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Sirt3调控肺泡上皮细胞铁死亡减轻急性肺损伤的机制研究

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Sirt3调控肺泡上皮细胞铁死亡减轻急性肺损伤的机制研究

作者：吉青青中国人民解放军海军军医大学

学位级别：硕士

目的:急性肺损伤(Acute Lung Injury,ALI)是由各种肺内外致伤因素导致的以进行性呼吸困难和难治性低氧血症为特征的临床疾病,进展为急性呼吸窘迫综合征(Acute Respiratory Distress Syndrome,ARDS)时病死率高达35%-45%,临床仍然缺乏有... 详细信息

目的:急性肺损伤(Acute Lung Injury,ALI)是由各种肺内外致伤因素导致的以进行性呼吸困难和难治性低氧血症为特征的临床疾病,进展为急性呼吸窘迫综合征(Acute Respiratory Distress Syndrome,ARDS)时病死率高达35%-45%,临床仍然缺乏有效的预防和治疗手段。目前认为各种致病因素引发的炎症细胞活化浸润、肺上皮等实质细胞死亡与ALI进展密切相关。Sirt3是定位于线粒体的Sirtuin家族成员,系第三类组蛋白去乙酰化酶,通过调控线粒体糖代谢、减轻氧化应激等机制减轻ALI。铁死亡是近年发现的一种铁依赖性、脂质过氧化物堆积所致的非凋亡细胞死亡方式,可见于油酸、脂多糖(LPS)、肠缺血/再灌注(IRR)等诱导的ALI。目前有关Sirt3调控铁死亡影响ALI的研究较少,基于此本课题拟探讨Sirt3调控铁死亡对ALI的影响及可能机制。方法:首先我们建立了Sirt3基因敲除(Sirt3--)小鼠的ALI模型,与同窝的Sirt3--小鼠的ALI模型对比:Kaplan-Meier生存曲线计算小鼠存活率、ELISA检测支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid,BALF)中促炎细胞因子(IL-1β,IL-6,TNF-α)释放情况、HE染色肺组织评估肺损伤程度,验证Sirt3对小鼠ALI的影响。其次我们提取同窝的ALI小鼠(Sirt3--及Sirt3--)肺组织RNA进行转录组测序并构建相关富集通路,以获取Sirt3基因的可能关联通路。然后我们体外分离培养Sirt3+/-及Sirt3--小鼠的肺泡上皮细胞(AECs),给予LPS刺激后,qRT-PCR检测促炎细胞因子水平、CCK-8试剂盒检测细胞活力、免疫荧光评估细胞ROS水平及细胞膜脂质过氧化情况、免疫组化及Western blot检测糖代谢及铁死亡相关蛋白(p-PKM2、p-LDHa、p-PDHa、Gpx4)的表达水平。最后使用Sirt3的过表达质粒转染MLE-12细胞,PDH抑制剂(CPI-613)、铁死亡诱导剂(RSL3)或抑制剂(DFO)分别预处理后给予LPS刺激,Western blot检测糖代谢及铁死亡相关蛋白(p-PKM2、p-LDHa、p-PDHa、Gpx4)的表达水平。结果:体内研究表明:与Sirt3+/-的ALI小鼠相比,Sirt3--的ALI小鼠存活率显著降低,BALF中促炎细胞因子(IL-1β,IL-6,TNF-α)表达显著升高,肺损伤评分显著升高(p值均小于0.05)。转录组学分析表明:与Sirt3+/-的ALI小鼠相比,Sirt3-/-的ALI小鼠在炎症、铁死亡相关谷胱甘肽合成代谢及糖代谢相关糖原合成方面显著富集。体外研究表明:与Sirt3+/-小鼠的AECs相比,Sirt3-/-小鼠的AECs中ROS生成显著增加、细胞膜脂质过氧化显著增强。p-PKM2、p-PDHa、Gpx4蛋白表达显著降低,p-LDHa蛋白表达显著升高;与对照组MLE-12细胞(Mock)相比,过表达Sirt3基因的MLE-12细胞(Sirt3-myc)中p-PKM2、p-LDHa蛋白表达显著降低,p-PDHa、Gpx4蛋白表达显著升高;加入PDH抑制剂(CPI-613)后p-PKM2、p-LDHa蛋白表达显著升高,p-PDHa、Gpx4的蛋白表达显著降低。与对照组(DMSO)相比,铁死亡诱导剂(RSL3)预处理后p-PKM2、p-PDHa、Gpx4表达显著降低,p-LDHa表达显著升高;与对照组(RSL3)对比,铁死亡抑制剂(DFO)预处理后,p-PKM2、p-LDHa的表达显著降低,而Gpx4、p-PDHa表达明显升高。结论:Sirt3能够减轻LPS诱导的小鼠ALI,其机制可能与Sirt3调控肺泡上皮细胞糖代谢及脂质过氧化减轻铁死亡有关。因此调控Sirt3维持细胞稳态、减轻细胞铁死亡有望成为ALI防治的新方向。

关键词：去乙酰化酶沉默信息调节因子3 急性肺损伤铁死亡糖代谢脂质过氧化

基于MXene聚合物的电磁屏蔽复合材料制备及性能研究

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基于MXene聚合物的电磁屏蔽复合材料制备及性能研究

作者：翁吉湖北大学

学位级别：硕士

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数据资产课税法律问题研究

数据资产课税法律问题研究

作者：陈柯吉河南财经政法大学

学位级别：硕士

近年来,以“数字产业化”和“产业数字化”为特征的数字经济迅猛发展,对包括税收治理在内传统的治理体系、机制与规则带来明显挑战,现有税法中关于纳税人、征税对象、课税环节等课税要素的规定无法完全涵盖数字经济下市场主体的经营行为... 详细信息

近年来,以“数字产业化”和“产业数字化”为特征的数字经济迅猛发展,对包括税收治理在内传统的治理体系、机制与规则带来明显挑战,现有税法中关于纳税人、征税对象、课税环节等课税要素的规定无法完全涵盖数字经济下市场主体的经营行为,世界各国关于数据课税的立法尝试和理论界关于数据课税的相关研究表明,系统分析数据课税的法律构成并制定符合本国国情的数据税法,是一个迫在眉睫的现实问题。本论文以数据资产为研究对象,在分析数据资产应税性和可税性的基础上,从税收征管层面梳理了我国数据课税所面临的现实困难及其制度成因,分析比较OECD“双支柱”国际税改方案与欧盟、美国、英国等关于数据课税相关制度对策,结合我国实际提出了我国数据资产课税法律制度的完善路径。本论文除引言和结语外,共包括四部分内容。第一部分为数据资产课税基础理论,主要界定数据资产相关概念,分析数据资产的应税性与可税性。第二部分为我国数据资产课税现状及困境,主要梳理我国数据资产课税的现实条件、相关制度建设,在此基础上剖析我国数据资产课税实践中存在的要素认定与税种适用困难、以常设机构为依据的税收管辖权难以应对、税收征管和监管制度低效率等问题。第三部分是数据资产课税的国际经验借鉴,主要分析比较OECD“双支柱”国际税改方案与欧盟、美国、英国等关于数据课税相关制度的制定路径、主要特征和运行效果,由此形成完善我国数据资产课税可资借鉴的制度经验。第四部分是数据资产课税法律制度完善路径,主要针对要素认定与税种适用困难、以常设机构为依据的税收管辖权难以应对、税收征管和监管制度低效率等问题,提出构建数据资产税基确定体系、完善增值税法、企业所得税法等税收实体法,构建数据课税平台和数据课税体系等税收制度建议。

关键词：数据资产数据课税税收法律制度

医药生物企业战略联盟前因组态及绩效研究 ——基于QCA方法

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医药生物企业战略联盟前因组态及绩效研究 ——基于QCA方法

作者：李荣吉扬州大学

学位级别：硕士

EDTA配位滴定法在野外检测多金属矿石中锌量的应用

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岩矿测试 2024年第5期43卷 812-820页

作者：陆迁树叶元顺王银剑刘振超陈金伟中国地质调查局昆明自然资源综合调查中心云南昆明650111 元素形态与新污染物检验检测技术创新中心云南昆明650111

多金属矿石中锌量检测的准确性和速度直接影响到野外锌量勘查的准确性和效率。目前,将多金属矿石样品运输到实验室检测的方式存在采加化周期偏长、检测高含量锌稳定性和准确性不足的问题。本文对比了不同方式去除多金属矿石样品中有机... 详细信息

多金属矿石中锌量检测的准确性和速度直接影响到野外锌量勘查的准确性和效率。目前,将多金属矿石样品运输到实验室检测的方式存在采加化周期偏长、检测高含量锌稳定性和准确性不足的问题。本文对比了不同方式去除多金属矿石样品中有机质和硫、不同氧化剂、样品溶液是否离心、不同除氨方式对多金属矿石样品中锌量检测速度、稳定性和准确性的影响,建立了一种能在野外现场快速检测多金属矿石样品中锌量的EDTA配位滴定法。采用该方法对低、中、高锌含量的4个多金属国家标准物质分别进行6次平行分析,锌量的相对偏差为0.00%~2.11%,相对误差为0.00%~2.41%。结果表明,采用高温灼烧多金属矿石样品去除有机质和硫,将多金属矿石样品溶液离心后过滤可显著提升样品前处理速度;采用较为温和的氧化剂、滴加盐酸除氨,可提升检测方法的稳定性和准确度。

关键词：野外检测配位滴定多金属矿石锌

代谢相关脂肪性肝病致病因素及肠道菌群特征分析

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代谢相关脂肪性肝病致病因素及肠道菌群特征分析

作者：吉朝阳浙江中医药大学

学位级别：硕士

基于FCFF与模糊B-S模型的新能源汽车企业B公司价值评估研究

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基于FCFF与模糊B-S模型的新能源汽车企业B公司价值评估研究

作者：吉进北方工业大学

学位级别：硕士

在国家“双碳”政策背景下,可持续发展已成为未来发展的重要方向,新能源汽车行业因其在推动能源转型和降低碳排放中的关键作用而迅速崛起。政府对新能源汽车行业的大力支持,通过一系列政策措施促进了该行业的快速发展,为企业提供了广阔... 详细信息

在国家“双碳”政策背景下,可持续发展已成为未来发展的重要方向,新能源汽车行业因其在推动能源转型和降低碳排放中的关键作用而迅速崛起。政府对新能源汽车行业的大力支持,通过一系列政策措施促进了该行业的快速发展,为企业提供了广阔的发展空间和市场机遇,使得新能源汽车企业的价值评估成为一个热门话题。然而,现有的单一传统估值方法更多的是关注企业的财务表现和市场表现,这就导致其无法全面反映新能源汽车企业在快速技术创新和市场变化中的潜在价值和成长潜力。这种评估方法的局限性不仅影响了投资者和决策者对企业价值的准确判断,也会对企业的长期战略规划产生不利影响。因此,建立一种更加全面、科学、合理的评估方法,能更准确地反映新能源汽车企业的整体价值,为投资决策提供科学依据,同时对行业的持续健康发展提供参考和借鉴。根据上述背景,本文首先论述了国内外研究现状,针对传统估值方法的适用性和实物期权的适用性进行了深入的分析;随后通过自由现金流量模型计算企业的现有价值,实物期权模型计算企业的潜在价值,并将模糊数学概念引入实物期权中,使企业估值更加准确;最后将企业的现有价值和潜在价值合并形成企业的整体价值。本文以新能源汽车企业B公司为案例进行研究,通过构建估值模型对新能源汽车企业B公司进行估值,得到如下结论:(1)对于新能源汽车企业的价值评估,仅关注其现有价值远远不够,潜在价值在新能源汽车企业的整体价值中也占有较大比例。(2)对于FCFF与B-S实物期权和FCFF与模糊B-S实物期权两个组合模型的估值比较,并与股票市场价值对比分析,后者明显和市值更为接近,这表明在考虑新能源汽车企业潜在价值时,FCFF与模糊B-S实物期权模型更适用于该类企业的价值评估。(3)无论是FCFF模型和B-S实物期权模型,还是FCFF和模糊B-S实物期权模型,在评估中都会涉及到参数选取的问题,面对这一问题,则需要根据企业的实际情况进行谨慎选择。

关键词：新能源汽车价值评估实物期权自由现金流量模型

1+X课证融通模式下中职《烹调工艺学》活页式教材开发 ——以昆明市A中职学校为例

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1+X课证融通模式下中职《烹调工艺学》活页式教材开发 ——以昆明...

作者：吉娇云南师范大学

学位级别：硕士

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基于充电电压片段的退役锂离子电池筛选重组

基于充电电压片段的退役锂离子电池筛选重组

作者：王恩吉东北电力大学

学位级别：硕士

随着全球对于双碳战略的重视和绿色、清洁能源的需求日益增加,利用清洁能源替代传统化石燃料已成为实现可持续发展的关键。在此背景下,新能源汽车因其在减少碳排放方面的有效性而迅速发展。特别是在中国,新能源汽车的产销量及保有量均... 详细信息

随着全球对于双碳战略的重视和绿色、清洁能源的需求日益增加,利用清洁能源替代传统化石燃料已成为实现可持续发展的关键。在此背景下,新能源汽车因其在减少碳排放方面的有效性而迅速发展。特别是在中国,新能源汽车的产销量及保有量均已达到全球首位。新能源汽车市场的快速发展使得动力电池退役问题成为一大挑战。未经处理的退役电池中含有的重金属等有害物质可能导致严重的环境污染和健康危害,而缺乏高效的利用策略则会造成资源浪费和经济负担。随着市场规模的持续扩大,中国已经进入了动力电池大规模退役的高峰期。中国电池联盟预计,在综合考虑新能源汽车的多年生产状况、电池的使用寿命及车辆的实际运行情形之后,到2025年,可能有达111.7GWh的电池将面临退役,据估计,其报废费用可能高达203.71亿人民币。这些退役的锂离子电池在进行适当筛选和分类后,仍有巨大的使用和经济潜力。本研究针对当前退役电池筛选过程中的低精度和效率问题,提出一种新的基于电压片段与均值漂移聚类算法的退役锂离子电池直接重组方法。该方法能够进行直接的特征重组,从而间接达到对电池容量的重组。然而,在某些应用场景中,可能会对电池的某种或某几种电气性能有更高的一致性需求,例如备用电源,家庭储能等容量性应用场景对容量一致性要求更高,调峰调频等功率型应用场景则对内阻一致性要求更高,在这些特殊场景中,上述方法并不完全适用。因此,本文进一步提出了另一种筛选重组方法作为前一种的补充,本方法结合充电电压片段特性、基于多层感知机-支持向量回归-线性回归的混合模型,以及等数K-means聚类算法,以满足特殊应用场景的需求。尽管由于需要进行模型训练而降低了重组效率,并增加了流程的复杂性,但此方法扩大了应用范围,并且提高了各种规模下的筛选精度。因此,针对常规退役电池筛选,可以优先使用第一种高效方法,而对于具有特殊特性需求的场景,可采取第二种方法。本文主要工作如下:(1)提出一种对退役电池进行直接特征重组,间接达到容量重组目的的分组方法,进一步提升了分组效率。(2)提出了一种基于粒子群优化和分层聚类算法的改进均值漂移算法。这个算法使用粒子群算法来优化窗口大小,并使用分层聚类算法来寻找初始中心点。用轮廓系数作为适应度函数值来评价聚类效果。该算法的优点是自动找到最优的窗口大小,避免了手动调整窗口大小的问题,并提高了聚类的准确性和效率。(3)根据锂离子电池特性,提出一种新的充电电压片段特征提取方式,并结合MLP-SVR-LR混合模型,实现了退役电池高精度筛选。相较于其他三种经典模型,本文所提模型在筛选过程中的误差更小。(4)围绕聚类后每个集群中的电池数量不相等,不符合梯次利用场景要求的问题,本文提出了一种等数K-means重组方法,该方法有效避免了现有方法在仅有两个筛选指标时可能出现的死循环难题,并以轮廓系数为评估标准,提高了重组后电池组的一致性。通过SC、CH和DBI三种评价指数的提升显示,新策略优于当前的等数策略和其他两种经典聚类算法。

关键词：退役电池一阶RC模型 MLP-SVR-LR混合模型 K-means算法等数策略