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肠侵袭性大肠杆菌tatABC基因缺失株的生物学特性

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微生物学报 2013年第5期53卷 486-491页

作者：宫照龙叶长芸刘小兵张敏卓勤中国疾病预防控制中心营养与食品安全所北京100050 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京10220

【目的】研究双精氨酸运输系统(Tat)与肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)生物学特性之间的关系。【方法】通过同源重组的方法,构建EIEC的tatABC基因缺失菌株以及互补菌株,并探索其对细菌形态、底物转运功能以及对HeLa细胞和豚鼠角膜侵袭力的影响... 详细信息

【目的】研究双精氨酸运输系统(Tat)与肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)生物学特性之间的关系。【方法】通过同源重组的方法,构建EIEC的tatABC基因缺失菌株以及互补菌株,并探索其对细菌形态、底物转运功能以及对HeLa细胞和豚鼠角膜侵袭力的影响。【结果】TatABC基因缺失株细菌形态变化明显,底物转运功能丧失,细菌侵袭力也显著减弱(缺失株侵入HeLa细胞数量明显减少,致豚鼠角膜病变能力明显减弱),而互补菌株在上述方面较接近野生株。【结论】EIEC的Tat蛋白运输系统与EIEC的生物学特性有密切关系。

关键词：肠侵袭性大肠杆菌生物学特性双精氨酸运输系统毒力

中国福氏志贺菌前噬菌体分布与基因组进化研究

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疾病监测 2023年第5期38卷 516-521页

作者：梁俊容金东杨晶卢珊熊衍文叶长芸徐建国中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206

目的前噬菌体是细菌基因组中重要可移动原件,在细菌毒力和宿主适应性方面发挥着重要作用。由噬菌体介导的福氏志贺菌血清型转化频繁发生,给志贺菌的监测、诊断和预防工作带来不便。为了探究我国福氏志贺菌基因组进化与其前噬菌体相关的... 详细信息

目的前噬菌体是细菌基因组中重要可移动原件,在细菌毒力和宿主适应性方面发挥着重要作用。由噬菌体介导的福氏志贺菌血清型转化频繁发生,给志贺菌的监测、诊断和预防工作带来不便。为了探究我国福氏志贺菌基因组进化与其前噬菌体相关的血清型别转换之间的关系,利用生物信息学方法将前噬菌体在福氏志贺菌基因组中的分布与进化进行关联分析。方法在中国17省(市、自治区)选取的294株福氏志贺菌具有丰富的血清型多态性。通过比较不同血清型福氏志贺菌基因组中原噬菌体及血清型转换噬菌体的覆盖度,统计分析其分布规律。结果部分菌株可携带多种前噬菌体,同一种前噬菌体也可分布在不同血清型菌株中;部分菌株虽携带血清型转换噬菌体却并未发生血清型转换事件。不同血清型转换噬菌体在福氏志贺菌进化树中成簇出现,表明该部分菌株出现了血清型集中转换现象。结论本研究有助于揭示前噬菌体的遗传多样性及与福氏志贺菌进化和血清型变异之间的关系,对预防和控制志贺菌的感染具有重要意义。

关键词：福氏志贺菌噬菌体血清型转换细菌基因组进化

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单增李斯特菌质粒研究进展

中国人兽共患病学报 2021年第4期37卷 356-361页

作者：毛盼叶长芸南华大学病原生物学研究所特殊病原体防控湖南省重点实验室衡阳421001 传染病预防控制国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206

单增李斯特菌是一种可引起李斯特菌病的重要食源性病原体,质粒在单增李斯特菌中分布广泛,这些质粒对宿主的环境适应能力、毒力以及耐药有一定的促进作用。基因组测序技术的发展为质粒的发现及功能研究提供了很好的基础。本文综述了单增... 详细信息

单增李斯特菌是一种可引起李斯特菌病的重要食源性病原体,质粒在单增李斯特菌中分布广泛,这些质粒对宿主的环境适应能力、毒力以及耐药有一定的促进作用。基因组测序技术的发展为质粒的发现及功能研究提供了很好的基础。本文综述了单增李斯特菌质粒的分类、分布及其生物学功能研究进展。

关键词：单增李斯特菌质粒分类分布生物学功能

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细菌的毒力岛

微生物学通报 2002年第4期29卷 108-112页

作者：叶长芸徐建国中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所北京102206

毒力岛是指细菌染色体上一段具有典型结构特征的基因簇,主要编码与细菌的毒力及代谢等功能相关的产物,已在致病菌中发现了30几个毒力岛。由于毒力岛具有可移动性,使其在细菌的进化,毒力的获得,以及新病原的出现中均具有重要的意义。

关键词：细菌毒力岛 tRNA 致病性

食品级分泌表达载体的构建及报告蛋白在乳酸乳球菌中的表达

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微生物学报 2008年第3期48卷 293-298页

作者：孙强正熊衍文叶长芸徐建国中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206

为构建乳酸乳球菌食品级分泌表达载体,通过PCR扩增质粒pMG36e的p32启动子片段及乳酸乳球菌MG1363未知分泌蛋白(Usp45)基因的核糖体结合位点、分泌信号肽和成熟肽前11个氨基酸的编码序列(SPusp45),克隆到食品级载体pSH91中,构建食品级分... 详细信息

为构建乳酸乳球菌食品级分泌表达载体,通过PCR扩增质粒pMG36e的p32启动子片段及乳酸乳球菌MG1363未知分泌蛋白(Usp45)基因的核糖体结合位点、分泌信号肽和成熟肽前11个氨基酸的编码序列(SPusp45),克隆到食品级载体pSH91中,构建食品级分泌性表达载体pSQ;克隆报告基因金黄色葡萄球菌核酸酶(NucA)成熟肽的编码序列nucA到pSQ中分泌信号后,转化乳酸乳球菌MBP71,构建了乳酸乳球菌食品级分泌性表达系统Llactis/pSQ-nucA;通过TB-D法和酶谱法检测Llactis/pSQ-nucA的表达形式、表达量并与以前构建的Llactis/pSQZ-nucA系统表达能力进行比较,结果发现Llactis/pSQ-nucA能够分泌性表达NucA,分泌性表达的NucA量大约是胞内NucA的10倍;Llactis/pSQ-nucA的表达量高于lactis/pSQZ-nucA。为进一步目的蛋白的的分泌性表达及食品级疫苗的研制奠定了基础。

关键词：乳酸乳球菌 p32启动子食品级载体分泌性表达报告蛋白

高致病性猪链球菌感染及我国防制工作中存在的问题

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中华流行病学杂志 2005年第9期26卷 629-632页

作者：徐建国景怀琦叶长芸杜华茂中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206

猪链球菌(Streptococcus suis)是链球菌属中的一个种,有35个血清型,最常见对人和动物致病的为2型,属动物源性病原体,呈世界性分布,自20世纪50年代以来,荷兰、英国、加拿大、澳大利亚、新西兰、比利时、巴西、丹麦、西班牙、德国、日本... 详细信息

猪链球菌(Streptococcus suis)是链球菌属中的一个种,有35个血清型,最常见对人和动物致病的为2型,属动物源性病原体,呈世界性分布,自20世纪50年代以来,荷兰、英国、加拿大、澳大利亚、新西兰、比利时、巴西、丹麦、西班牙、德国、日本和中国台湾省等先后有报道,不仅给世界养猪业造成很大威胁,还严重危害人的生命安全[1-3].在以往的文献中,往往把猪链球菌称为"不常从人的临床标本中分离的链球菌",很少引起人间感染.

关键词：猪链球菌感染致病性世界性分布防制动物源性人间感染中国台湾省链球菌属 20世纪

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致病性大肠杆菌毒力岛插入位点的特征性研究

中国人兽共患病学报 2004年第Z1期21卷 24-25页

作者：叶长芸中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206

　　毒力岛是细菌染色体上具有特殊结构特征并与细菌致病性具有相关性的分子量较大的DNA片段,目前已在致病菌里发现有33个功能明确的毒力岛,其中致病性大肠杆菌中就有12个.已有资料发现许多毒力岛往往在染色体上的tRNA位点处插入,而tRN... 详细信息

　　毒力岛是细菌染色体上具有特殊结构特征并与细菌致病性具有相关性的分子量较大的DNA片段,目前已在致病菌里发现有33个功能明确的毒力岛,其中致病性大肠杆菌中就有12个.已有资料发现许多毒力岛往往在染色体上的tRNA位点处插入,而tRNA因其特殊的空间结构和保守的二级结构为外源性DNA的插入提供了有利条件.那么tRNA位点到底与毒力岛的存在与获得,是否有规律可寻.为此,我们以大肠杆菌K-12的染色体全序列为参照,在包括其所有tRNA位点在内的区域设计引物,对6类致泻性大肠杆菌和Shigella f2a进行了染色体上tRNA位点的完整性分析,并用杂交加以证实.……

关键词：致病性大肠杆菌毒力岛插入位点细菌染色体致泻性大肠杆菌空间结构结构特征二级结构致病菌相关性完整性外源性全序列分子量资料杂交引物设计区域规律

阿洛糖对非利用型单核增生李斯特菌生长影响的研究

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中国预防兽医学报 2018年第6期40卷 550-554页

作者：张璐王艳叶长芸中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206

为研究单核增生李斯特菌ICDC-LM188对阿洛糖的利用及阿洛糖对该菌株基因表达的影响,本研究利用含有不同碳源的MWB培养基和LB培养基分别进行单核增生李斯特菌在阿洛糖作用下的生长试验,采用RNA测序并进行主要差异表达基因分析。生长试验... 详细信息

为研究单核增生李斯特菌ICDC-LM188对阿洛糖的利用及阿洛糖对该菌株基因表达的影响,本研究利用含有不同碳源的MWB培养基和LB培养基分别进行单核增生李斯特菌在阿洛糖作用下的生长试验,采用RNA测序并进行主要差异表达基因分析。生长试验结果显示阿洛糖可以抑制ICDC-LM188生长。差异表达基因分析结果显示,5个上调表达基因均与已知的阿洛糖代谢相关,14个下调表达基因中部分与丙酮酸代谢相关,而丙酮酸代谢的抑制会影响菌体生长,推断丙酮酸代谢的抑制可能是阿洛糖抑制部分单核增生李斯特菌生长的原因。本研究为优化LAEB培养基提供了方向及对单增李斯特菌的糖代谢相关研究有借鉴意义。

关键词：阿洛糖单核增生李斯特菌生长作用表达差异基因

四种单增李斯特菌常用核酸检测方法的评价与应用

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中国人兽共患病学报 2019年第12期35卷 1085-1091,1099页

作者：纪顺师叶长芸传染病预防控制国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心中国疾病预防控制中心传染病预防控制所

目的应用聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光PCR(Real-time PCR)、环介导等温扩增(LAMP)和多交叉置换扩增(MCDA)4种核酸检测方法,对单增李斯特菌进行检测,探索特异、灵敏、高效,且适用于肉类样本中单增李斯特菌检测的核酸检测方法。方法比... 详细信息

目的应用聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光PCR(Real-time PCR)、环介导等温扩增(LAMP)和多交叉置换扩增(MCDA)4种核酸检测方法,对单增李斯特菌进行检测,探索特异、灵敏、高效,且适用于肉类样本中单增李斯特菌检测的核酸检测方法。方法比较文献报道的以单增李斯特菌特异性基因lmo0733作为靶标的4种核酸检测方法,评价这4种方法在特异性、灵敏度、检出速率方面的差异,并应用于单增李斯特菌模拟样本和猪肉样本中单增李斯特菌的检测。结果传统PCR、Real-time PCR、LAMP和MCDA方法都能准确检测单增李斯特菌,其中MCDA方法检测下限为10 fg/反应,且能在30 min内完成对样本核酸的检测,灵敏度和检出速率优于其它3种核酸诊断方法;MCDA方法对于模拟样本和实际样本的检测效率优于其它3种核酸检测方法和传统分离培养方法,能够提高样本检测的阳性率。结论MCDA方法作为一种特异、灵敏和高效的核酸检测方法,可用于肉制品中单增李斯特菌检测时的快速筛查,并能提高传统分离培养方法对标本中单增李斯特菌的阳性检出率。

关键词：单增李斯特菌聚合酶链式反应实时荧光PCR 环介导等温扩增多交叉置换扩增