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TALE介导的PiggyBac转座子高效转座方法

中国蚕学会第八届青年学术研讨会

作者：叶露鹏钱秋杰张玉玉尤征英车佳倩宋佳钟伯雄浙江大学动物科学学院蚕桑蜜蜂研究所

Promoter is one of the most important regulatory elements in regulating target genes spatiotemporal expression. However,the majority of studies are focus on core or proximal promoter regions, so that the information far away from 5’-fianking region of proximal promoter is often neglected. In this study, a long length sequence（about 4-kb） of sericin1（Ser1） promoter was cloned from silkworm genome, which was further validated as a kind of conserved and tissue-specific promoter by bioinformatic analysis. The4-kb length of Ser1 promoter was divided into three sections and each section was predicted including a lot of potential transcriptional factor binding sites（TFBSs）. The transgenic experiment suggested that the TFBSs facilitated enhancement of promoter driving activity. To our surprise, the combination of multi-copy proximal Ser1 promoters could not improve the transcriptional level of exogenous gene but reduction. We speculated that multi-copy promoters would disperse transcription pre-initiation complexes, therefore the driving force of promoters were weakened. The correlation analysis between two contiguous genes, target foreign gene（firefly luciferase, FLuc） and marker gene（enhanced green fluorescent protein, EGFP）, was carried *** results indicated that the correlation was highly significant between FLuc and EGFP regardless of different insertion ***, the ELISA assay revealed the correlation between transcriptional and translational level of EGFP were also very significant. Therefore, the exogenous genes expression could be simply and conveniently predicted by using an adjacent marker *** is a low-cost, time- and labour-saving approach for large-scale screening high foreign protein expression transgenic strains. In sum, all those results provide important clues for researchers to further investigate underlying molecular mechanism of promoters,and a new way is discovered to quickly and accurately predict exogenous genes expression in transge

关键词： Bombyx mori sericin 1 promoter regulatory element correlation analysis expression efficiency transgenosis

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TALE介导的PiggyBac转座子高效转座方法

2015中国遗传学会大会

作者：钟伯雄叶露鹏尤征英钱秋杰张玉玉车家倩宋佳浙江大学动物科学学院

PiggyBac转座子最初从粉纹夜蛾Trichoplusia ni基因组中分离得到,是一种非病毒载体,具有承载大片段外源基因,低毒以及长效表达等优点。在过去的几十年中,piggyBac转座子已成功应用在大量的脊椎动物和非脊椎动物,是一个广谱的、强大的遗... 详细信息

PiggyBac转座子最初从粉纹夜蛾Trichoplusia ni基因组中分离得到,是一种非病毒载体,具有承载大片段外源基因,低毒以及长效表达等优点。在过去的几十年中,piggyBac转座子已成功应用在大量的脊椎动物和非脊椎动物,是一个广谱的、强大的遗传操作工具,可以制备转基因动物,用于人类基因治疗和诱导多能干细胞。但是,piggyBac转座子介导的转基因效率还是较低,以家蚕转基因实验结果为例,所有已发表的研究论文平均转基因效率仅为8.8%。针对这个问题,本研究发明创建了一种有效提高转基因效率的新方法,其核心是构建一个类转录激活因子效应蛋白(transcription activator-like effector,TALE)和piggyBac转座酶(PBase)的融合蛋白(TALE-PBase)用于介导piggyBac转座子的转座。实验结果证明采用TALE-PBase融合蛋白可以显著地将转座效率提高到63.9%,相当于是目前转座效率平均水平的7倍。而且新方法的转基因阳性蛾区中的阳性个体数每区平均达到了18.1条,比目前家蚕转基因实验的平均水平最大提高了5.7倍。TALE-PBase融合蛋白介导的转基因技术不仅提高了转基因阳性蛾区数,而且也明显提高了阳性蛾区中的阳性个体数。这是piggyBac转座子介导的转基因技术的巨大突破,为今后的转基因研究提供了很好的技术支撑。

关键词： TALE piggyBac 转座子转基因

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不同防疫阶段下应急医疗物资调度模型

物流科技 2025年第1期48卷 83-88页

作者：叶露李弘郭冰浙江理工大学经济管理学院浙江杭州310018

比较了异常紧急、紧急、常态下,基于两种紧急度计算形式得到的模型仿真结果,在模型建立的基础上,给出了两期对医用防护服、N95口罩的分配方案。结果表明:选择恰当的紧急度计算形式,所构建的模型能在三种防疫阶段下均能确保多需求点之间... 详细信息

比较了异常紧急、紧急、常态下,基于两种紧急度计算形式得到的模型仿真结果,在模型建立的基础上,给出了两期对医用防护服、N95口罩的分配方案。结果表明:选择恰当的紧急度计算形式,所构建的模型能在三种防疫阶段下均能确保多需求点之间物资分配的公平性,降低需求点在某一阶段产生较大的物资短缺损失的可能,使得应急物资分配更合理。

关键词：最优化理论应急物资需求满足率调度模型

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从拒斥到规划：中国国际法态度的历史变迁

吉林大学社会科学学报 2025年第1期 64-78+235页

作者：何志鹏吉林大学法学院

自鸦片战争之后签订《南京条约》,中国与国际法接触的180余年见证了中国现代化进程在波折中迅速前进，而国际法在螺旋中缓慢上升的过程。起初，前现代的中国受到了现代性国际法的冲击，从拒斥国际法的介入与影响，逐渐转变为了解和回应... 详细信息

自鸦片战争之后签订《南京条约》,中国与国际法接触的180余年见证了中国现代化进程在波折中迅速前进，而国际法在螺旋中缓慢上升的过程。起初，前现代的中国受到了现代性国际法的冲击，从拒斥国际法的介入与影响，逐渐转变为了解和回应。继而，中国努力利用国际法维护本国的利益，虽然并未取得成功，但国际法对中国的正反馈逐渐增加，中国的现代精神更加突出，在国际法领域的地位得到认可。中华人民共和国成立之后的20年是中国努力突破国际法体系的各种阻碍、求取国家独立平等的艰难时代。而恢复联合国合法席位之后，中国对国际法的主动性不断增加，融入国际法的程度不断加深，了解和参与国际法日趋全面。中国式现代化取得的成就与积极参与全球治理、清晰研判国际法、建设和参与国际法治有着密切的关系。

关键词：中国国际法态度拒斥规划中国式现代化现代性

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海南省农业生态效率时空特征及影响因素研究

热带作物学报 2025年第1期46卷 236-245页

作者：梁伟红邓春梅叶露刘燕群王丹阳李玉萍中国热带农业科学院科技信息研究所/海南省热带作物信息技术应用研究重点实验室海南海口571101

基于海南省18个市(县)2012—2022年县域行政单元农业面板数据,运用非期望产出超效率SBM模型,结合空间相关性分析方法,分析海南省农业生态效率时空演变特征,并利用Tobit回归模型探究其影响因素。结果表明:(1)2012—2022年,海南省农业生... 详细信息

基于海南省18个市(县)2012—2022年县域行政单元农业面板数据,运用非期望产出超效率SBM模型,结合空间相关性分析方法,分析海南省农业生态效率时空演变特征,并利用Tobit回归模型探究其影响因素。结果表明:(1)2012—2022年,海南省农业生态效率均值呈现中部地区>西部地区>东部地区的明显分级特征;海南省市(县)域尺度农业生态效率逐年明显改善,农业生态效率均值为0.541,达到均值以上的市(县)数为7个。(2)空间变化上,总体呈现中部向东西部扩散的空间分布特征,同时完全有效和效率较高呈现块状和链条式分布特征,效率中等类型市(县)围绕着完全有效和效率较高市(县)分布;南北方向和东西方向的投影趋势线均呈现倒“U”型特征。(3)在省域尺度下,农民收入水平、农业机械化强度、农业化学投入品使用强度和城镇化率是对海南省农业生态效率时空演变产生影响的主要因素;在不同区域尺度下,农民收入水平是对东部地区农业生态效率产生影响的主要因素,城镇化率、农业化学投入品使用强度和农田灌溉率是对中部地区农业生态效率产生影响的主要因素,城镇化率、农民收入水平、农业产业结构、农业化学投入品使用强度和农田灌溉率是对西部地区农业生态效率产生影响的主要因素。总体而言,海南省各市(县)农业生态效率整体呈上升趋势,各区域农业生态效率存在一定差异。未来应因地制宜探索不同地区农业发展重点,切实提升农业生态效率。

关键词：农业生态效率影响因素超效率SBM模型 Tobit模型海南省

跨媒介融合背景下微短剧叙事模式创新与发展研究

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中国广播电视学刊 2025年第1期 75-78页

作者：王献鹏河南广播电视台

数字化媒体时代，跨媒介融合成为当代影视作品传播的重要趋势，微短剧作为新兴的叙事形式，以其短小精悍、灵活多变的特点迅速崛起。本文主要探讨在跨媒介融合背景下微短剧的叙事模式创新与发展。通过分析该剧的叙事特征和在不同媒介平... 详细信息

数字化媒体时代，跨媒介融合成为当代影视作品传播的重要趋势，微短剧作为新兴的叙事形式，以其短小精悍、灵活多变的特点迅速崛起。本文主要探讨在跨媒介融合背景下微短剧的叙事模式创新与发展。通过分析该剧的叙事特征和在不同媒介平台上的传播，探讨其在内容生产、叙事结构、角色塑造、情节设置和观众互动方面的创新。微短剧通过将传统叙事模式与新媒体技术相结合，实现了叙事内容的多样化与丰富性，也增强了观众的沉浸感与参与感。微短剧的发展不仅需要创作者在叙事技巧上不断创新，也需要平台方提供适应该剧特点的传播环境。

关键词：跨媒介融合微短剧叙事模式创新

亡佚的经典:试论《苍颉篇》的经典化及经典地位

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东北师大学报（哲学社会科学版） 2025年第1期 99-106页

作者：白军鹏东北师范大学文学院吉林长春130024

《苍颉篇》的经典地位问题以往学者均未论及,它是秦代“书同文”政策的产物,也是这一活动的重要组成,在文字编排及结构两个方面都深刻地影响了《说文解字》的编纂。在汉代,《苍颉篇》不仅与入仕息息相关,从同墓葬的伴出文献可推知它也... 详细信息

《苍颉篇》的经典地位问题以往学者均未论及,它是秦代“书同文”政策的产物,也是这一活动的重要组成,在文字编排及结构两个方面都深刻地影响了《说文解字》的编纂。在汉代,《苍颉篇》不仅与入仕息息相关,从同墓葬的伴出文献可推知它也是深受贵族重视的典籍,尤其值得重视的是它对汉代辞赋家产生过重要影响。通过官方所组织的两次文字会议均以之为核心来看,除表明《苍颉篇》的特殊地位,还可知其与古文经学有重要的关联。经过扬雄、杜林、张揖、郭璞等的注释工作后,《苍颉篇》的身份在南北朝隋唐时期发生了转换,它开始成为学者注释古书的重要参考。本文所论也提示我们应该重新审视对虽已亡佚却在历史上产生过深远影响的古书的评价。

关键词：《苍颉篇》经典文本注释

领导干部责任制体系化的制度审视、内在逻辑与推进路径

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领导科学 2025年第1期 126-134页

作者：黄耀鹏厦门大学法学院厦门大学党内法规研究中心

党的自我革命制度规范体系的深化发展对领导干部责任制提出了新要求。当前领导干部责任制呈现“领域型”责任的特征，并且内容要素联系不紧密、碎片化，需要运用体系化思维以形成制度合力。领导干部责任制的体系化完善以党政科层制、体... 详细信息

党的自我革命制度规范体系的深化发展对领导干部责任制提出了新要求。当前领导干部责任制呈现“领域型”责任的特征，并且内容要素联系不紧密、碎片化，需要运用体系化思维以形成制度合力。领导干部责任制的体系化完善以党政科层制、体系融贯性和权责统一原则为基础逻辑，需要将形式内容的规范融贯性与坚持党的领导的价值融贯性相结合，激发制度活力。探索体系化完善进路，技术方法上要着力于融贯性，积极协调党规国法，谨慎扩展新领域责任制；核心内容上要持续推进责任制的具体化、精准化、常态化，既在考核激励中增强内在激励和容错纠错的作用，做到精准问责和轻重分离，又要加强经常性检查考核并形成成熟稳定的制度机制，提高制度效能。

关键词：领导干部责任制体系化融贯性容错纠错

日常观念与专业知识:知识类型与知识社会学的基本结构

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浙江学刊 2025年第1期 35-45+239页

作者：许松影李钧鹏华中师范大学政治学与国家治理研究院华中师范大学社会学院

“知识”定义的模糊性阻碍了知识社会学的发展。探索恰当的知识类型学，从研究对象角度将知识社会学加以系统化处理，有望改善这一问题。文章讨论社会学既有的多种知识分类，指出日常观念/专业知识的区分满足了系统化知识社会学的四条... 详细信息

“知识”定义的模糊性阻碍了知识社会学的发展。探索恰当的知识类型学，从研究对象角度将知识社会学加以系统化处理，有望改善这一问题。文章讨论社会学既有的多种知识分类，指出日常观念/专业知识的区分满足了系统化知识社会学的四条标准，进而考察日常观念/专业知识这组区分的不同形态，分析实用主义等流派对该区分的理解，总结其逻辑内涵。在此基础上，细化日常观念/专业知识的区分，结合既有的知识社会学研究，对该领域的相关议题做系统性分类，简述其中的八个重点部分。通过知识分类呈现知识社会学的基本结构，不仅是学科自反性的要求，也对知识社会学的未来具有重要意义。

关键词：社会理论知识社会学知识类型日常观念专业知识