检索结果-南通市图书馆

养禽与禽病防治 2012年第8期 33-35页

作者：张光明王鑫张思远叶贺佳华南农业大学兽医学院广州510642 广州市华南农大生物药业有限公司广州511300

2012年3月，广东江门某肉鸽场发生一种连续死亡的急性病，接连2个星期内肉鸽连续死亡，养殖户多方求医用药，死亡不见减少。附近的鸽场也发生类似情况，后送我公司技术部进行诊治，经流行病学调查、临床检查及实验室检查，诊断为鸽沙门... 详细信息

2012年3月，广东江门某肉鸽场发生一种连续死亡的急性病，接连2个星期内肉鸽连续死亡，养殖户多方求医用药，死亡不见减少。附近的鸽场也发生类似情况，后送我公司技术部进行诊治，经流行病学调查、临床检查及实验室检查，诊断为鸽沙门氏菌和曲霉菌混合感染。

关键词：混合感染沙门氏菌曲霉菌鸽场诊治流行病学调查实验室检查临床检查

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新城疫病毒基因Ⅶ型辅助质粒的构建

新城疫病毒基因Ⅶ型辅助质粒的构建

表达SIV H1亚型HA蛋白重组腺病毒的构建与生物学特性研究

中国微生物学会兽医微生物学专业委员会暨中国畜牧兽医学会生物制品学分会2021年学术论坛

作者：刘云霞仇微红叶贺佳梁昭平

利用反向遗传操作技术,构建新城疫病毒基因ⅧNP、P、L三个辅助质粒,为新城疫病毒基因Ⅶ反向遗传的拯救提供基础。提取尿囊液病毒RNA,利用RT-PCR技术,分别扩增NP、P、L片段,并连接至克隆载体,通过电泳、酶切验证及测序后连接至辅助质粒载... 详细信息

利用反向遗传操作技术,构建新城疫病毒基因ⅧNP、P、L三个辅助质粒,为新城疫病毒基因Ⅶ反向遗传的拯救提供基础。提取尿囊液病毒RNA,利用RT-PCR技术,分别扩增NP、P、L片段,并连接至克隆载体,通过电泳、酶切验证及测序后连接至辅助质粒载体pCI-neo。成功获取NP、P、L三个目的基因,测序结果与预期一致;成功构建pCI-NP、pCI-P、pCI-L三个辅助质粒。本文成功构建的三条辅助质粒为后期NDVⅦ反向遗传的构建提供基础。

关键词：新城疫病毒反向遗传辅助质粒 NP蛋白 P蛋白 L蛋白

来源： cnki会议评论

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中国预防兽医学报 2009年第5期31卷 333-336,355页

作者：亓文宝叶贺佳张文炎焦培荣樊惠英张桂红廖明华南农业大学兽医学院农业部动物疫病防控重点开放实验室广东广州510642

本研究对猪流感病毒A/Swine/Guangdong/3/2003(H1N1)株(SIV-GD03株)的HA基因序列进行了遗传演化分析,结果表明SIV-GD03株与GenBank中登录的全部192株H1亚型SIV中的151株核苷酸序列相似性达到85%以上,表明该毒株具有作为疫苗候选株的分... 详细信息

本研究对猪流感病毒A/Swine/Guangdong/3/2003(H1N1)株(SIV-GD03株)的HA基因序列进行了遗传演化分析,结果表明SIV-GD03株与GenBank中登录的全部192株H1亚型SIV中的151株核苷酸序列相似性达到85%以上,表明该毒株具有作为疫苗候选株的分子特征。将SIV-GD03的HA基因克隆到腺病毒穿梭载体pAd-CMV5-IRES-GFP中,将得到的重组穿梭质粒pAd-H1-IRES-GFP电转化至BJ5183感受态细胞中,与人5型腺病毒骨架质粒同源重组获得重组腺病毒质粒prAd-H1-IRES-GFP,该质粒线性化后转染AD-293细胞。包装出的重组腺病毒rAd-H1HA-GFP通过荧光显微镜观察、PCR和western blot鉴定,证明HA基因和GFP基因在重组腺病毒中得到高效表达,该毒株在AD-293细胞上连续传12代后表现出较好的整合稳定性及传代稳定性。

关键词： H1亚型猪流感病毒 HA基因序列分析重组腺病毒

H1N1亚型猪流感灭活疫苗的研制及免疫效果试验

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动物医学进展 2013年第3期34卷 72-75页

作者：叶贺佳李敏梁昭平仇微红王鑫罗开健广州市华南农大生物药品有限公司广东广州511300 华南农业大学广东广州510642

利用近年来分离到的H1N1亚型猪流感病毒SGD01株制成猪流感灭活疫苗,并对疫苗的免疫效果进行评估,为预防猪流感的发生和流行提供科学依据。将SIV-SGD01株用灭活生理盐水进行100倍稀释接种10日龄非免疫鸡胚,35℃培养72h后收获感染胚液,经... 详细信息

利用近年来分离到的H1N1亚型猪流感病毒SGD01株制成猪流感灭活疫苗,并对疫苗的免疫效果进行评估,为预防猪流感的发生和流行提供科学依据。将SIV-SGD01株用灭活生理盐水进行100倍稀释接种10日龄非免疫鸡胚,35℃培养72h后收获感染胚液,经甲醛灭活后,加矿物油佐剂混合制成油乳剂灭活疫苗,并对制备疫苗的性状、安全性、免疫效力等进行检验,结果表明制备的3批猪流感灭活疫苗均为油包水型,黏度均在8s以内,3批疫苗取样经3 000r/min离心15min,管底析出的水相不超过0.5mL。安全性试验结果表明将3批疫苗分别按6mL/头的剂量接种35日龄非免疫仔猪,试验猪未见任何不良反应,表明疫苗对仔猪的安全性良好。免疫效力及攻毒保护试验结果表明3批疫苗按3mL/只的剂量对35日龄非免疫仔猪进行一次免疫接种,免疫接种后21d试验猪HI抗体平均效价在1∶211～1∶278之间,使用1∶10倍稀释的SGD01株进行攻毒,滴鼻和肌肉注射接种各1mL/头(约含5×106.5 EID50),免疫接种猪对SGD01株的攻毒保护率均在80%以上。

关键词： H1N1亚型猪流感灭活疫苗研制免疫效果

一株H9亚型禽流感病毒的分离鉴定及免疫试验

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中国预防兽医学报 2016年第2期38卷 155-157页

作者：许利娜彭特胡秀美仇微红苏子由王鑫叶贺佳广州市华南农大生物药品有限公司广东广州511300

为了解养禽业禽病流行病毒株的基本情况,本研究对2014年从山东某鸡场采集的疑似流感的病料样品采用鸡胚尿囊腔接种进行病毒的分离,并经血凝试验(HA试验)、血凝抑制试验(HI试验)及分子生物学试验对其病原学进行鉴定。结果显示,分离鉴定... 详细信息

为了解养禽业禽病流行病毒株的基本情况,本研究对2014年从山东某鸡场采集的疑似流感的病料样品采用鸡胚尿囊腔接种进行病毒的分离,并经血凝试验(HA试验)、血凝抑制试验(HI试验)及分子生物学试验对其病原学进行鉴定。结果显示,分离鉴定到一株病毒分离株。HA试验结果表明该分离株具有血凝活性,经病毒亚型鉴定为一株H9亚型禽流感病毒(AIV),该病毒株为欧亚分支的BJ亚分支,将该病毒株筛选纯化后作为毒种,制备了禽流感油乳剂灭活疫苗,将该疫苗免疫SPF鸡,21 d后对其HI抗体效价进行检测,结果显示其平均效价达到9.1 log2,免疫后第35 d HI抗体平均效价达到峰值10.3 log2,至免疫后第10周,HI抗体平均效价仍达8.5 log2。本研究分离的病毒制备成疫苗后具有较好的免疫效果,可以作为疫苗候选株。

关键词：禽流感病毒 H9亚型免疫试验

不同新生牛血清对体外培养BHK-21细胞的影响

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中国生物制品学杂志 2012年第7期25卷 862-864页

作者：孙招金陈柄企王玲叶贺佳童菊芸罗开健广州市华南农大生物药品有限公司广州511300 华南农业大学兽医学院预防兽医系广州510642

目的比较不同新生牛血清对体外培养的BHK-21细胞的影响。方法以不同厂家和同一厂家不同批次的共6种新生牛血清培养BHK-21细胞,观察细胞传代后在不同血清培养条件下的形态、增长倍数和细胞维持时间。结果 6号血清培养的细胞生长状态最好... 详细信息

目的比较不同新生牛血清对体外培养的BHK-21细胞的影响。方法以不同厂家和同一厂家不同批次的共6种新生牛血清培养BHK-21细胞,观察细胞传代后在不同血清培养条件下的形态、增长倍数和细胞维持时间。结果 6号血清培养的细胞生长状态最好,增长倍数最高,维持细胞存活时间最长;3号血清培养效果次之;2号、4号和5号血清培养的细胞至第4天仍未长满单层;1号血清培养的细胞基本未生长。结论不同厂家和同一厂家不同批次的新生牛血清对BHK-21细胞体外培养的效果存在差异。

关键词：血清 BHK-21细胞细胞形态

H1亚型SIV HA基因序列分析及双基因表达腺病毒疫苗株的构建

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H1亚型SIV HA基因序列分析及双基因表达腺病毒疫苗株的构建

鸡传染性支气管炎病毒江苏分离株S1基因的克隆与序列分析

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：亓文宝叶贺佳张文炎樊惠英焦培荣廖明华南农业大学兽医学院

本研究对猪流感病毒A/Swine/Guangdong/3/2003(H1N1)株(SIV-GD03株)的HA基因进行了序列测定和遗传演化分析,结果表明SIV-GD03株与国内外151株同亚型SIV的HA基因核苷酸序列相似性达到85%以上,特别是与国内H1亚型SIV流行毒株的核苷酸序列...

本研究对猪流感病毒A/Swine/Guangdong/3/2003(H1N1)株(SIV-GD03株)的HA基因进行了序列测定和遗传演化分析,结果表明SIV-GD03株与国内外151株同亚型SIV的HA基因核苷酸序列相似性达到85%以上,特别是与国内H1亚型SIV流行毒株的核苷酸序列相似性达到了94%-99%,说明该毒株具有作为疫苗候选株的分子特征。将SIV-GD03的HA基因亚克隆到腺病毒穿梭载体质粒pAd-CMV5-IRES-GFP中,获得重组穿梭质粒pAd-H1-IRES-GFP,将该重组穿梭质粒电转化携带腺病毒骨架质粒pAdenoVatorΔE1/ΔE3的BJ5183感受态细胞,通过同源重组获得的重组腺病毒质粒rAd-H1-IRES-GFP,用限制性内切酶PacⅠ将所获得的重组腺病毒质粒rAd-H1-LRES-GFP线性化后转染AD-293细胞,包装出的重组腺病毒rAd-H1-GFP。通过PCR检测、荧光显微镜观察和Western-blot方法对重组腺病毒rAd-H1-GFP进行鉴定,PCR扩增结果表明,所得到的重组腺病毒rAd-H1-GFP中同时含有SIV-GD03株HA基因和表达绿色荧光蛋白的GFP基因;荧光显微镜观察到明显的绿色荧光,表明绿色荧光蛋白得到了高效表达;Western-blot检测结果表明,SIV-GD03株HA基因在重组腺病毒中得到高效表达,并具有良好的免疫原性。重组腺病毒rAd-H1-GFP在AD-293细胞上连续传12代后,对原毒及第4、8、12代重组病毒进行检测,抽提DNA对HA基因和GFP基因进行PCR扩增,结果表明HA基因和GFP基因在该重组腺病毒的各传代毒中能稳定存在;Western-blot方法检测结果表明,各代病毒都能稳定高效表达SIV-GD03株HA蛋白;各代毒的TCID分别为10/mL、10/mL、10/mL、10/mL,表明该重组腺病毒的传代稳定性较好。该基因工程疫苗已经完成了农业转基因生物安全评价的中间实验。

关键词：

来源： cnki会议评论

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动物医学进展 2018年第11期39卷 84-87页

作者：卢秀娴张思远梁昭平叶贺佳梅廷媛广州市华南农大生物药品有限公司广东广州510300

从江苏省某肉鸡养殖场发生疑似传染性支气管炎的发病鸡群中分离到1株鸡传染性支气管炎病毒,命名为CK/JS/073/2017。参照GenBank中IBV的核苷酸序列,设计特异性和全长序列引物,应用RT-PCR技术对CK/JS/073/2017分离株的S1基因进行克隆与序... 详细信息

从江苏省某肉鸡养殖场发生疑似传染性支气管炎的发病鸡群中分离到1株鸡传染性支气管炎病毒,命名为CK/JS/073/2017。参照GenBank中IBV的核苷酸序列,设计特异性和全长序列引物,应用RT-PCR技术对CK/JS/073/2017分离株的S1基因进行克隆与序列测定,并进行比对分析。结果显示,CK/JS/073/2017的S1基因片段大小为1 635bp,编码545个氨基酸,蛋白裂解识别位点序列为HRRRR,与中国大部分分离毒株相一致。CK/JS/73/2017株与国内外参考毒株核苷酸同源性为64.7%~99.5%,与位于同一基因型的参考毒株间同源性较高,与我国使用的常规Mass型疫苗毒株及其他参考株同源性较低。以疫苗株H120为参照,该分离株S1基因变异程度较大,出现了基因突变、缺失或插入等现象。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定 S1基因序列分析

1株HA蛋白S145变异H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定与HA基因序列分析

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中国兽医学报 2017年第4期37卷 676-681页

作者：彭特许利娜张思远胡秀美苏子由叶贺佳广州市华南农大生物药品有限公司广东广州511300

从山东某发病养殖场采集疑似病料,经RT-PCR检测为H9N2亚型禽流感阳性,采用鸡胚尿囊腔接种法分离病毒(SD089),并进行HA、HI试验和HA基因扩增、测序以及序列的同源性和遗传进化分析。结果显示,分离的SD089株具有血凝特性但不能被H9亚型禽... 详细信息

从山东某发病养殖场采集疑似病料,经RT-PCR检测为H9N2亚型禽流感阳性,采用鸡胚尿囊腔接种法分离病毒(SD089),并进行HA、HI试验和HA基因扩增、测序以及序列的同源性和遗传进化分析。结果显示,分离的SD089株具有血凝特性但不能被H9亚型禽流感标准阳性血清所抑制,其HA基因推导的氨基酸序列与参考毒株相比,第145位由S漂变为N,导致增加糖基化位点NGT,表明S145是血凝抑制抗体结合位点。SD089株属于BJ94分支,与2010―2014年大部分山东流行毒株的核苷酸和氨基酸序列相似性分别为88.9%~97.5%和89.9%~99.6%,而与疫苗株SD696分别降至88.0%和89.1%。试验表明,分离的SD089株HA基因在分子水平上发生了变异,S145位点的突变提示低致病性禽流感的防制面临新的挑战。

关键词：禽流感病毒 H9N2亚型 HA基因 S145位点遗传进化