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一起细菌性痢疾的病原检测及菌株脉冲场电泳分析

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浙江预防医学 2007年第10期19卷 25-26页

作者：周海慧许素芬叶菊莲陆群英三门县疾病预防控制中心浙江三门317100 浙江省疾病预防控制中心不详

志贺菌是肠杆菌科一种常见的重要病原菌,广泛分布于自然界,可通过日常生活接触、食物传播等途径传染给人而引起细菌性痢疾(菌痢)。是发展中国家儿童发病和死亡的重要原因。2006年4月本县某镇发生了一起爆发性腹泻事件,经现场流行病学调... 详细信息

志贺菌是肠杆菌科一种常见的重要病原菌,广泛分布于自然界,可通过日常生活接触、食物传播等途径传染给人而引起细菌性痢疾(菌痢)。是发展中国家儿童发病和死亡的重要原因。2006年4月本县某镇发生了一起爆发性腹泻事件,经现场流行病学调查、临床症状和实验检测结果的综合分析,是一起由福氏4C型志贺菌污染水源而引起的菌痢爆发。[第一段]

关键词：细菌性痢疾脉冲场电泳分析病原检测现场流行病学调查菌株发展中国家肠杆菌科生活接触

实时荧光定量PCR检测O139群霍乱弧菌研究

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中国卫生检验杂志 2008年第8期18卷 1477-1479页

作者：张政金大智朱水荣叶菊莲罗芸浙江省疾病预防控制中心杭州310009

目的:利用荧光定量PCR技术,建立一种快速、准确、特异检测O139群霍乱弧菌的定量方法。方法:选取O139群霍乱弧菌糖基转移酶基因(LPSgt)作为检测的靶基因,设计引物和TaqMan探针,探针的两端均进行荧光标记。对PCR扩增体系进行优化,进一步... 详细信息

目的:利用荧光定量PCR技术,建立一种快速、准确、特异检测O139群霍乱弧菌的定量方法。方法:选取O139群霍乱弧菌糖基转移酶基因(LPSgt)作为检测的靶基因,设计引物和TaqMan探针,探针的两端均进行荧光标记。对PCR扩增体系进行优化,进一步评价实时荧光定量PCR方法的特异性、灵敏度、重复性后,对收集的临床样本进行鉴定。结果:本文所建立的实时荧光定量PCR方法可准确、特异的检测和鉴定O139群霍乱弧菌,其他菌株均无阳性结果产生;该方法的灵敏度可达到10 cfu/ml;定量检测的批间和批内的变异系数均小于5%;对85例临床样本进行评价,结果获得9例O139群霍乱弧菌阳性,与常规培养法结果完全一致。结论:本文建立的检测O139群霍乱弧菌实时荧光定量PCR方法快速、准确,结果可靠,实用性强,可对结果进行定量分析,为O139群霍乱弧菌的实验室诊断和现场流行病学调查提供了较好的分析手段。

关键词：实时荧光定量PCR O139群霍乱弧菌检测

致病性大肠埃希菌毒素基因的Allglo探针技术鉴定

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浙江预防医学 2014年第6期26卷 646-648页

作者：赵锎戎奇吉叶菊莲徐莹莹童柯方金大智温州医科大学附属慈溪医院检验科浙江温州315300 浙江省疾病预防控制中心

目的基于Allglo探针技术结合多重荧光PCR,建立快速、简便鉴定致病性大肠埃希菌相关毒素基因的方法。方法选取致病性大肠埃希菌的紧密黏附素基因(eae)、志贺样毒素Ⅰ基因(stx I)、志贺样毒素II基因(stx II)和转录激活因子基因(aggR)作为... 详细信息

目的基于Allglo探针技术结合多重荧光PCR,建立快速、简便鉴定致病性大肠埃希菌相关毒素基因的方法。方法选取致病性大肠埃希菌的紧密黏附素基因(eae)、志贺样毒素Ⅰ基因(stx I)、志贺样毒素II基因(stx II)和转录激活因子基因(aggR)作为靶点。通过设计引物和Allglo探针,建立多重荧光PCR反应体系。同时,构建了4种毒素基因标准质粒,进而评价方法的特异性、灵敏性和重复性。结果基于Allglo探针技术的多重荧光PCR方法可同时准确、特异地鉴定致病性大肠埃希菌所携带的4种毒素相关基因,eae基因和aggR基因的灵敏度为10 copies/μL,stx I基因和stx II基因的灵敏度为1 copies/μL;定量检测的批间和批内变异系数均小于5%。对356份腹泻粪便样本进行评价,结果显示检出39份基因阳性。39份阳性样本中,eae基因阳性为53.85%,stxⅠ基因和stx II基因阳性为23.08%,aggR基因阳性为46.15%。通过直接测序方法进行鉴定,符合率达到100.00%。结论本实验建立的基于Allglo探针技术结合多重荧光PCR方法具有操作简便、特异性好和灵敏度高等特点,为致病性大肠埃希菌鉴定提供了一种快速、可靠的检测方法。

关键词：致病性大肠埃希菌 Allglo探针毒素基因检测

浙江省部分地区2003年痢疾志贺菌菌群分布和耐药性分析

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疾病监测 2005年第2期20卷 80-81页

作者：叶菊莲朱水荣莫顺堂罗芸孟真浙江省疾病预防控制中心浙江杭州310009

目的　了解浙江省志贺菌的菌型分布及耐药情况 ,提高防治措施的针对性 ,避免抗生素的滥用。方法　 15 8株志贺菌均按GB16 0 0 2 - 1995标准进行鉴定分型并采用kirby -Bauer法检测其对 14种抗生素的敏感性。结果　 15 8株志贺菌中福氏志... 详细信息

目的　了解浙江省志贺菌的菌型分布及耐药情况 ,提高防治措施的针对性 ,避免抗生素的滥用。方法　 15 8株志贺菌均按GB16 0 0 2 - 1995标准进行鉴定分型并采用kirby -Bauer法检测其对 14种抗生素的敏感性。结果　 15 8株志贺菌中福氏志贺菌 113株 (占 71 .5 2 % ) ;鲍氏志贺菌2 2株 (占 13. 92 % ) ;宋内志贺菌 14株 (占 8 .86 % ) ;痢疾志贺菌 9株 (占 5 . 70 % ) ;91株志贺菌对氨苄西林耐药最高达 95 .6 0 % ,其次为链霉素 (72. 5 3% ) ;对头孢他啶最敏感 ,其敏感性高达 95. 6 0 %。结论　近年来浙江省志贺菌的菌型分布及其对抗生素的敏感性均发生了明显的变化 ,医疗卫生部门应加强对志贺菌菌型及耐药性监测。

关键词：痢疾志贺菌浙江省耐药性分析 2003年菌群分布 kirby-Bauer法医疗卫生部门菌型分布福氏志贺菌鲍氏志贺菌宋内志贺菌耐药性监测志贺菌菌型抗生素敏感性耐药情况防治措施氨苄西林头孢他啶针对性链霉素

霍乱弧菌溶血素PCR检测方法的建立及序列分析

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霍乱弧菌溶血素PCR检测方法的建立及序列分析

基于多重PCR结合毛细管电泳技术甄别产毒素艰难梭菌方法的建立

2007年浙江省医学病毒学、医学微生物与免疫学学术年会

作者：陆群英程苏云叶菊莲占利罗芸张政浙江省疾病预防控制中心浙江省疾病预防控制中心浙江省疾病预防控制中心浙江省疾病预防控制中心浙江省疾病预防控制中心浙江省疾病预防控制中心

目的：建立霍乱弧菌溶血素基因(hly)PCR 检测方法,测序,分析霍乱弧菌溶血素基因多态性。方法：设计了霍乱弧菌溶血素特异性引物,建立霍乱弧菌溶血素的 PCR 检测方法,扩增溶血素全基因;对霍乱弧菌溶血素全基因测序,序列比对。结果：建立... 详细信息

目的：建立霍乱弧菌溶血素基因(hly)PCR 检测方法,测序,分析霍乱弧菌溶血素基因多态性。方法：设计了霍乱弧菌溶血素特异性引物,建立霍乱弧菌溶血素的 PCR 检测方法,扩增溶血素全基因;对霍乱弧菌溶血素全基因测序,序列比对。结果：建立的霍乱弧菌溶血素 PCR 检测方法特异性强;霍乱弧菌溶血素全基因序列分析表明,O1群和 O139群霍乱弧菌与霍乱孤菌 N16961(第七次大流行代表株)100%同源,而非 O1非 O139霍乱弧菌则存在不同程度的差异。结论：本文建立溶血素 PCR 检测方法,可以鉴定弧菌科中的霍乱弧菌属;霍乱弧菌 O1群和 O139群溶血素基因高度保守。

关键词：霍乱弧菌溶血素聚合酶链反应特异性序列分析

来源： cnki会议评论

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基于多重PCR结合毛细管电泳技术甄别产毒素艰难梭菌方法的建立

2014年浙江省检验医学学术年会

作者：金大智罗芸罗丽黄忱叶菊莲张政张严峻王贤军浙江省疾病预防控制中心微生物检验所杭州市第一人民医院检验科

艰难梭菌(Clostridium difficile)是一种产芽孢厌氧梭菌,感染患者多由于院内感染或经抗生素治疗。过去几十年中,由于高毒力株在多个发达国家引起艰难梭菌感染的大规模爆发,进而导致艰难梭菌感染的发病率和死亡率急剧增加。因此,在临床...

艰难梭菌(Clostridium difficile)是一种产芽孢厌氧梭菌,感染患者多由于院内感染或经抗生素治疗。过去几十年中,由于高毒力株在多个发达国家引起艰难梭菌感染的大规模爆发,进而导致艰难梭菌感染的发病率和死亡率急剧增加。因此,在临床诊断方面迫切需要一种快速、准确的艰难梭菌诊断技术方法。本实验采用多重PCR结合毛细管电泳技术对临床产毒素型艰难梭菌进行诊断和甄别,该方法能够同时检

关键词：

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腹泻样本中创伤弧菌的检测分析

疾病监测 2012年第1期27卷 59-61页

作者：潘军航叶菊莲朱敏罗芸张政浙江省疾病预防控制中心浙江杭州310051 浙江大学浙江杭州310058

目的了解浙江省部分地区腹泻患者创伤弧菌的感染情况。方法对2010年6-10月采集的标本,经3%氯化钠碱性蛋白胨水于37℃增菌后,划线纤维二糖多粘菌素E平板于40℃培养18～24 h,挑取可疑菌落进行分子生物学鉴定。结果在144份腹泻患者粪便样... 详细信息

目的了解浙江省部分地区腹泻患者创伤弧菌的感染情况。方法对2010年6-10月采集的标本,经3%氯化钠碱性蛋白胨水于37℃增菌后,划线纤维二糖多粘菌素E平板于40℃培养18～24 h,挑取可疑菌落进行分子生物学鉴定。结果在144份腹泻患者粪便样本中检测分离到2株创伤弧菌,阳性率为1.39%(2/144);均为生物Ⅰ型,其基因型为vcgC/16S rRNA B型。药敏结果显示分离的创伤弧菌对氨基糖苷类抗生素耐药如阿米卡星、庆大霉素。结论在监测的腹泻样本中分离到具有较强致病能力的创伤弧菌,且氨基糖苷类抗生素耐药,应加强对海水产品和腹泻样本中创伤弧菌的检测及耐药分析,预防创伤弧菌的感染暴发。

关键词：创伤弧菌腹泻检测

浙江沿海地区海及水产品霍乱弧菌污染状况调查分析

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中华预防医学杂志 2006年第5期40卷 336-338页

作者：吕华坤陈恩富谢淑云柴程良韦余东莫顺堂叶菊莲罗芸浙江省疾病预防控制中心传染病防制所杭州310009

目的了解浙江省沿海地区的海及水产品霍乱弧菌污染状况和菌型特征,为制定海及水产品卫生管理措施和霍乱防治对策提供科学依据。方法选择3个沿海县市,分别在农贸市场、养殖场(或捕捞点)、餐馆等场所采集990份海及水产品标本,标本经碱性... 详细信息

目的了解浙江省沿海地区的海及水产品霍乱弧菌污染状况和菌型特征,为制定海及水产品卫生管理措施和霍乱防治对策提供科学依据。方法选择3个沿海县市,分别在农贸市场、养殖场(或捕捞点)、餐馆等场所采集990份海及水产品标本,标本经碱性蛋白胨水增菌,4号培养基选择性培养,生化鉴定和血清、噬菌体分型,毒力基因检测。结果海及水产品带菌率为1.41%,其中甲鱼带菌率最高为8.9%。有稻叶型、小川型、0139群等3个血清型,各型菌株数分别为2株、2株、10株。12株菌株中9株有毒力基因,其中5株有3个毒力基因,1株只有 CTX、ACE 毒力基因,3株只有 ZOT 毒力基因。结论浙江省沿海地区海及水产品受到霍乱弧菌污染,霍乱弧菌3种菌型全有,大多具有毒力基因,能引起霍乱暴发的危险。

关键词：弧菌霍乱水产品污染分析

应用脉冲场凝胶电泳技术对浙江省福氏4c型痢疾志贺菌的分型研究

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疾病监测 2008年第1期23卷 7-10页

作者：叶菊莲占利罗芸程苏云陆群英韦余东浙江省疾病预防控制中心浙江杭州310009

目的通过应用脉冲场凝胶电泳技术对浙江省痢疾志贺菌福氏4c(F4c)型菌株进行分子流行病学研究,耐药谱分析,为了解本地区菌型的变化提供资料。方法60株F4c型志贺菌均按GB16002-1995标准鉴定分型并采用kirby-Bauer法检测其对13种抗生素的... 详细信息

目的通过应用脉冲场凝胶电泳技术对浙江省痢疾志贺菌福氏4c(F4c)型菌株进行分子流行病学研究,耐药谱分析,为了解本地区菌型的变化提供资料。方法60株F4c型志贺菌均按GB16002-1995标准鉴定分型并采用kirby-Bauer法检测其对13种抗生素的敏感性。参照美国疾病预防控制中心PulseNetUSA的统一方法进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型并做同源性分析。结果60株F4c型菌株都存在多重耐药,其中红霉素、利福平的耐药率最高,达100.0%,其次是奈定酸、氨苄西林、多西环素,耐药率均在96.2%以上;丁胺卡那、庆大霉素最敏感,其敏感率均在86.5%以上。脉冲场凝胶电泳分型60株试验菌株共分为24个型,1型36株占60.0%,且所有的暴发型菌株都为1型,2型2株占3.3%,其余22个型各为1株,各占1.7%。结论F4c型志贺菌是2004年在浙江首次分离到,PFGE分型1型菌株占60.0%,有明显的优势,并且容易引起暴发,其余各型均为少见菌型。此次检测发现其多重耐药现象严重,这可能与浙江省F4c型菌痢病人迅速增多和高度散发有关,应引起临床和疾病控制部门的高度重视。

关键词：志贺菌耐药率脉冲场凝胶电泳分子分型