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应用伊氏锥虫毛细管集虫直接镜检法普查牛锥虫病

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中国兽医科技 1990年第5期20卷 25-27页

作者：方元聂海洋叶万祥南京军区后勤部军事医学研究所

前文(中国兽医科技,11,38～40,1987)报道,伊氏锥虫毛细管集虫直接镜检法(下简称集虫法)简便、快速、检出率高,既可用于临床诊断,又可用于流行病学调查。在此基础上,我们应用该法和间接血凝试验(IHA)进行牛伊氏锥虫病的普查,进一步考核... 详细信息

前文(中国兽医科技,11,38～40,1987)报道,伊氏锥虫毛细管集虫直接镜检法(下简称集虫法)简便、快速、检出率高,既可用于临床诊断,又可用于流行病学调查。在此基础上,我们应用该法和间接血凝试验(IHA)进行牛伊氏锥虫病的普查,进一步考核和证实了其实用价值,并对镜检方法作了改进。现将结果报告如下。

关键词：牛锥虫病集虫法镜检

布氏锥虫伊氏亚种和马媾疫亚种在不同气相条件下的体外培养

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中国兽医杂志 1991年第10期17卷 3-5页

作者：方元聂海洋叶万祥王元伦南球军区军事医学研究所 210002

在烛缸和密闭培养的气相下,用我们改良的Baltz无细胞培养系统培养了3个已适应于体外培养的布氏锥虫伊氏亚种虫株、1个布氏锥虫马媾疫亚种虫株和3个未经培养的布氏锥虫伊氏亚种虫株(未适应株),并与常规CO_2培养箱(含5%CO_2的空气)培养作... 详细信息

在烛缸和密闭培养的气相下,用我们改良的Baltz无细胞培养系统培养了3个已适应于体外培养的布氏锥虫伊氏亚种虫株、1个布氏锥虫马媾疫亚种虫株和3个未经培养的布氏锥虫伊氏亚种虫株(未适应株),并与常规CO_2培养箱(含5%CO_2的空气)培养作比较。所有适应株和未适应株均可在烛缸和密闭培养条件下正常生长,连续培养1—2月,虫体形态、生长特性和对小白鼠的致病力与CO_2培养箱培养相同。培养物的虫密度,密闭培养明显高于烛缸和CO_2培养箱培养,CO_2培养箱培养一般稍高于烛缸培养。密闭和烛缸培养的成功,对普及锥虫体外培养技术有很大实用价值,也提示应进一步研究培养的最佳气相条件。此外,不经饲养层培养系统适应直接建立3个未适应株的无细胞培养系统的培养也是重要进展。

关键词：锥虫伊氏亚种马媾疫亚种培养

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体外培养布氏锥虫伊氏亚种的葡萄糖代谢

中国兽医杂志 1993年第10期19卷 10-11页

作者：方元聂海洋叶万祥王元伦南京军区后勤部军事医学研究所江苏南京210002

布氏锥虫伊氏亚种[Trypanosoma(Trypanozoon brucei evansi)下简称伊氏锥虫]在宿主体内以葡萄糖作为能量来源,葡萄糖被酵解为丙酮酸排入体液。其在体外的存活和培养都需有葡萄糖存在。伊氏锥虫病病畜呈现低血糖。为了解体外培养伊氏锥... 详细信息

布氏锥虫伊氏亚种[Trypanosoma(Trypanozoon brucei evansi)下简称伊氏锥虫]在宿主体内以葡萄糖作为能量来源,葡萄糖被酵解为丙酮酸排入体液。其在体外的存活和培养都需有葡萄糖存在。伊氏锥虫病病畜呈现低血糖。为了解体外培养伊氏锥虫的葡萄糖代谢。

关键词：布氏锥虫伊氏亚种葡萄糖代谢

检测伊氏锥虫循环抗原的McAb-RPHA试验

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中国畜禽传染病 1991年第6期13卷 33-35页

作者：叶万祥方元聂海洋王元伦南京军区军事医学研究所

用一株抗伊氏锥虫、马媾疫锥虫和布氏锥虫共同抗原(与泰氏锥虫等抗原无交叉反应)的单克隆抗体建立了检测伊氏锥虫循环抗原(TcA)的反向间接血凝试验。用以检测人工感染兔,于感染后8～10天TcA转阴;如不治疗直至观察期结束持续阳性;治疗后... 详细信息

用一株抗伊氏锥虫、马媾疫锥虫和布氏锥虫共同抗原(与泰氏锥虫等抗原无交叉反应)的单克隆抗体建立了检测伊氏锥虫循环抗原(TcA)的反向间接血凝试验。用以检测人工感染兔,于感染后8～10天TcA转阴;如不治疗直至观察期结束持续阳性;治疗后一周即转阴。用以检测疫区36份虫血症阳性水牛血清,25份阳性(69.44％);16份虫血症阴性、IHA阳性水牛血清,3份阳性;25份虫血症和IHA阴性水牛血清,全部阴性。

关键词：伊氏锥虫循环抗原试验

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伊氏锥虫在27℃和41℃的体外培养

中国兽医学报 1995年第1期15卷 74-78页

作者：聂海洋方元叶万祥王元伦南京军区军事医学研究所

用改良Ｂａｌｔｚ无细胞培养系统在２７℃和４１℃培养伊氏锥虫，２７℃培养取得成功，４１℃培养失败。２７℃培养已持续１０个月，培养的伊氏锥虫仍保持其在哺乳动物宿主内的主要形态特征，对小鼠有感染力和致病力，消耗葡萄糖，葡萄... 详细信息

用改良Ｂａｌｔｚ无细胞培养系统在２７℃和４１℃培养伊氏锥虫，２７℃培养取得成功，４１℃培养失败。２７℃培养已持续１０个月，培养的伊氏锥虫仍保持其在哺乳动物宿主内的主要形态特征，对小鼠有感染力和致病力，消耗葡萄糖，葡萄糖分解的最终产物为丙酮酸；其群体增倍时间约为２４ｈ，ＤＥＡＥ－纤维素分离的回收率仅５０％左右，显著长于和低于３７℃培养物。文内还讨论了２７℃培养伊氏锥虫的用途和意义。

关键词：伊氏锥虫体外培养葡萄糖丙酮酸群体增倍时间

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布氏锥虫伊氏亚种体外药敏试验

中国兽医科技 1992年第1期22卷 13-16页

作者：方元聂海洋叶万祥王元伦南京军区后勤部军事医学研究所 210002

应用布氏锥虫伊氏亚种(Trypanosoma brucei evansi,T.b.e)体外药敏试验系统检查了国内6个T.b.e虫株和国外布氏锥虫指名亚种(T.b.b)对苏拉灭(Suramin)、贝尼尔(Berenil)、安锥赛(Antrycide)、咪唑苯脲(Imidocard)和硫胂聚氰胺(Cymelarsan)等5种抗锥虫药的敏感性。结果表明,该系统能准确测定不同虫株对各种药物的敏感性,与小鼠治疗试验结果基本相符,发现了国内抗贝尼尔和苏拉灭的T.b.e虫株。

关键词：布氏锥虫伊氏亚种药物敏感

免疫抑制对苏拉灭和贝尼尔治疗小鼠伊氏锥虫病疗效的影响

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中国兽医学报 1995年第2期15卷 145-148页

作者：方元叶万祥聂海洋王元伦南京军区军事医学研究所

用从自然感染宿主分离的伊氏锥虫（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａｅｖａｎｓｉ）原种ＪＧ的克隆ＪＧｍｃｌ和ＪＧｍｃ５感染免疫活性正常小鼠和免疫抑制小鼠，２４ｈ后，以苏拉灭或贝尼尔治疗，两种药物对免疫抑制小鼠的ＣＤ１００均明显高于... 详细信息

用从自然感染宿主分离的伊氏锥虫（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａｅｖａｎｓｉ）原种ＪＧ的克隆ＪＧｍｃｌ和ＪＧｍｃ５感染免疫活性正常小鼠和免疫抑制小鼠，２４ｈ后，以苏拉灭或贝尼尔治疗，两种药物对免疫抑制小鼠的ＣＤ１００均明显高于免疫活性正常小鼠。由经受一次苏拉灭或贝尼尔治疗未愈的免疫抑制小鼠分离的锥虫，感染免疫活性正常小鼠，再用原来对该克隆感染的免疫活性正常小鼠ＣＤ１００的苏拉灭或贝尼尔治疗即无效。用免疫溶解试验分别测定一组免疫抑制和免疫活性正常小鼠感染后７ｄ的血清，前者均为阴性，后者均为阳性，几何平均滴度１：１０２．３。抗体水平和虫血症消失与否密切相关。免疫抑制不仅显著降低抗锥虫化疗的效果，而且会导致产生抗药的锥虫；抗体的产生受抑制可能是引起上述效应的一个重要因素。

关键词：伊氏锥虫病免疫抑制抗药性抗体溶解试验治疗

分泌抗布氏锥虫群共同抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

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中国兽医科技 1993年第7期23卷 42-44页

作者：叶万祥方元聂海洋王元伦南京军区军事医学研究所南京210002

用DEAE-纤维素分离的布氏锥虫伊氏亚种JG克隆株虫体按Segura 氏法制备抗原,常规免疫BALB/c鼠、融合、筛选和克隆。筛选时除使用免疫抗原外,还使用按同法制备的我国不同地区分离的3株布氏锥虫伊氏亚种(JX、ZJ、GY株),1个布氏锥虫马媾疫... 详细信息

用DEAE-纤维素分离的布氏锥虫伊氏亚种JG克隆株虫体按Segura 氏法制备抗原,常规免疫BALB/c鼠、融合、筛选和克隆。筛选时除使用免疫抗原外,还使用按同法制备的我国不同地区分离的3株布氏锥虫伊氏亚种(JX、ZJ、GY株),1个布氏锥虫马媾疫亚种虫株和培养的1株布氏锥虫指名亚种发育前期型虫体的抗原,以及泰氏锥虫和弓形虫抗原。共获得8个杂交瘤细胞株(4A_(11)、2D_6、5C_8、2E_3、1H_8、1C_9、1F_(11)、4F_6。它们分泌的单克隆抗体与泰氏锥虫、弓形虫抗原均无反应。4A_(11)、2D_6在ELISA和间接免疫荧光试验中只与免疫克隆株抗原反应。其余6株在ELISA中不仅与免疫株抗原反应,而且与其他锥虫虫株抗原呈明显交叉反应,免疫荧光试验则全部阴性。在ID试验中,1C_9、1F_(11)腹水与上述6种抗原呈现明显沉淀线,另6株则均无反应。4A_(11)和2D_6是针对伊氏锥虫群JG克隆株特异抗原,而5C_8、2E_3、1H_8、1C_9、1F_(11)、4F_6则是抗布氏锥虫群共同抗原。

关键词：布氏锥虫抗原单克隆抗体杂交瘤

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体外培育抗苏拉灭伊氏锥虫克隆

中国兽医学报 1994年第1期14卷 26-30页

作者：方元叶万祥聂海洋王元伦南京军区军事医学研究所

将３个苏拉灭敏感的伊氏锥虫原种的克隆连续培养于改良Ｂａｌｔｚ无细胞培养系统中，通过逐步提高培养基中苏拉灭的含量，培育了３个抗苏拉灭的伊氏锥虫克隆─ＪＧｃ１－１６０、ＪＸ－１ｃ１－１６０和ＺＪｃ１－１４０。它们体外药敏... 详细信息

将３个苏拉灭敏感的伊氏锥虫原种的克隆连续培养于改良Ｂａｌｔｚ无细胞培养系统中，通过逐步提高培养基中苏拉灭的含量，培育了３个抗苏拉灭的伊氏锥虫克隆─ＪＧｃ１－１６０、ＪＸ－１ｃ１－１６０和ＺＪｃ１－１４０。它们体外药敏试验的ＩＣ５０依次为３５８．５、４１２．３和２４６．４μｇ／ｍＬ，是各自亲本克隆的１２９２．５、１８７４．１和１７６０．ｏ倍；小鼠治疗试验的ＣＤ１００，对免疫功能正常小鼠依次为８０、１２０和３０ｍｇ／ｋｇ，为各自亲本克隆的５．３、８．０和３．０倍，对免疫抑制小鼠为２５０、３００和１００ｍｇ／ｋｇ，分别是相应免疫正常小鼠的３．１、２．５和３．３倍。试验结果表明，抗锥虫药治疗剂量不足和宿主免疫功能不全是导致产生抗药虫株的重要因素，各自既可单独发挥作用，又可相互协同。本文报道了体外培育伊氏锥虫抗药虫株的方法，这一方法对研究锥虫抗药性具有重要作用。

关键词：伊氏锥虫体外培养抗药性苏拉灭