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作者：吕全省苏州大学

学位级别：硕士

近年来随着肿瘤发病率逐渐增加,癌症患者趋于年轻化,治愈率较低,死亡率较高,肿瘤已经成为人类的一大“杀手”,严重危害人类的健康。从形态上,肿瘤可以分为实体瘤和非实体瘤,前者是一个主要由肿瘤细胞、间质细胞、肿瘤浸润免疫细胞以及... 详细信息

近年来随着肿瘤发病率逐渐增加,癌症患者趋于年轻化,治愈率较低,死亡率较高,肿瘤已经成为人类的一大“杀手”,严重危害人类的健康。从形态上,肿瘤可以分为实体瘤和非实体瘤,前者是一个主要由肿瘤细胞、间质细胞、肿瘤浸润免疫细胞以及供应肿瘤组织营养的血管组成。肿瘤浸润淋巴细胞的数量、功能以及类型决定了机体抗肿瘤免疫应答的效果,并且与患者预后关系极为密切。在肿瘤浸润淋巴细胞中发挥抗肿瘤免疫应答的主要是CD8+T淋巴细胞((cytotoxic lymphocytes,CTLs)和CD4+辅助性T淋巴细胞(Th),尤其是CD8+T淋巴细胞介导的细胞免疫反应是机体抗肿瘤免疫应答的基础。复杂的肿瘤微环境(tumor microenvironment)会造成肿瘤局部的免疫抑制,使肿瘤浸润的CD8+CTLs和CD4+Th1细胞处于一种功能耗竭或无能状态,无法对肿瘤进行免疫监视和清除。因此,寻找一种可以改变肿瘤微环境免疫抑制状态,提高机体自身免疫力,再次激活肿瘤浸润的淋巴细胞(tumorinfiltrating lymphocytes,TILs)或逆转其功能耗竭状态的新的分子和方法,已经成为抗肿瘤免疫治疗研究的一大热点。白细胞介素33(IL-33)于1999年首次被Onda H和其同事所发现并命名为DVS27,主要表达在犬脑血管痉挛细胞,分子量为30 k Da的蛋白。四年后,发现其相应的基因高表达在微静脉高内皮细胞核内,将该分子称为“高内皮微静脉核因子(NF-HEV)。2005年,Schmitz等人用计算机分析比较IL-1家族序列时,发现并证实IL-33(NF-HEV)是一个新的IL-1家族成员。IL-33与IL-1家族成员IL-1b和IL-18相似,人的IL-33基因位于人9号染色体(9q24.1)上。随后发现,IL-33是孤儿受体ST2(IL-1R-like-1)的功能性配体。其受体ST2选择性地表达在巨噬细胞、肥大细胞和Th2型细胞表面。最近研究发现,ST2也表达于Th1细胞。IL-33可以通过其受体ST2促进Th1型免疫应答并且可以影响病毒抗原特异性CD8+T淋巴细胞的功能。也有文献报道IL-33是一个可以促进小鼠Th1型和CD8+T淋巴细胞免疫应答的新型细胞因子,在介导抗肿瘤和抗慢性病毒感染的免疫应答过程中起重要的保护作用。但是IL-33在机体抗肿瘤免疫应答过程中的确切机制尚不明了。本实验室前期研究发现,IL-33及其受体ST2在人的多种肿瘤组织中低表达。另外,IL-33可以协同T细胞受体(T cell receptor,TCR)和白细胞介素12(IL-12)信号,刺激活化体外培养的小鼠T淋巴细胞,促进小鼠CD8+T细胞的效应功能。但对于其在抗肿瘤免疫应答作用和机制的研究还不透彻,而CD8+T淋巴细胞又是机体抗肿瘤免疫应答的关键和基础。因此,本课题首先探讨IL-33是否能直接作用于体外培养的人CD8+T淋巴细胞,增强其效应功能,继而构建荷瘤小鼠模型,探讨IL-33联合肿瘤疫苗对肿瘤的生长和转移的影响,以期为IL-33在肿瘤免疫治疗的潜在转化应用提供新的方法和理论依据。第一部分IL-33增强体外培养的人CD8+T淋巴细胞活化,并促进细胞因子的分泌【目的】探讨人白细胞介素IL-33(r IL-33)是否能够直接作于人CD8+T淋巴细胞,增强体外培养的人CD8+T淋巴细胞活化和效应功能,促进细胞因子分泌,为IL-33/ST2信号途径在肿瘤免疫治疗的潜在的临床转化应用提供一定的理论基础和依据。【方法】首先用密度梯度离心法从健康人外周血中分离出外周血单个核细胞(PBMCs),再用免疫磁珠阳性富集纯化CD8+T淋巴细胞,分别用CD3单克隆抗体(m Ab)(50ng/ml+CD28 m Ab(200ng/ml);CD3 m Ab(50ng/ml)+CD28m Ab(200ng/ml)+IL-12(10ng/ml);CD3 m Ab(50ng/ml)+CD28 m Ab(200ng/ml)+IL-33(30ng/ml);CD3 m Ab(50ng/ml)+CD28 m Ab(200ng/ml)+IL-12(10ng/ml)+IL-33(30ng/ml),四种细胞因子组合刺激培养,24h和72h后收集细胞。采用免疫荧光标记,流式细胞术检测分选的CD8+T淋巴细胞纯度以及IFN-γ、IL-33受体ST2、CD107a等分子的表达;采用realtime PC R(q RT-PCR)检测各组细胞的γ干扰素(IFN-γ)、颗粒酶B(granzyme B)、IL-21、IL-10、TIM-3、TNF-α、ST2、CCL20等分子m RNA水平表达。运用Cytometric Bead Array(CBA)试剂盒,流式细胞术检测24h、72h细胞培养上清中细胞因子IFN-γ

关键词：白细胞介素-33(IL-33) IL-12 ST2 IFN-γ CD8+T淋巴细胞肿瘤免疫

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回顾分析COBE-Spectra血细胞分离机对健康供体中性粒细胞分离富集的效果以及影响因素

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2021年第10期 1-3页

作者：吕全省苏州大学附属第一医院血液科江苏苏州215006

回顾分析用COBE-Spectra血细胞分离机对119例健康供体中性粒细胞分离富集的效果以及影响因素。方法:选择2018年3月至今,在本院进行供体中性粒细胞采集的119例供体为研究对象。用COBE-Spectra血细胞分离机和相应的WBC-PMN程序,对供体进... 详细信息

回顾分析用COBE-Spectra血细胞分离机对119例健康供体中性粒细胞分离富集的效果以及影响因素。方法:选择2018年3月至今,在本院进行供体中性粒细胞采集的119例供体为研究对象。用COBE-Spectra血细胞分离机和相应的WBC-PMN程序,对供体进行中性粒细胞分离富集,分析粒细胞采集效果以及影响因素。结果:男性供体外周血红细胞比积(HCT)明显高于女性供体外周HCT,差异具有统计学意义(P<0.0001);男性供体富集的中性粒细胞终产品细胞含量以及中性粒细胞终产品浓度均高于女性供体,差异具有统计学意义(P=0.006,P=0.026);单因素线性回归分析健康供体中性粒细胞富集效果,终产品细胞含量与供体外周血白细胞WBC呈正相关关系( r2=0.3877,P<0.0001),也与供体外周血中性粒细胞数量呈正相关(r2=0.339,P<0.0001);并且富集的终产品细胞浓度与供体外周血白细胞WBC呈正相关关系(r2=0.374,P<0.0001),也与供体外周血中性粒细胞数量呈正相关(r2=0.3591,P<0.0001);动员后的供体中性粒细胞富集效果明显优于非动员供体(P<0.0001)。结论:男性供体粒细胞富集效果明显优于女性供体,G-SCF动员供体优于非动员供体,供体粒细胞富集效果与供体外周血白细胞和中性粒细胞数量成正相关。

关键词： COBE-Spectra血细胞分离机健康供体中性粒细胞富集

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IL-33增强体外培养的外周血单个核细胞细胞因子的分泌以及杀伤功能

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第9期31卷 1246-1250页

作者：李晓晨吕全省夏瑞古彦铮高腾飞虞培娟张学光朱一蓓苏州大学医学部基础医学与生命科学学院江苏苏州215123

目的探讨白细胞介素33(IL-33)是否能在体外增强外周血单个核细胞(PBMC)分泌细胞因子和杀伤功能。方法常规分离培养健康人PBMC,分别经CD3单克隆抗体(m Ab)/CD28mAb/IL-2、CD3mAb/CD28mAb/IL-2/IL-12、CD3mAb/CD28m Ab/IL-2/IL-12/IL-33三种组合刺激培养72 h,收集细胞。经实时定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞γ干扰素(IFN-γ)、颗粒酶B(granzyme B)mRNA的水平;CCK-8法检测各组细胞对A549人肺腺癌细胞的杀伤活性;采用流式细胞术分析各组细胞IFN-γ、程序性死亡蛋白1(PD-1)的水平。结果各组因子组合刺激的PBMC,形态无明显差异;qRT-PCR检测发现,IL-33刺激组的PBMC中IFN-γ、granzyme B mRNA的水平升高;IL-33刺激组的PBMC对A549的杀伤能力更强;IL-33刺激组的PBMC中CD3+CD8+细胞亚群IFN-γ的水平升高、PD-1的水平降低。结论 IL-33能够在体外增强PBMC的效应功能。

关键词：白细胞介素33(IL-33) 外周血单个核细胞 γ干扰素肿瘤免疫

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G及GM试验在急性白血病合并侵袭性真菌病中的诊断价值

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中国实验血液学杂志 2019年第5期27卷 1678-1681页

作者：钱柯羽吕全省戴丽君常惠荣吴德沛孙爱宁苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

目的:分析G及GM试验在急性白血病患者合并侵袭性真菌病中的诊断效能,及其与CT在侵袭性真菌病早期诊断中的应用。方法:本院血液科2016年下半年急性白血病患者怀疑侵袭性真菌病(IFD)行G及GM试验检测的病人共493例。根据IFD的诊断标准,将... 详细信息

目的:分析G及GM试验在急性白血病患者合并侵袭性真菌病中的诊断效能,及其与CT在侵袭性真菌病早期诊断中的应用。方法:本院血液科2016年下半年急性白血病患者怀疑侵袭性真菌病(IFD)行G及GM试验检测的病人共493例。根据IFD的诊断标准,将患者分为:IFD确定组(包括确诊及临床诊断IFD,62例),IFD未确定组(包括拟诊及非IFD,431例)。分析2组患者G及GM试验结果,并评价二者单独及联合诊断的诊断效能。此外,从病例中筛选入院时肺部CT结果阴性,在住院过程中CT显示肺部有改变及血清学检测结果显示阳性的患者26例,比较血清学检测阳性结果与CT显示肺部改变的时间差异。结果:G试验在IFD确定组和IFD未确定组中的阳性率分别是56.5%和10.4%;GM试验在2组中的阳性率分别是41.9%和9.0%。G试验的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别是56%、90%、44%、92%;GM试验分别是42%、91%、40%、93%,并且二者联合诊断的灵敏度和特异度可分别提高到69%和98%。血清学检测(G/GM试验)阳性结果比肺部CT改变早出现大约5 d。结论:G及GM试验有较高的灵敏度和特异度,且两者联合使用能提高诊断效能,更准确地指导临床抗真菌治疗用药。在早期临床诊断IFD上,血清学检测阳性结果比CT显示肺部改变出现较早。

关键词： G试验 GM试验侵袭性真菌病 CT 急性白血病

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细胞因子IL-33促进体外培养CD8+T细胞的效应功能

细胞因子IL-33促进体外培养CD8+T细胞的效应功能

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中华医学会2014全国微生物学与免疫学学术年会

作者：朱一蓓李晓晨夏瑞吕全省文雯苏州大学

目的 IL-33是2005年发现的IL-1家族的第11个成员,IL-33的受体是ST2及lL-1受体辅助蛋白组成的二聚体。IL-33被认为是组织损伤及感染的一个预警信号,主要参与Th2型免疫应答、炎症及多种病理过程,而其在抗肿瘤免疫应答中的作用尚不明了。Th...

目的 IL-33是2005年发现的IL-1家族的第11个成员,IL-33的受体是ST2及lL-1受体辅助蛋白组成的二聚体。IL-33被认为是组织损伤及感染的一个预警信号,主要参与Th2型免疫应答、炎症及多种病理过程,而其在抗肿瘤免疫应答中的作用尚不明了。Th1、CD8T、NK、NKT、和γδT细胞介导的Ⅰ型免疫应答是抗肿瘤免疫应答的关键。本研究旨在探讨IL-33是否能在体外增强CD8r细胞的效应功能,以期为IL-33信号途径运用于肿瘤免疫治疗的临床转化研究奠定基础。

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毛泽东关于党的自我革命思想及其新时代价值

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渭南师范学院学报 2024年第4期39卷 1-9页

作者：张全省宝鸡文理学院马克思主义学院陕西宝鸡721016

在领导中国革命斗争过程中,毛泽东以无产阶级革命家的胆略和勇气,敢于直面党内存在的缺点和问题。他强调通过严肃有效的党内思想教育,坚定党员理想信念;通过积极的党内斗争,解决党内矛盾;通过开展党内批评,克服各种错误思想倾向,实现党... 详细信息

在领导中国革命斗争过程中,毛泽东以无产阶级革命家的胆略和勇气,敢于直面党内存在的缺点和问题。他强调通过严肃有效的党内思想教育,坚定党员理想信念;通过积极的党内斗争,解决党内矛盾;通过开展党内批评,克服各种错误思想倾向,实现党员的思想和党内生活政治化、科学化,保持党的纯洁,巩固党的团结,形成了关于党的自我革命的重要思想。虽然没有提出“自我革命”的概念,但毛泽东是中国共产党自我革命思想的奠基人。在党领导人民进行“坚持和发展中国特色社会主义”这一伟大社会革命的新时代,习近平总书记重温和高度肯定毛泽东关于中国共产党勇于自我革命的思想和传统,强调我们共产党人要有正视问题的自觉和刀刃向内的勇气,“牢记初心使命,推进自我革命”,永葆党的纯洁性先进性。学习研究毛泽东关于党的自我革命的重要思想,对切实贯彻党的二十大精神,按照习近平总书记的要求,推进党的自我革命和新时代全面从严治党向纵深发展,实现兴党强党目标,把党建设成始终走在时代前列、人民衷心拥护的马克思主义先进政党,带领人民以中国式现代化全面推进中华民族伟大复兴,具有十分重要的时代价值和现实启示。

关键词：毛泽东党的自我革命新时代价值

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野香优航148在安溪县种植表现及栽培技术

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福建稻麦科技 2024年第2期42卷 39-41页

作者：肖全省福建省安溪县良种繁殖场福建泉州362400

野香优航148是福建省农业科学院水稻研究所利用香型三系不育系野香A与抗稻瘟病恢复系航148配组育成的优质高产香型杂交晚稻品种,2017年通过福建省农作物品种审定。2021年引进安溪县种植,表现长势繁茂、丰产性好、群体整齐、适应性广、... 详细信息

野香优航148是福建省农业科学院水稻研究所利用香型三系不育系野香A与抗稻瘟病恢复系航148配组育成的优质高产香型杂交晚稻品种,2017年通过福建省农作物品种审定。2021年引进安溪县种植,表现长势繁茂、丰产性好、群体整齐、适应性广、抗病性强、米质优等特点。总结了野香优航148在安溪县作晚稻种植表现及栽培技术。

关键词：香型杂交稻野香优航148 种植表现栽培技术

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基因转染表达小鼠白细胞介素-33及其抗肿瘤机制研究

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中华实验外科杂志 2015年第1期32卷 60-62页

作者：文雯吕全省李刚高鑫张学光蒋敬庭王雪峰朱一蓓卢斌峰苏州大学医学部基础医学与生物科学学院 215123 苏州大学附属第一医院苏州大学附属第三医院

目的建立分泌小鼠白细胞介素-33（IL-33）的基因转染细胞株,分析其特性并探讨IL-33在肿瘤微环境中的抗肿瘤作用.方法构建含有人CD8信号肽基因序列的IL-33融合基因,经BamH I和EcoR I双酶切后插入pCDEF3真核表达载体构建成为pCDEF3-IL-3... 详细信息

目的建立分泌小鼠白细胞介素-33（IL-33）的基因转染细胞株,分析其特性并探讨IL-33在肿瘤微环境中的抗肿瘤作用.方法构建含有人CD8信号肽基因序列的IL-33融合基因,经BamH I和EcoR I双酶切后插入pCDEF3真核表达载体构建成为pCDEF3-IL-33重组子,采用脂质体法以重组质粒pCDEF3-IL-33和空质粒pCDEF3分别转染小鼠乳腺癌细胞株4T1,经G418长期加压筛选后,使用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测基因转染细胞株培养上清中小鼠IL-33的分泌和IL-33体外对效应性CD8^＋T细胞干扰素（IFN）-γ的分泌;活细胞计数和羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）掺入法检测基因转染细胞生长与增殖的均一性.结果基因转染细胞4T1-pCDEF3-IL-33能稳定分泌小鼠IL-33分子,其培养上清中的表达量为28 μg/L;与4T1及转染了空质粒pCDEF3的4T1-vec比较,其生长和增殖差异无统计学意义（P＞0.05）;体外刺激试验表明,IL-33能显著地促进效应性CD8^＋T细胞分泌IFN-γ,对照组为125 μg/L,实验组为300μg/L,差异有统计学意义（P＜0.05）;体内实验研究表明,分泌于肿瘤微环境中的IL-33能显著抑制肿瘤的生长和转移,第30天时肿瘤直径对照组为（18.0±2.5） mm,实验组为（6.5±0.9）mm,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论建立了稳定分泌小鼠IL-33的基因转染细胞株,微环境中的IL-33对肿瘤具有显著的抑制作用.

关键词：白细胞介素-33 肿瘤微环境效应性CD8^+T细胞干扰素肿瘤生长与转移

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IL-36γ促进人CD8^+T淋巴细胞细胞因子的分泌

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江苏大学学报（医学版） 2016年第3期26卷 193-198页

作者：吕全省马静姝古彦铮王雪峰王明元张学光朱一蓓卢斌峰苏州大学基础医学与生命科学学院江苏苏州215123 苏州大学附属第一医院临床免疫研究所江苏苏州215006 苏州市中心血站输血研究室江苏苏州215006

目的:探讨白细胞介素36γ(IL-36γ)是否能够增强体外培养的人CD8+T淋巴细胞分泌γ干扰素。方法:经密度梯度离心法从健康人外周血分离获得外周血单个核细胞(PBMC),经磁珠阳性选择富集纯化CD8^+T淋巴细胞,分别用CD3单克隆抗体(m Ab)+CD28 ... 详细信息

目的:探讨白细胞介素36γ(IL-36γ)是否能够增强体外培养的人CD8+T淋巴细胞分泌γ干扰素。方法:经密度梯度离心法从健康人外周血分离获得外周血单个核细胞(PBMC),经磁珠阳性选择富集纯化CD8^+T淋巴细胞,分别用CD3单克隆抗体(m Ab)+CD28 m Ab,CD3 mAb+CD28 mAb+IL-12,CD3 mAb+CD28 mAb+IL-36γ以及CD3m Ab+CD28 m Ab+IL-12+IL-36γ4种因子组合刺激培养24 h和72 h。收集细胞,采用免疫荧光标记和流式细胞术分析分选富集的CD8^+T淋巴细胞纯度以及γ干扰素的表达;采用实时PCR检测各组细胞IL-36受体(IL-36R)、γ干扰素和颗粒酶B mRNA的表达。结果:人CD8+T淋巴细胞表达IL-36R;各组因子刺激的人CD8^+T淋巴细胞形态没有明显差异;人CD8^+T淋巴细胞经IL-36γ刺激后,γ干扰素、颗粒酶B mRNA表达上调;同时,IL-36γ和IL-12具有协同刺激CD8+T淋巴细胞的作用。结论:IL-36γ能促进体外培养的人CD8^+T淋巴细胞分泌细胞因子,并且与IL-12具有协同作用。

关键词：白细胞介素36γ CD8+T淋巴细胞 γ干扰素颗粒酶B

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创伤性膝骨关节炎患者血清CX3CL1、Apelin-13与炎症指标的相关性及预后价值

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国际检验医学杂志 2024年第9期45卷 1126-1130页

作者：吕新凯李光磊段强民王宝鹏张平孙全省张冰山东省淄博市临淄区人民医院骨科一病区山东淄博255400

目的探索创伤性膝骨关节炎(PTOA)患者血清趋化因子CX3CL1及脂肪细胞因子-13(Apelin-13)的表达水平,并分析二者与炎症指标的相关性及预后价值。方法选取2020年1月至2022年2月在该院确诊的65例PTOA患者作为试验组,选取同期来该院体检的5... 详细信息

目的探索创伤性膝骨关节炎(PTOA)患者血清趋化因子CX3CL1及脂肪细胞因子-13(Apelin-13)的表达水平,并分析二者与炎症指标的相关性及预后价值。方法选取2020年1月至2022年2月在该院确诊的65例PTOA患者作为试验组,选取同期来该院体检的55例体检健康者作为对照组。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清CX3CL1与Apelin-13的表达水平。Pearson法相关性分析血清CX3CL1与Apelin-13与炎症指标的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析CX3CL1与Apelin-13对PTOA患者预后的诊断价值。多因素Logistic回归分析PTOA患者预后不良的影响因素。结果与对照组相比,试验组中白细胞介素-6(IL-6)、瘦素、降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hsCRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CX3CL1的表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),Apelin-13的表达水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson法相关性分析显示,CX3CL1与IL-6、瘦素、TNF-α呈正相关(r=0.528、0.602、0.511,P<0.001)。Apelin-13与IL-6呈负相关(r=-0.541,P<0.001);多因素Logistic回归分析显示IL-6、瘦素、TNF-α、CX3CL1与Apelin-13是PTOA患者预后不良的影响因素(P<0.05);ROC曲线下面积(AUC)分析显示,与血清CX3CL1和Apelin-13单独指标相比,CX3CL1联合Apelin-13预测预后不良的AUC更大(Z_(联合)-CX3CL1=2.010,P=0.044;Z_(联合)-Apelin-13=2.091,P=0.036)。结论 PTOA患者血清CX3CL1表达水平显著升高,Apelin-13表达水平显著降低,CX3CL1与Apelin-13是PTOA预后不良的影响因素,二者联合检测对于PTOA的预后提供帮助。

关键词：创伤性膝骨关节炎 CX3CL1 脂肪细胞因子-13 预后

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