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园林绿化的施工管理与养护技术探讨

花木盆景（下半月） 2024年第6期 110-111页

作者：刘娜赵家勇叶双双北京欣谷建设发展有限公司北京奥康达体育科技有限公司北京绿艺新源建设发展有限公司

在人们越来越关注生态环境的今天,园林绿化已成为城市可持续发展的重要组成部分,在我国,园林绿化事业得到了前所未有的发展机遇,各级政府和社会各界对园林绿化的关注度也逐渐提高。然而,在园林绿化施工过程中,如何确保工程质量、提高绿... 详细信息

在人们越来越关注生态环境的今天,园林绿化已成为城市可持续发展的重要组成部分,在我国,园林绿化事业得到了前所未有的发展机遇,各级政府和社会各界对园林绿化的关注度也逐渐提高。然而,在园林绿化施工过程中,如何确保工程质量、提高绿化效果,成为一个函待解决的问题。因此,本文主要对园林绿化的施工管理措施进行了分析,并对园林绿化的养护技术进行了阐述,以期促进园林绿化行业的进步。

关键词：工程质量园林绿化绿化效果生态环境养护技术城市可持续发展管理与养护施工管理措施

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鸭肝油脂提取工艺优化及其品质分析

粮食与油脂 2024年第7期37卷 17-23页

作者：叶双双刘安琪肖骏王殿勤苑博华常世敏河北工程大学生命科学与食品工程学院河北邯郸056038 邯郸市天然产物与功能食品开发重点实验室河北邯郸056038 河北乐寿鸭业有限责任公司河北沧州062250

探究粗制鸭肝油脂的最佳提取工艺,考察精炼工艺主要参数对鸭肝油脂精炼效果的影响,并分析精炼过程中脂肪酸组成及含量变化。结果表明:最优提取工艺为料液比4∶1(g/mL)、无水乙醇与正己烷体积比1∶1、超声温度50℃、超声时间30 min,在此... 详细信息

探究粗制鸭肝油脂的最佳提取工艺,考察精炼工艺主要参数对鸭肝油脂精炼效果的影响,并分析精炼过程中脂肪酸组成及含量变化。结果表明:最优提取工艺为料液比4∶1(g/mL)、无水乙醇与正己烷体积比1∶1、超声温度50℃、超声时间30 min,在此条件下,鸭肝油脂提取率55.74%;最佳精炼工艺为脱胶水添加量(以粗制鸭肝油脂质量计)10%、脱酸超碱量(以脱胶油质量计)0.6%、活性白土用量(以脱酸油质量计)10%、真空脱臭2.0 h。精炼后油脂的酸价为1.17 mg/g,过氧化值为0.1538 g/100 g;鸭肝油脂中共检测出16种脂肪酸,其中饱和脂肪酸5种,单不饱和脂肪酸4种,多不饱和脂肪酸7种。

关键词：鸭肝油脂提取超声辅助提取脂肪酸组成

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基于精益生产的圆锯装配线效率提升研究

基于精益生产的圆锯装配线效率提升研究

作者：叶双双江西理工大学

学位级别：硕士

随着国际经济形势愈加严峻,市场竞争不断加剧,中国人力成本优势的渐弱,制造行业在中国遭遇发展瓶颈,尤其是劳动密集型企业。精益生产方式是具有高度灵活性和高效率的综合哲学体系,它的核心思想是减少浪费。越来越多的制造企业开始推行... 详细信息

随着国际经济形势愈加严峻,市场竞争不断加剧,中国人力成本优势的渐弱,制造行业在中国遭遇发展瓶颈,尤其是劳动密集型企业。精益生产方式是具有高度灵活性和高效率的综合哲学体系,它的核心思想是减少浪费。越来越多的制造企业开始推行精益生产,而在实际实施过程中,容易陷入以人的主观经验判断为主,或生搬硬套的状况,没有一个系统化的解决方案,导致产线的改善效果不能满足要求。因此,如何运用精益生产的思想与方法对产线进行改善,达到改善的目标和要求,是企业亟待解决的一个问题。S公司是全球知名的电动工具及附件生产商,产线大多为手工装配线,其订单数量呈现周期性变化,在旺季时容易产能不足,需要招聘外包工,由于人力成本提高,导致外包费用显著增长。此外,公司为了降低厂房租用面积,对工厂内部进行了区域合并,现场布局过于拥挤,布局不合理。本文以S公司圆锯装配线为研究对象,在精益生产及其相关理论与方法研究的基础上,采用六西格玛中DMAIC改进模型,将质量改善工具运用到产线改善中,系统化地解决S公司旺季产能不足及布局不合理等问题。整个改善过程划分为界定(Define)、测量(Measure)、分析(Analysis)、改善(Improve)、控制(Control)五个阶段,将整个改进过程流程化、阶段化,使改进过程更加系统化,更有逻辑性,主要内容包括:(1)界定阶段,通过分析圆锯装配线目标需求与产线现状之间的差距,得出此圆锯装配线当前产能不足,效率低于理论水平,布局存在不合理现象,6S管理水平有待提高,明确了效率优化的方向。(2)测量阶段,通过测量来收集产线的基本数据,建立量化改善的基础,据此确定优化目标为提高产线产能效率至6.5件/人/时以上,优化产线平衡率,改善瓶颈工时和产线布局,提高现场6S管理水平。(3)分析阶段,运用5W1H法和ECRS原则相结合进行操作流程分析,寻找操作流程中的改善点,应用MTM法进行具体动作分析,通过缩短工作人员拿取物料的距离,提高其对物料的控制程度,来降低生产浪费,提高作业效率,从而得到初步的解决方案。(4)改善阶段,针对分析阶段的根本原因及基本解决方案具体实施改善措施,重新划分工序、分配人员,优化布局及6S改善,提出具体的改善方案。最后,利用ED仿真软件和物理模拟对装配线改善方案进行模拟,验证方案的合理性和可操作性。(5)控制阶段,基于精益生产以人为本思想,通过制定作业指导书和相关标准,加强员工的培训,使改善结果得以持续并继续优化改进。通过上述的工作内容,为装配线的优化改善提供了一个较为系统化的解决方案,具有较强的实际操作性。本文所运用的技术方法与步骤由于较为方便实用,容易掌握,可为更多的企业所应用,并产生显著的改善效果。

关键词：精益生产装配线产能效率 DMAIC 节拍

龟鹿益神配方颗粒对慢性疲劳大鼠行为和骨骼肌线粒体的影响

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龟鹿益神配方颗粒对慢性疲劳大鼠行为和骨骼肌线粒体的影响

作者：叶双双河南中医学院

学位级别：硕士

目的：建立慢性疲劳大鼠模型，观察龟鹿益神配方颗粒对慢性疲劳大鼠一般情况和行为学指标（力竭游泳时间、鼠尾悬吊静止时间）的影响，电镜下观察慢性疲劳大鼠骨骼肌线粒体微观结构的变化，检测血清琥珀酸脱氢酶活性的变化，探讨慢性疲... 详细信息

目的：建立慢性疲劳大鼠模型，观察龟鹿益神配方颗粒对慢性疲劳大鼠一般情况和行为学指标（力竭游泳时间、鼠尾悬吊静止时间）的影响，电镜下观察慢性疲劳大鼠骨骼肌线粒体微观结构的变化，检测血清琥珀酸脱氢酶活性的变化，探讨慢性疲劳综合征的发病机理;观察龟鹿益神配方颗粒对慢性疲劳大鼠骨骼肌线粒体微观结构和血清SDH的影响，探讨其作用机制，为龟鹿益神配方颗粒治疗CFS的临床应用提供实验依据和理论支持。方法：雄性SPF级SD大鼠40只，体重200±20克，适应性饲养1周后，随机抽取16只不进行造模，其余24只进行造模。采用强制力竭游泳，束缚和夹尾复合因素刺激，构建慢性疲劳大鼠模型。造模成功后，未造模者随机分为两组，分别为正常组和正常对照组;造模者随机分为3组，分别为模型组、苁蓉益肾组、龟鹿益神组。从造模结束次日起，在正常饲养的基础上，正常组、模型组给予生理盐水灌胃;正常对照组、龟鹿益神组给予龟鹿益神配方颗粒混悬液灌胃;苁蓉益肾组给予苁蓉益肾颗粒混悬液灌胃。各组大鼠均给药1次/d，连续14天。造模前、造模后及末次给药后均测一次大鼠体重、力竭游泳时间及鼠尾悬吊静止时间。上述实验结束后，大鼠经腹腔麻醉后，取各组大鼠右后肢骨骼肌组织一块，电镜下观察线粒体结构。经腹主动脉采血分离上清液，采用ELISA法测定各组大鼠血清SDH活性。采用IBM SPSS19.0统计软件对数据进行处理。结果：（1）造模结束后，各组造模大鼠体重增长缓慢甚至减轻，饮食量、饮水量减少，眯眼懒动，便溏，毛发暗淡失去光泽。与正常组比较，正常对照组体重、力竭游泳时间、鼠尾悬吊静止时间无显著性差异(P>0.05);模型组、龟鹿益神组、苁蓉益肾组大鼠体重减轻、力竭游泳时间缩短、鼠尾悬吊静止时间延长均有显著性差异(P 0.05);苁蓉益肾组体重减轻有显著性差异（P0.05);模型组大鼠体重减轻、力竭游泳时间变短、鼠尾悬吊静止时间延长均有显著性差异（P0.05），力竭游泳时间延长有显著性差异（P0.05）;苁蓉益肾组、模型组大鼠血清SDH活性升高，有显著性差异（P<0.05）。与模型组比较，苁蓉益肾组、龟鹿益神组血清SDH活性降低，有显著性差异（P<0.05）。与苁蓉益肾组相比，龟鹿益神组血清SDH活性降低，有显著性差异（P<0.05）。结论：（1）本实验采用非病毒感染的慢性应激刺激方法，即强制力竭游泳，束缚和夹尾激怒的复合因素刺激，构建慢性疲劳大鼠模型。此方法操作性强，能够模拟导致人类疲劳的内外环境，可复制出人体的慢性疲劳状态。（2）龟鹿益神配方颗粒可以延长慢性疲劳大鼠力竭游泳时间，缩短鼠尾悬吊静止时间，保护线立体结构的完整性，降低血清SDH的活性。（3）本实验表明，慢性疲劳大鼠骨骼肌及其线粒体结构易损伤，且不易恢复，血清SDH活性明显升高。龟鹿益神配方颗粒可增强骨骼肌及其线粒体膜的稳定性，促进其损伤的恢复，增强线粒体功能，降低血清SDH活性。提示龟鹿益神配方颗粒可通过保护线粒体结构、增强其功能从而达到抗疲劳的作用，进一步阐释了慢性疲劳综合征的发病机制及龟鹿益神配方颗粒治疗该病的作用机理，为临床应用龟鹿益神配方颗粒治疗慢性疲劳综合征提供了实验依据。（4）龟鹿益神配方颗粒可作为CFS的预防性用药。

关键词：慢性疲劳龟鹿益神配方颗粒线粒体琥珀酸脱氢酶

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协同学要义下赫钦斯高等教育思想探究

协同学要义下赫钦斯高等教育思想探究

作者：叶双双华东师范大学

学位级别：硕士

纵观中外高等教育发展史,在众多国内外名校一步步发展起来的历程中,少不了许多杰出校长的身影。芝加哥大学的赫钦斯便是其中一位极具影响力的校长,其系统的教育理念和卓有成效的教育实践,都值得我们研究和借鉴。同时,随着时代的发展与进... 详细信息

纵观中外高等教育发展史,在众多国内外名校一步步发展起来的历程中,少不了许多杰出校长的身影。芝加哥大学的赫钦斯便是其中一位极具影响力的校长,其系统的教育理念和卓有成效的教育实践,都值得我们研究和借鉴。同时,随着时代的发展与进步,我们生存的环境日益复杂化,所需求的信息更是浩如烟海,要系统研究一位教育家的思想更是盘根错节,难以下手;即使是搜集到大量的材料,仍然会被无关紧要的信息弄得云里雾里,无法做出准确的判断。因此,把握核心要素,减少复杂信息,从而掌控事物的大局,成为本文研究的基本思路。赫钦斯作为美国著名教育家与实践家,对其教育思想的研究十分详细与全面,因此,本文的研究重点不在于对其思想的全面性论述,而在于将其思想中的重要原则系统化展现出来。与此相对应的,物理动力学中的协同学理论很好的向我们展示了一个开放系统想要形成有序结构的基本原理与关键要素。因此,本文以系统化思维、把握核心要素为基本研究思路,以激光协同模型为理论参考,以赫钦斯的高等教育思想为具体研究对象,梳理出高校系统有效运作的关键要素,从而为我国高等教育系统化发展提供借鉴。本文分为四个章节,其中第一章为绪论,对论文的研究背景、研究现状进行说明,阐释系统思维、耗散结构、高等教育等核心概念,并对赫钦斯高等教育理论与协同学的结合进行可行性分析,从而明确研究的方法与意义;第二章为协同学要义与高等教育框架构建的概述,在阐述协同学基本内涵与原理的基础上,尝试构建协同学视野下高等教育系统的总体框架。第三章为赫钦斯的高等教育理论的论述,首先简单介绍赫钦斯的生平背景,之后重点结合协同学系统对赫钦斯的高等教育理论进行框架性的分析研究,主要从大学的原则与目标、大学制度构建要点、教师队伍建立、高校与外部环境的能量交换四个方面来论述。第四章为对当前高等教育发展的借鉴,基于前文框架性分析的基础上,主要从高等教育定位、反馈评估机制、教师队伍构建与领导者的整合能力四个方面进行分析与借鉴。

关键词：系统思维协同学赫钦斯高等教育

紫色色杆菌苯丙氨酸羟化酶分子改造及保护剂优化

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紫色色杆菌苯丙氨酸羟化酶分子改造及保护剂优化

作者：叶双双江南大学

学位级别：硕士

苯丙氨酸羟化酶(Phenylalanine hydroxylase,PAH,EC 1.***.16.1)是一种芳香族氨基酸羟化酶(Aromatic amino acid hydroxylase,AAAH),能催化苯丙氨酸单加氧生成酪氨酸。紫色色杆菌(Chromobacterium violaceum)来源的苯丙氨酸羟化酶(CvPAH)的结构与人类苯丙氨酸羟化酶(HuPAH)亚基结构高度相似,催化性能相近,在人体生理温度、pH条件下表现出较高的酶活,在治疗苯丙酮尿症中具有潜在应用价值。然而,目前CvPAH的热稳定性较低,不利于长期保存,限制了该酶的应用。因此,提高CvPAH的热稳定性、存储稳定性,为其在功能食品领域的应用打下坚实的基础。本论文对紫色色杆菌来源的苯丙氨酸羟化酶进行基因水平的设计,研究了N-端柔性区对CvPAH酶学性质的研究,并且对CvPAH进行分子改造,提高其热稳定性。在此基础上,研究了保护剂对CvPAH热稳定性的保护效果。具体研究结果如下:(1)通过高斯网络模型预测发现苯丙氨酸羟化酶N-端前10个氨基酸为一段柔性很大的无规则区域,为了研究该段序列对酶热稳定性的影响,对该段氨基酸进行截断或重组,获得CvPAH、N-7、N-8、N-9、N-10以及CvPAH+T7 tag。最适反应温度研究表明,各酶的最适反应温度均为40℃,相较其他截断酶及原酶,N-9、CvPAH+T7tag的热稳定性有所提高。而对最适反应pH进行研究,发现添加T7 tag能使酶的最适pH向酸性偏移,最适反应pH达到7.5。在pH 7.5、37℃条件下对各酶进行酶活测定发现,重组CvPAH+T7 tag具有更高的活性562.7 U·mg-1。相较原酶酶活(377.23 U·mg-1),二者酶活均显著提高。(2)对CvPAH+T7 tag进行进一步分子改造。根据嗜热菌蛋白存在Ala替换Gly以及Arg替换Lys的趋势。将重组CvPAH中所有Gly突变成Ala、Lys突变成Arg。结果表明,突变酶K94R和G221A在50℃的半衰期分别为26.2 min、16.8 min,比重组CvPAH(9.0 min)分别提高了1.9倍、0.9倍,同时组合突变酶K94R/G221A在50℃处理1 h后仍保留65.6%的酶活,比重组CvPAH(8.6%)高出6.6倍。圆二色谱结果显示重组CvPAH和突变酶K94R、G221A及K94R/G221A的Tm值分别为51.5℃、53.8℃、53.1℃、54.8℃。(3)考察了多种保护剂对重组CvPAH热稳定性的影响,结果表明,甘油、甘露醇、棉籽糖、海藻糖提高重组CvPAH的热稳定性的效果显著。对海藻糖,棉籽糖,甘露醇进行正交实验,获得最佳保护剂配方(2.5 mmol·L-1甘露醇、1 mmol·L-1棉籽糖、1.5mmol·L-1海藻糖)。在此复合保护剂作用下50℃处理10 min后酶活保留率高达到99.3%。在4℃、20℃下,添加10%甘油、复合保护剂相较对照组均表现出更好的保护作用;在37℃下,通过添加10%甘油、复合保护剂,半衰期较对照组分别提高了2.8倍、4.0倍。

关键词：苯丙氨酸羟化酶热稳定性 N-端氨基酸丙氨酸突变精氨酸突变保护剂

巨厚砂岩顶板“上断下切”切顶留巷深孔预裂爆破研究

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巨厚砂岩顶板“上断下切”切顶留巷深孔预裂爆破研究

作者：叶双双安徽理工大学

学位级别：硕士

现阶段国家虽然提出了“双碳”目标,但是短时间内煤炭能源的消耗依然处于能源消耗的高位。为了早日实现“双碳”目标,煤炭行业开始做出转变,从最开始的粗放式开采转变为如今的精准开采,有效的避免了煤炭资源的浪费。伴随着煤炭资源的开... 详细信息

现阶段国家虽然提出了“双碳”目标,但是短时间内煤炭能源的消耗依然处于能源消耗的高位。为了早日实现“双碳”目标,煤炭行业开始做出转变,从最开始的粗放式开采转变为如今的精准开采,有效的避免了煤炭资源的浪费。伴随着煤炭资源的开采,我国的很多矿井深度达到了数千米,同时面临着高压力、高瓦斯等一系列问题,为了解决在不浪费煤炭资源的同时减小工作面的压力,相关专家学者提出了沿空留巷技术,通过对工作面顶板进行深孔预裂爆破强制放顶,切断顶板的应力传递路径,增大切顶短臂梁的厚度,有效减少工作面顶板的压力,使得顶板按照预定的方案进行垮落,保障生命财产安全。深孔预裂爆破强制放顶技术的关键在于爆破参数的选取,本篇文章的工程背景为丁集煤矿1452(1)工作面。研究分析了深孔预裂爆破的原理,依据工作面的实际情况主要研究了“下切”爆破参数的最优化选取,并且对各参数分别进行了数值模拟和模型试验,得出:(1)通过模型试验中的静态应变测试可知,加载阶段,试块横向受拉,纵向受压,卸载阶段,试块横向受压,纵向受拉。通过动态应变测试可知,应变片距离炸药越远,应力波达到峰值的时间越长,各应变片应力波峰值也随着距离的增加而减小。由爆炸产生的损伤分析可知,当炮孔间距是炮孔直径8～12倍时,爆炸产生的损伤较好,当炮孔位置相对集中时,爆炸产生的能量较为集中,会对试块弱面产生严重破坏,抵抗线较大时,爆炸对试块边界损伤较小。由于试块的上下表面不平整,围压装置与其接触时,会对试块产生应力集中,从而影响爆破后试块损伤裂缝的发展。(2)运用数值模拟软件对双孔爆破炮孔间距分别为40cm、50cm、60cm、70cm进行模拟,从有效应力云图、有效应力时程曲线和爆炸后岩石的损伤裂隙发育云图来综合分析双孔爆破数值模拟的最终效果,最终确定无地应力情况下当炮孔间距为60cm时,炮孔间的裂缝刚好贯穿,并且对周围岩体的损伤较小。当地应力存在时,双孔爆破的裂纹扩展长度被地应力削弱。在实际爆破参数设计时要适当缩小双孔爆破的间距。(3)通过对沿空留巷技术原理的研究以及丁集煤矿1452(1)工作面的实际情况进行综合分析,可对该工作面上方的悬空顶板进行的深孔预裂爆破切缝,切断采空区上方顶板,阻断采空区顶板与巷道顶板的传力路径,采空区顶板岩体在周期来压作用下沿切缝结构面切断滑落,垮落后的矸石成为护巷体。而巷道顶板则在恒阻大变形锚索高强支护作用下,保持了巷道的稳定。具体的爆破方案分为三步:第一步,切眼倾向80m,上覆30m范围内顶板深孔预裂爆破,使切眼上隅角煤层上覆岩层与切眼后方上覆岩层中间产生爆破损伤,采用爆破孔径94mm,炸药采用内装高威力三级煤矿许用水胶炸药的三级煤矿许用瓦斯抽采水胶药柱,规格为Φ63×1000mm×3300g/根;第二步,切眼前方30m,倾向80m,上覆30m范围内厚硬顶板超深孔预裂爆破,损伤上覆厚硬岩层,采用爆破孔径94mm,炸药规格为Φ63×1000mm×3300g/根;第三步,顺槽深孔预裂爆破和上覆顶板预裂耦合爆破,顺槽深孔预裂爆破采用爆破孔径50mm,炮孔间距0.5m,孔深13m,与水平方向角度75度,炸药采用普通三级煤矿许用水胶炸药,规格为Φ27×430mm×330g/卷,上覆顶板预裂爆破采用爆破孔径94mm,孔深30-42m,炸药规格为Φ63×1000mm×3300g/根。进行深孔预裂爆破后有效的减小了工作面顶板压力和来压步距。图[60]表[24]参[41]

关键词：深孔预裂爆破数值模拟模型试验

氧化牛脂-酶解豆粕美拉德风味增强产物及其特性的研究

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氧化牛脂-酶解豆粕美拉德风味增强产物及其特性的研究

作者：叶双双合肥工业大学

学位级别：硕士

豆粕中包含了多种氨基酸,营养均衡,是鲜味肽制备的优质蛋白质来源,然而利用率低、浪费较为严重等是豆粕蛋白在利用时存在的主要问题。酶解豆粕粗蛋白后通过热加工制备风味肽,从而提高蛋白利用率且赋予食品较好的色香味。本文以酶解豆粕... 详细信息

豆粕中包含了多种氨基酸,营养均衡,是鲜味肽制备的优质蛋白质来源,然而利用率低、浪费较为严重等是豆粕蛋白在利用时存在的主要问题。酶解豆粕粗蛋白后通过热加工制备风味肽,从而提高蛋白利用率且赋予食品较好的色香味。本文以酶解豆粕为主要原料,研究了添加复合含硫氨基酸(半胱氨酸和蛋氨酸)以及维生素(Vb1)参与美拉德反应制备最佳风味的工艺条件,通过添加预氧化牛脂参与美拉德反应制备具有浓郁牛肉风味的肉类香料香精风味产物,在探究美拉德反应产物(MRPs)的味觉特性的基础上,进一步研究了其功能特性,包括抗氧化性和抗菌特性,以及对于酱卤牛肉的实际添加的保鲜效果。(1)美拉德反应条件的优化:通过单因素实验确定了半胱氨酸与蛋氨酸的添加比例与浓度,Vb1的添加浓度的合理取值范围,进一步通过响应面程序设计优化及实际矫正得到了最优的反应参数(感官得分达到8.55分),最终确定的美拉德反应条件为:p H 7,氨基酸比例2%,半胱氨酸:蛋氨酸3:1,Vb1浓度0.05%,木糖浓度3%,反应时间2 h和反应温度120℃。(2)预氧化牛脂参与美拉德反应制备类似肉类香料香精产物。通过对牛脂进行不同方式的氧化(UT、TT、ET和ETT)后参与水解豆粕为基底的高温热反应制得了MRPs(NT-MRPs,UT-MRPs,TT-MRPs,ET-MRPs和ETT-MRPs)。从挥发性物质分析中看出,与UT组相比,氧化牛脂显示出更多种类和更高含量的挥发性物质(如醛类、醇类以及含硫化合物等)。在ETT-MRPs组产生了最高含量的一些特定风味挥发性物质成分,如2-戊基呋喃、5-甲基-2-噻吩甲醛、2-甲基吡嗪和2,5-二甲基吡嗪等,且含氧杂环、含硫化合物和含氮杂环的成分含量也最高,从而本文提出了一条提高水解豆粕衍生MRPs提升牛肉风味的途径,即通过酶解结合温和的热处理方式氧化牛脂,然后参与美拉德反应可得到风味增强的反应产物。(3)MRPs的生物活性研究。通过测定还原力、DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率表征抗氧化性,通过抑菌圈实验和抑菌共生实验表征了抑菌性,结果表明:3 mg/m L的MRPs还原能力相当于195μg/m L Vc的还原能力,280μg/m L的MRPs样品的DPPH自由基清除率达到了81%,相当于7.05μg/m L Vc的清除能力,8 mg/m L的MRPs清除羟基自由基率达到了85%,相当于386μg/m L Vc的清除能力,表明豆粕酶解参与的美拉德反应产物具有较好的综合抗氧化能力;MRPs对于三种有害菌的平均抑菌直径都达到了7.2 mm以上,李斯特菌的抑菌圈直径达到了8.45 mm,总体来说,所制备的MRPs有一定的抑菌能力。(4)MRPs在酱卤牛肉中的保鲜性能。将不同浓度的MRPs添加到酱卤牛肉制品中,通过测定在存储时间内的p H、TBA和TBC来表征肉制品的脂质氧化和菌落生长等新鲜度评价指标。将20 g/kg MRPs添加到酱卤肉的腌制料中,可以有效延缓酱卤牛肉制品储藏期间碱性物质的生成、脂质的氧化以及抑制微生物的生长繁殖,能够较好的延长肉制品的货架期,具有优良的保鲜性能。

关键词：美拉德反应响应面优化氧化牛脂肉类香精抗氧化性抑菌性

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定点突变提高苯丙氨酸羟化酶的热稳定性

生物工程学报 2016年第9期32卷 1243-1254页

作者：叶双双周丽周哲敏江南大学生物工程学院江苏无锡214122

嗜热菌中,蛋白质存在Ala替换Gly以及Arg替换Lys的趋势。为了提高紫色色杆菌来源的苯丙氨酸羟化酶的热稳定性,将该酶中所有Gly突变成Ala,Lys突变成Arg,筛选获得热稳定性提高的突变体,并进行组合突变,对突变酶的酶学性质进行研究。结果表... 详细信息

嗜热菌中,蛋白质存在Ala替换Gly以及Arg替换Lys的趋势。为了提高紫色色杆菌来源的苯丙氨酸羟化酶的热稳定性,将该酶中所有Gly突变成Ala,Lys突变成Arg,筛选获得热稳定性提高的突变体,并进行组合突变,对突变酶的酶学性质进行研究。结果表明,突变酶K94R和G221A在50℃的半衰期分别为26.2 min、16.8 min,比原始酶(9.0 min)分别提高了1.9倍、0.9倍,同时组合突变酶K94R/G221A在50℃处理1 h后仍保留65.6%的酶活,比原始酶(8.6%)高出6.6倍。圆二色谱结果显示原始酶和突变酶K94R、G221A及K94R/G221A的T_m值分别为51.5℃、53.8℃、53.1℃和54.8℃。蛋白三维结构模拟推测突变体热稳定性提高机理为:突变体K94R中Arg94与Ile95之间形成额外氢键,稳定其所在的柔性区域;突变体G221A中Ala221与Leu281产生疏水作用,稳定酶分子C-端柔性区。该研究结果为蛋白质热稳定性改造提供了参考,也为苯丙氨酸羟化酶在功能性食品领域的应用奠定了基础。

关键词：苯丙氨酸羟化酶热稳定性定点突变丙氨酸突变精氨酸突变