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小干扰RNA沉默CXCR4和CXCR7对人子宫内膜癌Ishikawa细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第4期24卷 389-394页

作者：叶园英黄煜颜莉莉赵淑萍张磊青岛大学医学部山东青岛66000 青岛市妇女儿童医院妇科山东青岛266000

目的:探讨针对趋化因子受体基因CXCR4和CXCR7的小干扰RNA(siRNA)对人子宫内膜癌Ishikawa细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法:将子宫内膜癌Ishikawa细胞株注射于裸鼠肩胛背部皮下建立动物模型,待肿瘤最长径达5~7mm后,将所有荷瘤裸鼠随机分组... 详细信息

目的:探讨针对趋化因子受体基因CXCR4和CXCR7的小干扰RNA(siRNA)对人子宫内膜癌Ishikawa细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法:将子宫内膜癌Ishikawa细胞株注射于裸鼠肩胛背部皮下建立动物模型,待肿瘤最长径达5~7mm后,将所有荷瘤裸鼠随机分组,分别给予CXCR4-siRNA和CXCR7-siRNA单独或联合瘤体内注射,并以阴性对照siRNA和生理盐水作为对照组,每3 d治疗一次,共6个治疗周期。观察各组裸鼠移植瘤的生长,比较各组移植瘤的体积和质量的差异,并以实时荧光定量RT-PCR、Western blotting和免疫组化技术验证CXCR4和CXCR7的基因沉默效果。结果:成功建立Ishikawa细胞裸鼠移植瘤模型,与阴性对照siRNA组和空白对照组相比,CXCR4 siRNA治疗组、CXCR-siRNA治疗组和CXCR4-siRNA+CXCR7-siRNA治疗组的肿瘤的生长均明显受到抑制(均P<0.05);CXCR4-siRNA和/或CXCR7-siRNA瘤体内直接注射能显著下调CXCR4、CXCR7 mRNA(均P<0.05)和蛋白(均P<0.01)的表达。结论:siRNA干扰CXCR4和CXCR7表达能够有效抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞裸鼠移植瘤的生长。

关键词： siRNA CXCR4 CXCR7 子宫内膜癌裸鼠

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人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立

山东医药 2016年第35期56卷 28-30页

作者：叶园英黄煜颜莉莉赵淑萍张磊刘倩倩青岛市妇女儿童医院山东青岛266000 青岛大学

目的建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法培养人子宫内膜癌细胞系Ishikawa,制成肿瘤细胞悬液,于裸鼠（10只）右侧肩胛背部皮下注射,每只裸鼠注射约1×107个细胞。接种后每日观察裸鼠精神、活动、饮食、排便等状况及是否有肿瘤生... 详细信息

目的建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型。方法培养人子宫内膜癌细胞系Ishikawa,制成肿瘤细胞悬液,于裸鼠（10只）右侧肩胛背部皮下注射,每只裸鼠注射约1×107个细胞。接种后每日观察裸鼠精神、活动、饮食、排便等状况及是否有肿瘤生长、肿瘤生长速度等。以接种部位可见或触及肿瘤小结节为成瘤标准,若第一次移植失败则考虑行二次瘤细胞接种。发现肿瘤生长后每3 d计算肿瘤体积。当肿瘤最长径达15 mm或出现皮肤破溃时,立即处死荷瘤裸鼠;否则于接种第49天将荷瘤裸鼠处死、剥出肿瘤,测量瘤体长径,称取瘤体质量。取肿瘤组织切片后行HE染色,观察肿瘤组织病理变化。结果有1只裸鼠第一次接种失败,在第二次接种后移植成功,一次成瘤率为9/10。在接种第40天和第46天各发现1只裸鼠瘤体表面皮肤破溃,发现后脱颈处死荷瘤裸鼠,测得肿瘤最长径分别为12.2、12.6 mm,肿瘤体积分别为505.14、510.30 mm3,肿瘤质量分别为0.88、0.86 g;至接种第49天,存活的7只裸鼠移植瘤瘤体表面皮肤完整,无破溃缺损,处死裸鼠后完整剥离肿瘤,测得肿瘤最长径为11.7~14.0 mm,瘤重0.86~1.23 g。取移植瘤组织进行病理检查,肿瘤组织大体表现与镜下表现符合人子宫内膜癌的特点。结论采用将Ishikawa细胞株接种于裸鼠右侧肩胛皮下的方式成功建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,且移植瘤组织和细胞保留了人子宫内膜癌的病理特征。

关键词：子宫内膜癌 Ishikawa细胞株子宫内膜癌移植瘤动物模型

RNA干扰CXCR4和CXCR7对人子宫内膜癌裸鼠转移瘤生长的抑制作用

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RNA干扰CXCR4和CXCR7对人子宫内膜癌裸鼠转移瘤生长的抑制作用

miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水平对多囊卵巢综合征患者肥胖及代谢紊乱的影响

2016全国中西医结合妇产科研究进展学术研讨会暨201...

作者：叶园英黄煜颜莉莉赵淑萍张磊青岛大学青岛市妇女儿童医院

目的探讨应用小干扰RNA(siRNA)下调CXCR4和CXCR7表达对人子宫内膜癌移植瘤生长的影响及其可能机制。方法设计并合成针对CXCR4和CXCR7基因的化学修饰siRNA和阴性对照siRNA序列:CXCR4-siRNA、CXCR7-siRNA和Negative-siRNA。将人子宫内膜癌...

目的探讨应用小干扰RNA(siRNA)下调CXCR4和CXCR7表达对人子宫内膜癌移植瘤生长的影响及其可能机制。方法设计并合成针对CXCR4和CXCR7基因的化学修饰siRNA和阴性对照siRNA序列:CXCR4-siRNA、CXCR7-siRNA和Negative-siRNA。将人子宫内膜癌Ishikawa细胞悬液接种于30只裸鼠成功建立人子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型,各组裸鼠分别给予移植瘤体内注射CXCR4-siRNA、CXCR7-siRNA、CXCR4-siRNA+CXCR7-siRNA、Negative-siRNA和生理盐水。每3d用游标卡尺测量肿瘤的长径和短径计算体积,并绘制各组移植瘤体积变化曲线。治疗结束后,处死所有荷瘤裸鼠,剥出肿瘤组织,并记录各肿瘤的质量和体积。以荧光定量RT-PCR和Western blotting验证各siRNA对CXCR4和CXCR7的基因沉默效果,采用免疫组化技术和TUNEL法检测各分组瘤组织中癌细胞增殖能力和凋亡水平的差异。结果各组肿瘤体积变化曲线表明:CXCR4 siRNA和CXCR-siRNA对移植瘤体进行单独注射和联合注射均可明显抑制移植瘤的生长。整个实验过程中,阴性对照组和生理盐水组的移植瘤生长迅速,而3个治疗组中的肿瘤自第3个治疗周期开始,生长速度明显减缓。治疗结束后称得各组移植瘤的质量分别为:CXCR4-siRNA注射组[(0.42±0.12)g]、CXCR7-siRNA注射组[(0.43±0.13)g]、CXCR4-siRNA和CXCR7-siRNA联合注射组[(0.40±0.08)g]、Negative-siRNA注射组[(0.90±0.09)g]和生理盐水对照组[(0.99±0.11)g]。瘤体内直接注射CXCR4-siRNA和CXCR7-siRNA可导致移植瘤组织中CXCR4和CXCR7mRNA和蛋白的表达显著降低;并使得子宫内膜癌细胞增殖能力显著下降(P0.05);TUNEL检测结果显示各分组瘤组织中肿瘤细胞凋亡率没有显著性差异(P>0.05)。讨论我们前期体外实验已经证实,利用siRNA沉默CXCR4和CXCR7基因后能够明显抑制子宫内膜癌细胞的增殖和侵袭能力。在本实验中我们采用移植瘤体内单独或联合注射CXCR4-siRNA和CXCR7-siRNA下调移植瘤组织中CXCR4和CXCR7的表达后,观察到各治疗组子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长受到明显抑制,但各治疗组(CXCR4-siRNA单独治疗、CXCR7-siRNA单独治疗和二者联合治疗)的肿瘤抑制效果相似,联合治疗并不能产生叠加效应。同样,通过检测各组移植瘤组织中PCNA(增殖细胞核抗原)的表达,我们发现3个治疗组中肿瘤细胞PCNA表达阳性率较阴性对照组或生理盐水对照组相比明显降低,但CXCR4-siRNA治疗组和CXCR7-siRNA治疗组对子宫内膜癌细胞增殖能力的抑制作用相当,甚至二者联合注射也不能产生更大的抑制效应。这些结果表明:CXCR4和CXCR7在子宫内膜癌发生发展过程中起着极其重要的作用,有望成为子宫内膜癌基因治疗的新靶点。

关键词：

来源： cnki会议评论

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临床检验杂志 2017年第3期35卷 193-195页

作者：许伟伟许昌谭慧芳吕映频祁秀娟王秋阳叶园英王圆圆青岛大学医学部山东青岛266000 烟台毓璜顶医院肝胆外科山东烟台264000 青岛大学医学院附属医院生殖医学科山东青岛266000

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者外周血淋巴细胞miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水平与肥胖及相关代谢紊乱的关系。方法收集PCOS患者60例(非肥胖组22例,肥胖组38例)。电化学发光法检测其血清促卵泡素(b FSH)、促黄体生成素(b LH)、雌... 详细信息

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者外周血淋巴细胞miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水平与肥胖及相关代谢紊乱的关系。方法收集PCOS患者60例(非肥胖组22例,肥胖组38例)。电化学发光法检测其血清促卵泡素(b FSH)、促黄体生成素(b LH)、雌二醇(b E2)、孕激素(b P)、睾酮(b T)、空腹胰岛素(FINS)水平,葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖(Glu),实时荧光定量PCR(q PCR)法检测淋巴细胞miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水平。肥胖组控制体重后复测上述指标。结果肥胖组b T、Glu、FINS、HOMA-IR水平均明显高于非肥胖组(P均<0.05);肥胖组控制体重后BMI、b LH、b T、Glu、FINS、HOMA-IR水平较控制前均明显降低(P均<0.05)。肥胖组miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水均明显高于非肥胖组(P均<0.05),且控制体重后较控制前亦明显降低(P均<0.05)。miR-21的表达量与b T呈正相关(r=0.342,P=0.008),miR-27a、miR-27b的表达量与FINS呈正相关(r=0.413,P=0.001;r=0.397,P=0.002)。结论 miR-21、miR-27a和miR-27b可能参与PCOS患者肥胖及相关代谢紊乱的进程。

关键词：多囊卵巢综合征微小RNA 肥胖实时荧光定量PCR

两种方法建立的大鼠慢性阻塞性肺疾病模型的比较

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解放军医学杂志 2024年

作者：李德富叶园园章洪萍侯润华何耀军张春云胡杰英陈蕊广州医科大学附属第五医院重症医学科/广东高校生物靶向诊治与康复重点实验室广州医科大学附属第一医院呼吸内科南部战区总医院重症医学科内科病区

目的对比烟草烟雾（CS）暴露和机动车尾气（MVE）暴露两种方法建立的大鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型的模拟程度。方法将24只雄性SD大鼠按随机数字表分为对照组、CS组和MVE组，每组8只。CS组与MVE组大鼠分别采用CS或MVE暴露建立COP... 详细信息

目的对比烟草烟雾（CS）暴露和机动车尾气（MVE）暴露两种方法建立的大鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型的模拟程度。方法将24只雄性SD大鼠按随机数字表分为对照组、CS组和MVE组，每组8只。CS组与MVE组大鼠分别采用CS或MVE暴露建立COPD模型；建模结束后，检测各组大鼠的肺功能；收集大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF），检测其中炎症细胞数、炎性因子白细胞介素（IL）-6和肿瘤坏死因子（TNF）-α及黏蛋白5AC(MUC5AC)表达水平；HE染色观察肺组织和气道病理变化；PAS染色用于检测气道杯状细胞增生情况。结果与对照组比较，CS组和MVE组大鼠的肺功能参数吸气阻力（RI）、肺总量（TLC）、肺静态顺应性（Cchord）均明显增高（P<0.05），而呼气流速参数FEV50/FVC均明显降低（P<0.05）；与MVE组相比，CS组大鼠的RI、TLC、Cchord均明显增高（P<0.05）,FEV50/FVC降低（P<0.05）。肺组织HE染色结果显示，CS组和MVE组大鼠平均肺泡截距（MLI）增大均高于对照组（P<0.05）,CS组MLI高于MVE组（P<0.05）。CS组和MVE组大鼠BALF中白细胞、中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞数，以及IL-6、TNF-α水平均高于对照组（P<0.05）；且CS组中炎症细胞数、IL-6及TNF-α水平均高于MVE组（P<0.05）。肺组织PAS染色结果显示，CS组和MVE组大鼠大气道杯状细胞较对照组均明显增多（P<0.05），且CS组杯状细胞数高于MVE组（P<0.05）;CS组和MVE组BALF中MUC5AC表达水平均高于对照组（P<0.05），且CS组大鼠BALF中MUC5AC水平明显高于MVE组（P<0.05）。结论应用CS或MVE暴露均可建立大鼠COPD模型，且CS暴露比MVE暴露能更好地模拟COPD急性加重期特征。

关键词：慢性阻塞性肺疾病烟草烟雾机动车尾气动物模型

生酮饮食对于婴儿痉挛症患儿肠道微生态及代谢改变研究

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中国实用儿科杂志 2024年第4期39卷 304-310,320页

作者：谢淦王文建叶园珍郑跃杰廖建湘申昆玲首都医科大学附属北京儿童医院北京100045 深圳市儿童医院广东深圳518000

目的研究生酮饮食(KD)治疗对婴儿痉挛症患儿肠道菌群结构及代谢组的改变,探讨KD治疗婴儿痉挛症微生态机制。方法 2015年7月至2020年4月在深圳市儿童医院神经内科确诊的婴儿痉挛症患儿16例,纳入年龄6月龄至3岁,并选取30名年龄匹配的健... 详细信息

目的研究生酮饮食(KD)治疗对婴儿痉挛症患儿肠道菌群结构及代谢组的改变,探讨KD治疗婴儿痉挛症微生态机制。方法 2015年7月至2020年4月在深圳市儿童医院神经内科确诊的婴儿痉挛症患儿16例,纳入年龄6月龄至3岁,并选取30名年龄匹配的健康儿童作为对照。分别采集婴儿痉挛症患儿KD治疗前粪便样本、KD治疗1周后的粪便样本和健康儿童的粪便样本,通过宏基因组和宏代谢组技术对粪便样本中的微生物组成和代谢物成分进行检测,探索治疗前、治疗后及相对健康儿童的菌群组成差异和代谢差异。结果婴儿痉挛症患儿肠道微生态的组成模式与健康儿童存在不同,其中占主导地位的有益菌拟杆菌属占比为22.62%,明显低于健康儿童(38.86%);多氏拟杆菌Bacteroides dorei两组差异有统计学意义[对照组(3.24±7.14),pre-KD组(0.19±0.40);P<0.001]。KD治疗前、后与对照组比较:埃希氏菌属丰度在KD治疗前、后均比对照组增加,差异有统计学意义(均P<0.001)。种水平统计分析显示,KD治疗后多种拟杆菌如脆弱拟杆菌、多形拟杆菌、普通拟杆菌、多氏拟杆菌等增加,普氏栖粪杆菌、嗜黏蛋白阿克曼菌也有随KD治疗增加。KD治疗后长双歧杆菌、短双歧杆菌下降。与对照组比较,婴儿痉挛症患儿大肠杆菌明显富集,随着KD治疗回落[对照组(0.31±0.66),KD治疗前(7.41±9.03),KD治疗后(3.61±4.59);P<0.001]。从KEGG基因功能预测结果分析,可见肠道微生物功能在3组中存在丰度差异,尤其是涉及到碳水化合物代谢、基因转录翻译、核酸代谢等功能通路,差异有统计学意义(P<0.05)。在宏代谢组学差异分析中,肠道微生态的代谢物发生了显著改变,KD治疗后显著富集了与抗癫痫相关的癸酸、姜黄素等代谢物,差异有统计学意义(P<0.05)。结论婴儿痉挛症患儿的肠道菌群组成与健康儿童存在差异,多氏拟杆菌在婴儿痉挛症患者中显著减少,大肠杆菌明显富集,经KD治疗后拟杆菌、普氏栖粪杆菌等有益菌增多。同时检测到多种与神经系统疾病相关的代谢物。这可能和KD改善婴儿痉挛症患儿临床症状的机制密切相关。

关键词：生酮饮食婴儿痉挛症肠道菌群宏基因组代谢组

瑞芬太尼靶控输注与舒芬太尼靶控输注在老年胃癌患者腹腔镜胃癌根治术中的麻醉效果比较

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中国实用医刊 2024年第3期51卷 45-48页

作者：温泉张军叶园园南阳市中心医院麻醉科南阳473000

目的比较瑞芬太尼靶控输注与舒芬太尼靶控输注在老年胃癌患者腹腔镜胃癌根治术(LRG)中的麻醉效果。方法随机对照研究。抽取2017年5月至2020年4月于南阳市中心医院行LRG的老年胃癌患者96例,按照随机数字表法分为对照组与观察组,每组48例... 详细信息

目的比较瑞芬太尼靶控输注与舒芬太尼靶控输注在老年胃癌患者腹腔镜胃癌根治术(LRG)中的麻醉效果。方法随机对照研究。抽取2017年5月至2020年4月于南阳市中心医院行LRG的老年胃癌患者96例,按照随机数字表法分为对照组与观察组,每组48例。对照组采用瑞芬太尼靶控输注麻醉,观察组采用舒芬太尼靶控输注麻醉。比较两组麻醉恢复情况,比较两组麻醉前(T0)、麻醉诱导后(T1)、麻醉结束时(T2)及麻醉后24 h(T3)的血流动力学指标[心率、平均动脉压(MAP)]、应激反应指标[皮质醇(COR)、谷氨酰胺(GLU)],比较两组不良反应发生率。结果观察组苏醒时间、拔管时间短于对照组(P<0.05)。T1、T2时,观察组心率低于对照组、MAP水平高于对照组,且观察组心率、MAP水平变化幅度小于对照组(P<0.05)。T1、T2、T3时,观察组COR、GLU水平低于对照组,且COR、GLU水平变化幅度小于对照组(P<0.05)。观察组不良反应发生率(4.17%,2/48)低于对照组(18.75%,9/48),P<0.05。结论与瑞芬太尼相比,舒芬太尼靶控输注在老年胃癌患者LRG中的效果更好,能缩短患者苏醒时间和拔管时间,稳定血流动力学,且不会使患者产生明显的应激反应,用药安全性较高。

关键词：舒芬太尼瑞芬太尼胃癌根治术靶控输注

基于并行测试技术的信号处理组件测试系统设计

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软件 2024年第4期45卷 181-183页

作者：王秀霞叶园园邓雪亚中国空空导弹研究院河南洛阳471009 中国人民解放军93160部队北京100071

为了解决信号处理组件生产中周期长、效率低等问题,本文设计了一种基于并行测试技术的测试系统,实现了单个测试周期内多任务的同时测试。该系统架构灵活性强,通用性高,可推广应用。

关键词：信号处理组件并行测试多任务

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柔直换流阀用相变冷却工质击穿特性研究

电工技术学报 2024年第3期39卷 875-886,913页

作者：温英科阮琳中国科学院电工研究所北京100190 中国科学院大学北京100049

相变冷却技术冷却效率高、安全可靠,有望攻克柔直换流阀散热瓶颈,实现其高压、大容量发展,在换流阀冷却领域具有良好的应用前景。为实现相变冷却换流阀绝缘系统可靠设计,该文设计研制了三相态相变冷却工质可调频绝缘特性测试专用平台,... 详细信息

相变冷却技术冷却效率高、安全可靠,有望攻克柔直换流阀散热瓶颈,实现其高压、大容量发展,在换流阀冷却领域具有良好的应用前景。为实现相变冷却换流阀绝缘系统可靠设计,该文设计研制了三相态相变冷却工质可调频绝缘特性测试专用平台,并以换流阀用相变冷却工质为研究对象,依据换流阀典型运行工况,利用专用测试平台开展了相变冷却工质三相态、50~300 Hz频率范围的绝缘击穿特性研究。得到了相变冷却工质击穿特性随工质相态及电压频率的变化规律,分析了相变冷却工质不同相态的击穿机理,揭示了工质相态和电压频率变化对冷却工质击穿特性的影响机制。研究工作不仅解决了高频下相变冷却工质的三相态耐压测试方法问题,且所得研究成果为相变冷却柔直换流阀的绝缘设计奠定了基础,同时可指导相变冷却技术在其他电力电子器件及装备上的应用。

关键词：换流阀柔性直流输电相变冷却击穿特性高频绝缘