8%、99.9%、99.8%,其中E蛋白的同源性均为100%。SA14-14-2生产株的病毒滴度为7.22 lg PFU/mL,原液和成品疫苗的滴度分别为7.32、7.23、7.32、6.86、6.92、6.70 lg PFU/mL。结论乙型脑炎减毒活疫苗生产株SA14-14-2基因稳定,具有良好的一致性,为乙型脑炎减毒活疫苗的质量的稳定性提供了可靠依据。

关键词：乙型脑炎减毒活疫苗 SA14-14-2株全基因组序列 E蛋白遗传稳定性

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健与美 2024年第1期 87-87页

作者：吕冰不详

便秘可能增加老痴风险慢性便秘不仅是肠道健康的一个指标,也是思维功能下降的一个潜在警告信号。研究团队选取了三项大型研究的数据,总共包括了超过10万名美国医疗专业人员。在2012~2013年期间,参与者报告了他们的排便习惯,并在2014~201... 详细信息

便秘可能增加老痴风险慢性便秘不仅是肠道健康的一个指标,也是思维功能下降的一个潜在警告信号。研究团队选取了三项大型研究的数据,总共包括了超过10万名美国医疗专业人员。在2012~2013年期间,参与者报告了他们的排便习惯,并在2014~2017年间对自己的认知功能进行了评估。在2014~2018年期间,其中的一组人接受了记忆和思维技能方面的客观测试。结果显示,平均而言,与每天排便1次的人相比,报告有慢性便秘(每周排便不到3次)的人客观测试得分较低。

关键词：慢性便秘医疗专业排便习惯客观测试警告信号思维技能认知功能研究团队

1例BHK21工作细胞库升级为主细胞库的变更管理

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预防医学情报杂志 2017年第3期33卷 201-204页

作者：王红许敬敏罗珊吕冰凌杨锣彭维潘海龙成都生物制品研究所有限责任公司成都610023

目的执行变更控制管理程序规定,将数量少的BHK21工作细胞库升级为主细胞库,将主细胞库传代扩增成新的、数量较多的工作细胞即建立新的工作细胞库。方法菌毒种细胞管理部门质量检定室(QC)提出变更申请,质量营运部(QCM)召集质量符合性讨论... 详细信息

目的执行变更控制管理程序规定,将数量少的BHK21工作细胞库升级为主细胞库,将主细胞库传代扩增成新的、数量较多的工作细胞即建立新的工作细胞库。方法菌毒种细胞管理部门质量检定室(QC)提出变更申请,质量营运部(QCM)召集质量符合性讨论会(QCF)对变更申请进行评估,将该变更分类确认为主要变更,制定变更实施计划、审核、批准,QC按照评估意见逐步实施并形成完善记录,QCF对变更实施结果进行评估,并决定同意变更有效并关闭。结果按照变更控制流程逐步完成各项计划步骤,根据《中国药典》(2010年版三部)检定用细胞的规定要求,对现用BHK21工作细胞库及新建工作细胞库施行细胞鉴别试验、无菌检查、支原体检查、外源病毒污染检查以及病毒敏感性检查,所有项目检定结果符合规定,QC签发检定报告,质量保证部(QA)审核签发合格报告。结论此例BHK21工作细胞库升级为主细胞的变更行动已完成,变更实施达到QCF变更申请评估要求,现用BHK21工作细胞库可升级为主细胞库,新建BHK21工作细胞库可用于乙脑减毒活疫苗(乙脑疫苗)和乙脑病毒SA14-14-2减毒株即乙脑疫苗生产用毒种的质量检定。

关键词： BHK21 工作细胞库主细胞库变更管理

不同细胞进行牛血清中牛源病毒检测的比较试验

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中国兽药杂志 2014年第12期48卷 38-42页

作者：袁良玉黄敏户美玲吕冰凌潘海龙孟丽成都生物制品研究所有限责任公司成都610023 中国生物技术股份有限公司北京100029

对不同细胞进行牛血清中牛源病毒检测的比较实验,选出用于牛血清中病毒检测的最适合外源病毒增殖的细胞,从而提高血清中病毒的检出率,以确保用于疫苗生产的牛血清安全可靠。将牛腹泻病毒、牛腺病毒、牛细小病毒、牛副流感病毒、呼肠孤... 详细信息

对不同细胞进行牛血清中牛源病毒检测的比较实验,选出用于牛血清中病毒检测的最适合外源病毒增殖的细胞,从而提高血清中病毒的检出率,以确保用于疫苗生产的牛血清安全可靠。将牛腹泻病毒、牛腺病毒、牛细小病毒、牛副流感病毒、呼肠孤病毒和狂犬病毒接种到培养好的MDBK细胞、VERO细胞、BT细胞中,逐日观察细胞的病变情况,待观察到10%细胞出现病变或者培养7 d后,进行免疫荧光染色,选出适合用于六种病毒增殖的细胞系。结果显示,BT细胞对所有病毒敏感,VERO细胞对BAV、BVDV病毒不敏感,MDBK对REO、BVDV、RV三种病毒不敏感。综合比较后,选择BT细胞为BPIV、BPV、BAV、BVDV的增殖及实验用细胞,VERO细胞为REO、RV的增殖及实验用细胞。

关键词：细胞病毒增殖

牛血清白蛋白残留量检测试剂盒内部参考品的制备及标定

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国际生物制品学杂志 2019年第4期42卷 189-192页

作者：袁良玉江莉周扬巫涛罗静吕冰凌卓金蓉刘菊成都生物制品研究所有限责任公司质量检定室 610023 成都生物制品研究所有限责任公司总经理办公室 610023 成都生物制品研究所有限责任公司质量管理部 610023

目的制备牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)残留量检测试剂盒的内部参考品,用于考察试剂盒的稳定性.方法首先对乙型脑炎减毒活疫苗生产过程中的3种工作液(病毒稀释液、病毒浸泡液、细胞上清液)进行BSA残留量检测.然后选择BSA含量... 详细信息

目的制备牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)残留量检测试剂盒的内部参考品,用于考察试剂盒的稳定性.方法首先对乙型脑炎减毒活疫苗生产过程中的3种工作液(病毒稀释液、病毒浸泡液、细胞上清液)进行BSA残留量检测.然后选择BSA含量适宜的工作液,适当稀释后制成内部参考品.由2名实验人员同时选取3个不同批号的试剂盒,在不同的日期进行3次检测,对内部参考品进行标定,并根据标定结果确定其赋值范围.分别采用方差分析和t检验对不同批号试剂盒和不同实验人员的检测结果进行比较.标定后连续8个月共20次使用该参考品考察试剂盒的稳定性.结果根据BSA残留量检测结果,选择病毒浸泡液,以疫苗冻干保护剂3倍稀释后制成内部参考品.2名实验人员的108次检测均值为33.46 ng/ml,标准差为2.15 ng/ml,变异系数为6.40%.根据标定结果,确定内部参考品的赋值范围为27.01~39.91 ng/ml.不同批号试剂盒检测结果的差异有统计学意义(F=11.497,P0.05).采用5个批号试剂盒总共对该参考品进行20次检测,BSA残留量均在30.00~36.63 ng/ml范围内,均值为33.14 ng/ml,标准差为1.73 ng/ml,变异系数为5.20%,不同批号试剂盒检测结果的差异无统计学意义(F=0.997,P>0.05).结论制备的BSA残留量检测试剂盒内部参考品可用于试剂盒的稳定性考察.

关键词：血清白蛋白牛参考标准试剂盒日本脑炎疫苗