检索结果-南通市图书馆

重组腺病毒IκBαM在人肝癌细胞HepG_2中的表达及对NF-κB活性的抑制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 2003年第13期83卷 1156-1160页

作者：向明确黄爱龙唐霓肖彧君闫歌 Tong-Chuan He 400010 重庆医科大学病毒性肝炎研究所美国芝加哥大学分子肿瘤室

目的　检测重组腺病毒IκBαM (AdIκBαM)在肝癌细胞HepG2 中的表达及TNF α诱导下IκBαM变化情况 ,并观察此超级抑制物对NF κB活性的抑制作用。方法　利用GFP及有限稀释法测定病毒滴度和感染靶细胞的效率 ,Western印迹法检测 2 93... 详细信息

目的　检测重组腺病毒IκBαM (AdIκBαM)在肝癌细胞HepG2 中的表达及TNF α诱导下IκBαM变化情况 ,并观察此超级抑制物对NF κB活性的抑制作用。方法　利用GFP及有限稀释法测定病毒滴度和感染靶细胞的效率 ,Western印迹法检测 2 93细胞和HepG2 中重组腺病毒介导IκBαM的表达及TNF α诱导下IκBαM变化情况 ,EMSA观测感染AdIκBαM前后经TNF α处理的HepG2 细胞核中NF κB活性水平的变化。结果　扩增AdIκBαM的滴度为 2× 10 8pfu/ml,MOI为 2 0 ;AdIκBαM在HepG2 中能稳定高效表达且不因TNF α的诱导而降解 ,未感染细胞基础水平的IκBα及转入的AdIκBα对照则随诱导时间延长而呈现先逐渐降低后升高的趋势。EMSA显示 ,感染AdIκBαM的细胞在处理前后均无NF κB活化迹象 ,而未感染及感染AdIκBα的细胞经TNF α诱导后则有NF κB过度活化情况。结论　AdIκBαM能高效扩增并有效感染靶细胞HepG2 ,能在HepG2 细胞中稳定高水平表达 ,且不会被TNF α诱导而降解 ,能稳定有效的抑制HepG2 细胞中NF κB的过度活化 ,上述结果初步表明 ,通过IκBαM超级抑制物抑制NF κB的活性 ,再辅以常规的抗肿瘤治疗 ,有望成为一种十分有效的肿瘤基因治疗方法。

关键词：重组腺病毒 IκBαM 人肝癌细胞 HepG2 表达 NF-κB 活性抑制

重组腺病毒IκBαM抑瘤作用的体外实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

重组腺病毒IκBαM抑瘤作用的体外实验研究

作者：向明确重庆医科大学

学位级别：硕士

目的：检测重组腺病毒IκBαM(AdIκBαM)在肝癌细胞HepG中的表达及TNF-α诱导下IκBαM变化情况，并观察此超级抑制物对NF-κB活性的抑制作用，为IκBαM在肝癌基因治疗中的应用提供理论基础。方法： 1．利用293细胞包装并批... 详细信息

目的：检测重组腺病毒IκBαM(AdIκBαM)在肝癌细胞HepG中的表达及TNF-α诱导下IκBαM变化情况，并观察此超级抑制物对NF-κB活性的抑制作用，为IκBαM在肝癌基因治疗中的应用提供理论基础。方法： 1．利用293细胞包装并批量制备体外实验所需重组腺病毒。 2．利用GFP及有限稀释法测定病毒滴度和感染靶细胞的效率。 3．采用Western blotting法检测293细胞和HepG2中重组腺病毒介导的IκBαM的表达及TNF-α诱导下IκBαM变化情况。 4．EMSA实验观察AdIκBαM感染前后经TNF-α处理的HepG2细胞核中NF-κB活性水平的变化。结果： 1．扩增AdIκBαM的滴度：2×10pfu/L,感染靶细胞HepG的MOI为20。 2．AdIκBαM在HepG2中能稳定高效表达且不因TNF-α的诱导而降解，未感染细胞的IκBα及转入的AdIκBα对照则随诱导时间延长而呈现先逐渐降低后升高的趋势。 3.EMSA显示:感染AdIκBαM的细胞在处理前后均无NF-κB活化迹象，而未感染及感染AdIκBα的细胞经TNF-α诱导后则有NF-κB过度活化情况。结论:AdiKBaM能高效扩增并有效感染靶细胞HePG:，在HePGZ 细胞中呈现稳定高水平表达，且不会被TNF一a诱导而降解，能稳定有效的抑制HePG:细胞中NF一沼的过度活化，述结果初步表明，通过 IKBaM超级抑制物抑制NF一KB的活性，再辅以常规的抗肿瘤治疗，有望成为一种十分有效的肿瘤基因治疗方法。I沼aM超级抑制物作为肝癌基因治疗的一种新的辅助手段，理论上是可行的。

关键词：重组腺病毒 HCC NF-кB 基因治疗

短发夹状RNA抑制survivin基因在肝癌细胞中的表达

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中华肝脏病杂志 2003年第12期11卷 712-715页

作者：闫歌黄爱龙唐霓张秉强蒲丹向明确兰英华吴刚重庆医科大学病毒性肝炎研究所 400010

目的构建抗凋亡因子survivin的短发夹状RNA(shRNA),观察其在肝癌细胞株HepG2、SMMC—7721中对survivin基因表达的抑制作用。方法设计、合成两对survivin编码基因的反向重复序列,中间分别间隔4和8个nt,分别定向克隆至载体pTZU6+1的U6... 详细信息

目的构建抗凋亡因子survivin的短发夹状RNA(shRNA),观察其在肝癌细胞株HepG2、SMMC—7721中对survivin基因表达的抑制作用。方法设计、合成两对survivin编码基因的反向重复序列,中间分别间隔4和8个nt,分别定向克隆至载体pTZU6+1的U6转录启动子下,构建pshRNA—survivin 1和pshRNA—survivin 2重组质粒,与表达survivin基因的质粒pEGFP—C1-survivin共转染肝癌细胞株HepG2和SMMC—7721,荧光显微镜下观察融合蛋白中GFP的表达以分析pshRNA—survivin对survivin基因表达的抑制作用。结果酶切分析和测序证实pshRNA—survivin 1和pshRNA—survivin 2构建成功;两组shRNA对survivin的表达均有明显的抑制作用,抑制率达80％以上;两重组质粒在HepG2和SMMC—7721两种细胞中抑制目的基因的作用无明显差异;反向重复序列中间隔4或8个nt构建的shRNA,对抑制目的基因的表达无显著差异。结论构建的pshRNA—survivin重组质粒能有效抑制survivin基因在肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721中的表达。

关键词：短发夹状RNA survivin基因肝癌癌细胞细胞凋亡基因治疗

含临床病毒株聚合酶逆转录酶区的乙肝病毒DNA稳定复制细胞系的构建

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国医学科学院学报 2013年第1期35卷 13-18页

作者：向明确蔡雪飞张文露黄爱龙胡接力重庆医科大学重庆市第九人民医院感染科重庆400700 重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016

目的构建含有临床病毒株聚合酶逆转录酶(RT)区的乙肝病毒(HBV)DNA稳定复制细胞系。方法采用巢式PCR从患者血清扩增HBV DNA片段,利用片段置换反应将该片段克隆到HBV DNA复制载体,并在该载体上引入新霉素抗性基因,在确认该重组DNA体外可... 详细信息

目的构建含有临床病毒株聚合酶逆转录酶(RT)区的乙肝病毒(HBV)DNA稳定复制细胞系。方法采用巢式PCR从患者血清扩增HBV DNA片段,利用片段置换反应将该片段克隆到HBV DNA复制载体,并在该载体上引入新霉素抗性基因,在确认该重组DNA体外可复制后,将其转染HepG2细胞,G418筛选,采用real-time PCR结合ELISA及Southern blot检测初筛和鉴定HBV DNA稳定复制细胞系。结果从患者血清扩增出的HBV DNA片段nt55～1654被成功置换到HBV复制质粒pLL相应区域,得到质粒p11;新霉素抗性基因表达片段被克隆到p11中HBV DNA下游,获得质粒p11-neo,Southern blot检测证实p11-neo可支持体外复制;p11-neo转染HepG2后,经筛选鉴定,获得了可支持HBV DNA稳定复制的细胞系3-10。结论建立了含有临床病毒株聚合酶RT区的HBV DNA稳定复制细胞系,real-time PCR结合ELISA有助于HBV DNA稳定复制细胞系的快速初筛鉴定。

关键词：乙型肝炎病毒逆转录聚合酶复制稳定细胞系

临床医生对一线抗结核药物及治疗支持的知信行研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

临床肺科杂志 2023年第6期28卷 863-868,873页

作者：皮殷欢谭隽怡李天驹石小枫向明确重庆医科大学附属第二医院感染科重庆400010 重庆市第九人民医院感染科重庆400799 重庆医科大学第二临床学院重庆400016

目的了解临床医生对一线抗结核药物及治疗支持的知信行现状。方法随机抽取重庆各级卫生机构诊治成人肺结核的医生,调查其对一线抗结核药物及治疗支持的知信行。结果知识得分中位数16(14,18)分,知道治疗支持提供者推荐顺序的医生占19.2%... 详细信息

目的了解临床医生对一线抗结核药物及治疗支持的知信行现状。方法随机抽取重庆各级卫生机构诊治成人肺结核的医生,调查其对一线抗结核药物及治疗支持的知信行。结果知识得分中位数16(14,18)分,知道治疗支持提供者推荐顺序的医生占19.2%。15.4%的参与者认为复方制剂效果优于单一制剂,72.1%的人认为复方制剂不便于调整用药,27.9%的医生倾向开复方制剂处方,这些情况在感染专业、三级医院医生中更为显著(P<0.05)。认为门诊医生进行健康教育效果更好的占85.6%。大多数医生选择剂型时考虑的主要因素为疗效(76.0%),没有医生选择患者要求和价格。受访医生所接诊患者的治疗支持主要由家庭成员提供(50.0%),其次是医务人员(34.6%),健康教育由门诊医生进行的占70.2%。结论重庆地区不同类型临床医生对一线抗结核药物的知信行存在较大差异,治疗支持知识不全面,感染专业及三级医院医生更偏好单一制剂。

关键词：肺结核抗结核药物临床医生知识态度实践合理用药

奥美拉唑与莫沙比利联合治疗中、重度反流性食管炎疗效观察

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

第三军医大学学报 2006年第5期28卷 461-461,464页

作者：袁晓英王丹向明确贾丽萍重庆市第九人民医院消化科重庆400700

反流性食管炎是消化系统的常见病。其发病原因是食管下段括约肌（low esophageal sphincter；LES）功能失调、张力降低，使胃酸、胃蛋白酶反流入食管所致的炎性病变。近年国内发病率日趋增高，患病率约为1．9％。目前药物治疗主要以抑... 详细信息

反流性食管炎是消化系统的常见病。其发病原因是食管下段括约肌（low esophageal sphincter；LES）功能失调、张力降低，使胃酸、胃蛋白酶反流入食管所致的炎性病变。近年国内发病率日趋增高，患病率约为1．9％。目前药物治疗主要以抑酸剂和促动力药为主。我们选择常用的抑酸剂奥美拉唑和促动力药莫沙比利，观察其联合治疗中、重度反流性食管炎的疗效。

关键词：奥美拉唑莫沙比利反流性食管炎

转化生长因子β受体-Ⅰ等在非酒精性脂肪性肝病患者肝组织中的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华肝脏病杂志 2006年第9期14卷 698-700页

作者：向明确袁晓英张培林王旭东李智泉重庆市第九人民医院消化内科 400700

检测转化生长因子β受体Ⅰ（TGFβRⅠ）和血小板衍生生长因子（PDGF）-A、-B及其受体PDGFR-α、-β，观察其在各种类型的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者肝组织中的表达、分布和变化情况，以探讨其促进NAFLD发生脂肪性肝炎、脂肪性肝... 详细信息

检测转化生长因子β受体Ⅰ（TGFβRⅠ）和血小板衍生生长因子（PDGF）-A、-B及其受体PDGFR-α、-β，观察其在各种类型的非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者肝组织中的表达、分布和变化情况，以探讨其促进NAFLD发生脂肪性肝炎、脂肪性肝硬化的作用机制及临床意义。

关键词：脂肪肝,受体,转化生长因子β 受体,血小板源性生长因子

shRNA抑制外源绿色荧光蛋白在肝癌细胞株中的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

重庆医科大学学报 2003年第6期28卷 681-684页

作者：闫歌黄爱龙唐霓张秉强向明确蒲丹重庆医科大学病毒性肝炎研究所重庆400010

目的 :构建绿色荧光蛋白 (GFP)的短发夹状RNA(shRNA) ,观察其在哺乳动物细胞中抑制外源GFP的表达。方法 :设计、合成含GFP编码基因片段 ,中间被 4个bp间隔的反向重复序列 ,与转录载体 pTZU6 +1连接 ,构建pshRNA—GFP重组质粒 ,与pEGFP ... 详细信息

目的 :构建绿色荧光蛋白 (GFP)的短发夹状RNA(shRNA) ,观察其在哺乳动物细胞中抑制外源GFP的表达。方法 :设计、合成含GFP编码基因片段 ,中间被 4个bp间隔的反向重复序列 ,与转录载体 pTZU6 +1连接 ,构建pshRNA—GFP重组质粒 ,与pEGFP -C1共转染肝癌细胞株HepG2和SMMC - 772 1,检测其对GFP表达的影响。结果 :pshRNA—GFP对共转染的 pEGFP -C1中的绿色荧光蛋白有明显的抑制作用 ,抑制率达 70 %～ 85 %。结论 :构建的 pshRNA—GFP重组质粒能有效地抑制GFP在哺乳动物细胞中的表达。

关键词： RNA干扰绿色荧光蛋白短发夹状RNA

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

老年与中青年消化性溃疡的差异

中华消化杂志 2006年第3期26卷 206-207页

作者：袁晓英向明确常杭花贾丽萍重庆市第九人民医院消化科 400700

消化性溃疡（PU）临床表现不典型，并发症多而严重，死亡率高。本研究就904例PU患者根据年龄分为老年组与中青年组，对其进行临床分析，探讨老年人与中青年人PU的临床特点，以期为临床防治工作提供裨益。

关键词：消化性溃疡中青年组老年组临床表现不典型临床分析临床特点中青年人临床防治并发症死亡率