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热休克因子HSF1介导卵巢间质细胞活化为癌相关成纤维细胞（CAFs）促进肿瘤细胞转移的功能研究

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热休克因子HSF1介导卵巢间质细胞活化为癌相关成纤维细胞（CAFs）...

作者：叶小琳重庆医科大学

学位级别：硕士

背景与目的:卵巢癌的二元模式分类逐渐被接受,I型卵巢癌以低级别浆液性癌和子宫内膜样癌为代表,表现为膨胀性生长和低侵袭潜能,II型卵巢癌以高级别浆液性癌和子宫内膜样癌为代表,表现为弥漫性生长和高侵袭潜能。微环境在肿瘤研究中的作... 详细信息

背景与目的:卵巢癌的二元模式分类逐渐被接受,I型卵巢癌以低级别浆液性癌和子宫内膜样癌为代表,表现为膨胀性生长和低侵袭潜能,II型卵巢癌以高级别浆液性癌和子宫内膜样癌为代表,表现为弥漫性生长和高侵袭潜能。微环境在肿瘤研究中的作用逐渐受到重视,CAFs是肿瘤微环境中的主要成分。前期实验成功分离出I型CAFs和II型CAFs,且实验结果提示两类CAFs对肿瘤细胞浸润转移促进作用的不同与其来源的卵巢癌细胞本身的特质有关,但机制尚不清楚。HSF1是一种热休克因子,能够编程肿瘤间质细胞从而促进恶性肿瘤形成。本文探讨卵巢癌细胞中HSF1活化对间质细胞中HSF1表达的影响及其在促卵巢癌侵袭转移潜能中的作用。方法:1.从Ⅰ/Ⅱ卵巢癌新鲜标本中分离提纯Ⅰ/Ⅱ型CAFs及相应的Ⅰ/Ⅱ型肿瘤细胞,并验证CAFs对相应原代卵巢癌细胞迁移的促进作用。2.构建不同侵袭潜能卵巢癌细胞株的小鼠异种移植瘤,验证对NFs的活化募集及促进肿瘤转移的作用。3.免疫组化检测HSF1在10例正常卵巢组织、Ⅰ/Ⅱ型各20例卵巢癌组织中的表达情况,免疫细胞化学验证NFs与CAFs中HSF1表达情况;4.Western blot检测卵巢癌细胞株及原代分离提纯的NFs和CAFs中HSF1表达;5.收集上皮性卵巢癌细胞株的条件培养基与NFs共培养得到inducible CAFs(indcafs),检测nfs/indcafs/cafs中hsf1及α-sma的蛋白和mran表达,同时验证三种细胞本身及对hey细胞转移能力影响;6.rna干扰cafs中hsf1表达后,采用westernblot检测三组细胞(caf-nt/caf-ihsf1/nfs)中hsf1及α-sma表达;7.收集caf-nt/caf-ihsf1条件培养基,比较caf-nt/caf-ihsf1本身运动能力及其条件培养基(cm)对hey细胞株迁移侵袭能力的影响。结果:1.Ⅱ型cafs对其本身分离出的原代肿瘤细胞迁移能力的促进作用强于Ⅰ型cafs对其本身分离出的原代肿瘤细胞的迁移促进作用;2.体内试验验证Ⅱ型卵巢癌细胞株对小鼠体内nfs募集活化作用增强,且其活化后的cafs对卵巢癌细胞株迁移促进作用同样增强;3.免疫组化结果显示上皮性卵巢癌组织的癌细胞与间质细胞中hsf1呈高表达,正常卵巢组织上皮细胞与间质中hsf1几乎不表达(p<0.01);免疫细胞化学验证hsf1在cafs中表达高于nfs。4.Ⅱ型卵巢癌细胞株中hsf1表达高于Ⅰ型卵巢癌细胞株,cafs细胞中hsf1表达高于nfs;5.indcafs中hsf1及α-sma表达增高,其本身迁移能力增加,对癌细胞的转移促进作用明显增高(p<0.01)。6.与对照组(caf-nt)相比,rna干扰cafs中hsf1(caf-ihsf1)后,hsf1与α-sma蛋白表达水平下降,transwell结果显示其本身迁移侵袭能力显著下降(p<0.01),其条件培养基与hey细胞共培养明显降低hey细胞迁移侵袭能力(p<0.05)。结论:hsf1在卵巢癌组织中表达高于正常卵巢组织,间质细胞表达与癌细胞表达强度一致,恶性程度越高表达强度越强,提示hsf1与卵巢癌恶性潜能可能相关;体内进一步验证卵巢癌细胞株对正常间质的募集活化进而促进癌细胞转移的作用。癌细胞与NFs共培养可能诱导NFs中HSF1及α-SMA表达,促进其本身的迁移能力,同时诱导其对癌细胞迁移侵袭潜能的促进作用。干扰CAFs中HSF1下调其本身及对卵巢癌细胞的迁移侵袭能力,说明卵巢癌细胞可能通过HSF1活化正常间质细胞,从而促进恶性肿瘤进展。以上结果均验证HSF1可能介导卵巢癌间质成纤维细胞激活进而促进卵巢肿瘤的恶性进展。

关键词：热休克因子1 CAFs 卵巢癌转移

牦牛CLDN3基因特征及FSH对CLDN3、CLDN11在睾丸支持细胞表达的影响

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牦牛CLDN3基因特征及FSH对CLDN3、CLDN11在睾丸支持细胞表达的影响

作者：叶小琳甘肃农业大学

学位级别：硕士

睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)的紧密连接蛋白(claudins,CLDNs)在精子迁移过程中扮演着开关的角色。为探索CLDNs对牦牛(Bos grunniens)SC的生物学作用,本研究获取牦牛CLDN3基因序列,对其进行生物信息学分析,并检测FSH对SCs CLDN3、CL... 详细信息

睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)的紧密连接蛋白(claudins,CLDNs)在精子迁移过程中扮演着开关的角色。为探索CLDNs对牦牛(Bos grunniens)SC的生物学作用,本研究获取牦牛CLDN3基因序列,对其进行生物信息学分析,并检测FSH对SCs CLDN3、CLDN11表达的影响。扩增CLDN3基因序列,测序并拼接,用生物信息软件分析牦牛CLDN3 m RNA特征。运用实时荧光定量PCR(quantitative real time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测FSH对牦牛SCs CLDN3 m RNA、CLDN11 m RNA表达的影响。通过免疫蛋白印记(Western bloting,WB)方法,检测FSH对牦牛SCs CLDN3蛋白、CLDN11蛋白表达的影响,并采用免疫荧光染色对CLDN3蛋白、CLDN11蛋白进行定位检测。结果表明:(1)本研究成功克隆得到1074 bp含有开放阅读框的牦牛CLDN3 c DNA序列(Gen Bank No.YK 411920),其中编码区660 bp,编码219氨基酸,经同源性分析发现牦牛与其他物种同源性较高(≥90%)。(2)FSH浓度为25 ng/m L时CLDN3 CLDN11 m RNA表达与其他组相比表达水平最高,差异极显著(p<0.01)。(3)25 ng/m L FSH作用2h CLDN3 m RNA和蛋白水平与其他组相比表达水平最高差异极显著(p<0.01);25 ng/m L FSH作用24 h时CLDN11 m RNA(p<0.01)和蛋白水平与其他组相比表达水平最高。(4)免疫荧光结果显示CLDN3蛋白在SCs细胞质、细胞核及细胞膜均有表达,CLDN11在SCs细胞质、细胞膜均有表达。综上所述,牦牛CLDN3氨基酸序列在种属间具有保守性,FSH可能是牦牛SCs形成TJ的重要激素,并以浓度依赖和时间依赖的方式影响CLDN3、CLDN11的表达。本研究为揭示牦牛精子迁移过程中CLDN3、CLDN11的生物学作用提供科学依据。

关键词：牦牛睾丸支持细胞紧密连接蛋白促卵泡刺激素

高校红色旅游资源开发运作分析——基于云南师范大学的分析

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旅游与摄影 2022年第21期 64-66页

作者：杨韵永叶小琳王六妹师佳英云南师范大学会计学院云南师范大学经济与管理学院

文章运用实地调研法、比较分析法和文献研究法,从市场营销角度分析云南师范大学打造特色高校红色旅游品牌的可行性与面临的问题以及具体实施方案,探索高校红色旅游发展的市场化运作模式,为推动国内外高校文化旅游模式的进一步转变提供... 详细信息

文章运用实地调研法、比较分析法和文献研究法,从市场营销角度分析云南师范大学打造特色高校红色旅游品牌的可行性与面临的问题以及具体实施方案,探索高校红色旅游发展的市场化运作模式,为推动国内外高校文化旅游模式的进一步转变提供新思路。

关键词：后疫情时代高校红色旅游市场化

绝经前ROMA截断值在卵巢子宫内膜异位症与上皮性卵巢癌中的鉴别价值

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重庆医科大学学报 2018年第5期43卷 698-702页

作者：叶小琳令狐华重庆医科大学附属第一医院妇产科重庆400016

目的:探讨血清CA125、HE4水平和绝经前ROMA值鉴别卵巢子宫内膜异位症及上皮性卵巢癌的临床应用价值。方法:收集2013年8月至2014年9月因发现附件区包块,收住入我院行手术治疗的患者共293例,其中上皮性良性卵巢肿瘤(EOB)患者61例(绝经前35... 详细信息

目的:探讨血清CA125、HE4水平和绝经前ROMA值鉴别卵巢子宫内膜异位症及上皮性卵巢癌的临床应用价值。方法:收集2013年8月至2014年9月因发现附件区包块,收住入我院行手术治疗的患者共293例,其中上皮性良性卵巢肿瘤(EOB)患者61例(绝经前35例),卵巢子宫内膜异位症(OEM)患者151例(绝经前149例),上皮性卵巢癌(EOC)患者81例(绝经前41例)。术前2~5 d抽取静脉血,化学发光法测定血清中CA125与HE4水平,用卵巢癌风险评估软件计算ROMA指数。结果:(1)OEM组年龄(中位年龄32岁)明显小于EOC组(中位年龄51岁)(P=0.000),与EOB组差异不明显(P=0.500)。(2)绝经前EOC组的CA125高于EOB组与OEM组(P=0.000)。HE4和ROMA指数也高于OEM及EOB组,差异均有统计学意义(P=0.000),二者在EOB组与OEM组间无明显差异(HE4:P=0.762,ROMA:P=0.389)。(3)早期EOC组与OEM组比较,绝经前CA125值无明显差异(P=0.861),其诊断EOC的敏感性为85.71%,特异性为20.13%;HE4和ROMA(标准截断值为7.4%)诊断敏感性、特异性,阳性预测值、阴性预测值分别为71.43%、97.32%、71.43%、97.32%和92.86%、83.89%、35.14%、99.21%。绘制CA125,HE4及ROMA诊断EOC的ROC曲线,曲线下面积分别为:0.798、0.921、0.919。根据约登指数选取最佳ROMA截断值11.65%时,诊断早期EOC的敏感性,特异性,阳性预测值,阴性预测值分别为92.86%、93.96%、59.1%、99.29%,诊断效能高于现有截断值7.4%。结论:提高绝经前ROMA截断值至11.65%可能更有助于鉴别早期上皮性卵巢癌和子宫内膜异位症。

关键词：绝经前 ROMA 卵巢子宫内膜异位症早期上皮性卵巢癌

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英语词汇练习

英语词汇练习

1986年

作者：叶小琳林秀英等编

本书选自英国.美国,日本,香港,及国内有关方面的试题,介绍了英语词汇的学习方法等

ISBN: (数字)7405·16

ISBN: (纸本)7405·16

本书选自英国.美国,日本,香港,及国内有关方面的试题,介绍了英语词汇的学习方法等

关键词：英语-基本词汇

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桥牌做庄题解

桥牌做庄题解

卵巢癌肿瘤间质中癌相关成纤维细胞全基因表达谱分析

1986年

作者：里斯(Reese T.)

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重庆医科大学学报 2017年第11期42卷 1385-1389页

作者：侯靓思叶小琳令狐华重庆医科大学附属第一医院妇产科重庆400016

目的:寻找上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)中差异表达的m RNA并进行分析,为进一步阐明肿瘤间质中癌相关成纤维细胞影响卵巢癌细胞恶性行为的机制提供依据。方法:分别提取3例上皮性卵巢癌的CAFs及3例正常卵巢组织的NFs,抽提总RNA,进行全基因表达谱分析。对差异基因进行基因本体论(Gene Ontology,GO)富集及信号通路联合分析,推定相关差异基因生物学功能,并对MDM2、NR3C1等6个上调的差异基因进行荧光定量PCR验证。结果:对芯片结果的分析显示差异基因共1 636个。q RTPCR对MDM2、NR3C1等6个差异基因的验证结果与芯片结果相符,生物信息学分析显示上述差异基因与癌相关通路、肌动蛋白细胞骨架重塑通路等有关,提示可能参与了对卵巢癌细胞恶性行为的促进作用。结论:EOC肿瘤间质中的成纤维细胞存在调控癌细胞的差异基因,分析这些差异基因为进一步研究卵巢癌成纤维细胞调控癌细胞生物学行为的分子机制提供了基本依据。

关键词：上皮性卵巢癌癌相关成纤维细胞全基因表达谱芯片

薛爱国以“少阳为枢”理论指导经筋刺法治疗髌骨软化症经验

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广州中医药大学学报 2023年第12期40卷 3168-3173页

作者：叶小琳李蕙萍钟浩宇李悦张小文薛爱国广州中医药大学东莞医院广东东莞523127 东莞市虎门中医院广东东莞523320

总结薛爱国教授治疗髌骨软化症(CP)的理论观点及疗法应用。薛爱国教授指出“筋骨失衡”和“少阳枢机不利”是本病关键病机,治疗以“通少阳枢,筋骨并治,形神同调”为原则,其治疗方案是在“调形”(体态评估、体格检查)的基础上,采取经筋... 详细信息

总结薛爱国教授治疗髌骨软化症(CP)的理论观点及疗法应用。薛爱国教授指出“筋骨失衡”和“少阳枢机不利”是本病关键病机,治疗以“通少阳枢,筋骨并治,形神同调”为原则,其治疗方案是在“调形”(体态评估、体格检查)的基础上,采取经筋恢刺法针刺“足少阳经筋穴”(风池、肩井、带脉、环跳、阳陵泉)及膝后结筋病灶点,再依据以上针刺点施以揿针埋针,对于肌力不足导致的膝前疼痛配合运动康复训练,从而提高临床疗效。

关键词：髌骨软化症少阳为枢经筋理论名医经验薛爱国

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Ⅲ-Ⅴ族半导体制成的高速光通信集成电路

中国集成电路 2002年第1期11卷 38-41页

作者： Eiichi Sano 叶小琳 NTT光电子实验室

超高速集成电路是大容量光通信系统的关键部件之一。Ⅲ-Ⅴ族半导体光通信IC的最新进展,适应下一代40Gb/s/波长通道系统的发展需要。

关键词：高速光通信集成电路半导体分布式放大器晶体管工作速率前置放大器驱动器触发器线路图