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人直肠癌组织匀浆上清对树突状细胞的内皮化影响

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人直肠癌组织匀浆上清对树突状细胞的内皮化影响

作者：吕丰收郑州大学

学位级别：硕士

研究背景树突状细胞(dendritic cell，DC)是目前所知的机体内功能最强的专职性抗原提呈细胞，是机体细胞免疫反应的始动者，在肿瘤免疫应答的诱导中具有独特的地位。而在体内，肿瘤组织通过分泌抑制性细胞因子营造特殊的微环境来影响树... 详细信息

研究背景树突状细胞(dendritic cell，DC)是目前所知的机体内功能最强的专职性抗原提呈细胞，是机体细胞免疫反应的始动者，在肿瘤免疫应答的诱导中具有独特的地位。而在体内，肿瘤组织通过分泌抑制性细胞因子营造特殊的微环境来影响树突状细胞的功能，从而逃脱机体的免疫监视。探讨肿瘤环境下树突状细胞的功能及作用将是一个新的研究热点。最近George Coukos等研究发现，肿瘤浸润树突状细胞前体在VEGF-A的影响下，发生内皮细胞化，参与了肿瘤微血管的形成，从而促进了肿瘤的生长、扩散、转移。研究目的本实验研究直肠癌肿瘤微环境对DC的功能和细胞表型的影响，在体外利用直肠癌匀浆上清液作为人外周血来源的DC培养的诱导分化剂，来观察DC内皮化等表型变化的现象，探讨肿瘤血管发生的新机制，为肿瘤治疗提供一种新的治疗靶点和治疗思路。实验方法1．免疫组化检测肿瘤微血管处S-100蛋白的表达免疫组化SABC法对10例直肠癌及癌旁组织切片进行检测，来观察肿瘤组织微血管壁及微血管旁有无S-100蛋白的表达，因S-100蛋白可作为树突状细胞的一种特异性标记分子，可以间接推测肿瘤环境中DCs是否参与了肿瘤微血管的形成。***检测匀浆上清液VEGF-A的含量将肿瘤组织200mg：1ml生理盐水的比例制成肿瘤组织匀浆，用ELISA方法检测癌及癌旁匀浆上清中VEGF-A活性因子含量的差异。3．直肠癌匀浆上清对树突状细胞表型的影响从外周血来源的单核细胞来培养树突状细胞，在DC发育的早期加入匀浆上清诱导其内皮化。树突状细胞在培养至第7d前，可视为未成熟状态。因此设第3d癌上清加入组，第3d癌旁上清加入组;第7d癌上清加入组，第7d癌旁上清加入组;并设未加上清的正常培养组作对照。4．流式细胞学检测培养细胞CD1a/CD31,CD1a/CD34双阳性的表达FACS Calibar检测，Cellquest分析软件分析检测结果。5．免疫细胞化学检测培养细胞vWF的表达对培养细胞进行单细胞悬液涂片，观察内皮性标记分子vWF的表达情况。6．统计分析采用SPSS10.0统计软件包进行统计学分析，计量资料用(?)±s表示;两组之间比较采用t检验;两组以上均数的比较采用单因素方差分析(ANVOA);以α=0.05为检验水准。实验结果1、S-100蛋白的表达肿瘤微血管旁和血管壁可发现S-100蛋白的表达，但数量较少，未进行统计学处理。2、ELISA检测匀浆上清VEGF-A含量癌及癌旁匀浆上清液里活性因子测定显示，与癌旁匀浆上清相比，癌上清里活性因子VEGF-A的浓度明显高于对照组，两组之间的差异具有显著性(P＜0.05)。3、CD31，CD34、CD1a等标记分子的动态表达情况未加入肿瘤匀浆上清液的正常培养的树突状细胞，动态观察第1d、3d、7d、10d、14d时CD31，CD34，CD1a等标记分子的表达水平，结果显示：CD31和CD34随培养时间延长表达逐渐下降，CD1a在1-7d过程中表达逐渐升高，7-14d过程中表达则变化不大。4、匀浆上清对DC内皮化的诱导效应第3d加入各组间比较显示：癌上清及癌旁上清组CD1a/CD31、CD1a/CD34双阳性的表达率均高于正常对照组，且差异具有显著性(p＜0.05);第7d加入各组间比较显示：癌上清及癌旁上清组的CD1a/CD31、CD1a/CD34双阳性的表达率也高于正常对照组，且差异具有显著性(p＜0.05);第3d加入各组CD1a/CD31，CD1a/CD34双阳性表达率均高于其相对应的第7d加入的各组，且差异具有显著性(p＜0.05)。癌上清组CD1a/CD31，CD1a/CD34双阳性表达率略高于癌旁上清组相比，但差异不显著(p＞0.05)。5、培养细胞vWF的表达癌上清组和癌旁上清组培养细胞开始表达vWF内皮性标记分子，与正常组相比，差异具有显著性(p＜0.05)，癌与癌旁上清组相比，差异不显著(p＞0.05)。实验结论1、在直肠癌肿瘤微血管壁及血管旁均发现DC的出现，说明肿瘤组织浸润的未成熟状态的树突状细胞一部分趋化到肿瘤微血管处。2、癌匀浆上清中活性因子VEGF-A的浓度明显高于癌旁上清。3、癌及癌旁

关键词：匀浆上清树突状细胞内皮化

黄芪多糖干预多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞的变化

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中国组织工程研究 2016年第10期20卷 1396-1401页

作者：杨景柯吕丰收韩立郑州大学附属肿瘤医院血液科河南省郑州市450003 河南医学高等专科学校病理学教研室河南省郑州市451191 南阳理工学院张仲景国医学院河南省南阳市473004

背景:骨髓间充质干细胞可通过产生多种细胞因子,可以为骨髓瘤细胞的生长增殖提供一定的支持。目的:探讨黄芪多糖对多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞增殖情况以及细胞因子分泌情况的影响。方法:取正常人与多发性骨髓瘤患者骨髓,通过密... 详细信息

背景:骨髓间充质干细胞可通过产生多种细胞因子,可以为骨髓瘤细胞的生长增殖提供一定的支持。目的:探讨黄芪多糖对多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞增殖情况以及细胞因子分泌情况的影响。方法:取正常人与多发性骨髓瘤患者骨髓,通过密度梯度离心法分离得到骨髓间充质干细胞,行传代培养及鉴定。收集第3代骨髓间充质干细胞,使用酶标仪法描绘出生长曲线。使用MTT法及流式细胞术分别检测不同质量浓度(0.5,1,2,4,6,8 g/L)黄芪多糖对骨髓间充质干细胞增殖及细胞周期的影响。使用ELISA法检测细胞中白细胞介素1β和白细胞介素6的表达水平。结果与结论:(1)正常人与多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞均呈现出CD34阴性和CD44阳性表达,表明所获得的是骨髓间充质干细胞;(2)正常人骨髓间充质干细胞倍增时间显著短于多发性骨髓瘤患者的骨髓间充质干细胞;(3)当黄芪多糖干预的质量浓度为1和2 g/L时,多发性骨髓瘤组的细胞增殖率显著高于正常对照组;质量浓度为6和8 g/L时,细胞增殖率显著低于正常对照组;(4)与1 g/L黄芪多糖干预的正常人骨髓间充质干细胞相比,1 g/L黄芪多糖干预的多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞的G_0/G_1期所占比例较少,S期和G_2/M期所占比例增加;(5)多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞的白细胞介素1β和白细胞介素6水平均显著高于正常人;(6)经0.5,1和2 g/L黄芪多糖干预后,多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞中的白细胞介素1β和白细胞介素6水平显著下降;(7)结果表明,一定质量浓度的黄芪多糖可以促进多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞的增殖及白细胞介素1β和白细胞介素6水平的下降。

关键词：干细胞骨髓干细胞多发性骨髓瘤骨髓间充质干细胞黄芪多糖细胞增殖细胞周期细胞因子

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奶牛霉变饲料中毒的诊治

天津畜牧兽医 1997年第1期14卷 33-34页

作者：吕丰收天津市军粮城渤海石油基地奶牛场

奶牛霉变饲料中毒的诊治吕丰收（天津市军粮城渤海石油基地奶牛场３００３０１）我场奶牛饲喂霉变饲料（豆饼、豆腐渣）出现中毒现象，共发病１１头。但由于饲喂量小没有发生死亡。１发病原因１．１购进豆饼１２ｔ，卸车后码垛堆放于１... 详细信息

奶牛霉变饲料中毒的诊治吕丰收（天津市军粮城渤海石油基地奶牛场３００３０１）我场奶牛饲喂霉变饲料（豆饼、豆腐渣）出现中毒现象，共发病１１头。但由于饲喂量小没有发生死亡。１发病原因１．１购进豆饼１２ｔ，卸车后码垛堆放于１５ｍ２的仓库。３０ｄ后，粉碎堆存在...

关键词：牛病乳牛霉变饲料饲料中毒诊断治疗

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高职高专院校青年教师培养现状分析

河南职工医学院学报 2013年第3期25卷 358-359页

作者：吕丰收河南卫生职工学院病理学教研室郑州451191

高职高专教育的办学规模迅速扩大,高职高专教师的招聘数量和培养要求也随之提高,该文以当前高职高专院校青年教师招聘与培养工作中存在的主要问题进行具体分析,依据高职高专教育的发展定位和师资队伍建设目标,从合理确定学历层次、制定... 详细信息

高职高专教育的办学规模迅速扩大,高职高专教师的招聘数量和培养要求也随之提高,该文以当前高职高专院校青年教师招聘与培养工作中存在的主要问题进行具体分析,依据高职高专教育的发展定位和师资队伍建设目标,从合理确定学历层次、制定科学招聘计划和招聘程序,坚守招聘原则、加强培养和使用管理等方面提出改善建议和对策。

关键词：高职高专院校青年教师招聘与培养

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论新时期下高校教师的爱与责任

河南职工医学院学报 2012年第5期24卷 691-692页

作者：吕丰收文帅河南卫生职工学院病理教研室郑州451191 河南卫生职工学院教务处郑州451191

社会体制由计划经济转向市场经济,很多行业都面临着巨大的冲击,高等教育事业也不例外。高校作为思想道德教育重要的宣教阵地,新时代下高校教师的师德如何,师爱和责任感怎样,显得尤为重要。

关键词：高校教师师德责任

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浅议高校青年教师的职业感

河南职工医学院学报 2011年第6期23卷 773-774页

作者：吕丰收王黎河南职工医学院病理学教研室河南职工医学院教务处郑州451191

对于每一个职场人士而言,职业感非常重要,因为只有从心底里认同并喜欢所从事的职业,才可能全身心投入。教师,因为育人功能的特殊性,其职业感显得尤为重要。随着高校的扩招,精英教育向大众化教育的过渡,青年教师所占的比重急剧上升,青年... 详细信息

对于每一个职场人士而言,职业感非常重要,因为只有从心底里认同并喜欢所从事的职业,才可能全身心投入。教师,因为育人功能的特殊性,其职业感显得尤为重要。随着高校的扩招,精英教育向大众化教育的过渡,青年教师所占的比重急剧上升,青年教师正在成为高校教书育人和精神文明建设的主力军。

关键词：高校青年教师职业感

丁基苯酞软胶囊联合长春西汀治疗后循环缺血眩晕120例分析

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中国实用神经疾病杂志 2012年第15期15卷 62-63页

作者：韩卓娅吕丰收郑州人民医院神经内科郑州450003 河南职工医学院病理学教研室郑州451191

目的观察丁基苯酞软胶囊联合长春西汀治疗后循环缺血眩晕的疗效。方法将120例患者随机分为治疗组(60例)和对照组(60例)。治疗组给予丁苯酞软胶囊200mg口服,3次/d;长春西汀注射液20mg加入0.9%氯化钠注射液250mL静滴,1次/d;对照组给予长... 详细信息

目的观察丁基苯酞软胶囊联合长春西汀治疗后循环缺血眩晕的疗效。方法将120例患者随机分为治疗组(60例)和对照组(60例)。治疗组给予丁苯酞软胶囊200mg口服,3次/d;长春西汀注射液20mg加入0.9%氯化钠注射液250mL静滴,1次/d;对照组给予长春西汀注射液20mg加入0.9%氯化钠注射液250mL静滴,1次/d,疗程均为14d。结果治疗组总有效率95.0%,高于对照组的76.7%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后血流动力学较治疗前及对照组治疗后差异均有统计学意义(P<0.05)。结论丁基苯酞软胶囊和长春西汀具有协同作用,联合应用优于单用长春西汀,且疗效显著,安全可靠。

关键词：丁苯苯酞长春西汀后循环缺血眩晕

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中青年脑梗死与脑出血临床对比分析

中国实用神经疾病杂志 2012年第13期15卷 33-34页

作者：韩卓娅吕丰收郑州人民医院神经内科郑州450003 河南职工医学院病理学教研室郑州450000

目的探讨中青年脑梗死与脑出血的病因、危险因素、临床特点的异同,为中青年脑血管疾病的防治提供理论依据。方法回顾性分析中青年脑梗死130例与108例青年脑出血患者临床资料。结果 (1)中青年脑梗死以动脉粥样硬化、高血压、血管炎为主... 详细信息

目的探讨中青年脑梗死与脑出血的病因、危险因素、临床特点的异同,为中青年脑血管疾病的防治提供理论依据。方法回顾性分析中青年脑梗死130例与108例青年脑出血患者临床资料。结果 (1)中青年脑梗死以动脉粥样硬化、高血压、血管炎为主要病因,分别占36.9%、21.5%、20.8%;中青年脑出血以高血压、脑血管畸形、动脉粥样硬化为主要病因,分别占32.4%、24.1%、16.7%。(2)2组病人的病变部位均以基底节区和脑叶最常见,其次为脑干、丘脑。结论中青年脑梗死与脑出血的病因差异显著;中青年脑梗死与脑出血危险因素相同;中青年脑梗死临床治疗和预后较脑出血好。

关键词：中青年脑梗死脑出血病因危险因素

急性脑梗死与血清同型半胱氨酸水平的相关性探讨

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中国实用神经疾病杂志 2012年第17期15卷 39-40页

作者：韩卓娅吕丰收郑州人民医院神经内科郑州450003 河南职工医学院病理学教研室郑州451191

研究均证明高同型半胱氨酸血症会增加心血管病的发生率和病死率,高同型半胱氨酸血症作为心脑血管损害的重要危险因素已经被广泛接受,但对于脑梗死患者急性期血清同型半胱氨酸水平与脑梗死的相关性研究较少。本研究旨在探讨血同型半胱氨... 详细信息

研究均证明高同型半胱氨酸血症会增加心血管病的发生率和病死率,高同型半胱氨酸血症作为心脑血管损害的重要危险因素已经被广泛接受,但对于脑梗死患者急性期血清同型半胱氨酸水平与脑梗死的相关性研究较少。本研究旨在探讨血同型半胱氨酸水平与急性期脑梗死是否具有相关性,并初步探讨其可能机制。

关键词：脑梗死血清同型半胱氨酸